乳酸菌富硒技术初步研究

本文首先对含有嗜酸乳杆菌(LA),保加利亚乳杆菌(LB),嗜热链球菌(ST)的分离样品进行分离,纯化,筛选出纯菌种,然后分别进行富硒试验。通过抗性筛选和三角瓶发酵培养获得富硒能力优良的菌株和富硒条件,试验结果表明:嗜酸乳杆菌(LA)富硒能力最强,其富硒条件初步确定为:选用番茄汁液体培养基,亚硒酸钠添加量为18μg/ml,pH6.6,37℃,培养24h,富硒能力为62.22%。     

富硒乳酸菌筛选及其富硒工艺初探

首先对含有嗜酸乳杆菌(La),保加利亚乳杆菌(Lb),嗜热链球菌(St)的分离样品进行分离,纯化,筛选出纯菌种,然后分别进行富硒试验,通过抗性筛选和三角瓶发酵培养获得富硒能力优良的菌株和富硒条件。试验结果表明,嗜酸乳杆菌(La)富硒能力最强,其富硒条件初步确定为:选用番茄汁液体培养基,亚硒酸钠添加量为18μg/mL,pH6.6,37℃,培养24h,富硒能力为62.22%。     

富硒乳酸菌种的筛选

本实验从样品中分离,纯化,筛选出嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus,简称 LA),保加利亚乳杆菌(Lactobacillus Bulgaria,简称 LB),嗜热链球菌(Streptococcus thermopiles,简称 ST)。通过富硒抗性筛选,确定了 LA 为耐硒菌种。通过对其发酵培养获得富硒能力优良的菌株和富硒条件,试验结果表明:选用番茄汁液体培养基,接种量 10%,加硒量 18μg/ml,pH 6.8,37℃培养 24h,有机硒含量可达 12.99μg/ml,转化率为 72.17%。     

多菌种发酵辣椒汁培养基配方的优化

以肠膜明串珠菌（Leuconostoc mesenteroides）、植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）、发酵乳杆菌（Lactobacillus fermentum）和嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）为试验菌株,采用鲜辣椒汁为基础培养基,通过单因素试验确定最佳碳源、氮源和无机盐及其添加量。在此基础上,以上4种乳酸菌按照1∶1∶1∶1的配比混合后作为试验菌株,采用正交试验设计优化,多菌种发酵鲜辣椒汁培养基的配方。结果表明,最佳培养基配方为葡萄糖的添加量为4%,酵母浸膏的添加量为3%,磷酸氢二钾的添加量为0.2%,优化后培养基中乳酸菌浓度为8.45×109 CFU/mL,增殖效果良好。该研究为剁辣椒的产业化生产奠定了基础。     

富硒乳酸菌种的筛选

本实验从样品中分离，纯化，筛选出嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus，简称LA)，保加利亚乳杆菌(Lactobacillus Bulgaria,简称LB)，嗜热链球菌(Streptococcus thermopiles，简称ST)。通过富硒抗性筛选，确定了LA为耐硒菌种。通过对其发酵培养获得富硒能力优良的菌株和富硒条件，试验结果表明：选用番茄汁液体培养基，接种量10％，加硒量18ug／ml，pH6．8，37℃培养24h，有机硒含量可达12．99μg／ml，转化率为72．17％。     

富硒酵母的选育及其发酵条件的优化试验

通过对一株耐硒酵母进行UV和60Co逐级诱变,获得一株产量高的突变株Y7,发酵液的硒总含量达19mg/L,是出发菌株的1.58倍,经多次传代试验,证明其稳定性良好。通过单因素、L16(37)正交试验对其发酵培养基和培养条件进行优化,试验表明富硒酵母发酵培养基的最佳配方是:蔗糖6%,牛肉膏1%,蛋白胨1%,K2HPO4 0.15%,亚硒酸钠35μg/L;最佳培养条件:初始pH为4.0,温度32℃,装液量60mL/250mL摇瓶,转速200r/min,10%(v/v)接种量,培养48h。富硒酵母的硒总含量达23mg/L以上,是出发菌株的1.92倍。     

