食品中大肠杆菌代谢的定量法研究

用热活性检测系统测定了大肠杆菌在不同温度、pH及药物(甘草)的作用下生长的完整热谱曲线,进而按指数生长模型计算出不同条件下细菌代谢的生长速率常数,并用计算机拟合出生长速率常数与温度、pH及药物浓度之间的关系式,进一步求得大肠杆菌最适生长温度及最低和最高生长温度;最佳生长pH及最低和最高生长pH;甘草液抑菌的最佳浓度。此项研究工作的开展对深入研究细菌生长规律及抑制细菌生长提供了一种新的、可靠的定量方法。      

食品中大肠杆菌代谢的定量法研究

用热活性检测系统测定了大肠杆菌在不同温度、pH及药物(甘草)的作用下生长的完整热谱曲线,进而按指数生长模型计算出不同条件下细菌代谢的生长速率常数,并用计算机拟合出生长速率常数与温度、pH及药物浓度之间的关系式,进一步求得大肠杆菌最适生长温度及最低和最高生长温度;最佳生长pH及最低和最高生长pH;甘草液抑菌的最佳浓度。此项研究工作的开展对深入研究细菌生长规律及抑制细菌生长提供了一种新的、可靠的定量方法。     

采用微量量热法研究苹果多酚对大肠杆菌的抑菌作用

应用微量量热法测定了大肠杆菌在不同浓度的苹果多酚中的生长热谱图,采用微生物指数生长模型进行数学处理,得出生长速率常数,并用计算机拟合出线性方程,确定了大肠杆菌在苹果多酚中的临界生长浓度。     

酸奶发酵剂中嗜热链球菌与保加利亚乳杆菌生长关系的微量量热法研究

应用微量量热计测定了普通酸奶菌种保加利亚乳杆菌 (L bulgaricus)、嗜热链球菌(Str thermophilus)及 2者混合菌在发酵鲜乳制酸奶过程中的热效应变化 ,并获得了细菌生长的热谱图曲线 ,从热谱图中得出的不同温度下细菌的热功率表明 ,嗜热链球菌与保加利亚乳杆菌有促进生长的关系 ,该结果与酸度判断法的结论相同。由此得出微量量热法是判断菌种有促进生长关系的简单方法     

量热法监控生物发酵过程的研究

量热法是生物热化学的重要方法之一,适合于生物体系各个层次的研究。在生物反应器的发酵过程中,量热法作为一种新的技术,简单适用,有着很大的市场前景。本文主要通过对生物发酵过程中罐体热流变化的研究,得出热量控制对生物发酵的影响,从而为大规模生产发酵过程的在线控制提供一定指导意义。     

老蒜提取物石油醚部位对大肠杆菌的抑制作用研究

本文自制了两种老蒜提取物(aged garlic extract,AGE)AGE-1和AGE-2,用石油醚进行萃取后挥干溶剂得到AGE-1和AGE-2的石油醚部位。采用微量肉汤稀释法测定了AGE-1和AGE-2的石油醚部位对大肠杆菌的最低抑菌浓度,发现AGE-1和AGE-2的石油醚部位对大肠杆菌的最低抑菌浓度分别为31μg/m L和62μg/m L。通过大肠杆菌生长曲线、细胞内容物泄漏、培养液电导率的测定以及激光共聚焦显微镜和扫描电子显微镜观察等方法研究了AGE-1和AGE-2石油醚部位对大肠杆菌的抑菌机理,发现AGE-1和AGE-2的石油醚部位在其最低抑菌浓度下能够抑制大肠杆菌的生长发育,导致细胞内电解质和大分子物质的泄漏,并能对大肠杆菌细胞壁和细胞膜造成损伤,改变细胞膜的通透性,促使细胞凋亡或坏死,从而使大肠杆菌细胞表面粗糙,菌体之间互相黏连,细胞形态发生变形和凹陷。     

曲酸对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用研究

为了探讨曲酸对食品中常见污染细菌的抑制效果,采用平板稀释涂布法和圆滤纸片法研究曲酸对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)、曲酸抑菌热稳定性以及曲酸与ε-聚赖氨酸复合抑菌效果.实验表明:曲酸对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌MIC分别是0.25%、0.40%;曲酸经过80、100、120℃处理30 min后MIC不变:1.0%的曲酸与0.001%的ε-聚赖氨酸复合后对金黄色葡萄球菌抑菌能力增强.结论:曲酸对食品中常见污染细菌具有良好的抑菌效果而且热稳定性好,与ε-聚赖氨酸复合对金黄色葡萄球菌抑菌效果具有协同增效作用.     

