产酸性蛋白酶微生物的筛选及其在玉米淀粉生产中的应用

分别从土壤和泡菜中筛选到适合玉米淀粉湿法加工浸泡条件(50℃,pH值3.5～5)的微生物,经形态学及分子生物学鉴定,初步确定该菌株为烟曲霉(Aspergillas fumigates);提取发酵液中的酸性蛋白酶粗酶进行酶学性质研究,发现该酶在50℃,pH值3.5～5下仍保持较高的稳定性;将发酵液应用于玉米淀粉湿法浸泡工艺中,优化的玉米浸泡条件为:浸泡温度50℃、乳酸含量0.5%、SO2含量0.08%,初次浸泡12 h,然后添加12%发酵液浸泡10 h。新工艺减少了环境污染,浸泡时间缩短了26 h,更有利于生产。     

利用蛋白酶发酵液替代SO_2改进玉米淀粉生产浸泡工艺研究

在确定了地衣芽孢杆菌蛋白酶摇瓶发酵工艺各项参数的基础上,采用改良的实验室生产淀粉方法,将处于产蛋白酶活性高峰期的发酵液添加到玉米浸泡水中,探讨了利用蛋白酶发酵液替代SO_2降解包裹玉米淀粉蛋白质的可行性和工艺条件。结果表明,当玉米在含有0.1%的SO_2(和0.5%的乳酸)的浸泡液中浸泡18h后,加入20%的蛋白酶发酵液继续浸泡6h,淀粉得率为67.79%。与传统工艺相比,淀粉得率提高了9.5%,SO_2含量降低了0.1%,总的玉米浸泡时间由36h缩短至24h。     

湿磨工艺生产玉米淀粉的研究进展

本文阐述了淀粉加工在玉米加工中的地位,介绍国内外关于玉米浸泡技术的研究现状和发展趋势,进而为创新工艺提供理论基础。     

原生质体紫外诱变技术在该糖菌种选育中的应用

本文采用原生质体紫外诱变技术，经过硫酸二乙酯（DES）诱变后筛选出的NO3菌。采用溶菌酶浓度0.8mg/ml，酶解温度36℃，酶解时间120min，获得原生质体；采用10s作为紫外原生质体诱变的作用时间，选育出一株稳定的核糖生产菌TJ3，该菌具有莽草酸营养缺陷，而高糖、以核糖为唯一碳源不生长等遗传标记。     

酸性蛋白酶生产菌种的选育及培养基的优化

以黑曲霉(Aspergillus niger)为出发菌株,经原生质体紫外诱变,得到了产酸性蛋白酶优良菌株。采用单因素和正交实验,对其液态发酵的培养基成分进行了优化,得到最佳培养基组成为:玉米粉1%,豆饼粉3%,鱼粉1.2%,氯化铵4%,磷酸氢二钾0.3%,氯化钙0.5%。在优化的培养基条件下,30℃、180 r/min摇瓶发酵72 h,酶活力达到1117.52 u/mL。     

原生质体紫外诱变技术在核糖菌种选育中的应用

本文采用原生质体紫外诱变技术,经过硫酸二乙酯(DES)诱变后筛选出的NO3菌。采用溶菌酶浓度0.8mg/ml,酶解温度36℃,酶解时间120min,获得原生质体;采用10s作为紫外原生质体诱变的作用时间,选育出一株稳定的核糖生产菌TJ3,该菌具有莽草酸营养缺陷,耐高糖、以核糖为唯一碳源不生长等遗传标记。     

嗜热乳酸菌的筛选及其在玉米淀粉湿法生产浸泡工艺中的应用

从淀粉生产车间的玉米浆中筛选出耐50℃高温的嗜热乳酸菌,以不同浓度接种量接种嗜热乳酸菌到玉米浸泡水中,研究嗜热乳酸菌对缩短玉米浸泡时间的效果。结果表明,选育的嗜热乳酸菌适应浸泡环境,接入10%的嗜热乳酸菌可缩短玉米细胞破壁所需有效乳酸浓度到达的时间,由传统工艺的20 h缩短为14 h;乳酸菌发酵有效地降低了浸泡水的pH值,在玉米浸泡过程的第1阶段不加入SO_2同样可以抑制其他微生物的生长。     

原生质体融合技术在微生物菌种选育中的应用

对原生质体融合技术的关键步骤、影响原生质体融合和分离的因素进行了综述.就原生质体融合技术在微生物育种技术上的应用前景进行了分析.     