响应面法优化富硒发酵羊乳饮料加工工艺

以羊奶粉和小麦胚芽粉为原料,通过添加富硒酵母,制备富硒发酵羊乳饮料。以滴定酸度和感官评价得分为指标,在单因素试验研究基础上,根据Box-Behnken试验设计原理,选取小麦胚芽粉添加量、富硒酵母添加量、发酵温度和发酵时间四因素进行响应面试验,确定优化组合条件。试验结果表明,富硒发酵羊乳饮料的最佳加工工艺及配方为:嗜酸乳杆菌与副干酪乳杆菌添加比例为1∶1,小麦胚芽粉和富硒酵母的添加量分别为11%和0.44‰,发酵温度为42℃,发酵时间为8 h。此条件下得到的羊乳饮料的滴定酸度约为125°T,硒质量分数约为145μg/kg,符合GB14880《食品营养强化剂使用卫生标准》规定含乳饮料中硒的使用量50～200μg/kg。羊乳饮料呈现淡黄色,香味浓郁,酸甜适中,有助于提高人体抗氧化、抗衰老能力。     

高生物量富硒产朊假丝酵母培养基优化

对富硒产朊假丝酵母发酵培养基进行优化,获得高生物量富硒酵母。从6种发酵培养基中确定G改良培养基为最佳培养基。利用Plackett-Burman设计法从影响富硒产朊假丝酵母生长的12个因子中筛选出葡萄糖、蛋白胨、KH2PO4、CuSO4添加量这4个关键因子。再利用Box-Behnken试验设计及响应面分析法确定关键因子的最佳水平及交互作用。试验得出各关键因子的最优组合为葡萄糖30 g/L、蛋白胨17 g/L、KH2PO4 6.5 g/L、CuSO4 0.01 g/L。结果表明,培养基优化后酵母生物量为12.01 g/L,有机硒含量为1 337.46 μg/g,谷胱甘肽为134.27 mg/L。将培养基中亚硒酸钠添加量由25 μg/mL提高至30 μg/mL,酵母生物量为11.21 g/L,有机硒为1 673.32 μg/g,谷胱甘肽为126.80 mg/L。     

响应面法优化欧李果汁与牛奶复合益生菌饮料发酵工艺

以欧李（Cerasus humilis）果汁与牛奶为主要原料制作复合益生菌饮料,以总抗氧化能力和活菌数为评价指标,经单因素试验分析发酵菌株、果浆浓度、脱脂牛奶添加量、糖度、接种量和发酵时间对发酵饮料的影响,并通过响应面试验对影响较大的4个因素进行优化,确定复合益生菌饮料最佳工艺。结果表明,最佳发酵工艺为发酵菌株植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）和嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）（1∶1）,欧李果汁添加量49%,脱脂牛奶添加量12.3%,糖度12 °Bx,接种量6%,发酵时间41 h。在此优化发酵工艺条件下,饮料总抗氧化能力为143.33 U/mL,活菌数为8.70 lg（CFU/mL）,色泽鲜艳呈粉红色,气味纯正,具有欧李果香,酸甜可口,滋味宜人。     

适于脱脂羊奶益生菌发酵剂发酵条件的优化

以干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)为试验菌种,对脱脂羊奶为发酵基质的益生菌发酵条件进行研究。通过单菌发酵和复配菌种发酵试验,筛选出最佳的益生菌复配组合。在单因素试验的基础上,通过正交试验优化复配益生菌的最佳发酵条件。结果表明:最佳益生菌复配组合为干酪乳杆菌(L. casei)和长双歧杆菌(B. longum),接种比例为3∶1,接种量为4%,发酵温度为37℃,发酵时间为54 h。在此优化条件下,发酵基质中的最大活菌数为9.59×10~8 CFU/m L,滴定酸度达到198.56°T。     

