Ppargc1α基因与肉质品质的相关性

Ppargc1α是一种核转录辅激活因子，能在棕色脂肪组织、骨骼肌等部位大量表达，而在白色脂肪组织、胰腺及大脑中的分布较少。Ppargc1α通过参与机体能量平衡和多种代谢调控过程，有效诱导线粒体生物合成并且上调线粒体生物氧化功能从而影响机体的生长、疾病的发生和生物体内各种物质的合成。肉质品质与物种的遗传因素有着密切而直接的关系。本文通过分析ppargc1α基因的作用机制，阐述了ppargc1α对骨骼肌肌纤维类型、基因型表达和多种生化过程的调控作用，体现出ppargc1α作为一种辅转录激活因子能停靠多种转录因子增强靶基因转录效率，可以通过调控线粒体表达和生物氧化等途径来影响肉质品质。     

叉头转录因子1(FoxO1)与肌球蛋白重链基因(MyHC)的相关性及其对肉品质的影响

肉品质作为一个综合性状,从本质上,基因水平的遗传调控对肉质产生关键影响。随着肉品质研究的深入,多种肉质标记基因被不断发掘,基因之间的相互调控作用为进一步研究提供新的视野。FoxO1作为FoxO(叉头框转录因子)家族的重要成员,是多种细胞通路中关键的信号分子,参与骨骼肌的生长发育、脂肪沉积,并与多种肉质基因具有密切相关性。肌球蛋白重链(MyHC)基因,通过基因表达对肌纤维类型产生直接调控,对肉质产生重要影响;文中对FoxO1、MyHC基因的功能及其对肉品质的影响进行介绍,同时综述了FoxO1对MyHC的调控作用与肉质的相关性,并对其调控机理进行了探讨。     

FoxO基因转录活性调控及其对肉品质的影响

FoxO是Fox(Forkhead Box)转录因子家族的一个亚族,是INS/IGF-1通路中关键的信号分子。FoxO1、FoxO3、FoxO4作为FoxO家族主要成员,通过多种方式调节骨骼肌的生长发育。FoxO转录因子调控靶基因的表达、细胞周期进程及程序化死亡,因此FoxO在成肌细胞增殖分化、肌纤维类型转化及脂肪沉积过程中发挥重要作用。本文综述了FoxO基因转录活性调节与骨骼肌发育的相关性,着重介绍FoxO与肉质相关基因的相互联系,以期为提高畜肉肉品质提供理论依据。     

烟草转录因子bHLH93基因的克隆及表达分析

碱性/螺旋-环-螺旋(basic/helix-loop-helix,b HLH)转录因子是一类广泛存在于真核生物体内的重要转录因子,能够参与调控植物体多种生理途径。为了明确b HLH转录因子在烟草中的功能和调控机制,通过同源克隆技术从烟草中克隆到一个b HLH转录因子基因(Ntb HLH93),并结合生物信息学和基因表达模式分析进一步预测其生物学功能。结果表明:Ntb HLH93 c DNA序列长1 254 bp,包含一个长度为1 047 bp的开放阅读框,编码349个氨基酸。Ntb HLH93属于疏水性蛋白,其二级结构中的主要结构元件是α-螺旋和无规则卷曲,三级结构中具有b HLH家族典型的螺旋-环-螺旋结构特征。Ntb HLH93基因表达具有明显的组织特异性,主要在烟草不同生育期侧根和盛花期子房组织中高表达,这与植物甾醇集中在生长分裂旺盛组织中合成的特征相吻合。     

果蔬低温贮藏的糖代谢转录调控研究进展

低温贮藏是延缓果蔬采后品质劣变的主要手段。该文通过综述低温延缓果蔬贮藏品质劣变的生理生化作用,总结果蔬低温贮藏糖代谢研究进展,阐明果蔬糖代谢的转录调控作用。此外,对低温延缓果蔬采后品质劣变与v-myb禽成髓细胞瘤病毒致癌基因同源物（v-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog,MYB）转录调控糖代谢的关系研究进展进行综述,以期揭示果蔬采后低温贮藏过程中糖代谢的可能转录调控机制,为果蔬贮藏保鲜和加工提供理论依据。     

