斑蝥酸钠维生素B_6注射液联合顺铂治疗恶性胸腔积液的临床研究

目的评价斑蝥酸钠维生素B6联合顺铂胸腔灌注与单用顺铂治疗恶性胸腔积液的有效性和安全性。方法收治恶性胸腔积液患者73例,斑蝥酸钠维生素B6注射液联合顺铂(A组)38例,单用顺铂组(B组)35例。用一次性中心静脉导管行胸腔置管和闭式引流胸水。A组胸腔给药:斑蝥酸钠维生素B6注射液50mL+生理盐水20mL、顺铂40mg/m2+生理盐水50mL;B组胸腔给药:顺铂40mg/m2+生理盐水50mL。结果 A组患者临床总有效率和生活质量改善率均优于B组(P<0.05),2组不良反应相近。结论胸腔置管闭式引流后灌注斑蝥酸钠维生素B6注射液联用顺铂治疗恶性胸腔积液的疗效优于单用顺铂,而且也安全,毒副作用轻微。     

肺癌患者GM-CSF、CEA联合检测及临床意义

目的 探讨联合检测血清、胸水中粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和癌胚抗原(CEA)对肺癌的诊断价值和临床意义。方法 利用放射免疫法检测32名健康人的血清及78名肺癌患者(其中腺癌28例,鳞癌27例,小细胞癌23例)血清和胸水中GM-CSF和CEA的含量。结果 肺癌各组血清GM-CSF均明显低于正常组,而各组之间血清与胸水的含量差异均无显著意义。血清中CEA含量各组均明显高于正常组,且腺癌组升高幅度最大,小细胞癌升高幅度最小,各组之间差异均有显著意义。胸水CEA含量各组变化与血清相似。血清和胸水GM-CSF的含量随临床症状的加重而逐渐降低。而CEA含量逐渐升高,相关性显著。结论 肺癌的病情严重程度不同,GM-CSF、CEA的含量也不同。检测GM-CSF、CEA对临床应用GM-CSF治疗肺癌具有指导作用。     

急性脑梗死患者血清Sfrp5、Wnt5a的表达与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的关系

目的:探讨急性脑梗死患者血清分泌型卷曲相关蛋5(Sfrp5)、无翅型MMTV整合位点家族成员5a(Wnt5a)水平与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的相关性。方法:选取2018-12～2019-11在佳木斯大学附属第一医院神经内科住院治疗的急性脑梗死病人90例为实验组,根据颈动脉彩色多普勒超声检查结果分为无斑块组(20例)、稳定性斑块组(25例)、不稳定性斑块组(45例);预选取同期45例健康体检者为对照组,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组血清Sfrp5、Wnt5a水平,并分析Sfrp5、Wnt5a与斑块稳定性的相关性。结果:实验组血清Sfrp5水平(27.06±8.74)ng/mL低于对照组(34.28±9.01)ng/mL,血清Wnt5a水平(4.28±0.98)ng/mL高于对照组(3.31±0.99)ng/mL,差异均有统计学意义。不稳定性斑块组血清Sfrp5(23.70±9.13)ng/mL低于稳定性斑块组(28.72±8.00)ng/mL,血清Wnt5a(4.74±1.02)ng/mL高于稳定性斑块组(4.08±0.69)ng/mL,差异均有统计学意义。结论:血清Sfrp5、Wnt5a的表达程度对提示颈动脉粥样硬化斑块性质有一定的作用,可能参加颈动脉粥样硬化斑块发生发展的过程中。     

CA125测定对卵巢癌早期诊断及预后监测的临床意义

目的探讨CA125测定对卵巢癌早期诊断及预后监测的临床价值。方法以我院妇科2006年4月至2011年6月227例拟诊卵巢癌并行手术探查患者为研究对象,以病理检查结果为黄金标准,比较分析CA125和CEA检测结果的敏感性、特异性、阳性预测值、阳性拟然比。所有病理诊断为卵巢癌患者术后随访1年,比较分析CA125和CEA水平与卵巢癌预后及复发的关系。结果本组227例拟诊卵巢癌患者术后病理诊断卵巢癌104例,符合率为46.70%;CA125检测阳性137例,CEA检测阳性116例;以病理诊断查为黄金标准,CA125检测的敏感性、特异性、阳性预测值、阳性拟然比分别为88.46%、63.41%、74.89%、67.15%和1.25,其中敏感性、准确度、阳性预测值显著高于CEA检测(P<0.01);1年后随访,死亡11例,死亡率为9.62%,复发24例,复发率为25.81%,正常存活69例,占66.35%;正常存活组CA125平均水平为(42.26±4.42)u/mL,显著低于死亡组和复发组(P<0.01),CEA平均水平为(18.96±1.47)ng/mL,与死亡组和复发组无显著性差异(P>0.05)。结论 CA125对...     