响应面法优化包被发酵嗜酸乳杆菌的高密度培养

针对益生菌嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）包被发酵的形成特性和营养需要,采用Plackett-Burman试验设计优化其增殖培养基,获得高密度培养条件和提高菌粉存活率方法。结果表明,嗜酸乳杆菌包被发酵的增菌最佳培养基组成为：葡萄糖7.77%、蛋白胨2%、牛肉膏2%、酵母粉3%、柠檬酸氢二铵0.3%、K2HPO4·7H2O 0.2%、MgSO4·7H2O 0.09%、MnSO4·4H2O 0.025%、NaAc·3H2O 0.3%、吐温-80 0.1%、海藻酸钠1.45%、纳米碳酸钙2.93%。在此优化条件下,嗜酸乳杆菌活菌数达4.32×1010 CFU/mL,制备成的冻干粉在37 ℃条件下贮藏100 d后仍保留75%以上的存活率。     

混菌发酵产共轭亚油酸条件的优化

从淘米水中筛选出一株能高产共轭亚油酸（CLA）的菌株,通过菌株的菌落形态特征及微生物生理生化实验,确定其为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）。以该植物乳杆菌和实验室保藏的嗜酸乳杆菌（lactobacillus acidophilus）为出发菌株,优化其混合发酵的培养条件。结果表明：底物添加量4.0%、菌种比例（植物乳杆菌：嗜酸乳杆菌）4：1、接种量5%、培养基初始pH5.5、34℃下发酵72h,CLA的合成量最高,可达到160.35μg/mL。     

复合益生菌发酵雷竹笋保质期的初步研究

复合益生菌发酵雷竹笋是以雷竹笋为主要原料,经植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)、德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii)四种益生菌发酵,研制出的一种集四种益生菌和雷竹笋营养的养生保健于一体的新型发酵竹笋食品。通过试验添加了四种益生菌的竹笋风味得到明显改善,研究在不杀死益生菌的前提下低温冷藏不变质的时间。     

蓝莓汁及其提取物对嗜酸乳杆菌NCFM体外生长的影响

蓝莓汁、蓝莓花青素和蓝莓多糖对嗜酸乳杆菌NCFM(Lactobacillus acidophilus NCFM)体外生长影响表明,24 h培养期间,添加蓝莓汁会促进嗜酸乳杆菌NCFM的生长,蓝莓汁添加量低于70％时,随蓝莓汁添加量的增加益生茵NCFM的细胞活茵数上升;当蓝莓汁添加体积分数高于70％时,促进菌株NCFM生长的作用趋于稳定;当添加量达到100％时,促进益生菌NCFM生长的作用开始减弱.添加单一蓝莓花青素对嗜酸乳杆茵NCFM的生长无明显作用;蓝莓多糖添加量为100 mg/L时能较好的促进菌株NCFM的生长,37 ℃培养24 h,细胞活菌数可达到8.323× 108 mL-1.目前的工作表明,在发酵乳中添加适当浓度的蓝莓能促进益生茵数量的增殖.     

响应面法优化黄浆水发酵液制备工艺及其抗氧化活性研究

采用植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)和清酒乳杆菌(Lactobacillus sakei)3种乳酸菌对黄浆水进行组合发酵,以发酵液DPPH自由基清除率为评价指标,研究发酵温度、发酵时间、脱脂乳粉添加量、葡萄糖添加量和接种量对发酵液的影响。在单因素试验基础上,采用响应面法优化制备高抗氧化活性黄浆水发酵液的工艺条件。结果表明最佳发酵参数为:接种量1%、发酵温度37℃、发酵时间37.50 h、脱脂乳粉添加量8%、葡萄糖添加量5%。在此条件下制备的黄浆水发酵液DPPH自由基清除率为82.36%。抗氧化活性试验表明:黄浆水发酵液提取物抗氧化能力得到显著提升,其清除DPPH自由基、羟自由基和ABTS自由基的半抑制质量浓度(IC50)分别为2.03 mg/mL、1.12 mg/mL和0.30 mg/mL。     

