大豆分离蛋白ACE活性抑制肽的研究

研究了预处理条件对大豆分离蛋白水解效果的影响,热处理与微波辅助处理相结合能显著提高蛋白酶的水解效率.比较了6种酶解大豆蛋白产物的ACE抑制活性,选择碱性蛋白酶为最佳水解用酶,并优化了酶解条件.研究了8种大孔树脂对水解产物精制效果,结果表明:经D3520型大孔吸附树脂精制后,水解产物脱盐率89.4%,肽回收率90.6%,ACE抑制活性达84.1%.经HPLC法测定,大豆分离蛋白ACE活性抑制肽混合物分子质量主要分布在200～800 ku之间.     

响应面法优化大孔树脂吸附发酵羊乳ACE抑制肽

血管紧张素转换酶(ACE)的活性过高是导致高血压的重要因素之一。ACE抑制肽可有效地抑制ACE的活性。为了制备高纯度的ACE抑制肽,考查不同截留分子量超滤膜对发酵羊乳中的ACE抑制肽的分离效果,比较4种树脂(AB-8、HPD-100、DA201-C、DM130)对ACE抑制肽的纯化效果,选择最佳树脂并对其纯化工艺参数进行优化。结果表明,经超滤分离后,ACE抑制肽主要集中在M1 ku组分中,其IC50值降到了0.348 mg/mL,ACE抑制率为86.91%,比超滤前ACE抑制率提高了5.61%;大孔树脂DA201-C最佳,静态吸附最佳工艺条件为上样pH2.15、上样浓度20 mg/mL、吸附率为(72.38±1.26)%,通过大孔树脂后IC_(50)值达到0.301 mg/mL,与超滤液相比IC50降低了0.047 mg/mL。     

大孔吸附树脂分离魔芋飞粉中ACE抑制肽工艺研究

采用大孔吸附树脂对魔芋ACE抑制肽进行分离,比较3种大孔吸附树脂对魔芋飞粉中ACE抑制肽的静态吸附和解吸效果,从中筛选出适合该魔芋ACE抑制肽分离纯化的树脂。结果表明,DA201-C型树脂最适合魔芋飞粉中ACE抑制肽的纯化。通过对影响树脂吸附解吸的各种因素进行系统地研究,确定工艺参数。最佳工艺参数为上样浓度8 mg/mL、pH 2.0、上样量8 mL、洗脱液乙醇体积分数80%、洗脱流速1.0 mL/min、洗脱时间2 h,在此条件下,分离得到的魔芋ACE抑制肽的抑制率为95.19%。     

大豆肽的离子交换色谱分离及其活性评价

采用Sephadex C-25阳离子交换剂对经过DA201-C型大孔吸附树脂脱盐、乙醇梯度洗脱(75%乙醇洗脱组分)的Alcalase水解大豆肽(DH14%)进行进一步的分离纯化,并对分离得到的各组分ACE抑制活性进行了评价。试管试验确定的SephadexC-25色谱分离条件为:上样量0.004g/mLIE,起始缓冲液为1M醋酸,上样吸附率为61.19%。经SP-Sephadex C-25分离得到6个组分,其中未吸附的3个组分ACE抑制活性低,但NaCl梯度洗脱的3个组分ACE活性均为60%左右,从纯化ACE抑制活性肽的角度考虑,分离效果比SephadexG-15差。     

燕麦ACE 抑制肽的分离纯化及其活性研究

通过对3 种大孔吸附树脂的比较,选择DA201-C 树脂对燕麦ACE 抑制肽进行纯化。纯化后的燕麦肽产物的ACE 抑制率达到92.86%,利用HPLC 测得纯化后燕麦ACE 抑制肽的分子质量分布在240.10～1292.11D 之间,这部分物质在整个纯化产物中占99.82%。采用SephadexG-15 凝胶分离燕麦ACE 抑制肽得到D峰,其IC50 为0.103mg/mL,分子质量545D。采用大孔吸附树脂及凝胶层析法能够较好地分离纯化燕麦ACE 抑制肽。     

大孔树脂吸附分离蚕蛹ACE抑制肽的研究

为了找出大孔树脂纯化蚕蛹ACE抑制肽的方法。比较了5种大孔树脂在纯化蚕蛹ACE抑制肽时的吸附率和解吸率,得出DA201-C分离蚕蛹ACE抑制肽的效果最好。再进一步考察上样流速、上样浓度、分级洗脱等对DA201-C大孔树脂吸附及分离效果的影响。最终结果为75%乙醇洗脱下的多肽的ACE抑制率最高,其IC50为0.632mg/mL,并且发现疏水性与ACE抑制率呈正相关。     

