磁性固定化纤维素酶的交联法制备及其磁致酶学性质

以磁性壳聚糖微球为载体,采用交联法制备磁性固定化纤维素酶.分别研究了活化剂乙基[3-(二甲胺基)丙基]碳二亚胺盐酸盐(EDC)与戊二醛的活化时间及活化温度对酶固载量的影响.比较磁性固定化纤维素酶与游离纤维素酶在外加磁场作用下,其酶活力的变化.结果表明,磁性固定化纤维素酶的酶活受磁场作用影响较小;当磁场强度<500 mT与曝磁时间<60 min时,游离纤维素酶的酶活随着磁场强度与曝磁时间的增加而增加,但超过这范围,酶活就急速下降.     

响应面法优化磁性固定化纤维素酶的制备

以磁性固定化纤维素酶的酶活力为响应值,应用响应面分析法（Response Surface Methodology,RSM）对制备磁性固定化纤维素酶的主要工艺参数（固定化时间、pH值、离子浓度和酶用量）进行了优化,并且采用二次回归方程拟合了4种因素和酶活力之间的数学模型,决定系数（R2）为0.9024,失拟性分析表明,无失拟因素存在.数学模型得出的最优工艺参数为：固定化时间11.98 h、pH值5.2、离子浓度0.066 moL·L^-1和酶用量202.7 mL,最优条件下得到的最大酶活力为28.45744 IU·g^-1.     

过氧化物酶在丝素膜中的固定化及其活性研究

家蚕Ｂｏｍｂｙｘｍｏｒｉ丝素蛋白经中性盐溴化锂处理后成为水溶性丝素，然后制成固定化过氧化物酶（ＰＯＤ）的丝素膜。经分光光度法分析表明这种固定化ＰＯＤ丝素膜的最适ｐＨ值范围较游离酶宽，为ｐＨ７．０～８．０；酶促反应温度在５０℃其活性最大。而且，此固定化酶膜的热稳定性良好，在６０℃保温１５分钟，其活性几乎未受影响，而游离酶失活４０％。因此，ＰＯＤ对ｐＨ和热的稳定性在丝素蛋白中固定后得到了改善，蚕丝丝素是一种良好的固定化酶的生物材料。     

磁性壳聚糖微球固定化脂肪酶的研究

以纳米级磁性壳聚糖微球为载体,戊二醛为交联剂固定化脂肪酶,对固定化脂肪酶条件进行优化,同时对固定化脂肪酶的理化性质、活性回收率、热稳定性和储存稳定性进行研究.结果表明,固定化脂肪酶的最佳时间为7 h,最佳pH为8,最佳温度为50 ℃,最佳酶加量为每100 mg磁性微球加酶10 mg.和自由酶相比,脂肪酶被磁性壳聚糖固定...     

表面复合修饰磁性颗粒固定化脂肪酶效能研究

以表面复合修饰的纳米超顺磁性Fe_3O_4颗粒聚集体为载体固定胰脂肪酶,比较分析固定化脂肪酶的固载效能及酶学特性,研究了固定化及游离脂肪酶的最适温度和pH值、不同环境下的操作稳定性等应用特性及基本动力学特征。结果表明:在室温下脂肪酶质量浓度为4.01 mg/mL时具有最大的固载酶量0.72 mg/10 mg,固定化脂肪酶最适作用pH为6,最适温度35℃,与游离脂肪酶相比,对酸性环境pH的变化更敏感,但具有更广泛的温度耐受性。固定化脂肪酶催化水解Lineweaver-Burk曲线线性相关,米氏常数K_m值为9.65 g/mL,远高于游离脂肪酶,亲和性弱于游离脂肪酶。固定化脂肪酶重复催化反应7次,相对酶活力仍剩余51.6%,半衰期为6.2次,重复操作较稳定。     

