脂肪酶膜固定化方法的研究

研究了以纤维素滤纸膜为载体的猪胰脂肪酶的四种固定方法,优化了固定化条件。结果表明,在适宜条件下,高磺酸钠氧化法获得的固定化酶活最高,达０．５２ｕ／ｃｍ＾２,酶活回收率为２０％。     

高静水压协同下脂肪酶自组装纳米膜制备与表征

以聚对苯二甲酸乙二醇酯(Polyethylene Terephthalate,PET)薄膜为载体,高静水压协同下制备高活力的猪胰脂肪酶(porcine pancreas Lipase,PPL)静电自组装纳米膜。考察组装条件(压力、温度、时间和pH)对脂肪酶自组装纳米膜酶活力的影响,利用原子力显微镜对脂肪酶自组装纳米膜进行表征,结果表明,100MPa,35℃,pH7.2,组装10min,脂肪酶自组装纳米膜的酶活力最高。与常压下的自组装相比,高静水压协同下猪胰脂肪酶自组装膜的酶活力提高60%。原子力显微镜检测表明,高静水压协同下猪胰脂肪酶分子在PET膜表面的沉积层较致密。     

聚丙烯二氧化钛负载膜固定化脂肪酶的研究

利用二氧化钛的吸附性,将脂肪酶固定于聚丙烯二氧化钛负载膜上,研究固定化酶的水解特性。结果表明,二氧化钛负载膜上酶的最大负载量为3 0U/cm2 ,固定化酶的最适反应温度为30℃,与自由酶最适温度相比降低了6℃;固定化酶的最适pH为8 7,与原酶最适pH相比,向碱性一侧偏移了0 9个单位;在对大豆油水解时,固定化酶的催化效果比自由酶提高了2 5倍     

蛋白质分子膜

介绍了蛋白质的Langmuir单分子膜、Lanmgmuir-Blodgett(LB)膜、自组装膜(SA)和分子沉积膜(MD)的形成和表征，并回顾了蛋白质分子膜的动力学和构象研究的进展。这方面的研究进展为蛋白质分子膜的应用带来了光明的前景。     

超临界体系脂肪酶膜催化合成甘油二酯的研究

以醋酸纤维素和聚四氟乙烯为材料制备醋酸纤维素/聚四氟乙烯复合膜,采用吸附-交联相结合的固定化方法,用该复合膜固定化脂肪酶。并研究了在超临界CO2状态下,采用该固定化脂肪酶膜催化一级大豆油与甘油反应合成甘油二酯的工艺,以反应产物中甘油二酯的含量为指标,通过单因素与响应面法进行分析,确定最佳的工艺条件为:一级大豆油与甘油的物质的量比为2∶1,反应温度为64℃,时间为7 h,加酶量为3.2%,甘油含水量为1%。在此条件下,得到反应产物中甘油二酯的质量分数为66.3%。     

热缩式膜包机供膜机构的分析与设计

对热缩式膜包机工作原理的阐述和传统送膜机构的分析,通过改变导膜方向和增加刹车装置的方法设计出一种新型的送膜机构。并在多台热缩式膜包机上生产运行后,证明了其送膜的精确度得到明显提高;方便膜卷更换的同时也提高了生产效率。     

电渗析膜污染研究进展

从电渗析装置的离子交换膜污染定义着手,介绍了钙离子、碳酸根离子、腐殖酸盐以及脂肪酸和羧酸等物质对离子交换膜的污染规律,全面地概括了离子交换膜污染评价方法,并提出防止和缓解膜污染的措施.     

固定化脂肪酶的应用研究进展

脂肪酶能发生催化水解、醇解、酯化、酯交换等反应，是一种重要的生物催化剂。而由于脂肪酶的特性，其能否工业化利用很大程度取决于固定化技术的成功与否。本文综述了固定化脂肪酶在修化水解、醇解、酯化、酯交换等方面的应用。固定化脂肪酶膜反应器具有其它类型的反应器不可比拟的优点。     

膜生物反应器的膜污染及防治措施

膜生物反应器在应用过程中,存在膜污染后水质降低且影响处理效率的问题。为此,文章首先分析了膜污染的形成机理和影响因素,提出以改变膜的材料属性、合液中投加填料、优化操作条件三个方面的防治措施,以求找出能够有效控制膜污染的方法。     

