L-苯丙氨酰甘氨酸炔丙酯二肽的合成及性能研究

采用液相合成法,高产率地合成了L-苯丙氨酰甘氨酸炔丙酯二肽,用核磁共振氢谱(1H NMR)、核磁共振碳谱(13C NMR)和电喷雾质谱(ESI-MS)对L-苯丙氨酰甘氨酸炔丙酯二肽进行了表征.通过加入α-糜蛋白酶、失活的α-糜蛋白酶以及胰蛋白酶,研究了L-苯丙氨酰甘氨酸炔丙酯二肽的酶解性能,结果表明,L-苯丙氨酰甘氨酸...     

中试规模制备L-茶氨酸及其衍生物

报道了中试规模制备L-茶氨酸和L-谷氨酰胺的一种方法。以廉价的L-谷氨酸为原料,采用邻苯二甲酰基作为保护基,保护L-谷氨酸的α-氨基,醋酐回流10 m in使其分子内脱水生成N-邻苯二甲酰-L-谷氨酸酐,在常温、常压条件下,分别与2 mol/L氨水和2 mol/L乙胺水溶液反应生成中间产物N-邻苯二甲酰-L-谷氨酰胺、N-邻苯二甲酰-L-茶氨酸,中间产物在室温条件下与0.5 mol/L水合肼反应48 h脱除保护基,分别以57%、61%的收率得到L-谷氨酰胺和L-茶氨酸。     

Fmoc保护氨基酸-卟啉化合物的设计合成与光谱性能研究

为了获得结构和性能更加接近天然卟啉的合成卟啉化合物,采用Fmoc保护氨基酸(甘氨酸、缬氨酸、L-酪氨酸),将氨基酸引入卟啉体系,设计合成了系列新型卟啉-氨基酸化合物,并对其光谱性能进行了研究。结果表明,在合成以酯键相连的卟啉-氨基酸化合物时,甘氨酸、缬氨酸反应生成含有2个氨基酸单元的化合物,L-酪氨酸生成含1个氨基酸单元的化合物。在合成以酰胺键相连的化合物时,反应得到含有1个氨基酸单元的化合物。卟啉的光谱性能不因不同Fmoc保护氨基酸单元的引入而改变。     

L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成研究

以L-丙氨酸和L-谷氨酰胺为起始原料,以邻苯二甲酰基为保护基,采用混合酸酐法接肽,水合肼脱保护,得到目标产物。探讨了接肽时的最佳溶剂,肼解脱保护时的最佳温度等反应条件。总收率大于38%,纯度大于99%(液相色谱外标法定量)。产品通过核磁共振氢谱、熔点测定、红外光谱等手段进行了表征。     

生物转化制备D-谷氨酰胺的研究

报道了制备D-谷氨酰胺的一种新方法,即利用大肠杆菌AS1.505的L-谷氨酰胺脱羧酶立体选择性地将D,L-谷氨酰胺中L型对映体降解为4-氨基-丁酰胺,分离得到D-谷氨酰胺。同时考察了转化体系温度、pH等因素对L-谷氨酰胺脱羧酶活力的影响。实验结果表明最佳条件为:温度37℃,转化体系pH=4.8,菌体质量浓度5 g/L,吐温-80质量浓度0.15 g/L,菌龄14 h,底物质量浓度40 g/L。L-谷氨酰胺脱羧酶在最适转化条件下比酶活可以达到4 200 U,L-谷氨酰胺在8 h内完全转化成4-氨基-丁酰胺,D-谷氨酰胺收率达到理论收率的92%。     

L—谷氨酰胺制备研究

对L-谷氨酰胺制备过程的反应条件进行了研究。L-谷氨酸甲酯化反应最优条件为谷氨酸∶甲醇∶浓硫酸=7.5g∶120mL∶3.7mL,反应温度25℃,反应时间4h,得率96％;L-谷氨酸甲酯酰肼化反应最优条件为L-谷氨酸甲酯∶水合肼=8g∶16mL,反应温度35℃,反应时间5h,得率93.8％;用Raney镍作催化剂对L-谷氨酰肼酰胺化,反应温度70℃,得率72％。最终总得率64.8％。     