固定化酶在药物合成和食品生产中的应用

近年来，固定化酶在半合成头孢菌素、半合成青霉素、单一对映体药物，富果糖浆生产、氨基酸消旋体的光学拆分、油酯改性等食品和制药方面取得了许多进展，并进入工业实用。     

磁性壳聚糖微球固定化漆酶催化肾上腺素

用交联法制备磁性壳聚糖微球，对微球的形貌和结构进行表征和分析，结果表明：微球呈规则的球形，分散比较均匀，粒径在3μm左右。磁性粒子矫顽力为210．6A／m，接近超顺磁性。以戊二醛为交联剂，将漆酶固定在此磁性壳聚糖微球表面，分别研究了该固定化漆酶和游离漆酶催化肾上腺素的性质。结果表明：固定化漆酶催化肾上腺素的最适温度为55℃，比游离酶升高了10℃，最佳pH值为5．2，游离酶为5．0。在60℃下保温300min后，固定化酶的催化活性仍保持为原来的75％以上，而在相同条件下游离酶仅保持为原来的10％。固定化酶连续催化肾上腺素10次以后．催化活性仍保持为原来的85％。     

过氧化物酶在丝素膜中的固定化及其活性研究

家蚕Ｂｏｍｂｙｘ ｍｏｒｉ丝素蚕白经中性盐溴化锂处理后成为水溶性丝素，然后制成固定化过氧化物酶（ＰＯＤ）的丝素膜。经分光光度法分析表明这种固定化ＰＯＤ丝素膜的最适ｐＨ值范围较游离酶宽，为ｐＨ７．０￣８．０；酶促反应温度在５０℃时其活性最大。而且，此固定化酶膜的热稳定性良好，在６０℃保温１５分钟，其活性几乎未受影响，而游离酶失活４０％。因此，ＰＯＤ对ｐＨ和热的稳定性在丝素蛋白中固定后得到了改善，蚕丝     

固定化虫荧光素酶反应器测定ATP的初步研究

以溴化氰活化的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ为载体固定虫荧光素酶，并对固定化过程中酶的稳定条件进行了研究；建立了发光酶的测活方法和装置；以固定化虫荧光素酶为核心构建的流动柱式反应器准确地检测了连续低氧环境下大鼠血液中ＡＴＰ浓度的变化．该装置可重复使用近百次．     

Preparation of magnetic chitosan nanoparticles and immobilization of laccase

The magnetic chitosan nanoparticles were prepared by reversed-phase suspension method using Span-80 as an emulsifier, glutaraldehyde as cross-linking reagent. And the nanoparticles were characterized by TEM, FT-IR and hysteresis loop. The results show that the nanoparticles are spherical and almost superparamagnetic. The laccase was immobilized on nanoparticles by adsorption and subsequently by cross-linking with glutaraldehyde. The immobilization conditions and characterizations of the immobilized laccase were investigated. The optimal immobilization conditions were as follows: 10 mL of phosphate buffer (0.1 M, pH 7.0) containing 50 mg of magnetic chitosan nanoparticles, 1.0 mg · mL⁻1 of laccase and 1% (v/v) glutaraldehyde, immobilization temperature of 4°C and immobilization time of 4 h. The immobilized laccase exhibited an appreciable catalytic capability (480 units · g⁻¹ support) and had good storage stability and operation stability. The K _m of immobilized and free laccase for ABTS were 140.6 and 31.1 μM in phosphate buffer (0.1 M, pH 3.0) at 37 °C, respectively. The immobilized laccase is a good candidate for the research and development of biosensors based on laccase catalysis. Funded by Key Project of National Science Foundation of China (No. 60537050) and the National Science Foundation of China (No. 60377032)     

微波辅助溶胶-凝胶法制备CeO2粉体及其生长机制研究

稀土氧化物CeO2粉体是极具应用前景的轻稀土材料,其新的用途不仅与其化学组成、纯度有关,而且与CeO2粒子的大小、形貌、分散性等指标密切相关,这对CeO2粉体制备过程的控制提出更高的要求.以六水硝酸铈为铈源,选择柠檬酸作为配体,采用微波辅助法通过对制备条件的控制得到了不同形貌的CeO2粉体,并应用X射线分析(XRD)、扫描电镜分析(SEM)等表征方法对产物的结构进行了分析,对不同形貌的CeO2粉体的形成机理进行了研究.     

溶胶-凝胶法制备SiO2固载酸性离子液体催化剂及其在2-甲基-4-甲氧基苯胺“一锅法”合成中的应用

采用溶胶-凝胶法制备了SiO2固载的酸性离子液体N-甲基咪唑丙磺酸硫酸氢盐([HSO3-pmim][HSO4])催化剂,运用FT-IR,TG-DTG和SEM等技术对催化剂进行了表征.考察了制备过程中盐酸用量和正硅酸乙酯(TEOS)用量对[HSO3-pmim][HSO4]固载牢度的影响,将其与Pt/C组成双功能催化体系用于邻硝基甲苯加氢重排"一锅法"合成2-甲基-4-甲氧基苯胺(MMA)反应中.研究结果表明:在反应温度50℃、氢压0.04MPa条件下反应6h,邻硝基甲苯转化率为100%,MMA的选择性为45.23%,催化剂循环使用三次后仍有较高的选择性.     

