明胶固定化果胶酶的制备及酶学性质研究

以明胶为载体、戊二醛作为交联剂制备固定化果胶酶，对其固定化条件和酶学性质进行了研究。结果表明：以15％明胶为载体、5％戊二醛为交联剂、1g明胶固定果胶酶4mg制备的固定化酶，其酶活力回收率达45．85％：固定化酶的最适温度55℃，最适pH3．4，Km^app值3．48mg／ml；固定化酶的酸碱稳定性与温度稳定性均得到提高，连续使用7次后固定化酶相对活力还剩下47．06％。     

固定化果胶酶产生菌澄清果汁研究

以多孔聚氨酯泡洒（PUF）固定化果胶酶产生菌黑曲霉P－6021可以实现菌丝体重复发酵产酶,重复5个批次,菌体数目增多,产酶量上升,发酵液酶活达以664．4U／ml.以PUF固定化黑曲霉P－6021进行了同时产酶澄清苹果汁试验,以苹果汁基质发酵12h后,产酶量可达到643．2u/ml,苹果汁基本澄清,透光率提高,粘度降低,表明固定化黑曲霉摇瓶间隙同时产酶澄清苹果汁工艺是可行的。     

果胶酶在壳聚糖上的固定化研究

本文以壳聚糖为载体，以戊二醛为交联剂，研究了果胶酶的固定化，分析了戊二醛浓度、给酶量、温度对酶固定化的影响。同时对固定化后的酶促作用条件（最适pH、温度）、米氏常数、半衰期等理化性质进行了初步测定，结果表明，在3％戊二醛，0．1mg/g湿壳聚糖的给酶量，5℃条件下，果胶酶固定化的固定率较高。酶促特性研究表明，固定化果胶酶最适温度范围较非固定化果胶酶大，最适pH和表观Km均有所下降，在4℃条件下,固定化果胶酶的半衰期约为30d。     

海藻酸钠包埋法固定化绿色木霉的研究

本实验以海藻酸钠包埋法固定化绿色木霉,研究了海藻酸钠固定化的最佳条件和固定化细胞理化性质。3%海藻酸钠包埋1.0×109/ml的绿色木霉的孢子溶液,用8号针头滴入3%CaCl2溶液中固化5h,缓冲液冲洗抽滤后。取10g固定化菌放入50ml/250mlpH为4.5的产酶发酵培养基的三角瓶中,在31℃、180r/min的条件下培养96h可达到最佳固定化效果,菌体经固定化后其耐高温性和耐热稳定性得到较大提高;重复使用六次后产酶率保持在80%左右。     

固定化乳糖酶的研究

用明胶作为固定化乳糖酶的载体，研究比较载体的用量、交联剂的浓度，用酶量、制备的pH值。结果表明，选择150g／L质量浓度的明胶为载体，体积分数为0．5％的戊二醛为交联剂，用酶量为0．5g／L，在pH值为7．2．混和搅拌时间为3min的条件下制备固定化果胶酶．其酶活力回收率可达78．12％，重复回收使用7次后，酶活力还可以保留75％以上，是乳糖酶固定化的一种较好的方法。     

S-8大孔吸附树脂固定果胶酶条件的优化研究

用S-8大孔吸附树脂作为载体对果胶酶固定化，对影响果胶酶固定化效果的反应温度、时间、pH及果胶酶用量四个参数，采用四因素三水平正交试验进行了优化，结果表明，最适果胶酶固定化的条件为：温度25℃，pH15．5，吸附14h，加酶量0.5mL／g树脂，固定化果胶酶的酶活回收率为55.56％。     

磁性壳聚糖微球固定化果胶酶的研究

以壳聚糖复合Fe3O4为载体,采用吸附．交联法固定化果胶酶。考察壳聚糖的脱乙酰度、分子量对微球载体形态的影响;对固定化过程中酶浓度、pH值、温度、时间等因素进行考察;采用正交试验设计对载体制备与酶固定化中的主要条件进行优化。结果表明,随着壳聚糖脱乙酰度、分子量的增加,载体表现出良好性能;脱乙酰度为95％、分子量为20万的壳聚糖浓度为3％、Fe3O4的加量与壳聚糖质量比为1：3、戊二醛浓度为3％、酶加量为0．3ml时,固定化果胶酶活力最高,其酶活保存率为79％。     