脂肪酸代谢与骨骼肌收缩相关基因对羊肉品质影响的研究进展

肉质受到多种因素的影响,遗传因素中的基因对肉质的调控起主导作用。脂肪酸代谢和骨骼肌收缩与肉的风味、嫩度和肌纤维的密度存在密切相关性,进而影响肌间脂肪的蓄积、肌肉纤维的发育和肌肉含水率等肉质性状。本文主要对影响脂肪酸代谢的脂素1基因、二乙酰基甘油酰基转移酶1基因、脂肪组织甘油三酯水解酶基因和影响骨骼肌收缩的骨骼肌快速肌钙蛋白基因、原肌球蛋白3基因的功能及其对肉质的调控机理进行介绍,并对基因影响肉质的研究现状进行综述。     

苦瓜提取物抑制3T3-L1脂肪细胞脂肪沉积研究

研究表明苦瓜具有一定减肥效果,但其确切分子机理尚未阐明,因此本实验研究苦瓜正丁醇提取物抑制脂肪沉积活性及其作用机制。针对3T3-L1脂肪细胞,利用噻唑蓝法检测苦瓜正丁醇提取物对细胞活性影响;采用油红O染色检测苦瓜正丁醇提取物对细胞脂肪沉积的影响;利用实时荧光定量聚合酶链式反应检测苦瓜提取物对脂肪沉积转录因子和脂肪酸代谢关键基因mRNA转录水平调控作用。结果表明：相对空白对照组,苦瓜提取物能明显减少3T3-L1细胞脂肪沉积,抑制转录因子C/EBPα、PPARγ和SREBP-1c的mRNA表达,对脂肪酸代谢基因GLUT4、ACC1、Fasn、AP2和LPL的mRNA表达抑制明显（P＜0.05）。总之,苦瓜正丁醇提取物对脂肪沉积具有一定抑制作用,可能通过下调脂肪沉积相关基因mRNA转录水平表达起作用。     

菌物多糖对巨噬细胞和树突状细胞的免疫刺激作用及信号通路

菌物多糖能激活巨噬细胞和树突状细胞的成熟,提高表面CD80、CD86和组织相容性抗原(MHC)分子的表达,降低树突状细胞的内吞作用,提高巨噬细胞的吞噬能力;促进各种细胞因子如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-12(IL-12)和效应分子一氧化氮(NO)、活性氧中间体(ROI)的分泌。菌物多糖发挥作用的信号通路可能是菌物多糖通过与两种细胞表面的Toll样受体(TLR)作用,引发巨噬细胞和树突状细胞胞内丝分裂原活化蛋白激酶(MAPKs)的磷酸化,转录因子活化因子蛋白(AP-1)的磷酸化和核转位,以及促进IκB的降解,使转录因子NF-κB向核转移,来调控核基因的转录和表达,从而对巨噬细胞和树突状细胞发挥免疫刺激作用。     

甜菊醇调控巨噬细胞ABCA1蛋白表达

甜菊糖能够降低机体的胆固醇水平,而甜菊醇（steviol,STE）是甜菊糖在机体内的主要天然水解物。作者研究了甜菊醇对小鼠巨噬细胞J774A.1三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白（ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1）的调控作用,并探讨其可能的分子机制。首先,利用MTT方法建立了甜菊醇的使用条件及浓度。采用免疫蛋白印记、细胞免疫荧光以及荧光定量PCR方法,发现在环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate,cAMP）的类似物8-（4-硫代氯苯基）腺苷-3'',5''-环磷酸盐（8-（4-chlorophenylthio）adenosine 3'',5''-cyclic monophosphate,CPT）的协作下,甜菊醇能够显著提高ABCA1在蛋白质水平和基因转录水平的表达;且甜菊醇可以显著上调ABCA1的上游调控基因肝X受体（LXRα）和过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARα）的mRNA表达水平和蛋白质表达水平,但对过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARγ）的表达无明显调控作用。结果表明,甜菊醇能够调控ABCA1蛋白表达的机制,可能与PPARα、LXRα的表达有关。本研究为后续治疗和预防动脉粥样硬化具有指导意义,对甜菊糖食品的应用提供了一定的参考作用。     

