烟草靶斑病(Thanatephorus cucumeris)侵染特性研究

采用室内离体叶片针刺接种的方法对烟草靶斑病菌(Thanatephorus cucumeris(Frank)Donk(anamorph Rhizoctonia solani kühn))侵染特性进行了研究。结果表明:病菌可侵染烟草幼苗茎基部引起立枯病的症状,也可在成株期侵染烟株近土表的茎基部引起椭圆形凹陷斑,又称之茎基腐症;病菌易侵染烟草各个生长期的叶片引起靶斑症状,也可侵染主脉及侧脉引起凹陷斑。光镜下观察病菌在接种6h即可侵入烟草叶片组织,接种24～48h菌丝迅速在细胞间和细胞内扩展,最终导致细胞死亡;病菌适宜的侵染温度为25℃～30℃,高湿及连续黑暗都有利于病菌侵染。     

烟草靶斑病LFD-RPA快速检测方法的建立

烟草靶斑病是由立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kühn)侵染引起的烟草叶部病害,近年来在我国部分省份发生严重,危害烟草生产。为开发烟草靶斑病的早期快速诊断方法,本研究根据该病原菌的内转录间隔区(ITS),设计了重组酶聚合酶扩增技术相关引物Rs RPA-F3/R3,建立了一种靶斑病菌的重组酶聚合酶扩增结合侧流层析试纸条(LFD-RPA)检测方法。该方法能够在37℃,15 min内特异性地检测到R. solani(1.40×10² copies/μL)质粒DNA,与常规PCR灵敏度一致。在田间烟草靶斑病实时检测中,准确率达95.83%。本方法具有快速、简单、可视化等特点,为烟草靶斑病菌的田间快速诊断提供了技术支撑。     

烟草靶斑病菌(Rhizoctonia solani)细胞壁降解酶活性分析及其致病作用

为揭示烟草靶斑病菌细胞壁降解酶的致病机理,进行了烟草靶斑病菌细胞壁降解酶活性变化、产酶条件及对叶片损伤作用的研究.结果表明:烟草靶斑病菌在烟草活体内、外均可产生果胶酶及纤维素酶,其中烟草组织活体外以多聚半乳糖醛酸酶(PG)和果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)活性最高,而在烟草活体内羧甲基纤维素酶(Cx)和β-葡萄糖苷酶活性最高,且强致病力菌株的产酶能力强于弱致病力菌株;产酶条件研究表明,培养10d产生的Cx和β-葡萄糖苷酶的活性最强,而培养12d产生的PG、PMG、多聚半乳糖醛酸反式消除酶(PGTE)和果胶甲基反式消除酶(PMTE)的活性最强;最适宜产生CWDEs的条件为250下,pH5～6连续黑暗的静止培养环境;烟草靶斑病菌产生的细胞壁降解酶可导致烟草叶片明显受损,其损伤作用大小表现为混合酶明显高于单一酶,且果胶酶对烟草叶片的损伤作用高于纤维素酶.     

湖北省烟草靶斑病病原鉴定及其菌丝融合群遗传分化研究

2020—2021年湖北烟区爆发新型烟草叶部病害,本研究对病原菌进行分离培养、形态观察、镜检菌丝和科赫法则验证,并提取30个菌株的DNA使用通用引物ITS1/ITS4进行rDNA-ITS序列的PCR扩增,及MEGA-X软件进行基因序列比对及系统发育树构建,同时以Rs1F2/Rs2R1为引物,进行30个菌株的rDNA-ITS基因的PCR专化性鉴定。结果表明,该病害病原菌为立枯丝核菌（Rhizoctonia solani Kühn）,30个菌株序列都隶属于R. solani AG-3融合群且均具有AG-3融合群所特有的504 bp片段。因此,确定该病害为烟草靶斑病。这是首次从湖北省烟草产区分离鉴定到该病菌。     

烟草靶斑病菌(Rhizoctonia solani)粗毒素的生物活性及理化性质

为揭示烟草靶斑病菌毒素的致病机理,进行了烟草靶斑病菌毒素的分离、纯化和生物活性测定方法及理化特性研究.结果表明:经分离纯化获得了烟草靶斑病菌的毒素.该毒素可以损伤离体叶片,抑制种子萌发和胚根的生长,并且可致使幼苗萎蔫,离体叶片针刺法最适宜毒素的生活性测定.烟草靶斑病菌毒素具有热与光稳定性,较耐储藏,是一类极性化合物,活性物属非蛋白类物质.     