混合菌种非固定化技术制氢反应器产氢效能

为了研究混合菌种非固定化技术生物制氢反应器的产氢效能，实验采用厌氧Hungate技术和MPN法，从采用混合菌种非固定化技术的生物制氢反应器厌氧活性污染中分离到210株优势发酵菌株，其中18株为产氢细菌（HPB）。实验结果表明，主要决定反应器产氢效能的因素是反应器内HPB的数量和活性。采用混合菌种非固定化技术可以充分发挥HPB的产氢活性，但是由于反应器内HPB的数量和比例不高，大大制约了混合菌种非固定技术生物制氢反应器效能的充分发挥。针对这一结论，提出采用有自絮凝能力的高效产氢细菌进行快速启动和投加高效产氢菌株的方法提高生物制氢反应器的产氢效能。     

纳米铁/SiO2核壳复合粒子的制备与性能表征

利用硅烷偶联剂 APS和活性硅作表面活性剂 ,采用种子包埋法 ,制备了纳米铁 / Si O2 核壳复合粒子。用 TEM、TG- DTA、VSM对材料结构与性能进行表征。TG- DTA表明纳米铁表面没有吸附水和结晶水 ,而抗氧化能力提高。VSM研究发现包裹一层二氧化硅后 ,饱和磁化强度与剩磁对比纳米铁粉减小 ,而矫顽力增大     

Fe-SiO2磁性核壳复合粒制备与表征

采用溶胶凝胶方法制备羰基铁/Si02核壳复合粒子.采用SEM、TEM、XRD、VSM、TG-DSC测试手段对材料形貌、微观结构与性能进行表征.实验结果表明羰基铁粉粒子表面均匀地包覆非晶态SiO2纳米壳层.包覆后的核壳复合粒子仍具有很好的超顺磁性能,适当控制壳层的厚度可以提高超顺磁性能.同时抗氧化性能也明显提高.     

壳聚糖凝胶的制备及应用研究

以壳聚糖为原料,将其溶于稀酸,确定了碱性介质固化,洗涤至中性,再在中性介质中交联的工艺路线.对壳聚糖的脱乙酰度和质量浓度、交联剂戊二醛的用量、交联时间,以及反应介质等工艺条件进行了优化,最适工艺条件为:壳聚糖的脱乙酰度为90.24%,质量分数为2.0%;交联剂戊二醛质量分数为0.6%;交联时间为6 h;以水为反应介质.在此工艺条件下制备的凝胶在pH=1.5的介质中稳定.应用试验表明,对蛋白质有良好的分离效果,中性蛋白酶经一次分离,可得到四个组分,总活力保持在90%以上.牛血清蛋白经凝胶可分离出两个组分,蛋白回收率达70%以上.     

APOB100免疫磁性微珠载体的研制及应用

研究用于载脂蛋白(APOB100)的免疫磁性微珠载体的合成工艺、结构特性及功能，为进一步研发APOB100吸附载体提供实验依据。采用超细r-Fe2O3粉对界面进行处理，利用苯乙烯、二乙烯基苯单体，采用悬浮聚合法和超声波技术。合成粒径为1μm左右的磁性微珠，该磁性微珠由超细磁粉、高分子材料和单抗功能基团组成。研究结果表明，磁性微珠具有很强的耐酸碱性，可以作为APOB100单抗的载体，用于免疫学检测时的特异性、精密度、重复性、准确性均符合质量控制要求。     

一种靶向蛋白质超声微泡的制备及表征

以氟碳气体为超声造影剂,通过接枝纳米磁性颗粒-RGD多肽,构建靶向蛋白质超声微泡,制备一种可同时用于超声造影和磁共振成像(MRI)的双模态造影增强剂。通过显微镜对磁性蛋白超声微泡形貌进行观察,利用红外光谱、分光光度法分析纳米磁性颗粒接枝牛血清蛋白的接枝率,并通过细胞实验评价磁性蛋白微泡的生物相容性。