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相似文献
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1.
玉米转基因成分的非同源模板竞争定量PCR检测   总被引:4,自引:0,他引:4  
建立了玉米转基因成分中35S启动子非同源模板的竞争定量PCR检测系统.竞争定量PCR的关键问题是内标物的制备.实验中非同源模板的构建是采用PCR方法对大肠杆菌基因组进行低严紧型扩增,回收预期DNA片段并将其构建到T-easy载体上.通过调整非同源模板浓度使竞争物PCR产物亮度与1%GMO玉米的亮度相同,从而确定转基因玉米的检出限为1%.然后以确定的内标物浓度与不同含量的GMO玉米样品进行竞争定量PCR反应,以此进一步确定样品中GMO的含量范围.  相似文献   

2.
利用改良CTAB法提取玉米产品的基因组DNA,应用PCR检测方法,并以玉米特异性内源基因IVR为内参,花椰菜花叶病毒35S启动子(CaMV35S启动子)、农杆菌胭脂碱合成酶终止子(NOS终止子)为靶基因检测玉米中是否存在转基因成分。实验结果表明,有些玉米样品中存在转基因成分,表明市场上存在未经标识的转基因玉米及其加工品。  相似文献   

3.
玉米中转基因成分的定性PCR检测   总被引:1,自引:0,他引:1  
利用改良 CTAB 法提取玉米产品的基因组 DNA,应用 PCR 检测方法,并以玉米特异性内源基因 IVR 为内参,花椰菜花叶病毒 35S 启动子(CaMV35S 启动子)、农杆茵胭脂碱合成酶终止子(NOS终止子)为靶基因检测玉米中是否存在转基因成分.实验结果表明,有些玉米样品中存在转基因成分,表明市场上存在未经标识的转基因玉米及其加工品.  相似文献   

4.
多重PCR方法检测食品中转基因成分   总被引:12,自引:0,他引:12  
根据转基因农作物中最常用的花椰菜花叶病毒启动子(CaMV35S)和根癌农杆菌终止子(NOS)的序列,设计合成了两对不同的引种和相对应的两种荧光双链探针(FDCP),分别建立了多重PCR,应用FDCP的实时荧光PCR同时检测转基因成分35S启动子和NOS终止子的方法,并利用该套方法对马铃薯、大豆、玉米、甜椒、番茄等实物样品进行了检测,发现13份样品有6份检出35S启动子、NOS终止子,其余7份样品的检测结果为阴性,表明作者建立的多重PCR方法能有效检测出35S和NOS成分,其中多重PCR法具有灵敏度高、特异性好的特点,多重荧光PCR法则更为简便、快速、准确。  相似文献   

5.
应用间接ELISA方法定量检测转基因抗虫玉米   总被引:7,自引:0,他引:7  
应用纯化的Bt1杀虫晶体蛋白质作为标准蛋白和免疫抗原,通过抗体-抗原-酶标抗体反应,建立了间接酶联免疫吸附测定法(ELISA),以快速检测转基因抗虫玉米中的BtL表达蛋白,用建立的ELISA法对4种进口玉米实物样品进行了测定,实验结果得到了免疫印迹分析的验证,并与进口试验盒方法的定量分析结果相一致。  相似文献   

6.
根据GenBank中芝麻种属特异性基因序列,利用分子生物学软件oligo7.60在其保守区设计并合成相应的特异性引物,提取芝麻DNA作为标准品模板,采用荧光定量PCR建立了芝麻油的定量检测技术。结果表明:芝麻特异性引物S199对芝麻DNA的定量检测效果最好。在芝麻油中以不同比例掺入其他食用油(大豆油),利用qPCR进行定量分析,最低检出限为1%。  相似文献   

