从枯草芽孢杆菌中提纯SOD的几种方法比较

通过实验找出一种从枯草芽孢杆菌提纯超氧化物歧化酶的最佳方法。实验着重对从枯草芽孢杆菌中提取SOD的工艺过程进行了研究,通过对热变性法、等电点法、盐析法等几种方法的实验分析比较,找出一套操作简便,SOD总收率高的提纯工艺。实验结果表明:硫酸铵分级盐析法是三种方法之中提取出酶的活力最高的一种工艺,适用于工业化大规模的提取SOD酶。从而为寻找更简便、经济的SOD生产方法提供依据。     

酶解辅助乙醇法提取土茯苓总黄酮条件研究

本文采用植物复合酶酶解辅助乙醇法提取土茯苓总黄酮.以芦丁为标准品,用铝离子显色、紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量.采用单因素实验探讨酶添加量、酶解时间和酶解pH值对总黄酮提取率的影响.结果表明:最佳提取条件为酶添加量1.0%,酶解时间3.0h和酶解pH值5.0;最佳条件下,粗提物干粉得率13.9%,干粉中总黄酮含量4.0%,总黄酮提取率为0.53%.     

从枯草芽孢杆菌中提纯SOD的几种方法比较

通过实验找出一种从枯草芽孢杆菌提纯超氧化物歧化酶的最佳方法。实验着重对从枯草芽孢杆菌中提取SOD的工艺过程进行了研究,通过对热变性法、等电点法、盐析法等几种方法的实验分析比较,找出一套操作简便,SOD总收率高的提纯工艺。实验结果表明：硫酸铵分级盐析法是三种方法之中提取出酶的活力最高的一种工艺,适用于工业化大规模的提取SOD酶。从而为寻找更简便、经济的SOD生产方法提供依据。     

短乳杆菌49蛋白提取及酶解条件优化

为了最大程度上获取短乳杆菌49（Lactobacillus brevis 49）的蛋白质信息，分别优化了蛋白质的提取条件与酶解条件。用正交实验法考察细胞破碎方法、蛋白酶种类、酶解时间、酶添加量4个因素对 L. brevis 49的胞内蛋白提取方法以及酶解方法的影响，以质谱中检测到的蛋白质数目为参考指标进行优化；同时对培养基氮源进行优化，并分别选用TCA沉淀法、冷丙酮沉淀法、平衡酚 丙酮法和超滤法提取发酵液中的胞外蛋白。结果表明：L. brevis 49胞内蛋白最佳的提取破壁方法为超声破碎法，最佳水解酶为糜蛋白酶和胰蛋白酶共同作用，最佳的酶与蛋白质量比为 1∶50，最佳酶解时间为12 h，获得胞内蛋白数目527个。获得L. brevis 49胞外蛋白的最佳培养基为0.6%酵母浸粉做单一氮源的MRS培养基，最佳提取方法为三氯乙酸（TCA）法，可获得44个含信号肽蛋白。该方法有望为啤酒的安全检测提供参考。     

超声波与酶解法协同提取天然产物中多糖类化合物的研究

论述了超声波法以及酶解法提取的原理、特点、影响因素及应用,并对多糖类化合物的提取方法以及超声波协同酶解法提取在该领域的研究情况进行了综述。     

卷柏中挥发性组分的酶提取及气相色谱-质谱分析

用酶提取卷柏中挥发性组分，考察pH值、酶用量、样品粒度等因素对提取率的影响。测得其挥发油的含量为w＝5.85%。采用气相色谱-质谱法(GC/MS)分离确认出31种化学成分,其中主要成分为雪松醇,占总挥发油的45.07%。并将酶提取法(CE)与水蒸汽蒸馏-萃取法(DSE) 法进行了对比。     