重组L-苏氨酸醛缩酶催化合成L-4-硝基苯基丝氨酸

利用pGEX-KG载体在大肠杆菌BL21(DE3)中重组表达了L-苏氨酸醛缩酶,以4-硝基苯甲醛、甘氨酸为底物酶法合成了L-4-硝基苯基丝氨酸,考察了反应温度、pH、底物摩尔比和甘氨酸浓度对酶活的影响。最佳转化条件为：反应温度45℃,pH=8.0,甘氨酸与4-硝基苯甲醛底物摩尔比5:1,底物甘氨酸最适浓度为500 mmol/L;0.1 g湿细胞菌体在10 mL反应体系中在最佳反应条件下反应24 h,底物4-硝基苯甲醛转化率为43%,产物L-4-硝基苯基丝氨酸达到9.72g/L,总收率为35%。     

响应面法优化L-抗坏血酸降解的工艺条件

以反应时间、反应温度、溶液初始pH值及L-抗坏血酸与甘氨酸物质的量比为考察因素,以L-抗坏血酸降解率为评价指标,采用响应面法优化美拉德反应中L-抗坏血酸降解的工艺条件。确定L-抗坏血酸降解的最佳条件为:反应时间146min、反应温度149℃、溶液初始pH值4.52、L-抗坏血酸与甘氨酸物质的量比1∶2,在最佳条件下,得到的L-抗坏血酸的实际降解率与预测降解率基本吻合。     

几种氨基酸的合成研究

1不对称相转移催化合成L-苯丙氨酸 化学合成法制备L-苯丙氨酸主要有苯甲醛与乙甘氨酸缩合法与氰氨法,这两种方法工艺路线长、收率低。工业上L-苯丙氨酸主要从天然产物中提取。利用不对称合成反应由化学法合成L-苯丙氨酸一直是化学工作者关注的课题。南京理工大学化工学院的周凤儿和魏运洋以（＋）-N-苄基氯化辛可宁作为手性相转移催化剂,以甘氨酸乙酯盐酸盐和溴化苄为基本原料,合成了L-苯丙氮酸。     

L-谷氨酰胺杂质的制备及结构确证

将L-谷氨酰胺高温破环后,利用制备色谱仪进行分离,运用~1H NMR、~(13)C NMR、 LC-MS对该杂质结构进行解析。确定该化合物为N-乙酰基-L-谷氨酰胺。分离制备的杂质纯度高,可作为L-谷氨酰胺药品研究的对照物。     

发酵液的组成对纳滤分离谷氨酰胺的影响

研究了谷氨酰胺发酵液中盐离子对纳滤分离提取谷氨酰铵的作用，系统地考察了操作温度和发酵液组成对纳滤分离透过特性的影响，确定了纳滤分离时发酵液最佳稀释倍数和操作温度. 结果表明，二价阳离子通过改变膜面电荷密度对谷氨酸的透过特性产生很大影响，使其截留率降低了8%. 发酵液中较高浓度的(NH4)2SO4使谷氨酸和谷氨酰胺的截留率和透过通量明显降低，但较高浓度的NH4Cl影响较小，这体现了纳滤膜对不同离子排斥力的差异. 当发酵液稀释至谷氨酰胺浓度为1%，pH调至7时，发酵液中的其它盐离子和残糖因浓度较低而对纳滤分离影响不显著.     