血清肿瘤标志物联合检测在肺癌诊断中的应用

目的研究肺癌及肺部良性疾病患者血清CEA、NSE、CA125的水平,探讨其在肺癌诊断及鉴别诊断中的价值。方法采用化学发光法检测34例肺癌和30例良性肺病患者血清中CEA、NSE、CYFRA21-1的水平。结果肺癌组CEA、NSE、CYFRA21-1测定值明显高于肺良性病变组(P<0.05),3项联合检测的敏感性和特异性分别为72.6%、83.5%,明显优于单项检测。3项肿瘤标志物测定水平和灵敏度与病理类型有关;血CEA及CA125以腺癌最高;血NSE以小细胞肺癌最高。结论肿瘤标志物CA125、CEA、NSE在不同病理分型的肺癌中的表达有差别;3项肿瘤标志物联合检测有利于肺癌的诊断。     

表皮生长因子受体在胸腔积液鉴别诊断中的价值

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)检测在良恶性胸腔积液性质鉴别诊断中的应用价值。方法用ELISA法对81例胸水进行EGFR定量检测,并对结果进行统计学分析。结果恶性胸水组EGFR水平明显高于良性胸水组(P<0.01),结核性胸水组EGFR水平与非结核性胸水EGFR水平没有显著性差异(P>0.05)。结论胸水中的EGFR定量检测,对鉴别胸腔积液性质和肺癌的诊断有一定价值,尤其对缺少病理证据的肺癌患者有初诊价值。     

三种方法联合检测对结核性胸膜炎的诊断价值

目的探讨胸水和血清ADA(腺苷脱氨酶)联合胸水抗结核抗体检测对结核性胸水的诊断价值。方法对40例结核性胸腔积液和32例恶性胸腔积液患者血清ADA和胸水ADA以及胸水中抗结核抗体IgG进行检测。结果结核性胸腔积液抗结核抗体TB-Ab阳性率为65%,胸水ADA>45U/L者34例,阳性率85%,显著高于恶性胸腔积液组.差异具有显著性(P<0.05)。90%结核性胸膜炎患者胸水ADA/血清ADA比值>1.0。联合三种检测法敏感性及特异性可高达97.5%和96.88%。结论胸腔积液ADA水平和抗结核抗体检测联合胸水ADA/血清ADA比值的检测,对结核性胸膜炎的诊断有重要的临床价值,较单一测定胸水ADA可显著提高结核性胸膜炎的诊断率。     

人源细胞间黏附分子-1基因SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立、验证及应用

目的建立并验证细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)基因的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法,并用该方法检测不同细胞中ICAM-1的基因水平。方法根据GenBank中登录的ICAM-1基因序列设计并合成引物,建立ICAM-1基因的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法,验证方法的适用性、线性范围、灵敏性、特异性及精密性。同时采用该方法对人胚肺成纤维细胞(MRC-5)、人星形神经胶质瘤细胞(u251)、人原发性肝癌细胞(PLC/PRF/5)、人胚肾细胞(HEK293)及人脐静脉内皮细胞(HuvEc)进行检测。结果该方法的溶解曲线峰单一,无非特异性产物和引物二聚体;标准质粒在6. 74×10~4～6. 74×10~9 copies/μL浓度范围内与Ct值呈良好的线性关系,线性方程为y=-3. 576 log x+42. 982,R~2=1. 000;建立方法的灵敏性是普通PCR法的10倍;该方法检测不同物种细胞无交叉反应,仅能检出人源细胞ICAM-1;批内和批间CV均1%。不同组织来源的细胞内ICAM-1基因含量不同,其中MRC-5细胞含量最高。结论成功建立了ICAM-1基因的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法,且具有良好的特异性、灵敏性及精密性,可用于ICAM-1基因的定量检测。     