酶在中药提取中的应用浅析

就酶在中药有效成分提取中的作用机制、影响提取效果的因素以及酶在中药提取中的应用进行了探讨与综述。     

不同方法提取侧柏叶中挥发性成分的气相色谱-质谱分析

采用气相色谱-质谱法(GC/MS)分析酶提取法(CE)、同时蒸馏萃取法(SDE)和水蒸气蒸馏-萃取法(DSE)三种方法提取侧柏叶挥发性成分。结果表明:三种方法提取侧柏叶挥发油的化学成分均有差异。酶提取法提取侧柏叶挥发油鉴定出32种化合物，主要成分为雪松烯，占挥发油总量的41.25%；同时蒸馏-萃取法提取侧柏叶挥发油鉴定出29种化合物，主要成分为雪松醇，占挥发油总量的39.06%；水蒸气蒸馏 萃取法提取侧柏叶挥发油鉴定出32种化合物，主要成分为雪松醇，占挥发油总量的31.43%。     

生姜中黄酮提取工艺研究进展

介绍了生姜中黄酮提取研究现状,阐述了生姜中黄酮的溶剂提取工艺、酶辅助提取工艺、超声辅助工艺及微波辅助提取工艺,对生姜中黄酮提取技术的发展进行了展望。     

芽孢杆菌所产果胶裂解酶检测条件的研究

果胶酶(Pectinase)一般是指分解植物组织中果胶质的一类含多种酶的复合酶,是一类具有广泛用途的生物酶.酸性果胶酶广泛应用于果胶和白酒的提取和澄清;碱性果胶酶可用于香料油和类胡萝卜素等医用原料的提取等过程.近年来又发现了碱性果胶酶新的用途,如植物病毒的纯化、纸浆漂白和纺织品的生物精练等,碱性果胶酶已经成为棉织物处理过程中重要的生物制剂.酶活力是衡量酶生物催化功能的重要指标,但酶活力的测定通常会受到测定温度、PH、底物浓度等多种因素的影响,因此,选择适宜的酶活力测定条件,提高测定结果的准确性,对于更好的开发和利用微生物果胶酶十分必要.本研究通过对芽孢杆菌所产果胶裂解酶酶学性质的研究,在此基础上确定了芽孢杆菌所产果胶裂解酶适宜的作用条件温度为50℃,底物聚半乳糖醛酸的浓度为0.2%,酶反应的PH值为9.4.     

Box-Behnken法优化超声辅助酶法提取灵芝多糖的工艺研究

以总多糖得率为指标,采用超声辅助纤维素酶法提取灵芝子实体粉末中的多糖类化合物。在单因素试验的基础上,利用Box-Behnken中心组合法对灵芝多糖的提取条件进行了优化,得到最优提取工艺条件:超声提取时间28 min、料液比1:36、酶解时间68 min,在此条件下,灵芝多糖的得率为7.57%。     

挥发油提取方法的研究进展

本文主要从水蒸气蒸馏法、同时蒸馏法、吸收法、溶剂萃取法、冷压法、微波辅助萃取法、超声波辅助萃取法、超临界流体萃取法、亚临界水萃取法、固相微萃取法、分子蒸馏法、酶解辅助提取法、微胶囊一双水相萃取法及多方法联合萃取等方面综述了挥发油的提取方法及其特点,旨在为挥发油的研究、开发、应用提供一定的参考。     

黑曲霉固体发酵物的应用效果研究

当前市场上所用复合酶制剂多为几种纯酶制剂按一定配方复配、稀释而成,由微生物制取酶制剂时常要提取其发酵物中的粗酶,提取过程中可能漏掉一些不溶的酶.提取时只能获取微生物的胞外酶,而要获取其胞内酶则必须先进行菌体破碎再抽提,在抽提过程中酶活力不免受到损失,而且酶自细胞中抽出之后,大多数是不稳定的.研究发现黑曲霉含有较高的胞内植酸酶、磷酸酯酶、蛋白酶和果胶酶.在肉鸡和火鸡中饲喂黑曲霉菌丝体(A.niger FM),发现也提高了生产性能和免疫机能,以及磷和钙的利用率,推测可能是黑曲霉菌丝体中含有维生素、有机酸等生长刺激因子以及免疫调节因子.     