L-谷氨酰胺研究进展

L－谷氨酰胺是人体内最重要的游离氨基酸，它是一种重要的生化制剂并且也是一种极有前途的新药。本文综述了L－谷氨酰胺的代谢调控机制及其营养作用，生产方法及条件、提取方法，结晶工艺研究和L－谷氨酰胺晶体的特征，为开展L－谷氨酰胺的制备及应用研究提供了一定的依据。     

纳滤分离提取谷氨酰胺过程的研究

对发酵液中的谷氨酰胺提取进行了采用纳滤膜分离技术的尝试，并对谷氨酰胺和谷氨酸混合溶液的纳滤分离进行了理论分析。研究了不同pH条件下发酵液中谷氨酰胺和谷氨酸在纳滤过程中的透过特性，并考察了纳滤过程中氨基酸的透过特性随压力和浓度的变化。结果表明：当发酵液pH=7，谷氨酰胺浓度为1％时，纳滤膜分离谷氨酰胺的提取总收率可达到65％以上。     

10 t/a中试规模制备二肽L-丙氨酰-L-谷氨酰胺

以邻苯二甲酰基为保护基,采用混合酸酐法接肽,中试规模制备了L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(力肽)。结果表明,制备L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的最佳条件为:N-Pht-L-丙氨酸接肽的最佳溶剂是乙酸乙酯,温度为0℃,n(N-Pht-L-丙氨酸)∶n(L-谷氨酰胺)=1∶1。以L-丙氨酸计,总摩尔收率为34.4%。目标产物质量分数达98.6%。     

以L-谷氨酰胺-铜（Ⅱ）配合物为供体酶法制备茶氨酸

A novel method for enzymatic synthesis of L-theanine using copper（Ⅱ）-L-glutamine［Cu（Gln）₂］as donor substrate was proposed.The structure of Cu（Gln）₂ was identified by infrared spectrum analysis and its stability was also investigated under the reaction conditions.The enzymatic synthesis of L-theanine catalyzed by γ-glutamyltranspeptidase was carried out by using Cu（Gln）₂ and L-glutamine as donor substrate respectively,and the product yield and conversion rate of donor substrate were compared under the conditions of different ratios of donor and acceptor.The results showed that the transpeptidation reaction could be effectively enhanced by using Cu（Gln）₂ as donor substrate.The conversion rate of donor would increase by 51.5%,44.9% and 27.1% under different reaction conditions,compared to that using L-Gln as donor substrate.When the molar ratio of donor to acceptor was 6∶100,a higher donor conversion of 71.3% was obtained.     

L-谷氨酰肼为底物酶法制备茶氨酸

采用一种廉价的底物L-谷氨酰肼代替L-谷氨酰胺,成功地合成了茶氨酸,并且对该酶促反应的条件进行了初步优化。结果表明,以L-谷氨酰肼为底物时,γ-谷氨酰转肽酶(GGT)活性约是以L-谷氨酰胺为底物时的78.3%。该酶促反应的最适条件为:pH=10,反应温度40℃,n(L-谷氨酰肼)∶n(乙胺)=1∶10,L-谷氨酰肼初始浓度0.3mol/L。利用以上条件进行了茶氨酸的小量制备,投料L-谷氨酰肼50g,乙胺140g,反应40h,L-谷氨酰肼的摩尔转化率达84.1%,经离子交换树脂分离产物,得到31.8g高纯度茶氨酸。该结果显示良好应用前景。     

以L-谷氨酰胺-锌(II)配合物为供体酶法制备茶氨酸及其反应机理

针对酶法合成茶氨酸中存在的自转肽副反应,合成了L-谷氨酰胺-锌(II)配合物Zn(Gln)2,以其为供体、乙胺为受体、枯草芽孢杆菌B. subtilis GGT为催化剂,酶法制备茶氨酸. 结果表明,Zn(Gln)2在反应主体相稳定性良好,以Zn(Gln)2为供体可有效抑制自转肽副反应;B. subtilis GGT对Zn(Gln)2和Gln的亲和力常数分别为0.53 mmol/L和1.01 mmol/L. 在Zn(Gln)2 6.0 mmol/L、乙胺200 mmol/L及GGT 0.5 U/mL条件下,经37℃反应2 h,茶氨酸浓度最高可达7.38 mmol/L,较以Gln为供体时提高了14.42%.