有机相酶促粉末磷脂制备溶血磷脂的研究

选用磷脂酶A1为工具酶,以响应面为数值分析方法,在正己烷有机相中进行了大豆粉末磷脂水解制备溶血磷脂研究。探讨了反应时间,反应温度,加酶量,底物浓度,加水量,pH对其反应的影响。结果表明,溶血磷脂制备优化条件为:反应时间12.1 h,反应温度45℃,加酶量3%,底物浓度20.8%,加水量23.8%,pH 6。该条件下验证得溶血磷脂酸值(KOH)为77.8 mg/g。所得产物中磷脂酰胆碱和1-酰基-溶血磷脂酰胆碱含量分别为15.51%和3.99%,且2-酰基-溶血磷脂酰胆碱相对含量为19.6%。     

酶法制备溶血磷脂的研究

利用液态磷脂酶A2,在水相中催化水解大豆磷脂制备溶血磷脂,并探论了该反应的影响因素,得出最佳反应条件为反应温度30℃、反应时间11h、加酶量5%、pH为7、底物浓度4%(w/v),该条件下测得水解后磷脂酸值为67.4(mgKOH/g),经HPLC检测后,按PC在反应前后相对含量的变化,得出水解率为80.0%,并研究了溶血磷脂在面包中的应用,发现溶血磷脂在面包中添加量为0.25%～0.5%范围内能有效增大面包的体积。     

水相体系酶法制备溶血磷脂酰乙醇胺研究

探索了磷脂酶A1在水相体系中酶解制备溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)的可行性,并进行了酶解条件对LPE相对含量的影响研究。得到最佳酶解条件为:磷脂酰乙醇胺(PE)的纯度为80%,液料比10∶1,酶解温度35℃,酶添加量0.04 m L/g,Ca Cl2添加量0.010 g/m L,酶解时间30 min。在最佳酶解条件下,得到酶解产物中的LPE相对含量为42.0%。     

大豆溶血磷脂的制备及其对面包品质的影响

利用液态磷脂酶A1,在水相中催化水解大豆粉末磷脂制备溶血磷脂,得出最佳反应条件为:磷脂与溶剂比为15%、加酶量6%、pH=5.0、反应温度50℃、反应时问8h,此条件下反应得磷脂酸值为79.46mg KOH/g.并研究了溶血磷脂对面包焙烤品质的影响,发现溶血磷脂的用量在0.60%～1.0%范围内能有效增大面包体积;硬度值测定结果表明,溶血磷脂对延缓面包老化有显著效果.     

大豆溶血磷脂的制备及其对面包品质的影响

利用液态磷脂酶A1,在水相中催化水解大豆粉末磷脂制备溶血磷脂,得出最佳反应条件为:磷脂与溶剂比为15%、加酶量6%、pH=5.0、反应温度50℃、反应时间8h,此条件下反应得磷脂酸值为79.46mgKOH/g。并研究了溶血磷脂对面包焙烤品质的影响,发现溶血磷脂的用量在0.6%～1.0%范围内能有效增大面包体积;硬度值测定结果表明,溶血磷脂对延缓面包老化有显著效果。      

浓缩磷脂的酶法改性研究

研究了磷脂酶A2在水相中水解浓缩磷脂的最佳工艺条件：底物浓度10％，反应温度55℃，pH值8．5，Ca^2 浓度0．2mol/L。在最佳条件下得到产品经HPLC检测，PC的转化率为92．7％，并研究了水解速度与时间的关系。水解得到的溶血磷脂产品的HLB大于8。     

大豆溶血磷脂的制备及其生物安全性分析

大豆溶血磷脂是原有大豆磷脂结构中失去一个脂肪酸基团的改性磷脂的统称,较大豆磷脂增强了亲水性和抗氧化性,被广泛地用于医药、食品和畜牧业。采用磷脂酶A1对大豆磷脂进行改性,以水解率和红外光谱检测其改性程度,以溶血试验和细胞毒性试验检测其生物安全性。结果表明:采用磷脂酶A1在60℃、40%大豆磷脂-水的体系中酶解大豆磷脂所制备的大豆溶血磷脂,纯化后为棕色、块状物质且无明显豆腥味;其水解率为101. 6%;大豆溶血磷脂中双键和酰胺键的吸收峰明显低于大豆磷脂;大豆溶血磷脂和大豆磷脂均有溶血现象,且二者在200μg/mL以下溶血率均低于5%,视为生物安全;大豆溶血磷脂在20μg/mL、大豆磷脂在50μg/mL以下时,Caco-2细胞的存活率均高于80%。综上,采用磷脂酶A1制备的大豆溶血磷脂,在一定质量浓度下使用,具备生物安全性。     