普通烟草NtNAC072基因的克隆、鉴定及表达模式分析

NAC转录因子是一类植物特有的转录因子,在植物生长发育、衰老及生物或非生物胁迫中发挥着重要的调控作用。为明确烟草转录因子NtNAC072的生物学功能,在普通烟草中克隆了NtNAC072基因,利用生物信息学分析结合亚细胞定位和转录激活实验对该基因功能进行初步鉴定,并通过实时荧光定量PCR方法研究基因的表达模式。结果表明,NtNAC072转录因子N端有典型的NAC结构域并且较为保守;进化分析表明,普通烟草中NtNAC072与拟南芥AtNAC072同源;亚细胞定位和转录激活实验结果表明,NtNAC072定位于细胞核中并具有转录激活活性;表达模式分析发现,NtNAC072基因表达具有特异性,其在衰老叶片中表达量较高并且受干旱胁迫、盐胁迫、脱落酸处理诱导。因此,作为NAC型转录因子NtNAC072可能在烟草叶片衰老、落黄以及非生物逆境应答中发挥着重要的调控作用。     

植物SOD基因表达调控的分子机制

SOD是活性氧清除系统中一种最重要的金属酶,在清除生物体产生的超氧阴离子自由基中起关键性作用。SOD基因的表达调控十分复杂,在转录水平上受到转录因子的调控,在转录后水平上主要受到microRNA的调控,同时存在翻译水平上的调控。本文重点阐述了SOD的结构和功能,转录水平和转录后水平SOD基因表达调控的分子机制及SOD与植物抗逆性的关系。     

转录因子UstR调控黄曲霉毒素的合成及其生物学功能研究

目的 明确黄曲霉中Zn(II)2Cys6转录因子稻曲菌素B调控蛋白R (Ustiloxin B biosynthesis protein R,UstR)功能,解析UstR对黄曲霉生长、次级代谢和黄曲霉毒素(aflatoxin,AF)合成的调控。方法 本研究利用聚乙二醇介导的同源重组构建ustR基因缺失突变体;比较敲除突变体和野生型菌株在黄曲霉生长发育、胁迫响应、侵染能力、AF合成以及次级代谢产物合成等方面的差异,并通过ELISA试剂盒测定AF合成底物变化,利用RT-qPCR验证AF合成相关基因的转录水平改变,明确转录因子UstR对AF合成的调控作用。结果 基因敲除突变体的分生孢子形成受抑制,孢子产量降低,但菌核形成能力显著提高;ustR缺失不影响黄曲霉细胞壁完整性、胁迫响应能力以及侵染能力;UstR能够影响黄曲霉多种次级代谢产物产量,其中UstR通过正调控AF合成基因簇表达影响AF生物合成。结论 UstR是黄曲霉重要的Zn(II)2Cys6 转录因子,调控黄曲霉生长发育及AF产生,研究进一步完善了AF合成调控网络,为AF污染防控提供了新的防控潜在靶点。     

杂交山猪骨骼肌PPARγ、RARα基因与脂代谢关系的研究

以3个山猪杂交组合为对象,分别测定18头猪的体脂和背最长肌(LD)脂代谢表观性状及LD肌细胞上PPARγ和RARα基因,研究上游基因对脂代谢的调控作用。首先优化该基因扩增条件,并采用qRT-PCR荧光定量技术检测LD肌细胞上PPARγ和RARα基因表达量。结果表明,PPARγ和RARα基因均可在骨骼肌细胞上有效表达并与体脂和IMF代谢间呈一定关联度。1/2山猪血统母猪骨骼肌细胞PPARγ和RARα基因表达量均较高,且呈现PPARγ基因为主导的脂肪合成代谢倾向,表现为皮下和肌内BF和IMF明显增加,肉质改善(p<0.05和p<0.01)。1/4山猪血统的杂交公猪和母猪骨骼肌细胞PPARγ基因表达量趋于下降,在雄性激素伴随下DDS的RARα基因升高,呈现RARα基因主导下抑制皮下或肌内脂肪原母细胞分化,脂肪沉积量明显减少。     

