QuEChERS/LC-MS/MS法测定人参中30种农药残留

建立人参中30种农药残留的快速样品处理,联合液相色谱-串联质谱(quick,easy,cheap,effective,rugged and safe/liquid chromatography tandem mass spectrometry,QuEChERS/LC-MS/MS)检测方法.通过对快速样品处理法(QuEC...     

LC-MS/MS同时检测烟草中的6种杀菌剂

为测定烟草中的杀菌剂残留量,利用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)建立了一种同时检测烟草中6种杀菌剂的方法:烟草样品提取液经处理后,在Atiantis dC18柱上以乙腈-水(含0.1％甲酸)为流动相进行分离,用LC-MS/MS在多反应监测(MRM)模式下测定,内标法定量.采用该方法测定了145个国内外烟草样品中6种杀菌剂农药的残留量.结果表明:①6种杀菌剂线性范围是5～200 ng/mL,线性关系良好(R2＞0.999),平均回收率为85.3％～118.8％,相对标准偏差(RSD)小于7.7％,定量限在0.007～0.033 mg/kg之间.②所测样品中,有52个烟叶和30个卷烟样品中未检出任何杀菌剂农药,分别占所选烟叶和卷烟样品数的52％和66.7％;在6种杀菌剂农药中,除苯菌灵未检出外,其他5种农药均有检出.该方法适用于烟草及烟草制品中6种杀菌剂残留的快速检测.     

LC-MS/MS测定牛蛙中硝基呋喃类代谢物残留

为建立LC-MS/MS测定牛蛙中呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ)、呋喃它酮代谢物5-甲基吗啉-3-氨基-2-恶唑烷酮(AMOZ)、呋喃西林的代谢物氨基脲(SEM)和呋喃妥因的代谢物1-氨基-2-内酰脲(AHD)的方法,试验利用优化后的方法同时测定样品中4种硝基呋喃类代谢物的残留.结果表明,在优化试验条件下...     

LC-MS/MS法测定烟用纸张中的五氯苯酚

建立了测定烟用纸张中五氯苯酚的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)。烟用纸张样品超声提取后直接进样,在Atiantis d C18柱上以甲醇-水(含0.1%甲酸)为流动相进行分离,用LC-MS/MS在多反应监测(MRM)模式下测定,内标法定量。结果表明:1方法的线性范围是1~20 ng/mL,线性关系良好(R20.99),平均回收率91.6%,相对标准偏差(RSD)8%(n=5),定量限为0.018 mg/kg。2样品前处理过程简单,无需复杂的衍生化操作。建立的方法适用于烟用纸张中五氯苯酚的快速检测。     

LC-MS/MS法测定保健食品及原料中石斛碱

目的：建立液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法测定金钗石斛类保健食品及其原料中石斛碱含量。方法：样品通过70%甲醇热回流的方法进行处理后,采用Agilent EclipsePlus C18色谱柱,以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.2 mL/min,进样量5μL。利用电喷雾离子源(ESI),采用正离子模式,多反应监测模式(MRM)进行检测,根据保留时间定性,外标法定量。结果：石斛碱的出峰时间在2.949 min,浓度在1.15～115 ng/mL范围内线性关系良好(r=0.9996),检出限为0.0373 ng/mL。金钗石斛原料和金钗石斛软胶囊的平均加标回收率分别为97.85%和102.64%;精密度相对标准偏差(RSD)分别为1.37%和0.97%。结论：该方法具有分析速度快、灵敏度高、重现性好、准确度高的特点,可为金钗石斛类保健食品及其原料的质量控制提供参考。     

牛血液前处理方式对ELISA法检测克仑特罗结果的影响

采用单因素实验和正交实验探讨牛血液样品前处理方式对酶联免疫法(ELISA)检测克仑特罗残留结果的影响.结果表明:通过控制牛血液离心前放置时间、离心后放置时间、抗凝剂添加比例,可以有效提高血清样品的质量,最大程度的减少EHSA法检测牛血样中克仑特罗残留假阳性的结果.牛血液样品前处理的各因素对克仑特罗残留检测结果的影响顺序为:离心前放置时间＞抗凝剂添加比例＞离心后放置时间.牛血液样品最佳前处理条件为离心前放置30min、抗凝剂添加比例为1:9、离心后放置时间0min.按照牛血液样品最佳前处理条件,用ELISA法检测30份样品,筛选出2份阳性样品,经液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)确证为阳性,两种方法检测结果一致.在1.0～8.1 μg/L线性范围内,ELISA法检测克仑特罗残留结果假阳性率为0％.     