热胁迫和培养温度对大肠杆菌抗热性的影响

研究大肠杆菌O157:H7 ATCC 43889经50、60 ℃和70 ℃反复多次热胁迫处理与在10、28、36 ℃和45 ℃的条件下生长培养后对其80 ℃抗热性的影响。分别对ATCC 43889进行50、60 ℃和70 ℃的热胁迫,研究在一定的热力致死温度条件下杀死某细菌数量90%所需要的时间（D值）的变化,观察ATCC 43889热胁迫前后菌落形态和个体形态的变化;将ATCC 43889置于10、28、36 ℃和45 ℃培养至稳定期,分别测定其在80 ℃的存活量,再利用Weibull模型拟合其在80 ℃的热致死曲线。结果表明,50、60 ℃和70 ℃热胁迫处理均可诱导ATCC 43889抗热性增加,经10 次热胁迫并传代培养后,其D值分别为第1次热胁迫处理后的1.88、2.38 倍和8.18 倍,D值随热处理次数的增加不断增大,说明胁迫温度越高,D值越大,其抗热性越强;经过60 ℃和70 ℃热胁迫后,ATCC 43889菌落形态和个体形态与对照组相比差异显著;在80 ℃,ATCC 43889的致死曲线表明,胁迫温度越高,其抗热性越强（P＜0.05）;在10～45 ℃培养,随培养温度的升高,ATCC 43889的抗热性显著增加（P＜0.05）。利用Weibull模型可以较好地拟合ATCC 43889经过50、60 ℃和70 ℃热胁迫处理10 次后与10、28、36 ℃和45 ℃培养后在80 ℃的抗热性曲线,随着胁迫温度和培养温度的升高,ATCC 43889的抗热性都呈增加趋势。综上,一定热处理与培养温度可胁迫诱导大肠杆菌ATCC 43889抗性热增强和形态的变化。     

枯草芽孢杆菌发酵提取物对大肠杆菌的抑制作用

为探索枯草芽孢杆菌发酵提取物对大肠杆菌的抑菌效果及作用机理,利用倍半稀释法确定其对大肠杆菌的最小抑菌浓度,通过研究枯草芽孢杆菌发酵提取物对大肠杆菌生长曲线、细胞膜通透性以及细胞超微结构的影响,探讨提取物对大肠杆菌的抑制作用机理,同时对该提取物的化合物类型进行了初步分析。结果表明,该提取物对大肠杆菌具有明显的抑制作用,其最小抑菌浓度为0.614 mg·mL^-1,在大肠杆菌生长的延滞期和对数期加入该提取物,比在稳定期加入能够显现出更好的抑菌效果。经提取物作用后的细胞表面粗糙,边缘模糊,细胞膜破裂,表明该提取物能够增加大肠杆菌细胞膜的通透性。化合物分析显示,提取物中抑菌成分主要是多烯类化合物和脂肽类化合物。     

磷酸盐对大肠杆菌发酵异亮氨酸的影响

探究磷酸盐浓度对大肠杆菌E.coli TRFP发酵生产L-异亮氨酸的影响。利用30 L发酵罐进行分批补料发酵试验,考察磷酸盐浓度对E.coli TRFP发酵生产L-异亮氨酸过程中生物量、比生长速率、L-异亮氨酸产量、发酵液中乙酸及NH4+浓度变化。结果表明,发酵初期维持低浓度磷酸盐(2 g/L KH2PO4),后期补加2 g/LKH2PO4可有效减缓菌体衰退,最终使菌体生物量和异亮氨酸产量分别提高了24.5%和12.7%,且副产物乙酸含量明显降低。     

PCR 检测乳品中大肠杆菌的研究

用大肠杆菌人工污染乳样品直接或8h 增菌后提取DNA 模板,以大肠杆菌丙氨酸消旋酶基因alr 保守区设计引物,经过PCR 扩增凝胶电泳检测,不增菌条件下全脂乳和脱脂乳的检出限为104CFU/ml,增菌后检出限为1CFU/ml。与国标鉴别培养法比较,PCR 法时间缩短、灵敏度和准确度提高,该法更适宜乳品生产经营的快速实时检测。     

pH和硫酸盐浓度对基因工程菌E．coliFBR5发酵木糖的影响

考察了磷酸缓冲液用量和硫酸钠浓度对基因工程茵E. coil FBR5发酵木糖生成乙醇的影响,发现在添加12 mL缓冲液的情况下,木糖利用率最高(为96.5%).10 g/L硫酸钠对发酵速度有一定影响,但对最终乙醇浓度影响不大.20g/L硫酸钠对FBR5的生长和乙醇合成都有明显抑制.     