普通烟草NtNAC042基因克隆、鉴定及功能分析

  背景和目的  NAC转录因子是一类植物特有的转录因子,在植物生长发育、生物/非生物胁迫中发挥着十分重要的调控作用,在普通烟草中克隆NtNAC042基因。  方法  进行生物信息学分析、亚细胞定位、转录激活试验和表达模式分析,以及基因功能分析。  结果  （1）生物信息学分析表明,NtNAC042基因编码蛋白具有高度保守的NAC结构域;（2）亚细胞定位和转录激活试验结果表明,NtNAC042定位于细胞核中,具有转录激活活性;（3）表达模式分析表明,NtNAC042基因在根和衰老叶片中表达量较高且受干旱胁迫、盐胁迫、H₂O₂处理诱导;（4）NtNAC042过表达烟草植株抗盐性显著提高。  结论  NtNAC042作为NAC型转录因子,在烟草衰老落黄及生物和非生物逆境应答中发挥着重要的调控作用。      

香蕉MaWRKY31转录因子的特性及对MaACS1、MaACO1和MaSAG1的调控

从香蕉果实中克隆得到1个WRKY转录因子,命名为Ma WRKY31。氨基酸序列比对及进化树分析发现Ma WRKY31具有一个典型的WRKY结构域,与拟南芥WRKY31和番茄Sl WRKY6同源性较高,且同属于第Ⅱ类b亚族。实时荧光定量聚合酶链式反应表明外源乙烯处理诱导了Ma WRKY31的表达,并且随着香蕉果实的成熟衰老,其表达明显增强。亚细胞定位和转录活性分析显示Ma WRKY31定位于细胞核,是一种核蛋白,并且具有转录激活活性。双荧光素酶瞬时表达分析显示,Ma WRKY31可以激活乙烯合成基因Ma ACS1和Ma ACO1,以及成熟衰老相关基因Ma SAG1的启动子活性。这些结果表明Ma WRKY31可能通过调控乙烯合成和成熟衰老相关基因的表达来参与香蕉果实成熟衰老过程,加深了对香蕉果实成熟衰老转录调控机制的认识。     

脱落酸的生物合成及对水果成熟的调控研究进展

作为一种重要的植物激素,脱落酸（abscisic acid,ABA）除具有引起植物芽体休眠、叶子脱落、气孔关闭、抑制植株生长和增强植物抗逆性等生理作用外,在果实生长发育和成熟衰老的过程中也具有重要的调控作用。高等植物组织中ABA生物合成主要是通过C40类胡萝卜素的间接途径来实现的。植物内源ABA的含量水平处于动态平衡状态,受其生物合成和分解代谢等因素影响,在此过程中有关基因转录表达水平和酶活性起着关键作用。内源ABA含量的升高会导致水果成熟和果肉软化,ABA可能同时调控了呼吸跃变型和呼吸非跃变型水果的成熟衰老。探究ABA的生物合成及其调控作用,对揭示水果的生长发育、品质形成、着色软化、成熟衰老等过程具有重要的现实意义。本文综述了ABA及其生成代谢相关基因调控水果成熟的研究进展,并展望了ABA在提高水果品质、延长水果货架期等方面的商业应用。     

营养素对基因表达的调控作用

本文回顾了近年来营养素对基因表达调控作用的研究进展。大量研究表明，许多营养素对基因表达具有多水平、多层次的调控作用，一些营养素还通过激素、细胞因子或转录因子等间接调控基因的表达。随着研究的不断深入，营养素的作用将从分子水平上得到揭示。     