乙脑患儿脑脊液和血清可溶性细胞间黏附分子-1的变化及其临床意义

目的探讨流行性乙型脑炎(乙脑)患儿脑脊液和血清可溶性细胞间黏附分子-1变化的临床意义。方法对45例乙脑患儿采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定脑脊液和血清可溶性细胞间黏附分子-1,20例无神经系统疾病而需外科手术的腰麻患儿为对照组。结果乙脑患儿极期轻型、普通型、重型脑脊液可溶性细胞间黏附分子-1分别为(4.78±0.74)ng/L、(6.42±0.84)ng/L、(9.12±0.75)ng/L,血清可溶性细胞间黏附分子-1分别为(432.47±124.32)ng/L、(687.43±154.85)ng/L、(952.64±187.54)ng/L;对照组脑脊液可溶性细胞间黏附分子-1为(2.43±0.31)ng/L,血清可溶性细胞间黏附分子-1为(235.31±55.26)ng/L。乙脑患儿极期脑脊液和血清可溶性细胞间黏附分子-1水平显著高于对照组(P<0.01)。并且,乙脑患儿脑脊液和血清可溶性细胞间黏附分子-1水平随临床分型加重而增高(P<0.01)。乙脑患儿恢复期血清可溶性细胞间黏附分子-1为(394.76±142.76)ng/L,较极期下降(P<0.01)。结论乙脑患儿脑脊液和血清可溶性细胞间黏附分子-1水平呈正相关,且与临床分型相关,检测乙脑患儿血清可溶性细胞间黏附分子-1水平的变化,有助于判定脑组织受损的严重程度及评估患儿的预后。     

热灌注化疗在恶性胸腔积液中的近期疗效观察

目的探讨热灌注化疗对恶性胸腔积液的近期疗效。方法将48例恶性胸腔积液患者随机分为两组,其中24例为观察组,采用顺铂40mg注入胸腔30min,7d1次直至控制胸水为止;其余24例为对照组,采用单纯顺铂60mg胸腔内灌注法,两组进行近期疗效对比。结果观察组总有效率和CR均优与对照组(P<0.05);而对照组的造血功能抑制和肾脏的毒副作用均明显高与观察组(P<0.01)。结论热疗合并应用化疗有互补和增效作用,热灌注化疗对恶性胸腔积液的近期疗效优于单纯化疗灌注。     

中心静脉导管用于胸腔穿刺治疗结核性胸膜炎26例

目的了解中心静脉导管置入胸腔治疗结核性胸膜炎的疗效。方法对48例结核性胸膜炎患者(均为胸腔中到大量积液)随机分为治疗组(26例)和对照组(22例),治疗组用中心静脉导管置入胸腔内引流,至无液流出。对照组为传统胸腔穿刺术按传统胸腔穿刺术抽液,3d1次首次不超过600mL以后不超过1000mL。结论采用中心静脉导管胸腔穿刺引流术治疗结核性胸膜炎中大量胸腔积液比传统胸腔穿刺术安全性高,疗程短,胸膜增厚等并发症明显减少。     

趋化因子CXCL12受体CXCR4 shRNA对胶质瘤细胞U87增殖及血管内皮生长因子、白细胞介素-8表达的影响

目的探讨趋化因子CXCL12受体CXCR4 sh RNA对胶质瘤细胞U87增殖及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)表达的影响,为胶质瘤的基因治疗提供实验依据。方法用脂质体Lipofectimine TM 2000分别将CXCR4 sh RNA载体p GPU6/GFP/Rac1-421和非特异质粒p GPU6/GFP/NC转染U87细胞,并设未转染组,转染后48 h,采用RT-PCR法检测各组细胞中CXCR4基因m RNA的转录水平;转染后24、48、72 h,采用MTT法检测细胞的增殖活力,ELISA法检测细胞培养上清中VEGF和IL-8的含量。结果转染p GPU6/GFP/Rac1-421可使U87细胞中CXCR4基因m RNA的转录水平、细胞体外增殖活力及细胞培养上清中VEGF和IL-8的含量均明显降低,与p GPU6/GFP/NC组和未转染组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论 CXCR4 sh RNA可下调U87细胞中CXCR4基因m RNA的转录,抑制细胞增殖,降低VEGF和IL-8的产生,提示CXCR4在胶质瘤发展过程中具有重要作用。     

