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血管紧张素转换酶(ACE)的活性过高是导致高血压的重要因素之一。ACE抑制肽可有效地抑制ACE的活性。为了制备高纯度的ACE抑制肽,考查不同截留分子量超滤膜对发酵羊乳中的ACE抑制肽的分离效果,比较4种树脂(AB-8、HPD-100、DA201-C、DM130)对ACE抑制肽的纯化效果,选择最佳树脂并对其纯化工艺参数进行优化。结果表明,经超滤分离后,ACE抑制肽主要集中在M1 ku组分中,其IC50值降到了0.348 mg/mL,ACE抑制率为86.91%,比超滤前ACE抑制率提高了5.61%;大孔树脂DA201-C最佳,静态吸附最佳工艺条件为上样pH2.15、上样浓度20 mg/mL、吸附率为(72.38±1.26)%,通过大孔树脂后IC_(50)值达到0.301 mg/mL,与超滤液相比IC50降低了0.047 mg/mL。 相似文献
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大豆肽的离子交换色谱分离及其活性评价 总被引:5,自引:0,他引:5
采用Sephadex C-25阳离子交换剂对经过DA201-C型大孔吸附树脂脱盐、乙醇梯度洗脱(75%乙醇洗脱组分)的Alcalase水解大豆肽(DH14%)进行进一步的分离纯化,并对分离得到的各组分ACE抑制活性进行了评价。试管试验确定的SephadexC-25色谱分离条件为:上样量0.004g/mLIE,起始缓冲液为1M醋酸,上样吸附率为61.19%。经SP-Sephadex C-25分离得到6个组分,其中未吸附的3个组分ACE抑制活性低,但NaCl梯度洗脱的3个组分ACE活性均为60%左右,从纯化ACE抑制活性肽的角度考虑,分离效果比SephadexG-15差。 相似文献
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本研究以燕麦蛋白为原料,分别选用Alcalase、Neutrase 和Protamex 进行单独或联合水解,经活性炭YD-303脱色、大孔吸附树脂DA-201C Ⅱ脱盐及分级纯化、Sephadex G-25 凝胶色谱柱进一步分离,以获得高纯度、高活性的血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽。结果表明:单酶反应时,Alcalase 水解2h所获得的产物对ACE 的抑制率可达85.40%;YD-303 处理燕麦蛋白酶解液脱色最优工艺为添加量1.5%(W/V)、pH3.5、温度40℃、脱色时间75min。利用75% 乙醇洗脱大孔吸附树脂DA-201C Ⅱ所获得的组分ACE 抑制活性最高,其经Sephadex G-25 进一步分离纯化,得到四个分离组分,第四组分的ACE 抑制活性最高,抑制率为95.6%。 相似文献
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综合比较了001 ×7、201 ×7离子交换树脂、MWCO100透析袋和DA201-C大孔吸附树脂对棉籽蛋白水解液的脱盐效果,分析了DA201-C树脂脱盐对棉籽蛋白水解液ACE抑制活性和氨基酸组成的影响,并对Sephadex G-25分离纯化获得ACE抑制肽各组分进行活性测定.结果表明:DA201-C大孔吸附树脂的脱盐效果最好,控制流速为3 mL/min时,脱盐率可达到94.78%,氮回收率为86.32%,脱盐后疏水性氨基酸得到了有效富集,ACE抑制率显著提高.分离纯化后的ACE抑制肽各组分中,组分Ⅲ的抑制率最高,分子质量小于1000u. 相似文献
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比较6种大孔树脂对苋籽ACE抑制肽的吸附-解吸效果,从中筛选出合适该活性肽分离纯化的树脂,并对其吸附-解吸工艺进行优化。结果表明,DA201-C树脂最适合苋籽ACE抑制肽的纯化,在样品质量浓度10mg/mL,pH为5,上样量1BV,流速6mL/min时,树脂的吸附效果最佳,吸附率达83.69%,再用5BV体积分数75%乙醇,以5mL/min的流速进行洗脱,此时几乎把吸附的多肽全部洗脱下来,解吸率为98.69%。经树脂纯化,样品的蛋白纯度为89.47%,脱盐率为88.86%,短肽含量提高了20.96%,ACE抑制活性提高了27.91%。 相似文献