两步荧光法检测牛乳中大肠杆菌的研究

本文主要进行了两步荧光检测牛乳中大肠杆菌的研究,确定了两步荧光法的基本条件和过程。其过程为将大肠杆菌菌悬液在TB培养基中进行12h的预培养后,取出0.1ml菌液加入到1.5ml的离心管中,再加入0.2mg/mlMUG底物0.1ml和100μg/ml的多粘菌素B0.05ml培养45min,最后加入pH10.4的0.2mol/LGly-NaOH缓冲液1.75ml终止反应,使用荧光分光光度计测荧光密度。空白样为0.1mlmol/LUG底物加0.05ml100ug/ml的多粘菌素B,再加0.2mol/LpH10.4Gly-NaOH缓冲液1.75ml。     

培养基影响大肠杆菌产L-天冬酰胺酶的研究

研究培养基的成分及添加量对大肠杆菌产生抗癌药物-L-天冬酰胺酶的影响.通过对大肠杆菌培养基中碳源、氮源以及微量元素的讨论,得知该菌株以蔗糖为碳源,添加量为0.7%,以0.5%牛肉膏 1.0%蛋白胨为氮源,添加0.01%的硫酸亚铁为微量元素,所产L-天冬酰胺酶的比酶活达到352.54 U/g,相比基本培养基培养提高了31%.     

Injury,Inhibition and Inactivation ofEscherichia coli O157:H7 by Potassium Sorbate and Sodium Nitrite as Affected by pH and Temperature

The effect of potassium sorbate (0–2 g litre⁻¹) and sodium nitrite (0–1 g litre⁻¹) on the growth of four strains of Escherichia coli O157: H7 in tryptic soya broth at various pH levels (pH 4·0–7·0 for sorbate, pH 5·0–8·0 for nitrite) were determined at 37°C and 4°C. Among the pH levels tested, sorbate and nitrite exhibited the highest antimicrobial activity at pH 4·0 and 5·0, respectively. At pH 5·0 and 37°C, the presence of 500 mg litre⁻¹ sorbate or 200 mg litre⁻¹ nitrite completely inhibited the growth of E coli O157: H7. While at higher pH levels, 2 g litre⁻¹ sorbate or 1 g litre⁻¹, nitrite, the highest concentration tested, did not show significant antimicrobial action against the test organisms. At 4°C and pH 5·0, the inoculated test organisms did not showed any significant growth in preservative-free control media. Different degree of inactivation and injury was observed when E coli O157: H7 strain 933 was stored in TSB (pH 5·0) containing 1 g litre⁻¹ sorbate or nitrite at 37°C. At 4°C, inactivation and injury of E coli O157: H7 cells was not observed in the medium containing sorbate or nitrite throughout the 24 h experimental period.     

高压脉冲电场对橙汁大肠杆菌和理化性质的影响效果

高压脉冲电场(pulsedelectricfield)技术是目前研究人员关注的非热加工技术之一。本文研究了高压脉冲电场技术对橙汁中E.coli和理化性质的影响效果。研究表明,高压脉冲电场对橙汁确实有杀菌钝酶的效果。当电场强度为12kV/cm、脉冲时间为1200个脉冲时,橙汁中E.coli的数量减少了1.73个对数;10kV/cm、400个脉冲时过氧化物酶(POD)活性下降了60%。对于橙汁理化性质总酸、0Brix、pH、浊度和色差等指标的影响不大。     

炝蟹大肠菌群的控制

研究了炝蟹中大肠菌群的受各种因子(aw、T、Pres、pH、Eh、腌制时间)的影响情况。实验结果表明,渗透压的变化对大肠菌群的生长影响很大,当盐浓度为10%开始受到抑制并随着培养时间的延长效果增大;pH值为7时大肠杆菌的生长良好,强酸较强碱不利于其生长;保鲜剂具有较好的抑制效果;真空影响不大。使炝蟹盐度为3%和采用保鲜剂控制微生物的生长,能达到国家指定的腌制品的标准。     

基因工程菌E.coli BL21/pET-DsbA-MalQ发酵产麦芽糖转糖基酶的研究

为了获得最佳的基因工程菌E.coli BL21/pET-DsbA-MalQ发酵产酶条件,通过进行诱导时间﹑诱导温度﹑IPTG的浓度﹑诱导前菌液浓度(OD600)等因素梯度实验,研究各因素对发酵产酶的影响。实验结果表明,基因工程菌的最佳诱导条件分别为:诱导时间为2.5h,诱导温度为30℃,IPTG浓度为0.5mmol/L,诱导前OD600值为0.5。在最佳工艺条件下,粗酶液的酶活为130U,相当于出发菌产酶效率的135倍。     

重组大肠杆菌生产人血管抑素的发酵条件

对重组人血管抑素表达菌株pQE32 AGN的生长及产物表达规律进行了探索,确定了最佳发酵条件.培养温度为37℃,初始pH7.0,OD600为0.8～1.0时开始诱导,诱导持续时间为6h,诱导剂浓度为0.1mmol/L,最终目的产物达到菌体总蛋白的35%,rhAGN的表达量达到560mg/L.