一种人血浆中多氯联苯测定方法的建立

建立人血浆中多氯联苯(PCBs)的检测方法,为流行病学调查提供灵敏、可靠的技术手段。利用5%Na2SO4、乙腈和1-丙醇/水(85∶15)超声提取人血浆中的PCBs,固相萃取后,采用气相色谱-电子捕获器联用的方法(GC-ECD)测定血浆中PCBs的含量。7种PCBs在1～50ng/mL范围内线性良好(R0.9998),在5、20ng/mL加标水平下,7种PCBs回收率在86.50%～120.00%之间,精密度在1.76%～8.13%范围内。PCBs的检出限为0.04～0.08ng/mL。     

慢性浅表性胃炎、消化性溃疡、胃癌与促胃液素的相关性研究

目的研究促胃液素在胃癌及消化性溃疡患者血浆中含量变化及它们之间的相关性。方法内镜及活检确诊的慢性浅表性胃炎(CSG)40例,十二指肠溃疡(DU)40例,胃溃疡(GU)40例,胃癌(GC)40例,用放免法同期进行血中促胃液素水平测定。结果胃癌患者空腹血浆中促胃液素的含量(157.6±50.3)pg/mL,明显高于DU(87.2±19.6)pg/mL,GU(90.3±22.8)pg/mL及CSG(72.3±21.5)pg/mL,组(P<0.05)。同时也发现促胃液素在DU及GU组的含量亦明显高于CSG组(P<0.05)。结论促胃液素可能参与了胃癌的发生、发展,并与溃疡的形成相关。     

大鼠骨髓间充质干细胞体外向血管平滑肌样细胞诱导分化过程中Periostin的表达及其作用

目的探讨血小板源性生长因子(Platelet derived growth factor,PDGF)-BB诱导骨髓间充质干细胞(Bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)向血管平滑肌样细胞(Vascular smooth muscle-like cells,VSMLCs)分化过程中Periostin的表达及其在促VSMLCs分化中的作用。方法采用全骨髓贴壁培养法分离和培养大鼠BMSCs,取第2代BMSCs分为2组:诱导Ⅰ组(用50 ng/ml PDGF-BB单独向VSMLCs诱导)和诱导Ⅱ组(加入地塞米松1μmol/L、胰岛素1μmol/L、吲哚美辛1μmol/L、3-异丁基-1甲基黄嘌呤0.5 mmol/L,向脂肪样细胞诱导),以大鼠胸大动脉平滑肌细胞作为阳性对照。分别于诱导后7 d和14 d,采用RT-PCR检测细胞中平滑肌肌动蛋白(SMα-actin)、平滑肌肌球蛋白重链(SM MHC)、平滑肌肌钙结合蛋白(SM Calponin)和Periostin mRNA的转录水平,Western blot检测Periostin蛋白的表达水平。结果诱导Ⅰ组细胞的SMα-actin、SM MHC、SMCalponin和Periostin基因mRNA及Periostin蛋白的表达水平14 d比7 d显著增强,且差异有统计学意义(P<0.05);14 d与阳性细胞相比,差异无统计学意义(P>0.05);未诱导组及诱导Ⅱ组在14 d均无表达。结论 PDGF-BB(50 ng/ml)能够单独诱导BMSCs向VSMCs分化,Periostin在此过程中起重要作用。     

仿生控释BMP-2和VEGF的PELA微球支架对骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的Wnt/β-catenin通路的影响

目的制备外黏附复合重组人骨形态发生蛋白(recombinant human bone morphogenetic protein 2,rh BMP-2)内包封血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的微囊,并研究其对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)向成骨细胞分化的Wnt/β-catenin通路的影响。方法以聚乳酸-聚乙二醇-聚乳酸三嵌段共聚物(polylactide-poly-ethylene glycol-polylactide,PELA)作为微囊的囊材,制备其外黏附rh BMP-2、内包封VEGF的微囊,制备微囊支架,实验分为对照组、BMP-2/PELA组、PELA/VEGF组和BMP-2/PELA/VEGF组。ELISA法检测微囊支架在1、2、4、8、12、16、22、28、35、42 d于PBS中缓释的rh BMP-2和VEGF的浓度;MTT法检测微囊支架对BMSCs作用3、7、14 d细胞活性的影响;Western blot法检测微囊支架对BMSCs作用3、7、14 d,BMSCs向成骨细胞分化中Wnt/β-catenin通路及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)蛋白表达的影响。结果微囊支架在PBS中第2天,BMP-2释放了约60%,而VEGF则释放了约32%;4组微囊支架对BMSCs作用3、7、14 d,细胞活性差异无统计学意义(P0.05)。在第14天,BMP-2/PELA/VEGF组Wnt、β-catenin及ALP的表达量均显著高于第3和7天(P0.05),而第7天的表达量均显著高于第3天(P0.05)。结论成功制备了BMP-2/PELA/VEGF微囊支架,对BMSCs无细胞毒性作用,可使BMSCs向成骨细胞进一步分化。     