酶解燕麦蛋白制备ACE抑制肽的研究

本研究以燕麦蛋白为原料,分别选用Alcalase、Neutrase 和Protamex 进行单独或联合水解,经活性炭YD-303脱色、大孔吸附树脂DA-201C Ⅱ脱盐及分级纯化、Sephadex G-25 凝胶色谱柱进一步分离,以获得高纯度、高活性的血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽。结果表明：单酶反应时,Alcalase 水解2h所获得的产物对ACE 的抑制率可达85.40%;YD-303 处理燕麦蛋白酶解液脱色最优工艺为添加量1.5%(W/V)、pH3.5、温度40℃、脱色时间75min。利用75% 乙醇洗脱大孔吸附树脂DA-201C Ⅱ所获得的组分ACE 抑制活性最高,其经Sephadex G-25 进一步分离纯化,得到四个分离组分,第四组分的ACE 抑制活性最高,抑制率为95.6%。     

棉籽蛋白源ACE抑制肽的制备过程中脱盐技术的研究

综合比较了001 ×7、201 ×7离子交换树脂、MWCO100透析袋和DA201-C大孔吸附树脂对棉籽蛋白水解液的脱盐效果,分析了DA201-C树脂脱盐对棉籽蛋白水解液ACE抑制活性和氨基酸组成的影响,并对Sephadex G-25分离纯化获得ACE抑制肽各组分进行活性测定.结果表明:DA201-C大孔吸附树脂的脱盐效果最好,控制流速为3 mL/min时,脱盐率可达到94.78％,氮回收率为86.32％,脱盐后疏水性氨基酸得到了有效富集,ACE抑制率显著提高.分离纯化后的ACE抑制肽各组分中,组分Ⅲ的抑制率最高,分子质量小于1000u.     

苋籽ACE抑制肽的大孔树脂分离纯化

比较6种大孔树脂对苋籽ACE抑制肽的吸附-解吸效果,从中筛选出合适该活性肽分离纯化的树脂,并对其吸附-解吸工艺进行优化。结果表明,DA201-C树脂最适合苋籽ACE抑制肽的纯化,在样品质量浓度10mg/mL,pH为5,上样量1BV,流速6mL/min时,树脂的吸附效果最佳,吸附率达83.69%,再用5BV体积分数75%乙醇,以5mL/min的流速进行洗脱,此时几乎把吸附的多肽全部洗脱下来,解吸率为98.69%。经树脂纯化,样品的蛋白纯度为89.47%,脱盐率为88.86%,短肽含量提高了20.96%,ACE抑制活性提高了27.91%。      

大孔吸附树脂静态处理对鳀鱼酶解液ACE抑制活性的影响

应用六种大孔吸附树脂静态处理鳀鱼酶解液,采用改进的高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)测定其ACE抑制活性.比较了六种树脂对鳀鱼酶解液ACE抑制活性的影响.结果表明:树脂吸附导致酶解液ACE抑制活性的变化主要与树脂的极性有关,非极性树脂会降低其ACE抑制活性,极性和弱极性树脂ACE抑制活性稍有提高.树脂H103处理后的ACE抑制活性降低最明显,IC50值由9.10mg提高到了17.58mg.     

大孔吸附树脂对酪蛋白非磷肽脱盐效果的研究

采用DA201-C型大孔吸附树脂对酪蛋白非磷肽(CNPPs)进行脱盐处理。采用脱盐率,回收率和血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性为指标考察脱盐效果。结果表明:CNPPs的脱盐率达到95.40%,回收率达到85%以上,ACE抑制活性得到提高,半抑制浓度(IC_(50))由0.35mg/mL下降到0.21mg/mL。本研究表明,采用大孔吸附树脂进行CNPPs的脱盐处理是一种简便有效的方法。     

葵花籽粕ACE抑制肽分离纯化及其性质研究

以葵花籽粕血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽为原料,采用DA201-C大孔吸附树脂对其进行分离纯化,并对纯化后的葵花籽粕ACE抑制肽稳定性和活性进行了分析。结果表明:葵花籽粕ACE抑制肽最优纯化工艺为乙醇浓度70%、上样p H 5、上样流速2 BV/h、洗脱流速2 BV/h,在此条件下,得率为93.26%,纯化后的葵花籽粕ACE抑制肽的抑制率为92.23%±0.48%。葵花籽粕ACE抑制肽对热和金属离子均具有良好的稳定性,模拟体内消化实验显示其活性不受胃肠酶的影响。     

Macroporous resin purification of grass carp fish (Ctenopharyngodonidella) scale peptides with in vitro angiotensin-I converting enzyme (ACE) inhibitory ability

The adsorption dynamics and thermodynamics of grass carp fish scale peptides (FSPs) onto non-polar macroporous resins (MARs), DA201-C, have been investigated. The adsorption of FSPs was affected by time, pH and peptide concentration. The adsorption process followed the Langmuir adsorption isotherm, and was endothermic (ΔH < 43 kJ/mol). The predominant force in adsorption of FSPs onto DA201-C was hydrophobic. Depending on this force, the dynamic adsorption and gradient desorption results showed that DA201-C resins were good at desalting and enriching peptides with higher contents of hydrophobic amino acids, and these peptides had higher ACE inhibitory capabilities in vitro. The lowest concentration at which the eluted fraction possessed half of its original ACE activity (IC₅₀) was 0.13 mg/ml. The results indicated that fish scale peptides produced showed good ACE-inhibitory effect in vitro and fish scales are a good source of peptides with in vitro ACE inhibitory activity.     

