己酸菌的选育与应用研究

己酸菌是一种能够在培养液中积累己酸的功能菌。以优质大曲发酵池的窖泥为材料，采用厌氧培养分离方法筛选出己酸菌；进行耐热、耐酒精、耐pH及厌氧培养试验。可将选育出的己酸菌用于人工窖泥、窖池泥养护、翻沙材料及灌窖工艺中。(孙悟)     

一株可调节浓香窖泥pH的克氏梭菌对基酒质量影响

浓香大曲酒在发酵过程中窖泥pH降低，形成窖泥的老化，窖泥产己酸能力减弱，导致基酒中己酸乙酯含量降低，影响基酒质量。为解决此问题，筛选出一株高产己酸的微生物，使用筛选培养基对该菌株进行富集培养，该菌株具备调节窖泥pH功能。采用显微镜镜检技术对该微生物进行形态鉴定，并采用16S rDNA测序进一步鉴定菌株的种属，鉴定该菌株为Clostridium celerecrecns。将Clostridium celerecrecns（克氏梭菌）制成养护液喷洒于窖池中，可有效改善窖池pH下降，保证基酒中己酸乙酯稳定产出，基酒中主体香更加突出，窖池中己酸菌菌数较对照组增加50%～70%，窖池pH升高2.0左右，基酒己酯含量提升0.9g/L，可有效防止窖池老化，提升基酒质量。     

己酸菌的筛选及发酵特性研究

在浓香型白酒生产中,己酸菌是窖泥中的重要功能菌,影响着白酒的品质。本研究通过对老窖泥进行富集培养,分离筛选出1株高产己酸的己酸菌,经16S rDNA鉴定为速生梭菌(Clostridium celerecrescens),命名为E-6。并研究培养时间、培养温度、乙醇添加量对菌株的生长和发酵特性的影响。结果表明,E-6产己酸的最佳培养温度为34℃,乙醇添加量为2 mL/100 mL,此条件下培养10 d左右己酸产量可达到9.4 g/L。     

剑南春天益老号窖泥特殊功能菌的选育及应用

研究了剑南春不同窖龄窖泥的微生物群落结构,解析其主导微生物菌群,并在天益老号老窖泥中分离选育窖泥特殊功能微生物。结果表明,窖泥中优势种群均分布在厚壁菌门、广古菌门、拟杆菌门。梭菌属、甲烷八叠球菌属在老窖池窖泥中含量远远高于新窖池窖泥,这两种微生物是窖泥老熟度的标志性微生物。采用微生物分离技术选育到1株产己酸能力强的菌株,产己酸能力可达到18000 mg/L以上,经16S rDNA序列分析和BIOLOG全自动微生物鉴定仪鉴定,定性为生孢梭菌(Clostridium sporogense),并将该功能菌发酵液用于人工窖泥的培养及窖池的维护保养,均取得了显著的效果。     

赊店老酒窖池中产己酸菌分离鉴定及产酸条件研究

窖泥己酸菌是重要的窖泥产酸功能菌,所生成的己酸是生产浓香型白酒主体香气己酸乙酯的主要成分,将其应用于白酒的生产,可提高白酒的香气和质量。本研究从赊店老酒不同窖池的窖泥和黄水中筛选产己酸菌株并进行分离纯化,通过硫酸铜显色及气相色谱分析检测,初筛从118株菌株中获得了96株可产生己酸和丁酸的菌株,大部分为兼性厌氧型菌株。其中10株高产己酸菌经分子鉴定属于赖氨酸芽孢杆菌属（Lysinibacillus）,芽孢杆菌属（Bacillus）,拉梅尔芽胞杆菌属（Rummeliibacillus）,寡养单胞菌属（Stenotrophomonas）,棒杆菌属（Corynebacterium）。己酸菌拮抗对峙实验结果表明10个菌株之间均无拮抗作用,可以进行混合培养。培养基中乙酸钠浓度从0.5%增加到1.0%时,产物中丁酸和己酸的总酸量最高,超过1.5%时己酸和丁酸的总量反而下降。74%的菌株在厌氧条件下产总酸量要高于好氧条件下产总酸量,厌氧条件下63%的菌株在30 ℃时产总酸量高于37 ℃时的产酸量。5株高产己酸菌在18 d发酵过程中菌浓度随着培养时间而逐渐增加,丁酸在发酵中期达到高峰并逐渐下降,己酸在发酵后期逐渐累积,产量最高达到3 g/L。     