中性蛋白酶高产菌株的诱变选育

对产中性蛋白酶的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) SHB 2010-1进行物理和化学诱变以筛选高产菌株。考察了6种筛选培养基在分辨中性蛋白酶高产菌株上的效率,菌株在脱脂牛奶培养基上生长状态最佳,水解圈易于观察。以紫外线、硫酸二乙酯为诱变剂,研究了两者的致死率曲线,选择致死率为90~95%的剂量进行两轮复合诱变,诱变菌的发酵液酶活依次较出发菌提高1.49%、10.99%、38.77%和59.68%,复合诱变表现出较单一诱变更强的效应,并能利用弱诱变剂紫外线积累的隐性突变。最终筛选得到的菌株命名为DES-59,在50 mL发酵培养基中培养60 h酶活达到7307 U/mL,相应的生物量为2.205×1010 CFU/mL,表现出典型的生长偶联型。突变菌的nprE基因经克隆及测序与数据库上的序列一致,酶活性的提高并非由中性蛋白酶A结构改变引起,突变出现在生产蛋白酶的其他位点上,有利于潜在性能的提高。     

鸭肠道内产蛋白酶乳杆菌的分离筛选

分离筛选鸭肠道内产蛋白酶乳杆菌。利用脱脂乳培养基,从鸭消化道中分离筛选出两株产蛋白酶的乳酸菌,对菌体形态、染色反应、培养性状、生理生化性状进行系统研究,结合16S rRNA 序列分析鉴定出筛选的乳酸菌为干酪乳杆菌鼠李糖亚种和干酪乳杆菌干酪亚种。     

硬质玉米和粉质玉米浸泡与发酵对比

硬质玉米(Flint corn)与粉质玉米(Flour corn)在pH值为4.20～4.50,水温为55～60℃条件下浸泡,考察两种玉米的吸水情况;研究发酵过程的失重、发酵液成分及出酒率情况.结果表明,粉质玉米的吸水速率比硬质玉米要快,提前2～3h达到40%以上;两种玉米的发酵酒精生产量、原料和淀粉出酒率差别不大;采用粉质玉米作原料,会降低相对成本.(孙悟)     

一株有机溶剂稳定性蛋白酶产生菌的筛选与鉴定

为了筛选分泌有机溶剂稳定性蛋白酶耐有机溶剂极端微生物,利用添加苯10%(V/V)的MLB培养液从油污染水样中分离获得有机溶剂耐受菌株56株。通过产蛋白酶筛选培养基(SMA 培养基)平板初筛和摇瓶发酵复筛从中筛选获得蛋白酶高产菌株DS1。通过形态学、生理生化及16S rDNA序列(genbank EU578329)构建的系统进化树将菌株DS1鉴定为Bacillus aquaemaris。该菌株能耐受多种有机溶剂,并可以分泌有机溶剂稳定性蛋白酶。该蛋白酶在 25%极性常数(logPOW)大于等于1.8的有机溶剂中稳定性好,于30℃、140 r/min,培养14d仍有70%以上的活力。菌株DS1及其所分泌的蛋白酶均能较好的耐受有机溶剂,可以进行有机相催化,具有潜在的工业应用价值。     

B.subtilis蛋白酶高产菌株的筛选与鉴定

本文以中性蛋白酶生产菌Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓＡＳ１．３９８为出发菌，用ＮＴＧ与紫外辐照相结合的方法对其进行复合诱变，筛选到一株蛋白酶活性明显高于出发菌的正突变株，命名为Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓＭＬ。通过对该突变株蛋白酶活性曲线的绘制、酶作用最适ＰＨ的确定、所产一的酶性质的分析及比酶活性的测定，发现该突变株扩酶活性比ＡＳ１．３９８至少高出３０％，最适反应ＰＨ７－８，酶活性受ＥＤＴＡ的强烈抑制，其突变位点很     

耐高温酸性蛋白酶产生菌株的选育

从白酒大曲中筛选出酸性蛋白酶产量高的菌株S-01和S-02,测定其酸性蛋白酶活力为1OU／g左右。通过紫外诱变、亚硝基胍诱变及温度驯化,进一步得到1株耐高温菌株GS-06,其产酶量达到29．2U／g左右。     

响应面法优化玉米两步浸泡工艺

以玉米为原料,采用两步浸泡工艺提取淀粉,通过单因素试验考察第2步浸泡工艺中浸泡时间、浸泡温度和酸性蛋白酶添加量对淀粉得率的影响,并通过响应面法建立淀粉得率与浸泡时间、浸泡温度及蛋白酶添加量之间的关系。玉米浸泡的最优工艺条件：第1步浸泡温度52℃、浸泡时间3h;第2步浸泡温度51℃、浸泡时间2.25h、加酶量700U/g。拟合得到的模型较好的符合实际。该方法浸泡时间2.25h,淀粉得率64.9%。     

玉米浸泡工艺研究进展

综述了国内外玉米浸泡工艺的最新进展,指出连续浸泡、高压浸泡和酶法浸泡是几种能够缩短玉米浸泡时间的方法,其中高压浸泡和酶法浸泡是很有前途的玉米生产工艺。