烟草气候斑病的发生及防治研究

烟草气候斑病的发生与气象、品种及栽培条件有密切的关系。低温多雨雷电交加的天气比一般天气病害重,国外引进品种比我国新育成品种病害重,Ｋ３２６ 比ＮＣ８９、中烟９０ 病害重,水田烟比旱地烟病害重,施钾少氮钾比失调比施钾多氮钾比协调病害重,已感染黄瓜花叶病毒和早花的烟株比健壮烟株病害重。在供试１８ 种药剂中,以代森锌的防治效果最好。所组装的综合防治措施已初步推广应用。     

烟草灰斑病在贵州烟草漂浮苗上的发生及鉴定

对贵州烟区发生的烟草灰斑病进行了病菌分离、鉴定,确定该病的致病菌为Alternaria pluriseptata。选用了4种杀菌剂对该病菌进行室内药效试验,结果表明,70%甲基硫菌灵WP对菌丝的抑制效果最好,EC50为5.94 mg/L;其它药剂的效果不甚明显。     

烟草靶斑病菌基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化

采用改良的CTAB法,对16个烟草靶斑病菌菌株进行基因组DNA的提取,所得的DNA样品的OD26o/OD280值在1.76～1.89之间,电泳主带清晰,无弥散、拖尾现象,DNA质量较高.通过单因素和正交设计结合的方法对影响RAPD-PCR反应的主要因子Mg2+,dNTP,引物的浓度和模板DNA,Taq酶的用量进行了优化,建立了适宜于病菌的RAPD分子标记的最佳反应体系.优化的反应体系为:模板DNA 10 ng,Mg2+浓度3.25 mmol/L,dNTP浓度0.175 mmol/L,Taq酶1.4 U,引物浓度0.5 μmol/L,反应体系总体积为25 μL.通过该反应体系可以获得清晰、稳定、特异性的分子标记谱带,扩增结果较好.     

杀虫剂混用对烟蚜的毒力及田间药效试验

试验目的在于为杀虫剂混用提供依据。选用"敌敌畏"1000倍 "敌杀死"2000倍、"功夫"1000倍 "辟蚜雾"1000倍、"氧化乐果"1000倍 "灭蚜宁"1000倍共3种混配杀虫剂进行室内毒力和田间小区药效试验,并与相应单剂作比较。田间药效试验结果表明,"敌敌畏"1000倍 "敌杀死"2000倍有增效作用,另两种混剂分别比对照的1种单剂为增效而比另1种为减效。农药成本混剂介于相应2个单剂之间。     

“绿得保”对烟草赤星病菌的室内毒力及田间药效测定

用生长速率法测定代森锰锌、绿得保对烟草赤星病菌菌丝生长有良好的抑制作用,４８０ ×１０ －４ 的抑制率分别为７３ ．８４ ％ 和７９ ．０３ ％ 。用改良的涂布平板法测定代森锰锌８００ 倍液对赤星病菌孢子萌发有强烈的抑制作用对孢子的产生抑制作用显著;绿得保４００ 倍液对孢子的萌发几乎无作用,对产孢抑制作用显著。代森锰锌６００ 倍液、绿得保５００ 倍液及清水喷雾５ 天后,平均单叶病斑数增加１２ ．８６ ％ 、３４ ．５５ ％ 和２３ ．６０ ％ ,单一病斑抑制面积扩展７６ ．９７ ％ 、８５ ．０７ ％ 和０ ,与室内毒力测定结果相一致。     

48%"地乐辛醇"乳油对烟草腋芽的抑制效果

为验证 4 8 %“地乐辛醇”的抑芽效果 ,进行了田间药效试验。结果表明 :“地乐辛醇”乳油 10 0倍液在烟草上使用 1次 ,对腋芽有较好的抑制效果 ,抑芽率可达 95 2 3% ,与对照药剂“止芽素”相当 ,是一种经济高效的烟草抑芽剂。     

27.12%碱式硫酸铜SC防治烟草气候性斑点病的田间药效试验

进行了田间碱式硫酸铜SC不同剂量的药效测定试验。结果表明:27.12%碱式硫酸铜SC对烟草气候性斑点病防治效果显著,施药后其防效均在53.68%～65.60%之间,显著高于生产上常用药剂80%"代森锌"WP的药效。施药适期宜掌握在病害发生初始期,用药方法以600倍液,用药量60 L/667m2,间隔7～10 d连续施药2～3次较为适宜。     