牛血液前处理方式对ELISA法检测克仑特罗结果的影响

采用单因素实验和正交实验探讨牛血液样品前处理方式对酶联免疫法（ELISA）检测克仑特罗残留结果的影响。结果表明:通过控制牛血液离心前放置时间、离心后放置时间、抗凝剂添加比例,可以有效提高血清样品的质量,最大程度的减少ELISA法检测牛血样中克仑特罗残留假阳性的结果。牛血液样品前处理的各因素对克仑特罗残留检测结果的影响顺序为:离心前放置时间>抗凝剂添加比例>离心后放置时间。牛血液样品最佳前处理条件为离心前放置30min、抗凝剂添加比例为1:9、离心后放置时间0min。按照牛血液样品最佳前处理条件,用ELISA法检测30份样品,筛选出2份阳性样品,经液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）确证为阳性,两种方法检测结果一致。在1.0～8.1μg/L线性范围内,ELISA法检测克仑特罗残留结果假阳性率为0%。      

枸杞中30种禁用农药残留的LC-MS/MS检测分析

建立了液相色谱-串联质谱法同时测定枸杞中30种禁用农药残留的分析方法.通过比较2020年版药典规定的5种供试品制备的方式,最终选择HLB固相萃取法进行前处理,采用LC-MS/MS多反应监测模式(MRM)分段采集,基质外标法定量.结果 显示,30种禁用农药在5 ng/mL～100 ng/mL(以甲胺磷计)范围内线性关系良...     

UPLC-MS/MS法同时检测水产品中喹诺酮类药物残留

利用UPLC-MS/MS技术建立一种同时检测水产品中喹诺酮类药物残留的分析方法.对样品进行前处理及分离条件的优化,样品经柠檬酸磷酸盐缓冲液(Mcllvaine)超声提取,采用固相萃取(SPE)方法净化提取液,并对目标物质进行富集,用UPLC-MS/MS法检测.结果表明:依诺沙星、奥索利酸、培氟沙星、帕珠沙星、氟罗沙星含量在3～300 μg/kg 范围,萘啶酸、氟甲喹含量在0.5～50 μg/kg 范围,其余13种喹诺酮类化合物含量在1～100μg/kg范围均具有良好的线性关系,相关系数0.9981～0.9999,定量限(LOQ)0.34～8.13 μg/kg.药物含量在5～150μg/kg范围,除氟甲喹、萘啶酸外,其它喹诺酮的回收率均在63.6%～92.8%之间,相对标准偏差1.51%～11.32%.该方法可满足水产品中喹诺酮类药物多残留检测的要求.     

液相色谱-串联质谱法测定葡萄酒中69种农药多残留

建立了液相色谱三重串联四级杆质谱(LC-MS/MS)法同时测定葡萄酒中69种农药多残留的分析方法。样品采用1%乙酸乙腈提取,应用固相萃取柱净化,经C18柱分离后,在电喷雾(ESI)正离子化模式下,通过多反应监测(MRM)方式测定。方法在1.0-0.001 g/mL质量浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99;检出限为0.001 g/mL-0.01 g/mL;添加水平为0.5 g/mL时的回收率和相对标准偏差分别为65.91%-121.25%和0.41%-24.97%;添加水平为0.05 g/mL时的回收率和相对标准偏差分别为66.20%-121.06%和0.93%-26.17%,其中绝大部分农药化合物的回收率为70%-120%,相对标准偏差小于15%。该方法简便、快速、灵敏,适用于葡萄酒中农药多残留的检测分析。     

盐酸克伦特罗残留酶联免疫吸附(ELISA)检测方法的研究

建立了间接ELISA检测盐酸克伦特罗的方法,并对其参数进行了分析计算。在该检测方法中,抗盐酸克伦特罗(CL)抗体最适稀释度为1∶1000,羊抗兔酶联抗体(HRP-IgG)的最适稀释度为1∶1500。该检测方法的检测灵敏度可达0·1046μg/L,生物检测限为1·452μg/L,线性检测范围为7·26~90·75μg/L。     

ELISA检测盐酸克伦特罗残留的方法学评侈

以盐酸克伦特罗（clenbuterol hydrochloride）重氮化后分别连接到牛血清蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）上制得免疫原BSA-CL和包被抗原OVA-CL。通过免疫兔获得含有多克隆抗体的血清，经硫酸铵沉淀、纯化，得到兔源抗CL的抗体，在此基础上建立了间接酶联免疫检测方法。实验结果表明，抗CL抗体最适稀释度为1：1000，羊抗兔酶联抗体（HRP—IgG）的最适稀释度为1：1500。该检测方法的检测灵敏度为1．452μg／L，线性检测范围为7．26-90．75μg／L。     

ELISA检测盐酸克伦特罗残留的方法学评价

以盐酸克伦特罗(clenbuterolhydrochloride)重氮化后分别连接到牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)上制得免疫原BSA-CL和包被抗原OVA-CL。通过免疫兔获得含有多克隆抗体的血清,经硫酸铵沉淀、纯化,得到兔源抗CL的抗体,在此基础上建立了间接酶联免疫检测方法。实验结果表明,抗CL抗体最适稀释度为1:1000,羊抗兔酶联抗体(HRP-IgG)的最适稀释度为1:1500。该检测方法的检测灵敏度为1.452μg/L,线性检测范围为7.26～90.75μg/L。     