猪血红蛋白ACE抑制肽的分离和理化性质研究

以猪血红蛋白的胃蛋白酶水解液为原料,依次通过大孔吸附树脂DA201-C、葡聚糖凝胶SephadexLH-20进行纯化,最终得到了3个降血压组分;并收集ACE抑制活性最高的组分α-Ⅱ,对其进行理化性质的研究。结果表明,酶解液经过大孔树脂DA201-C脱盐后,IC₅₀为0.87mg/mL;继续经过葡聚糖凝胶SephadexLH-20分离得到的猪血红蛋白ACE抑制肽（α-Ⅱ）的IC₅₀为0.21mg/mL。分离后的猪血红蛋白ACE抑制肽（α-Ⅱ）在pH为7时,溶解度最低,为50.37%;胃蛋白酶对其活性影响不显著。温度在25～55℃之间以及中性和偏酸性的条件下时,α-Ⅱ具有较好的热稳定性;当NaCl浓度大于0.6mol/L时,其活性急剧下降。      

核桃蛋白ACE抑制肽分离纯化研究

核桃ACE抑制肽经超滤后,其ACE抑制率由76.58%增至78.43%,再经DA201-C大孔吸附树脂脱盐纯化后,脱盐率达到98.70%,ACE抑制率升高至80.73%;采用Sephadex G-15凝胶分离后,核桃ACE抑制肽被分为三个组分,其中活性最大的G2组分,其ACE抑制率达83.10%,且IC50为1.308 mg/mL,G2组分主要分布在500 Da¹80 Da,系为2180 Da,系为2⁴个氨基酸残基组成小肽。     

大孔吸附树脂分离纯化海蜇ACE抑制肽的工艺研究

本文主要从分子极性角度研究了大孔吸附树脂对具有血管紧张素转化酶(Angiotensin-I converting enzyme,ACE)抑制活性的海蜇多肽的分离纯化作用.取海蜇酶解产物作为研究对象,选用HP20SS、SP20SS、SP207三种不同型号的大孔吸附树脂分离纯化海蜇ACE抑制肽,以ACE抑制率为评价指标,对...     

大孔吸附树脂对草鱼肽的脱盐作用

目的：研究DA201-C大孔吸附树脂对草鱼肽的脱盐作用。方法：对脱盐前后草鱼肽的灰分、肽含量、分子质量及氨基酸组成进行分析,采用脱盐率、血管紧张素转化酶（angiotensin I-converting enzyme,ACE）抑制活性、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical 2,2-diphenyl-1-（2,4,6-trinitrophenyl）hydrazyl,DPPH）自由基清除率和铁还原抗氧化能力（ferric reducing antioxidant potential,FRAP）为指标考察其脱盐效果。结果：草鱼肽的脱盐率为82.02%,脱盐处理后,肽片段和疏水氨基酸得到有效富集;ACE抑制活性显著增大,半抑制质量浓度（IC50）由0.36 mg/mL变为0.23 mg/mL;抗氧化性增强,其IC50由5.59 mg/mL变为4.48 mg/mL;总抗氧化值由1.018增大到1.261。结论：采用DA201-C大孔吸附树脂对草鱼肽脱盐是一种简便有效的处理方法。     

抑制血管紧张素转化酶的中药及活性成分的研究

比较32味中药对血管紧张素转化酶（angiotensin converting enzyme,ACE）的抑制作用,并对枸杞的活性成分进行鉴别。高效液相色谱法（HPLC）评价药物对ACE活力的抑制作用,柱层析法对具有最强抑制作用的中药进行分离,确定活性最高的部位。32味中药提取物对ACE有不同程度的抑制作用,其中抑制作用最强的是枸杞,抑制率高达92.30%。枸杞提取物用D-101大孔树脂粗分,50%乙醇洗脱部位对ACE的抑制活性最强,此部位通过硅胶柱进一步纯化得到纯度更高的ACE抑制部位及活性成分。枸杞提取物对ACE酶有很强的抑制效果,大孔树脂和硅胶能很好的分离枸杞中对ACE有抑制作用的化合物。