金种子优质窖泥高产己酸菌的筛选鉴定及其应用性能分析

在浓香型白酒酿造过程中,窖泥作为酿酒微生物的重要载体对曲酒的酒体质量与风格特征具有重要影响。从优质窖泥中筛选高产己酸菌,并制备人工窖泥以提高酒体中己酸乙酯的含量或制备生产己酸乙酯产品等,对曲酒生产具有重要意义。本文通过富集培养、平板涂布、发酵液己酸含量检测、16S rDNA分析等方法,筛选鉴定高产己酸菌株,并考察培养温度、乙醇浓度、pH值等发酵条件,分析己酸菌液配方组分单因素含量影响等。结果表明,筛选得到的高产己酸菌JZZ,其液态发酵己酸平均产量为4.36 mg/mL,温度耐受区间为36~39℃,乙醇耐受浓度为2%~6%,己酸菌液配方组分添加量为硫酸镁0.01%,硫酸铵0.05%,磷酸氢二钾0.3%,乙醇2%,16S r DNA比对结果表明,JZZ菌株为克氏梭状杆菌(Clostridium kluyveri)。     

电场辅助筛选技术快速筛选窖泥中的产酸菌

中国浓香型白酒的风味形成中起着关键作用的是窖泥中的产酸菌。由于梭状芽孢杆菌的培养条件恶劣，一旦培养不当，容易造成窖泥老化，降低浓香型白酒的质量。因此，研究梭菌的培养条件具有重要意义。研究采用电场辅助筛选法和传统筛选法对窖泥中的产酸梭菌进行筛选。两种方法共筛选得到23株形态具有差异的细菌，其中电场辅助筛选的菌株产酸能力是传统筛选菌株的2倍以上，其中C2菌株初步总产酸能力达到830.9mg/L，己酸初步产量达到8.5 mg/L，是传统筛选菌株（己酸0.6 mg/L）的十倍以上。该技术可用于改善窖泥的老化，进一步提高浓香型白酒的质量。也可用于其它厌氧条件严格的微生物的筛选和培养。     

浓香型白酒老窖中主要产香菌协同条件的优化及应用

从优质老窖泥中筛选出纯种己酸菌、丙酸菌、丁酸菌扩大培养成纯种菌液,配合优质老窖中培养的复合菌液,通过正交试验确定出最佳优化组合为己酸菌液30%,丙酸菌液30%,丁酸菌液20%,优质窖泥培菌液40%,最佳培养时间为11d,最大产己酸量为4.2g/L。通过连续三排应用于普通窖池,使得窖泥中的各项指标均有所提高,所产原酒中酯类比例更加协调。     

窖泥酯化菌的富集筛选及其生长条件研究

以优质老窖泥为研究对象,厌氧条件下富集酯化菌,并对富集条件进行优化。通过传统培养分离法及顶空固相萃取-气相色谱-质谱（HS-SPME-GC-MS）法从优化富集液中筛选酯化菌,通过形态观察、生理生化试验及分子生物学技术对其进行鉴定,并研究其生长条件。结果表明,窖泥富集液培养20 d并富集2次有利于酯化菌的富集,从优化富集液中共筛选出3株产己酸乙酯和丁酸乙酯的厌氧梭菌。经鉴定,菌株Y1、Y2、Y3分别为拜氏梭菌（Clostridium beijerinckii）、Clostridium guangxiense、Clostridium sartagoforme,其中,菌株Y1的最佳生长温度为30 ℃、最适生长pH值为5;菌株Y2的最佳生长温度为34 ℃、最适生长pH值为7;菌株Y3的最佳生长温度为37 ℃,最适生长pH值为5,且3株菌株的最高耐乙醇体积分数达20%。     

窖泥高产己酸菌的分离筛选及发酵性能测试

通过对老窖泥的多次富集培养,从中筛选高产己酸的菌株,并通过形态观察及分子生物学技术对其进行鉴定。同时,选取己酸产量最高的菌株进行发酵性能的测定。结果表明,从3#老窖泥中筛选并鉴定得到3株高产己酸的克鲁维氏梭菌（Clostridium kluyveri）A-1、A-3、A-5,己酸产量分别为5.73 g/L、9.77 g/L、7.45 g/L。其中Clostridium kluyveri A-3的己酸产量最高,生长周期为88.5 h,其产己酸的最佳初始pH值为7.0,发酵时间为14 d,发酵温度为37 ℃,乙醇含量为2%。pH耐受范围为3.0～11.0,温度耐受范围为13～55 ℃,乙醇最高耐受含量为5%。     

己酸菌培养液使用小议

人工培养己酸菌液,己酸菌接种量10%,接种后培养8～9d即投入使用,己酸菌落数达1×108～2×108个/ml菌液。己酸菌液可用于灌窖、培养窖泥、淋窖、拌入夹心泥养护窖泥。浓香型白酒生产中应用己酸菌液,宜用于灌窖和培养窖泥,以达到增己降乳的目的。(陶然)     

浓香型白酒窖泥中高产己酸兼性厌氧细菌的分离鉴定

筛选及鉴定白酒窖泥中高产己酸的细菌,以应用于窖池保养及人工窖泥培养。从东北地区某酒厂优质窖泥中采用兼性厌氧培养及微量成分分析的方法,分离筛选出3株(C78、a57、A17)高产己酸的兼性厌氧细菌,其产己酸量分别为：213.6914、170.465、103.5097mg/100mL,经形态学、生理生化特征和分子生物学鉴定其分别为：巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、梭状芽孢杆菌(Bacillus fusiformis)及地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),相应最适pH值分别为7、6.5、7,最适温度分别为34、34、37℃,最适接种量分别为5%、5%、3%。     