海藻酸钙固定水生假丝酵母生产耐酸性α-淀粉酶

介绍了以海藻酸钙为载体,对水生假丝酵母进行包埋固定处理,并利用这种固定化细胞生产酸性α-淀粉酶的方法。实验表征了固定化过程的工艺条件对海藻酸钙固定化水生假丝酵母细胞的结构、机械强度和产酶性能的影响,确定了最优的工艺条件为：在30％条件下,将2．8％海藻酸钠、0．6％的菌体的混合液体,通过注射器缓慢注入4％CACl2溶液中固定4h。这种固定化细胞的产酶能力为70．24U／mL,比游离细胞高9．45倍。     

壳聚糖固定果胶酶法澄清白兰瓜汁效果的研究

利用壳聚糖絮凝作用和吸附、交联特性对果胶酶进行固定化处理，用于白兰瓜果汁澄清试验。试验表明，以5％的戊二醛变联壳聚糖为载体的固定化酶，在温度为47℃，pH值为4．5，加酶量为0.15ml／L时，对白兰瓜果汁的澄清效果最好，透光率达到96.2％。固定化后的酶活力能保持到原来的97.37％，澄清后的平均回收率为大于75％。     

黑曲霉在不同机械浆循环白水处理中的比较

在三种机械浆（APMP、BCTMP和CTMP）三次循环白水中培养黑曲霉产果胶酶、木聚糖酶和纤维素酶,测定白水中果胶酶、木聚糖酶和纤维素酶的酶活力,分析白水的pH、电导率、阳离子需求量和化学耗氧量的变化,讨论黑曲霉在白水中培养对白水性质的影响。结果表明：黑曲霉能够借助机械浆循环白水中的营养物生长。在APMP白水中,黑曲霉培养;56h产果胶酶、木聚糖酶和纤维素酶活力最高,最大酶活分别为：1219．3IU／ml、1218．4IU／ml和253．2IU／ml。经过黑曲霉处理后,三种机械浆循环白水的COD和CD均有所下降。黑曲霉处理后BCTMP白水的COD和CD分别降低了41.7％和58.3％     

多孔聚酯材料固定化黑曲霉产糖化酶条件的研究

以多孔聚酯材料作固定化载体,考察了载体吸附固定化黑曲霉菌丝细胞的条件,当菌丝体细胞与载体预培养的条件为pH值5．0,孢子浓度烟10^5个／ml,固液比为1／75时,有利于菌丝体的生长,吸附固定及发酵产酶,在产糖化酶的发酵过程中,与游离菌丝体细胞相比,发酵过程持续产酶时间有一定程度的延长,产糖化酶活力始终高于游离菌丝体。     

固定化胰蛋白酶水解花生蛋白制备多肽的研究

以海藻酸钠为载体,戊二醛为交联剂固定化胰蛋白酶,考察固定化工艺的选择、固定化酶水解花生蛋白的优化条件及固定化酶的稳定性。结果表明：海藻酸钠固定化胰蛋白酶的最佳条件为：海藻酸钠浓度3％、加酶量4％、戊二醛浓度3％、氯化钙浓度0．2mol／L。此条件下酶活力回收率为50．34％。水解花生蛋白的最佳条件为：固液化1：20、pH7．5、温度60℃、时间6h、加酶量5％,此条件下氨基氮含量最高为1．57mg／ml。固定化酶重复使用7次,酶活力仍保持50％以上。     

黑曲霉胞外果胶酶特性的研究

对筛选出的A.niger A-03菌种产果胶酶的一些酶学性质进行了研究。结果表明：最适温度为50℃～55℃，随着温度的升高，酶的热稳定性下降；最适pH为4．0，果胶酶活力稳定的pH范围为3．5～4．5；最适盐浓度为0．2mol/L；Km值为147.1mg/mL；最大反应速度Vmax为19.2mg／min／mL；Ca^2 、AI^3 对果胶酶有激活作用，Hg 、Cu^2 对果胶酶有抑制作用。     

果胶酶高产菌株的激光选育及发酵条件的优化

利用氦氖激光诱变原生质体筛选到了一株产果胶酶性能稳定且酶活明显提高的突变株ZH-2。其最适发酵条件为：以2％桔皮粉＋1％乳糖作碳源，以1％（NH4）2SO4＋0．3％酵母膏作氮源，在起始pH7．0，33℃摇床发酵32h左右达产酶高峰。分析ZH-2所产果胶酶的性质得出，酶作用最适条件为：pH6．5，50℃，以聚半乳糖醛酸为底物，酶的热稳定性实验显示，50℃保温60min后，酶活力基本不变。     