酶法制备n-3多不饱和脂肪酸型磷脂的工艺

研究了无溶剂体系中固定化磷脂酶A1催化大豆磷脂与乙酯型鱼油进行酯交换反应,制备n-3多不饱和脂肪酸型磷脂的工艺。考察了反应温度、反应时间、底物比(乙酯型鱼油与磷脂的质量比)以及加水量的影响,得到了较优的反应条件。实验结果表明,加酶量(按大豆磷脂的质量计算)20%,底物比8∶1,底物总质量5.0g,加水量55μL,55℃反应12h时,所得产物中EPA和DHA的含量分别为8.0%和17.8%。     

水相体系中磷脂酶A1酶解南极磷虾磷脂制备溶血磷脂的分析

采用磷脂酶A1（phospholipase A1,PLA1）在水相体系中酶解南极磷虾磷脂,以期得到富含二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid,EPA）和二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid,DHA）的溶血磷脂。以酸价衡量磷脂酶解程度,通过高效液相色谱对酶解前后磷脂组分进行分析,结合甘油磷脂酰胆碱（glycerol phosphatidylcholine,GPC）含量分析进一步证实酰基位移现象,并利用气相色谱-质谱分析磷脂酶解前后脂肪酸组成。结果表明：酸价随加酶量的增加呈现先上升后下降的趋势。随着酶解时间的延长,Sn-2-溶血磷脂酰胆碱（Sn-2-lysophosphatidylcholine,Sn-2-LPC）含量先增加后趋于平衡,Sn-1-溶血磷脂酰胆碱（Sn-1-lysophosphatidylcholine,Sn-1-LPC）含量先升高后降低,这是由于部分Sn-2-LPC发生酰基位移生成Sn-1-LPC,而Sn-1-LPC又进一步被PLA1酶解生成GPC,且在较短酶解时间内,温度对酰基位移的影响不大。最后通过气相色谱-质谱分析得出酶解产物Sn-2-LPC中EPA和DHA含量较高,且其乳化稳定性也得到了提高。     

超临界CO2萃取脱油溶血磷脂的研究

以磷脂酶A1(Lectiase Ultra)水解的大豆浓缩磷脂为原料,通过响应面分析法研究了超临界CO2流体萃取脱油溶血磷脂的工艺条件,得出脱油溶血磷脂萃取率与影响因素间的回归模型,根据模型进行了工艺参数优化。同时,用红外色谱法和高效液相色谱法对所得磷脂进行了分析。结果表明,超临界CO2流体萃取脱油溶血磷脂的最佳工艺参数是:萃取温度为52℃,萃取压力为35 MPa,萃取时间为5.4 h,在此条件下脱油溶血磷脂的实际萃取率为(90.2±1.65)%。该脱油溶血磷脂中磷脂酰胆碱和1-酰基-溶血磷脂酰胆碱质量分数分别为6.79%和4.45%。     

响应面法优化酶解制备板栗清汁工艺条件研究

运用响应面法,对酶解制备板栗清汁条件进行优化,得出液化优化参数为:料液比1:4.21,酶添加量25.04U/g,酶解时间39.83min,pH5.54,在此条件下板栗清汁的透光率76.25%,吸光度0.30,可溶性固形物含量2.78%,最佳综合指标为1.88;得出糖化优化参数为:酶添加量80.44U/g,酶解温度62.01℃,酶解时间4.21h,pH5.68,在此条件下板栗清汁的透光率79.69%,吸光度0.26,可溶性固形物含量6.26%,最佳综合指标为4.34。     

鲜食糯玉米酶法制汁工艺优化

以“江南花糯”鲜食玉米为原料,在单因素试验基础上,确定中温α-淀粉酶添加量、中性蛋白酶添加量和中性蛋白酶酶解时间3个因素的取值范围,并应用Box-Behnken设计原理和响应曲面分析法对鲜食糯玉米汁酶解工艺条件进行优化。结果表明：中温α-淀粉酶添加量、中性蛋白酶添加量和中性蛋白酶酶解时间均对糯玉米浆液悬浮稳定性有显著影响(P＜0.05);在中温α-淀粉酶添加量7.5U/g、中性蛋白酶添加量83U/g、中性蛋白酶酶解时间43min最佳作用条件下,鲜食糯玉米汁悬浮稳定性得到最大程度的改善与提高(OD660＝1.832),回归模型的相对误差小于0.5%,与实测值拟合较好。     