人工培养窖泥的应用

将从窖池泥中分离优选出的1株己酸菌.再配以复合菌A、功能菌B为主要菌系,生产功能性人工窖泥.以己酸菌的富集培养为例.简单介绍窖泥功能菌的筛选和培养途径.将功能性人工窖泥应用生产.结果表明,投产4个月后,连续3个月每窖平均产量比用原窖泥配方多产酒75.48kg,优质品率比原窖泥配方提高8.56%;功能性窖泥还可改善窖泥风味,增强窖泥的酯香味,减少新窖产酒的邪杂味和泥臭味,增加新酒中盼主体香及其复杂香味成分,改善了酒体风格.增强新产酒的绵柔度和纯净感.     

津酒老窖泥己酸菌的筛选及培养条件的优化

本试验从津酒老窖泥中筛选出两株己酸菌,并对其培养条件进行了优化。结果显示,当pH值为6,酒精浓度为3%vol,培养温度为34℃,蛋白胨含量为4 g/L时,己酸菌生长最为旺盛且产己酸含量最高,为最适培养条件。     

醋酸钠在窖池养护上的应用

醋酸钠在制作人工窖泥中扮演着重要角色,既作为己酸菌发酵过程中的无机盐,又作为窖泥中己酸菌生长的营养物质,还用来调节窖泥的pH值。鉴于醋酸钠在窖泥制作中的作用,本实验采用窖池打孔灌注醋酸钠溶液进行窖池养护的方式,补充窖泥营养物质,调节在池窖泥的pH值,促进窖内以己酸菌为主体的有益微生物的生长繁殖,延缓窖池老化,促进酒质提升。结果表明,实验可使窖泥的pH值提高1.28,己酸菌数量增加3.41×10~5个/g;可使窖池所产优级酒中己酸乙酯含量提高31.06 mg/100 mL,乙酸乙酯含量降低26.90 mg/100 mL。     

无窖泥发酵生产浓香型白酒

浓香型白酒是我国产销量最大的白酒,传统的泥窖发酵劳动强度大、机械化操作困难,且原酒常常带有窖泥臭味。该研究采用窖泥微生物(己酸菌群)单独培养制备己酸发酵液,再与大曲微生物发酵酒醅(前发酵)混合发酵,实现无窖泥发酵生产浓香型白酒。己酸发酵液的制备采用液态厌氧培养,通过考察发酵产酸情况确定发酵时间为9 d,此时己酸含量达到10 g/L左右,丁酸含量达到2 g/L左右;前发酵为传统的固态发酵,由乙醇体积分数、残淀粉等发酵理化指标确定发酵周期为6～8 d;己酸发酵液与前发酵酒醅混合进行后发酵,己酸发酵液添加量为0. 40 g/kg,总发酵周期为42 d。在此条件下,酒醅四大酯含量较高,比例协调,该研究为无窖泥发酵生产浓香型白酒打下基础。     

己酸菌纯种培养与混合培养技术在窖泥生产中的应用

采用己酸菌纯种培养与混合培养相结合的技术培养己酸菌,己酸菌种子培养与一级培养采用无氧罐厌氧培养,并将一级厌氧培养的己酸菌液以30%的接种量应用于二级混合培养中,培养好的混合己酸菌液应用于窖泥制作中,发酵成熟的窖泥中己酸菌数经检测能达到克泥每106个以上,将窖泥运用于生产实践中,我公司在生产第一排即能产优级酒,平均优级酒率达15.21%,解决了以往改造后的窖池第一排无优级酒的状况,另外出酒率达35%,产质量均达到了理想的试验目标。     

四川省酿酒研究所最新研发成果 天然复合养窖液(已申请国家发明专利)

<正>东奔西走购买优质原酒不如自己生产拥有目前在白酒行业,提高窖泥质量的主要方法是加入人工培养的纯种己酸菌,因这类己酸菌通过实验室的长期保存、传代和培养,已适应了实验室的培养条件,将这类己酸菌加入窖泥中后,其适应窖池环境的能力较差,窖泥质量的提高难以有明显效果。本养窖液采用窖泥微生态原理(窖泥中的微生物是在窖池这一特殊环境中形成的微生物群落),以四川名酒老窖泥为菌种来源,培养出能很快适应窖池环境的己酸菌、丁酸菌、甲     

应用己酸菌及人工培养窖泥提高浓香型青稞酒质量的研究

详细叙述了己酸菌及窖泥的培养方法,以及应用己酸菌及人工培养窖泥提高浓香型青稞酒质量的研究全过程     

应用己酸菌人工培养窖泥提高浓香型青稞酒质量的研究

详细叙述了己酸菌及窖泥的培养方法,以及应用己酸菌及人工培养窖泥提高浓香型青稞酒质量的研究全过程。