酶联免疫法检测猪肉中呋喃唑酮代谢物残留

通过检测猪肉中呋喃唑酮代谢物的残留以评价试剂盒的性能,采用酶联免疫法对猪肉中的呋喃唑酮代谢物残留量进行测定。结果表明:该方法的线性检测范围为0.025～2.025μg/L,最低检测限为0.1μg/kg,样本添加回收率为78.2%～100.3%,变异系数为4.7%～10.3%,与呋喃唑酮的交叉反应率为16.3%,与其他药物的交叉反应率均小于1%,且对实际样本的检测结果与液相色谱-串联质谱法基本一致。该法灵敏准确、重复性好、特异性高,适用于猪肉中呋喃唑酮代谢物残留的检测。     

新霉素的直接竞争酶联免疫分析法

首先用碳二亚胺(EDC)法将新霉素(NEO)偶联于载体蛋白-卵清白蛋白(ovalbumin,OVA),合成包被原OVA-NEO,SDS-PAGE 进行鉴定;用高碘酸钠法连接辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP),制备酶标抗原NEO-HRP并建立直接ELISA检测方法。通过一系列参数的优化,包括包被溶液、封闭溶液、竞争时间、抗体稀释液、pH值、反应温度、显色时间等,最终得到其IC20(抑制率为20%时的标准溶液质量浓度)＜1ng/mL、半数抑制量(IC50)为7.6ng/mL,线性方程为y =－0.2798x＋0.7456,R2=0.991。直接ELISA总耗时只需大约1h。     

酶联免疫法与LC-MS/MS法测定水产品中呋喃唑酮代谢物

运用酶联免疫法和LC-MS/MS法对水产品中呋喃唑酮代谢物残留进行测定.样品经2-硝基苯甲醛衍生化并用乙酸乙酯提取.向样品中分别添加0.60、2.00、6.00μ g/kg三个浓度水平的呋喃唑酮代谢物时,酶联免疫法平均回收率分别为99.2%、96.0%和100.0%,变异系数(RSD)为1.8%～12.6%,最低检测限为0.3μg/kg.LC-MS/MS法平均回收率分别为90.8%、94.3%和86.3%,RSD为6.2%～14.3%,最低检测限为0.1μg/kg.用酶联免疫法对150个样品进行检测,筛选出3个阳性样品,经LC-MS/MS确证为阳性,未发现假阳性样品,且测定结果基本一致.研究表明酶联免疫法重复性较好、准确度较高,是一种水产品中呋喃唑酮代谢物残留的快速筛选方法;液- 质/质联用法灵敏度高,适用于阳性样品的确证和精确定量.     

酶联免疫吸附法测定水产品中甲基睾酮残留

建立了测定水产品中甲基睾酮(MT)残留的间接竞争酶联免疫吸附法(ic ELISA)。采用琥珀酸酐法衍生化制备半抗原MT17,进一步偶联钥孔血蓝蛋白(KLH)制备免疫原MT17-KLH,经动物免疫成功获取特异性识别MT的多克隆抗体(与其它结构类似物交叉反应小于1%)。优化确立了ic ELISA最佳检测条件:包被原浓度100μg/L,MT多克隆抗体稀释度1/1.2×105,抗体反应时间40 min,药物稀释液为PBS,水产样品经乙腈提取,N-丙基乙二胺吸附剂(PSA)分散固相萃取(DSPE)净化后用于ic ELISA测定。本方法的抑制中浓度IC50为3.48μg/L,检测线性范围为0.77~13.06μg/L。水产样品加标回收率为81.02~103.19%,相对标准偏差为4.46%~13.14%,测定结果与液相色谱-质谱联用法具有良好的相关性(R=0.9971)。本方法可用于水产品中甲基睾酮残留的快速测定。     

青霉素G人工抗原的合成及其酶联免疫检测方法研究

在碱性条件下,降解青霉素G并与6-氨基己酸反应,首次成功合成了纯度较高的半抗原.采用活化酯法与匙孔血蓝蛋白(KLH)偶联,成功制备了具有青霉素G结构特征的人工抗原.通过免疫获得了高效价、高特异性的多克隆抗体,抗血清效价达1:240 000.绘制了青霉素G酶联免疫直接竞争法的标准曲线,检测限可达0.04μg/L,灵敏度0.37μg/L.     

动物性食品中盐酸克伦特罗ELISA检测方法的建立及应用

目的:建立动物性食品中盐酸克伦特罗残留快速检测技术,确保食品安全.方法:以盐酸克伦特罗重氮化后分别连接到牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)上制得免疫原BSA-CL和包被抗原OVA-CL.通过免疫得到多抗血清,经硫酸铵沉淀,Sephrose 4B-proteinA对抗体进行纯化,在此基础上建立间接竞争ELISA方法.结果表明:包被抗原的最适质量浓度为10 μg/mL,抗体的最佳稀释度为1∶1000;该方法的IC50为2.18 ng/mL,最低检测限达0.05 ng/mL,与沙丁胺醇和妥洛特罗的交叉反应率分别为8.28％和7.75％,平均加标回收率为90.78％.结论:该法灵敏度高,样品前处理简便、快速,适用于动物源性食品中盐酸克伦特罗残留的大批量现场检测.