普洱茶茶色素对HepG2细胞脂质代谢的影响及作用机理

以正常培养和油酸诱导培养的人肝癌细胞系(human hepatocellular liver carcinoma cell line,Hep G2)细胞为模型,通过测定普洱茶茶色素对Hep G2细胞内甘油三酯(triglyceride,TG)和总胆固醇(total cholesterol,TC)含量,细胞中脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element binding protein 1c,SREBP-1c)、三磷酸腺苷结合转运子A1(ATP binding cassette transporter A1,ABCA1)、胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)的转录水平,磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phospho-AMPactivated protein kinase,p-AMPK)的蛋白表达水平研究普洱茶茶色素的减肥降脂作用机制。结果显示,普洱茶茶色素能明显降低油酸诱导的Hep G2细胞模型中TG和TC含量,作用程度依赖于普洱茶的作用质量浓度。但对正常培养的Hep G2的TG、TC作用影响不显著。经过普洱茶茶色素作用油酸诱导Hep G2细胞24 h后,能显著下调细胞的FAS和SREBP-1c的m RNA表达水平(P0.05),显著上调ABCA1的转录水平(P0.05),且使CYP7A1的转录水平呈上升趋势,并显著上调p-AMPK蛋白的表达量(P0.05)。因此,普洱茶茶色素可通过调控上述调控因子和酶的表达而改善油酸诱导下Hep G2细胞的脂质代谢水平。     

烟草NtWRKY71基因克隆与表达分析

【背景和目的】WRKY转录因子作为一类植物特有蛋白，不仅参与植物抗病、抗逆等防御反应，而且在植物分枝发育过程中发挥重要作用。为鉴定烟草分枝发育相关的WRKY转录因子。【方法】以拟南芥分枝发育相关转录因子AtWRKY71序列为参考，在烟草基因组中进行鉴定和克隆。利用生物信息学方法分析烟草NtWRKY71理化性质和进化关系。通过qPCR和芯片表达谱分析了NtWRKY71时空表达特征和激素诱导表达模式，利用本氏烟草瞬时表达系统进行亚细胞定位分析。【结果】烟草NtWRKY71基因的蛋白编码序列为930 bp，编码一个由309个氨基酸组成的WRKY蛋白。烟草NtWRKY71含有保守的WRKY蛋白结构域。进化分析显示NtWRKY71与野生烟草WRKY71、土豆WRKY71以及拟南芥WRKY71进化关系较近。基因表达分析表明，NtWRKY71在雄蕊、雌蕊以及根中大量表达；另外，NtWRKY71受赤霉素、生长素和水杨酸的诱导上调表达。亚细胞定位实验表明，NtWRKY71定位在细胞核中。【结论】烟草NtWRKY71为拟南芥分枝调控基因AtWRKY71的同源基因，其表达受到多种激素的调控。研究结果为深入解...     

烟草同源异型盒转录因子NtKNATM1基因的克隆及表达分析

KNOX基因是编码一类同源异型盒结构的转录调控因子,在植物顶端分生组织发生与维持、侧生组织的形态建成过程中起重要调控作用。为了揭示KNOX基因在烟草中的功能,通过同源性比对搜索的方法从烟草中克隆到1个KNOX基因,即NtKNATM1,其开放阅读框长度为522bp,编码174个氨基酸。生物信息学分析结果表明,NtKNATM1编码1个非典型结构的KNOX蛋白,含有KNOX1和KNOX2两个结构域。进化分析结果显示,烟草KNATM1与拟南芥KNATM进化距离较近,且形成一个独特的KNOX基因簇。qPCR分析结果显示,NtKNATM1在腋芽和顶芽中高量表达;生长素处理能够显著诱导NtKNATM1的表达,而打顶处理能够下调NtKNATM1的表达。因此,烟草NtKNATM1可能参与顶端、侧生组织发育过程,且受生长素的正向调控。