建筑用纤维膜材料

有用标准固定式和自显影测试方法。对膜材料，膜材料＋泡沫涂层，膜材料＋泡沫涂层＋ＰＣＭ（４０ｇ／ｍ＾２），膜材料＋泡沫涂层＋ＰＣＭ（９０ｇ／ｍ＾２）等４种材料进行了测试。结果显示应用微囊型相变物质增强了材料的保温能力。膜材料涂上泡沫塑料，再加一定量的相变材料之后用作屋顶材料，可提高建筑物的保温性能，增强房屋功能，延长建筑物使用寿命。     

醋酸纤维素-聚四氟乙烯复合膜固定化脂肪酶的研究

以醋酸纤维素(CA)和聚四氟乙烯(PTFE)为材料制备醋酸纤维素-聚四氟乙烯复合膜,采用吸附-交联相结合的固定化方法,用该复合膜固定化脂肪酶。研究温度、吸附时间、酶液质量浓度、交联时间和交联剂体积分数对脂肪酶固定化效率和催化效果的影响,并对固定化酶膜的酶学性质进行研究。得到最佳的固定化条件为：温度25℃、吸附时间2h、酶液质量浓度0.02g/mL、交联时间3h、交联剂(戊二醛)体积分数0.2%,固定化酶最大酶活力为17.2U/cm2。固定化酶膜的酶学性质为：最适温度35℃,比游离酶降低了5℃;最适pH8.5,与游离酶相比pH值向碱性偏移1.0;经10次(10h /次)重复使用后,固定化酶相对酶活力为55.5%。SEM结果显示CA-PTFE复合膜能较好的固定化脂肪酶。     

高碘酸钠氧化法固定化脂肪酶的研究

研究了以醋酸纤维素/聚丙烯复合膜为载体的高碘酸钠氧化法固定化脂肪酶的固定化条件,采用响应面分析法对固定化条件进一步优化,并对固定化酶膜的酶学性质进行了讨论。结果表明,以固定化酶活力为指标,当高碘酸钠浓度为0.15 mol/L,活化为60 min时,浓度为0.013 g/mL的酶液与pH 8.0的磷酸盐缓冲溶液于戊二醛质量分数0.24%,温度4℃下,进行交联反应,反应3.1 h后,获得的固定化酶活最高,为0.52 U/cm2。固定化酶膜的酶学性质为:固定化酶最适温度35℃,最适pH为9.0。     

从萌发的油菜种子中制备脂肪酶

测定不同萌发期油菜幼苗的脂肪酶活性,采用“盐析→超滤→M-Bondapak-C18 柱层析”的工艺路线,建立一种简单且高效的油菜脂肪酶纯化方法。结果表明：通过测定不同培养时间的油菜幼苗的脂肪酶比活力,发现培养6d 的油菜幼苗脂肪酶比活力最高,此时期的油菜幼苗适合作为脂肪酶提取的材料;对脂肪酶比活力为1.89U/mg的油菜蛋白粗提物采用盐析法沉淀脂肪酶时,得到脂肪酶的比活力为2.07U/mg,回收率为82.47%;采用截留分子质量为10000D 的超滤膜对脂肪酶盐析物进行脱盐和除去小分子杂蛋白处理,得到的脂肪酶的比活力为2.46U/mg,回收率为75.84%;进一步采用M-Bondapak-C₁₈ 柱层析纯化超滤液,脂肪酶最高比活力为9.14U/mg,回收率为34.13%。所得到的脂肪酶的活性达到了商品化脂肪酶的水平。     

壳聚糖对细菌细胞膜及膜蛋白的作用

研究壳聚糖对受试菌株大肠杆菌(E.coli)和金黄色葡萄球菌(St. aureus)的抑制作用;通过测定壳聚糖作用前后菌液的相对电导率变化和以1-N- 苯萘胺为荧光探针荧光强度的变化,分别考察壳聚糖对E.coli 和St. aureus 细胞膜和E.coli 外膜渗透性的影响;运用荧光分光光度计研究壳聚糖对E.coli 细胞膜中色氨酸(Trp)荧光强度的影响。结果表明,壳聚糖具有很好的抑菌性能,能改变细菌细胞膜的渗透性,从而破坏细胞膜。壳聚糖对细胞膜中Trp 的荧光具有明显的猝灭作用,且对细胞膜蛋白的猝灭作用 属于静态猝灭。     

