以DNA为靶标的植物油检测技术研究进展

为系统梳理以DNA为靶标的植物油检测技术,为其有效地应用及相关研究的开展提供思路,综述了植物油中DNA提取方法、以DNA为靶标的掺假植物油、转基因植物油的检测技术以及植物油油料品种溯源技术.分析结果表明,掺假植物油和转基因植物油的检测主要是以油料作物种属特异性基因或转入的外源基因为靶标进行PCR检测;植物油的油料品种溯源技术主要是利用具有品种特异性的油料作物分子标记技术.目前,植物油脂中的DNA提取方法日渐成熟,以DNA为靶标的植物油检测技术已具有很好的应用前景.     

一种植物基因组DNA快速提取方法的建立与评估

植物基因组脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)的提取是植物分子实验的基础,但随着样本数量的增加,基因组DNA的提取成为植株基因型鉴定以及单核苷酸多态性检测等分子实验的限速环节.为解决现有技术中提取植物基因组DNA过程繁琐、耗时耗力的问题,从提取液配方和提取条件等方面改良常规快速植物基因组DNA提取法,缩短了样本制备时间并简化了提取步骤,改良后每个样本DNA制备需时不到90 s,同时采用96孔板和配套设施显著提高了实验通量.该方法对植物样本的状态要求低、扩增效率高、成本低,适用于拟南芥、水稻和玉米等多种植物基因组DNA的提取与聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增实验,尤其适用于大样本量的规模化基因型鉴定.     

芝麻油DNA高效提取方法的建立与优化

从植物油中提取高纯度DNA可为利用分子生物学技术检测油脂掺伪提供技术支撑。以芝麻油为材料优化了植物油DNA树脂提取法。在单因素试验的基础上,进行五因素四水平正交试验设计,以分光光度法测定提取DNA的浓度和纯度。得到芝麻油DNA提取的最优条件为:油样用量4 m L,去油液为4 m L氯仿,裂解液为2.5 m L 1.4 mol/L NaCl,摇匀时间50 min,摇匀速度25 r/min。在此条件下,DNA提取效果最佳。通过方差分析可知,摇匀速度对提取DNA浓度影响显著。     

一种快速提取小麦DNA的方法

以优质小麦豫麦 47# 为原料 ,对小麦DNA的提取方法进行了探讨 .研究了在不用液态氮的情况下 ,防止DNA降解的关键技术 .对提取的小麦DNA进行紫外检测和琼脂糖凝胶电泳分析 ,结果表明提取的DNA相对分子质量大 ,浓度和纯度高 .该法也适合提取其它植物分子DNA .     

基于嵌入式技术的油脂色泽检测技术研究

为避免传统油脂色泽检测方法中的主观误差,降低油脂色泽检测系统的成本,提高系统的便携性,利用ARM嵌入式技术设计了新型的油脂色泽检测系统,介绍了该系统油脂色泽检测的原理、总体设计与软件流程.实验检测表明:系统具有较好的稳定性与准确性,可广泛应用于油脂色泽质量检测领域.     

羊乳及其制品中掺入牛乳成分的双重PCR检测

根据牛、羊的线粒体12SrRNA基因为靶基因设计合成两对特异性引物,建立了羊乳中掺入牛乳的双重PCR检测方法,对鲜乳中快速DNA提取进行了快速法和磁珠法的比较研究.结果显示,利用快速法提取出的DNA纯度欠佳,羊乳中能检测出牛乳10%的掺入比例,而利用磁珠法提取的DNA纯度高、重复性好,在羊乳及其制品中掺入牛乳检出值能达到1%,将该检测方法应用于巴氏杀菌乳和不同品牌市售羊奶粉的掺假牛乳的检验验证.以磁珠法来提取DNA,双重PCR检测方法可以作为羊乳及其制品中掺入牛乳源性成分的有效手段之一,为羊乳行业的掺假行为提供一定技术依据.     

酶技术制取植物油脂的研究进展

我国油料资源短缺状态一直存在,开发经济有效、环境友好、产品安全的制油技术是解决该现状的有效途径之一.酶技术不仅可以满足油脂行业发展的需求,且在制油的同时可以有效地回收油料的其他营养成分.从酶技术提取油脂、酶技术脱胶、酶技术脱除黄曲霉毒素等入手,详细介绍了国内外酶技术在植物油脂制取中的研究概况.     

超声波破碎法提取活性污泥DNA及其DGGE分析

为快速提取活性污泥中的微生物DNA,进一步应用于变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术分析其群落结构,采用细胞超声波破碎法直接提取反应器活性污泥DNA,以16S rRNA V3区域通用引物进行PCR扩增,随后利用DGGE技术对扩增产物的多样性进行评估.结果表明,超声波破碎法可以快速地提取活性污泥DNA,用超声波破碎法提取到的活性污泥克服了PCR扩增困难的问题.在一定的超声波功率下,超声时间对DNA产率、PCR扩增效率和DGGE分析均有很大影响,实验的最佳超声时间为27 s.DGGE分析表明,用该法提取到的DNA种类较为丰富,多样性较好,种群强度最高能达到0.7 OD,能够进一步应用于群落结构分析.     

一种快速提取小麦DNA的方法

以优质小麦豫麦47＃为原料，对小麦DNA的提取方法进行了探讨，研究了在不同液态氮的情况下，防止DNA降解的关键技术，对提取的小麦DNA进行紫外检测和琼脂糖凝胶电泳分析，结果表明提取的DNA相对分子质量大，浓度和纯度高，该法也适合提取其它植物分子DNA。     

气相色谱法SIMCA模式识别9种植物油脂的可行性研究

通过Soft Independent Modeling of Class Analogy(SIMCA)模式识别方法区分花生油、大豆油、米糠油、棕榈油、菜籽油、玉米油、棉籽油、葵花籽油和芝麻油9种植物油脂.采用气相色谱法分析9种植物油脂219个样品的脂肪酸,用面积归一化法得到每个植物油脂的各脂肪酸相对含量.以每种植物油脂中9个脂肪酸的相对含量为变量,采用SIMCA分析技术进行数据预处理,随机取2/3的样品作定标集,1/3作验证集,对9种植物油脂的训练集进行主成分分析(PCA),并通过交互验证建立各油脂种类的PCA模型,再利用训练集样本建立的SIMCA判别模型对验证集样本进行验证.结果显示,SIMCA可以对9种植物油脂分别聚类和识别,各种植物油脂的SIMCA分析的聚类精度均为100%,除了芝麻油的验证识别准确率为75%外,其他均为100%.