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The adsorption dynamics and thermodynamics of grass carp fish scale peptides (FSPs) onto non-polar macroporous resins (MARs), DA201-C, have been investigated. The adsorption of FSPs was affected by time, pH and peptide concentration. The adsorption process followed the Langmuir adsorption isotherm, and was endothermic (ΔH < 43 kJ/mol). The predominant force in adsorption of FSPs onto DA201-C was hydrophobic. Depending on this force, the dynamic adsorption and gradient desorption results showed that DA201-C resins were good at desalting and enriching peptides with higher contents of hydrophobic amino acids, and these peptides had higher ACE inhibitory capabilities in vitro. The lowest concentration at which the eluted fraction possessed half of its original ACE activity (IC50) was 0.13 mg/ml. The results indicated that fish scale peptides produced showed good ACE-inhibitory effect in vitro and fish scales are a good source of peptides with in vitro ACE inhibitory activity. 相似文献
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以猪血红蛋白的胃蛋白酶水解液为原料,依次通过大孔吸附树脂DA201-C、葡聚糖凝胶SephadexLH-20进行纯化,最终得到了3个降血压组分;并收集ACE抑制活性最高的组分α-Ⅱ,对其进行理化性质的研究。结果表明,酶解液经过大孔树脂DA201-C脱盐后,IC50为0.87mg/mL;继续经过葡聚糖凝胶SephadexLH-20分离得到的猪血红蛋白ACE抑制肽(α-Ⅱ)的IC50为0.21mg/mL。分离后的猪血红蛋白ACE抑制肽(α-Ⅱ)在pH为7时,溶解度最低,为50.37%;胃蛋白酶对其活性影响不显著。温度在25~55℃之间以及中性和偏酸性的条件下时,α-Ⅱ具有较好的热稳定性;当NaCl浓度大于0.6mol/L时,其活性急剧下降。 相似文献
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目的:研究DA201-C大孔吸附树脂对草鱼肽的脱盐作用。方法:对脱盐前后草鱼肽的灰分、肽含量、分子质量及氨基酸组成进行分析,采用脱盐率、血管紧张素转化酶(angiotensin I-converting enzyme,ACE)抑制活性、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical 2,2-diphenyl-1-(2,4,6-trinitrophenyl)hydrazyl,DPPH)自由基清除率和铁还原抗氧化能力(ferric reducing antioxidant potential,FRAP)为指标考察其脱盐效果。结果:草鱼肽的脱盐率为82.02%,脱盐处理后,肽片段和疏水氨基酸得到有效富集;ACE抑制活性显著增大,半抑制质量浓度(IC50)由0.36 mg/mL变为0.23 mg/mL;抗氧化性增强,其IC50由5.59 mg/mL变为4.48 mg/mL;总抗氧化值由1.018增大到1.261。结论:采用DA201-C大孔吸附树脂对草鱼肽脱盐是一种简便有效的处理方法。 相似文献
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《食品工业科技》2013,(01):49-52
比较32味中药对血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)的抑制作用,并对枸杞的活性成分进行鉴别。高效液相色谱法(HPLC)评价药物对ACE活力的抑制作用,柱层析法对具有最强抑制作用的中药进行分离,确定活性最高的部位。32味中药提取物对ACE有不同程度的抑制作用,其中抑制作用最强的是枸杞,抑制率高达92.30%。枸杞提取物用D-101大孔树脂粗分,50%乙醇洗脱部位对ACE的抑制活性最强,此部位通过硅胶柱进一步纯化得到纯度更高的ACE抑制部位及活性成分。枸杞提取物对ACE酶有很强的抑制效果,大孔树脂和硅胶能很好的分离枸杞中对ACE有抑制作用的化合物。 相似文献