液相色谱质谱联用法测定食品中瘦肉精的残留量

建立一种液相色谱质谱联用法,同时测定食品中盐酸克伦特罗和莱克多巴胺的残留量。样品用β-葡萄糖醛苷酸酶溶液酶解,20 mmol/l乙酸铵缓冲溶液(pH5.2)提取,经过滤和离心后,上清液用固相萃取柱净化,液相色谱/串联质谱仪测定,外标峰面积法定量。方法加标平均回收率盐酸克伦特罗为95.5%～103.8%,试验的RSD为0.21%～0.99%;莱克多巴胺为94.5%～99.8%,试验的RSD为0.28%～1.79%。该方法操作方便、分析速度快、回收率高、结果准确,能满足常规检测及安全控制的需要。     

天然产物中活性多糖提取纯化技术进展

天然产物中活性多糖组分具有抗肿瘤、增强免疫力、降低血糖等多种生物活性。多糖的提取与分离纯化技术作为多糖活性研究的基础,近年来受到广泛关注。本文综述了天然产物中多糖的各类提取技术,包括溶剂提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法和酶解法;还介绍了几种常用的分离纯化技术,包括分级沉淀法、膜分离法以及柱层析法。分析比较了它们的作用原理、主要影响因素以及应用,剖析其适用领域,并展望了其发展前景。     

桑属植物总RNA的提取及花青素合成基因MCHS的鉴定

桑属植物细胞中含大量蛋白酶及多糖等生物功能性分子。以新鲜的桑叶、桑果为试验材料,应用Trizol法提取总RNA。试验表明,使用Trizol法配合氯仿—苯酚试剂提取RNA操作简单,且能够有效去除桑叶中多糖和多酚类等次生物质,从而得到高质量的RNA,以获得的RNA为模板,设计简并引物,成功从桑叶中鉴定出花青素合成的关键酶基因MCHS基因。该试验为分子水平研究桑科类黄酮代谢机制、以及桑葚功能性食品的开发等提供了一定的理论依据。     

尿中β—阻断剂的GC／MS分析

本文使用酶解-液液提取-TMS衍生化的方法,成功地完成了β-阻断剂的检测工作,比较了酶解与酸解以及TMS衍生化和TFA衍生化的差别,给出了最小检出量的数据。     

线粒体ATP合成酶复合体分离纯化的方法学研究与探讨

科研工作者们在过去的50年前赴后继的工作中深入研究了ATP合成酶的功能,并努力尝试解析该酶的空间结构以其能够从结构基础上对ATP合成酶的催化机理进行阐明;但蛋白的纯化工作却一直是困扰研究顺利进展的最大障碍.蛋白的纯化技术是与特定阶段科技发展及科研工作者思维模式的直接反应,因而是一门不断发展的艺术.高纯度的ATP合成酶及其亚基是研究酶结构与催化机理的基础和关键,文章综合半个世纪以来ATP合成酶研究发展,提出了一条较为完备的ATP合成酶提取与纯化的方法路线,并对FO-ATPase部分亚基c的纯化方法进行了重点介绍.     

微探头超声破碎辅助提取-HPLC-ICP/MS快速测定海产品中甲基汞

建立了基于微探头超声破碎为基础的盐酸浸提和酶水解提取的前处理方法快速分析海鲜样品中甲基汞。分别采用7mol/L盐酸溶液和含0.75%(w/v)蛋白酶XIV及2.5%(v/v)2-巯基乙醇的提取液从海鲜样品中提取汞,超声提取5分钟。用含有0.1%(w/v)的L-半胱氨酸和0.1%(w/v)L-半胱氨酸HCl·H2O在C18色谱柱上可以在4分钟内实现汞物质的分离。酸浸提和酶提取的回收率分别为99±3%和93±1%。甲基汞在1μg/L~20μg/L的浓度范围内呈良好线性,相关系数r20.996,相对标准偏差在2.7%~7.5%之间。本方法对甲基汞检测限为0.1μg/kg。本研究方法简单快速,可靠性好,适用于较小海鲜样品中甲基汞的提取。     

用GC／MS法定性检测人尿中的可的松类药物

本文采用固相提取、酶解及甲肟－三甲基硅酸衍生化的方法，用ＧＣ／ＭＳ的多离子检测技术成功地检出人尿中多种可的松类药物及某些代谢产物，方法灵敏、可靠。