THP-1分化巨噬细胞用于检测细胞免疫的体外方法的建立

目的建立THP-1分化巨噬细胞用于检测细胞免疫的体外方法。方法将HPV治疗性疫苗原液参考品及样品用含佛波酯(phorbol myristate acetate,PMA)的RPMI1640培养基稀释后,加入THP-1细胞,设PMA对照(只加PMA),37℃,5%CO2培养箱孵育,取上清,检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量,测定样品体外相对效力。按上述方法对细胞密度(2.0×105、5.0×105、10.0×105个/ml)、PMA终浓度(2.8、8.3、25、75、225 ng/ml)和培养时间(2、3、4 d)进行优化,确定最佳检测条件。用HPV预防性疫苗原液及ELISPOT法验证该方法的有效性。结果优化的最佳检测条件为:细胞密度5.0×105个/ml,PMA终浓度25 ng/ml,培养时间3 d。验证结果表明该方法有效可行。结论建立了THP-1分化巨噬细胞用于检测细胞免疫的体外方法,为检测治疗性疫苗的细胞免疫提供了一个体外检测平台。     

苦豆碱对白细胞介素-1β诱导软骨细胞损伤的作用及其机制

目的 探讨苦豆碱(aloperine,ALO)对白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导软骨细胞损伤的作用及其机制。方法 将软骨细胞随机分为(1)空白对照(Con)、IL-1β、IL-1β+ALO-L(25 mg/L)、IL-1β+ALO-M(50 mg/L)、IL-1β+ALO-H(100 mg/L)组；(2)Con、IL-1β、IL-1β+miR-NC、IL-1β+miR-16-5p组；(3)Con、IL-1β、IL-1β+si-NC、IL-1β+si-SOX5组。IL-1β组细胞加入10 ng/mL的IL-1β,Con组不进行任何处理。qRT-PCR法检测软骨细胞中miR-16-5p和SOX5基因mRNA转录水平；ELISA法检测IL-6、TNF-α和IL-1β含量；Western blot法检测Bcl-2、Bax、SOX5蛋白表达水平；流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 与IL-1β组比较，IL-1β+ALO-L、IL-1β+ALO-M、IL-1β+ALO-H组软骨细胞中IL-6、TNF-α、IL-1β含量显著降低(t=5.002～20.653,P均<...     

LHRH-PE40与宫颈癌组织结合特性的研究

目的观察LHRH-PE40对各种病理型宫颈癌组织的结合能力,为其临床应用提供理论依据。方法采用免疫荧光法检测LHRH-PE40与正常宫颈组织及宫颈癌组织的结合能力。结果宫颈结缔组织、鳞状上皮的荧光结合率为0%。宫颈癌组织荧光结合率为74%,弱阳性及阴性表达病例中,高分化鳞状细胞癌占67%,中低分化鳞状细胞癌占15%,两者差异有显著意义(P<0.05)。中强阳性表达病例中,高分化鳞状细胞癌仅占37%,中低分化鳞状细胞癌占86%,两者差异有显著意义(P<0.05)。5例强阳性表达病例均为高分化腺癌。结论高分化鳞状细胞癌与LHRH-PE40结合能力最弱,子宫颈腺癌与LHRH-PE40结合能力最强。     

血小板源性生长因子-BB在肺癌中的表达和意义

目的探讨血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)在肺癌患者细胞中的表达和临床意义。方法我院2006年12月至2010年6月收治的经病理证实的30例肺癌患者(观察组)及30例肺部良性病变患者(对照组)为研究对象,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测2组患者的血清PDGF-BB,免疫组织化学(SABC法)检测PDGF-BB链的表达水平。结果观察组患者的血清PDGF-BB水平、PDGF-BB链阳性表达率分别为(378.56±34.26)pg/mL、66.7%(20/30)均显著高于对照组,P<0.05。结论 PDGF-BB在肺癌的发生发展中可能起着重要作用,其表达的检测有一定的临床指导意义。