采前喷施胺鲜酯对采后龙眼果实贮藏期间果皮膜脂代谢的影响

为研究采前喷施胺鲜酯（diethyl aminoethyl hexanoate,DA-6）对采后龙眼果实贮藏期间果皮膜脂代谢的影响,以‘福眼’龙眼为实验材料,在龙眼盛花期后70、90、110 d用10 mg/kg DA-6溶液各喷施龙眼果实1 次,以蒸馏水喷施为对照。龙眼果实在盛花期后120 d采收,采后龙眼果实经过挑选、清洗和晾干后用厚度为0.015 mm的聚乙烯薄膜袋密封包装（每组50 袋,每袋50 个）,在（28±1）℃、相对湿度85%条件下贮藏。结果表明：采前喷施DA-6可延缓采后龙眼果实贮藏期间果皮细胞膜透性的增加,降低果皮脂氧合酶、脂酶和磷脂酶D等膜脂降解酶活力,延缓果皮膜磷脂（磷脂酰胆碱（phosphatidylcholine,PC）、磷脂酰肌醇（phosphatidylinositol,PI））和不饱和脂肪酸（油酸（C18:1）、亚油酸（C18:2）、亚麻酸（C18:3））的降解,保持较高的PC和PI含量及脂肪酸不饱和指数、脂肪酸不饱和度,保持较低的磷脂酸含量,维持正常细胞膜区室化功能和结构。因此,采前喷施DA-6增强采后龙眼果实耐贮性与采前喷施DA-6能有效降低采后龙眼果实贮藏期间果皮膜脂代谢有关。     

Lipase localization in Rhizopus oryzae cells immobilized within biomass support particles for use as whole-cell biocatalysts in biodiesel-fuel production

To identify the lipase responsible for the methanolysis activity of fungus whole-cell biocatalysts, the lipase localization of Rhizopus oryzae cells was determined. Western blot analysis showed that R. oryzae cells produce two types of lipase with different molecular masses of 34 and 31 kDa; the former (ROL34) was bound to the cell wall, whereas the latter (ROL31) was mainly bound to the cell membrane. It was found that cell immobilization within reticulated polyurethane foam biomass support particles strongly inhibits the secretion of membrane-bound lipase into the culture medium. An investigation of the relationship between ROL34 and ROL31 suggested that ROL31 originates from the cleavage of a 28-amino-acid residue at the N-terminus of ROL34. The addition of olive oil to the culture medium led to the retention of increased amounts of lipase within the cell. This phenomenon was further confirmed by an immunofluorescence labeling of hyphal cells. When cells were cultivated with various substrate-related compounds, such as olive oil and oleic acid, the intracellular methanolysis activity strongly correlated with the relative amounts of the membrane-bound lipase, which suggests that ROL31 localized in the membrane plays a crucial role in the methanolysis activity of R. oryzae cells.     

耐有机溶剂脂肪酶产生菌的筛选及其酶学性质

以体积分数10%的甲苯等有机溶剂为筛选压力,从油污和污水等样品中筛选到一株产耐有机溶剂脂肪酶的有机溶剂耐受茵LX1,经16 S rDNA序列分析,该菌株鉴定为Pseudomonas aeruginosa.研究发现菌株LX1所产脂肪酶最适反应pH和温度分别为7.0和40℃,在较宽的pH范围内(6.5～10.5)具有较高的稳定性;金属离子鏊合剂EDTA和Ba~(2+)、Ca~(2+)对LX1脂肪酶活力均有明显的激活作用,推测该脂肪酶为金属激活酶.LX1脂肪酶在体积分数25%的疏水性和亲水性有机溶剂中均具有较好的耐受性,在十六烷、十四烷、十二烷、正庚醇、正辛醇和正己醇体系中半衰期显著延长到10 d以上,在DMF和DMSO体系中的半袁期为5 d以上,均高于在无溶剂体系中的半衰期.展现了LX1脂肪酶在有机相生物催化中的良好应用前景.     

高碘酸钠氧化法固定化磷脂酶A1的研究

研究了高碘酸钠氧化法在纤维素滤纸膜载体上固定化磷脂酶A₁的最佳条件。结果表明,以固定化酶活力为指标,当高碘酸钠浓度为0.15mol/L,活化80min,与浓度为0.05g/mL酶的磷酸盐缓冲溶液（pH为5.8）于戊二醛浓度0.4%、温度4℃交联4h,获得的固定化磷脂酶A₁酶活最高为4.8U/cm²。固定化酶膜的酶学性质为:最适温度35℃;最适pH为9.0。与游离酶相比,pH向碱性偏移1.0;经7次重复使用后,固定化酶膜活力为原酶活的65%以上。SEM结果显示,经高碘酸钠氧化后的纤维素滤纸膜能较好地固定磷脂酶A₁。