双载体固定化桔青霉产生核酸酶P1的研究

以玉米芯颗粒吸附桔青霉(Penicillium citrirum)孢子,再用1．5％的海藻酸钠包埋吸附固定化细胞玉米芯颗粒。于摇瓶中进行分批培养,实际结果表明：在固定化细胞产酶的条件下,培养基中淀粉水解糖浓度为9g/L,蛋白胨浓度为1g/L,摇瓶转速为180r/min,产酶发酵周期为50h,发酵液中核酸P1的活力高达503U／ml。双载体固定化细胞经30批次连续重复发酵产酶稳定在较高水平,固定化细胞粒子机械强度高。     

海藻酸钠固定化米曲霉产果胶酶及其性质

以海藻酸钠为载体固定化米曲霉产果胶酶.研究海藻酸钠浓度、CaCl2浓度、固定化时间对果胶酶固定化率与性质的影响.结果表明,以3.5%的海藻酸钠为载体、1.5%的CaCl2为凝聚剂、固定化时间2.5 h时所得的固定化果胶酶活力保存率最大,固定化率可达97.5%,固定化酶活性为3600U/g,固定化后果胶酶耐热性与游离酶相比有所提高.     

粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)产纤维素酶发酵条件研究

本文对粗糙脉胞菌Neurospora crassa 1602摇瓶发酵产纤维素酶的条件进行了研究。结果表明：培养液初始pH5．5，培养温度28℃，摇瓶转速150r／min，培养96h，诱导产酶碳源为3％玉米芯粉 0．5％麸皮酸水解液(0．6mol/L)，有机氮源为黄豆粉或无机氮源为NH4HSO4时为最佳产酶条件。其纤维素酶活力CMCase为10．34IU／ml，FPase为0．71IU／ml。     

壳聚精固定胰蛋白酶的研究

以自制壳聚糖为载体,戊二醛为交联剂将胰蛋白酶固定化。5％戊二醛在30℃下处理载体8h,加10ml酶液（0．3mg／ml,pH7．0）固定12h以上,活力回收率达67％－75％。固定化酶的表观米氏常数（酪蛋白）k’m=22．22mg／ml,而游离酶k’m=4.17mg／ml;固定化酶最适温度为80℃,比游离酶提高了30℃;固定化最适pH值为7．5,而游离酶为8．0;固定化酶的贮存稳定性很好,二个多月重复使用,酶活力未见明显下降。     

果胶酶在磁性复合载体上的固定化及其酶学性质

通过Fe3O4磁核与海藻酸钠明胶制备磁性复合载体,戊二醛交联后协同对果胶酶进行固定化,并研究固定化酶的酶学性质。利用正交实验优化固定化酶的制备条件,比较研究了固定化酶与溶液酶的酶学性质。结果表明:在Fe2+(5mol/L)∶Fe3+(5mol/L)体积比为0.75∶1的溶液中,制备Fe3O4磁核;3.5%海藻酸钠与3.0%明胶以2.5∶1的体积比,加入3.0mg/m L Fe3O4磁核量,在体积分数4.0%的戊二醛中交联2.5h;以每克载体加入20mg果胶酶,p H4.0下固定60min,制备的固定化果胶酶活力回收率可达78.69%。固定化果胶酶最适p H为4.0,在p H3.0~7.0内稳定;最适温度50℃,在20~50℃具有较好的热稳定性;表观米氏常数Kmapp为3.162mg/m L;重复使用10次后,酶活力还剩51%,4℃下储存10d,酶活力还保留81%。说明以戊二醛交联磁性海藻酸钠明胶为复合载体制备的固定化果胶酶,机械强度大、弹性好,酶活力回收率高,操作稳定性好。     

果胶酶产菌细胞固定化及其产酶研究

介绍产果胶酶的黑曲霉细胞的几种不同的固定化方法，及其所制备的固定化细胞产果胶酶的效果比较。研究比较的结果认为海藻酸钠包埋法和卡拉胶包埋－增殖法作为黑曲霉细胞的两种固定化方法用来制备果胶酶是可行的。