7.
转基因产品的PCR—ELISA液相杂交检测条件研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
确定杂交液成分,选择探讨浓度,将5′端标记生笔素的PCR扩增产物与5′端标记地高辛的探针呈液相混合,在PCR管中按优化后的条件(92℃,5min;55℃,5min)进行液相杂交。杂交产物通过链霉亲和素被固定在微孔表面,同时在含高浓度二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)的杂交液中将非特异结合的探针解离,然后对被固定的特异杂交产物进行ELISA检测。PCR-ELISA液相杂交检测方法操作简便,特异性高,避免了繁琐的杂交程序和对人体有害的溴乙锭,适用于转基因产品及春加工食品的快速检测。  相似文献   

8.
通过对CTAB法、胍-氯仿法和试剂盒法三种植物基因组提取方法进行比较,筛选出回收率最大的CTAB法用于本实验样品基因组的提取。其次,以转基因作物中9种常见的外源基因序列为模板,设计出9对引物,拟扩增片段皆小于200bp以适用于深加工食品的检测,并进行了引物的特异性、灵敏度、适用性验证试验。最后,将所建立的普通PCR检测方法应用到了转基因样品的实际检测中。结果表明,所建立的针对转基因作物中9种常见外源基因的PCR检测方法特异性强、灵敏度高,相对检测限可达0.1%~0.5%,约18~90拷贝的基因组。因此,该方法可用于转基因食品及加工品中常见基因的筛选检测。  相似文献   

9.
用十六烷基-二甲基-乙基-溴化铵(CTAB)法快速高效地从样品中提取了可供分析的基因组DNA,经PCR扩增,鉴定了含有35S启动子和NOS终止子的转基因样品,该方法的灵敏度可达0.1%,并且具有很好的稳定性。  相似文献   

10.
介绍了基因枪法、农杆菌介导法和花粉管通道法等转基因方法。对小麦、水稻、大豆、玉米4种粮食作物的转基因技术研究进展,以及PCR技术对转基因粮食的检测进展进行了综述,  相似文献   

11.
转基因食品及其检测技术   总被引:9,自引:0,他引:9  
就转基因食品的发展现状,转基因食品的安全性及其检测技术做了介绍。  相似文献   

12.
关于转基因食品安全性的讨论   总被引:4,自引:0,他引:4  
讨论了转基因食品的概念和安全性的评价内容,介绍了各国食品安全的法规体系,在目前生物技术时代,建立更完善的食品安全管理机构,已是当务之急。  相似文献   

13.
大孔树脂对玉米花粉黄酮类的吸附分离特性研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
选择8种大孔吸附树脂,比较其对玉米花粉黄酮类的吸附率和解吸率,筛选较优的玉米花粉黄酮类吸附剂,并对其动态吸附性能进行了考察.结果表明:AB-8树脂对玉米花粉黄酮类有较好的吸附和解吸效果.  相似文献   

14.
针对聚合物驱后剩余油分布更加零散,准确描述剩余油分布难度大,以孤岛油田注聚先导区为研究原型,建立精细地质模型,通过油藏数值模拟方法,对聚合物驱剩余油分布规律及其影响因素进行研究,提出了基于成因分类和形态分类的剩余油分布模式,定量描述了每种类型剩余油饱和度及其相对储量,指出厚油层顶部和压力平衡滞留区是剩余油的主要富集区,储层变异系数、地层原油黏度、夹层分布位置、注聚用量是聚合物驱受效剩余油的主要影响因素.在此基础上模拟了变形井网和水平井与直井组合井网两种开采方式,提出了聚合物驱后进一步改善后续水驱开发效果的技术思路.矿场应用表明,研究结果对聚合物驱剩余油描述与挖潜具有指导意义.  相似文献   

15.
本文介绍了一种无甲醛防皱整理剂──改性柠檬酸(CCA)的合成与结构特点。通过正交试验,优选了在纯棉织物防皱整理中的应用工艺。试验表明,CCA与柠檬酸(CA)配合使用,不仅防皱效果好,而且成本低,使柠檬酸用于棉织物防皱整理中产生的泛黄,强度损伤大以及耐洗牢度差等缺点得到明显改善  相似文献   

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