嗜酸乳杆菌GIM1.208产β-葡萄糖苷酶培养基及发酵条件优化

以嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）GIM1.208为研究对象,通过单因素、正交试验和响应面法优化其产β-葡萄糖苷酶的培养基及发酵条件。结果表明,嗜酸乳杆菌GIM1.208发酵产β-葡萄糖苷酶的最佳产酶条件为葡萄糖添加量3.0%,羧甲基纤维素钠添加量0.4%,初始pH值5.5,料液比1∶4（g∶mL）、发酵温度31 ℃,发酵时间24 h,接种量2.6%。在此优化条件下,β-葡萄糖苷酶活力为16.80 U/mL,是优化前的3.90倍。     

植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)8-6产细菌素发酵条件的优化

对植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)8-6产细菌素的发酵条件进行了优化,分别研究了培养时间、温度、接种量、培养基起始pH值、培养基碳源、氮源等因素对细菌素产生的影响,通过单因素水平试验和正交试验,确定产细菌素的最佳培养基组合和最佳发酵条件为葡萄糖3%,胰蛋白胨2%,蛋白胨1%,酵母膏1%,硫酸镁0.058%,吐温-80 0.2%,30℃培养24h,培养基起始pH值为6.5,接种量2%。乳杆菌8-6优化后效价为1825.56IU/mL,比优化前提高了373.15%。     

嗜酸乳杆菌生长促进物质研究

为提高嗜酸乳杆菌活菌数,工业化生产嗜酸乳杆菌冻干菌粉,通过测定嗜酸乳杆菌发酵液的吸光度和活菌数,采用优选法研究了不同生长促进物质对嗜酸乳杆菌活菌数的影响。结果表明:在11%(m/m)的脱脂乳中加入麦芽汁、番茄汁、酵母膏、真菌浸汁、胡萝卜汁能显著促进嗜酸乳杆菌的生长,蛋白胨、葡萄糖次之,麦芽糖几乎无促进效果。因此,以脱脂乳为基础培养基,嗜酸乳杆菌的最佳生长促进物质的组合为0.5%(m/m)酵母膏、5%(V/V)番茄汁、5%(V/V)真菌浸汁、12%(V/V)胡萝卜汁和5%(V/V)麦芽汁,在此条件下其活菌数可达5.46×109cfu/mL。     

松针富硒抗氧化酸乳的加工工艺研究

以松针提取液、富硒酵母、全脂乳粉为原料,研制出既富硒又具有抗氧化能力的功能性酸乳。通过单因素试验法、正交试验法、感官评定,确定松针富硒抗氧化酸乳的最佳工艺和配方。松针富硒抗氧化酸乳的最佳配方:以松针提取液为溶剂,全脂乳粉质量分数14%,白砂糖质量分数15%,富硒酵母质量分数0.075%,稳定剂明胶质量分数0.1%。松针富硒抗氧化酸乳最优发酵工艺:发酵剂添加质量分数0.14%,发酵时间9 h,发酵温度45℃。松针富硒抗氧化酸乳的硒含量为0.31 mg/kg,总抗氧化能力为22.57 U/m L。此工艺条件下制得的松针富硒抗氧化酸乳酸甜可口,口感细腻,具有松针清新香味,且符合富硒产品的要求。     

响应面法优化嗜酸乳杆菌乳清培养基

筛选嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus La-1)低成本培养基并用响应面法进行优化。从玉米粉培养基、酵母浸出液培养基、乳清粉培养基、麦芽汁培养基中筛选嗜酸乳杆菌基础培养基。利用Plackett-Burman设计确定重要因子,最陡爬坡试验确定因素水平,最后用响应面法优化最佳培养基配方。优化得到乳清培养基为乳清粉12.99%(w/v)、葡萄糖2.75%(w/v)、NH4H2PO4 0.52%(w/v)。采用优化的培养基,以4%接种量接种La-1菌种子液,37℃培养22h,菌体密度为1.93×109 cfu/mL。