烟草靶斑病菌（Rhizoctonia solani）SRAP-PCR 体系建立及优化

采用烟草靶斑病菌YC-9, LJT-8和QYS-7为DNA模板,初步筛选SRAP引物组合;采用L16(45)正交试验设计,对烟草靶斑病菌的SRAP-PCR反应体系中的Mg2+、dNTPs, Taq DNA聚合酶、引物和DNA模板浓度等5个因素进行优化试验。结果表明:共筛出13对扩增条带清晰且多态性好的引物组合;烟草靶斑病菌的最佳SRAP反应体系为Mg2+浓度2.0 mmol/L、dNTP浓度200μmol/L、Taq DNA聚合酶0.8U、引物浓度140 mmol/L、模板DNA 20 ng及1×PCR buffer,反应总体积为20 μL;各因素对SRAP-PCR扩增反应结果影响的差异较大,依次为Taq DNA聚合酶>引物> Mg2+> dNTPs=模板DNA。      

5%"神农丹"等3种农药防治烟草害虫的药效试验

大田对比试验表明 ,5 %“神农丹”和 15 %“铁灭克”在移栽时穴施和旺长期追施 ,对烟蚜及烟草根结线虫有很强的杀伤作用 ,无翅蚜虫口减退率可达 10 0 % ,移栽时穴施 15 %“铁灭克”1.0kg/6 6 6 .7m2 、5 %“神农丹”3.0kg/6 6 6 .7m2 对烟草根结线虫相对防效达 80 %以上 ,两种药剂防治效果差异不大     

36%"广灭灵"对地膜覆盖烤烟田间杂草的防效

为了有效地防除地膜覆盖的烟田杂草 ,于 2 0 0 0～ 2 0 0 1年进行了 36%“广灭灵”ME 4种用量(15、30、4 5、60mL/ 667m2 )、5 %“敌草胺”WP和清水 (对照 )喷施防除地膜覆盖烤烟田杂草的田间试验。结果表明 ,烟苗移栽大田后 ,喷施 36%“广灭灵”ME 4 5～ 60mL/ 667m2 ,药后 80d对单子叶和双子叶杂草防效均达 96.7%以上 ,而且对烟株无药害     

烟草蛙眼病发生规律与防治研究

本文研究了烟草蛙眼病发病规律和防治方法。结果表明：烟草进入旺长期后，温度影响病害发生的迟早，候均气温２３℃以上，相对湿度大于８５％，降雨量５ｍｍ时始病。病害发展最适宜的温度为２６℃－３０℃，降雨量和相对湿度影响病害发生的轻重，往往在暴雨后５—１０天，病害暴发流行。稻田烟比旱土烟病重，但多雨年份旱土烟发病也很重。目前生产上大面积种植的烤烟Ｇ８０、Ｋ３２６、红花大金元，晒烟小花青，香料烟ＴＯＹ等品种均较感病。随着种植密度的加大病情加重。采取以农业措施为基础，辅以药剂保护的综防措施，平均防效达９０％以上，每公顷产值增加７０２．４５元。对蛙眼病防效较好的药剂有７０％代森锰锌、５０％多菌灵和７５％百菌清。     

壳寡糖席夫碱纳米银溶液对烟草花叶病防治及烟叶色素的影响

为开发防治烟草花叶病的新型药剂,采用大田试验研究了壳寡糖纳米银溶液、壳寡糖席夫碱纳米银溶液及宁南霉素对烟草花叶病的田间防治效果。结果表明,壳寡糖和壳寡糖席夫碱的纳米银溶液对烟草花叶病的防治效果均优于宁南霉素,以预防和治疗效果分别达到53.32%、24.95%的壳寡糖席夫碱纳米银溶液为最好,能够减轻病株叶绿素和类胡萝卜素含量的下降幅度,增强烟株的光合作用强度,使烟株的抗病性得到提高。壳寡糖及其衍生物的纳米银溶液对烟草花叶病具有较好的防治效果,为今后开发绿色、高效的抗TMV药剂提供了新思路。     

病毒抑制剂防治烟草花叶病田间试验

为了筛选防效较好的病毒抑制剂 ,对目前市售的防治烟草花叶病 (TMV和CMV)的 8种主要化学药剂和 4种植物提取物进行了防治烟草花叶病的田间试验。试验结果表明 ,2 %“菌克毒克”AS和4 0 %“病毒灵”WP具有明显的预防效果 ;3.95 %“病毒必克”WP、4 0 %“病毒灵”WP、商陆 (Phytolaccaaci nosa)的乙醇提取物和香菇 (Lentinusedodes)的水提取物具有一定的治疗效果。