磷脂酶A1水解蛋黄卵磷脂的研究

采用磷脂酶A1水解蛋黄卵磷脂,通过单因素实验和正交实验确定该酶水解蛋黄卵磷脂经济合理的工艺条件为：反应温度50℃,反应时间5h,加酶量0．40 IU／g,起始pH6．0,底物质量浓度80g／L;利用电喷雾飞行时间质谱仪分析水解前后蛋黄卵磷脂组分,磷脂酶A1水解Sn-1位脂肪酸,生成含Sn-2位不饱和脂肪酸的溶血磷脂,反应过程中有酰基位移发生。     

酶解花生蛋白制备功能性多肽条件优化研究

为优化Alcalase 蛋白酶酶解花生蛋白制备功能性多肽的工艺条件,采用响应面分析法,以水解度、短肽得率为响应值,研究温度、pH 值、底物质量分数、酶底比对制备功能性多肽工艺的影响。综合考虑成本和工艺要求等问题,最终确定酶解花生蛋白制备功能性多肽的工艺条件为温度55℃、pH8.4、底物质量分数4.31%、酶底比3.39%、时间4h。该条件下水解度(DH)及三氯乙酸可溶性氮溶解指数(TCA-NSI)分别为23.40% 和74.88%,与理论值的相对误差在0.5% 以内,优化工艺稳定,DH 及TSA-NSI 较高,实验结果与模型预测值相符。     

酶法制备小黄鱼下脚料调味料的风味前体物质

以小黄鱼下脚料为原料,利用酶解技术获得小黄鱼下脚料风味前体物质,通过单因素及响应面分析,确定碱性蛋白酶(Alcalase)和风味蛋白酶(Flavourzyme)同步酶解工艺,研究料水比、酶解时间、酶用量、初始pH 值和酶解温度对酶解液水解度和感官品质的影响。结果表明,优化的酶解工艺条件为料水比1:7(g/mL)、酶解温度55℃、酶解时间6.5h、初始pH8.0、Alcalase 用量2.5%、Flavourzyme 用量3.0%。在此酶解条件下的水解度为40.11%,所得酶解液中氨基酸含量86.383g/100g,其中必需氨基酸32.785g/100g,鲜味和甘味氨基酸38.384g/100g,与酶解前相比氨基酸含量明显增加,氨基酸总量增加了67.56%,其中必需氨基酸增加了82.02%,呈味氨基酸增加了79.52%,产品具有浓郁的小黄鱼鱼香味。     

磷脂酶A_2水解大豆浓缩磷脂的研究(II)贫水相的水解及产品性能的测定

研究了磷脂酶A2 在水相 (贫水 )中水解大豆浓缩磷脂 ,经过正交试验得到最佳工艺条件 :浓缩磷脂和水比例 5∶2 ;加酶量 173.2IU/g浓缩磷脂 ;反应温度 6 5℃ ,钙离子浓度 0 .1mol/L。研究了溶血磷脂产品乳化性能 ,结果表明其HLB值大于 8,能很好的乳化O/W型体系。     

菜籽分离蛋白分子质量分布及酶解条件的研究

以脱脂"双低"油菜籽为原料,利用碱溶解酸沉淀法提取菜籽分离蛋白;用SDS-PAGE凝胶电泳研究菜籽蛋白的分子质量的组成;以水解度和氮回收率为考察指标,用响应面分析法拟合了Alcalase 2.4L酶解菜籽蛋白成菜籽肽的二次多项数学模型,优化了酶解菜籽分离蛋白的工艺参数。SDS-PAGE凝胶电泳研究表明利用碱溶解酸沉淀提取的菜籽分离蛋白主要是2S清蛋白。响应面分析法研究的试验结果表明,酶的使用量、pH、酶解温度、酶的使用量与pH的交互作用对Alcalase 2.4L酶解菜籽蛋白的水解度和氮回收率的影响均显著(P0.05)。通过求解菜籽肽的二次多项数学模型的逆矩阵方程,可得Alcalase 2.4L水解菜籽分离蛋白的最佳条件为:酶的使用量0.05 Au/g,pH 9.0,酶解温度54℃;在此酶解条件下,菜籽分离蛋白浓度为5%时,水解5 h,所得的水解度和氮回收率分别为35.12%及52.96%。     

磷脂酶法改性研究进展

该文简要介绍磷脂化合物分类、结构特点,及不同动物、植物、微生物来源工具酶分子结构和催化性质。酶的种类主要包括磷脂酶A_1、A_2、C、D及脂肪酶。对在非水相体系中,磷脂酶法改性途径,包括水解、醇解、酯化和酯交换反应,及影响反应因素,包括酶的种类、反应体系(包括体系相态和溶剂效应)、底物浓度和水分活度进行阐述。