辅助性T细胞17与相关疾病发生的研究进展

辅助性T细胞17(T helper cells 17,Th17)是新近发现的一种辅助性T细胞,该类细胞在机体的抗微生物免疫中起非常重要的作用,也与很多自身免疫性疾病的发生有一定的关系,如过敏、糖尿病、类风湿性关节炎等。Th17细胞是与Th1及Th2细胞不同的T细胞亚类,可分泌IL-17A、IL-17F、IL-21、IL-22等细胞因子。本文就Th17细胞的基本生物学功能、与感染性疾病及自身免疫性疾病发生的相关性作一综述。     

辅助性CD4~+ T细胞亚群失衡在实验性自身免疫性重症肌无力大鼠发病机制中的作用

目的研究实验性自身免疫性重症肌无力(Experimental autoimmune myasthenia gravis,EAMG)大鼠发病过程中辅助性CD4+T细胞亚型的变化。方法将Lewis大鼠分为完全弗氏佐剂(CFA)早、晚期发病时对照相和EAMG早期(初次免疫后13d)、高峰期(初次免疫后50d)发病时相4组,各组分别给予相应的药物后,于发病早期和高峰期分离淋巴细胞,采用流式细胞术检测各组大鼠淋巴细胞中Th1、Th2、Th17和Treg细胞的比例,ELISA法检测淋巴细胞培养上清中各种细胞因子水平。结果在EAMG发病的早期时相,与CFA组比较,EAMG组Th1、Th2、Th17细胞的比例下降,而Treg细胞比例上升;淋巴细胞培养上清中IFNγ和IL-4水平显著下降(P<0.05),IL-6水平显著升高(P<0.05),IL-17和TGF-β水平略升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。在EAMG发病的高峰期,与CFA组比较,EAMG组Th1和Th17细胞的比例显著上升(P<0.05),而Th2和Treg细胞的比例显著下降(P<0.05),淋巴细胞培养上清中IFNγ和IL-17水平显著上升(P<0.05),IL-4和TGF-β水平显著下降(P<0.01),IL-6水平略上升,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论在EAMG发生过程中,4种辅助性CD4+T细胞亚型之间的平衡被打破,晚期时相中Th1和Th17细胞比例上升,而Th2和Treg细胞比例下降。     

迷你袋技术评估杀菌剂对蘑菇堆肥中木霉菌的防效

广泛报道在蘑菇的栽培中，木霉菌是主要营养竞争者，有时也是蘑菇的病原菌。在英格兰、荷兰、比利时、德国以及南美、北美、亚洲地区，哈次木霉、绿色木霉和康宁木霉造成一定的经济损失，在这些国家及地区，哈次木霉侵染蘑菇堆肥和包装材料。哈次木霉有三个菌种分别为Th1、Th2、Th3，它们和绿霉生长在一起，而Th2是引起病害爆发的主要元凶。     

5-甲基-7-羟基-2—苄硫基-1,2,4-三唑[1,5-a]嘧啶的合成

以5－氨基－3－巯基－1，2，4－三唑，氯化苄和乙酰乙酸乙酯为原料，合成5－甲基－7－羟基－2－苄硫基－1，2，4－三唑[1,5-a]嘧啶，并进行了一步法改进，同时优化了其反应条件，使目标产物的产率达到了56％以上，产品经熔点测定、核磁共振普确认。     

重组B7-H1IgV融合蛋白的表达、纯化及活性鉴定

目的以B7-H1为靶点,研制肿瘤免疫治疗蛋白疫苗。方法将人B7-H1胞外片段IgV区基因插入pQE-30原核表达载体,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达。Ni2+-NTA亲和层析纯化蛋白,Westernblot鉴定。用纯化的rhB7-H1IgV蛋白免疫昆明小鼠,经ELISA、流式细胞术、免疫组化技术和CDC试验测定融合蛋白及其抗血清的生物学活性。结果所构建的pQE-30-TT-B7-H1IgV表达载体,能稳定表达rhB7-H1IgV蛋白,经纯化后免疫昆明小鼠,可获得高滴度抗B7-H1抗血清。经流式细胞术和免疫组化检测显示,其抗血清可与HT-29/B7-H1+及SP2/0肿瘤细胞结合,且在CDC试验中,可依赖补体杀伤HT-29/B7-H1+及SP2/0肿瘤细胞。结论rhB7-H1IgV融合蛋白不仅可引发小鼠体液免疫应答,而且其抗体还能与表达B7-H1的肿瘤细胞相结合,并介导补体依赖的体外杀伤作用。     

Th-LAK细胞杀伤肿瘤细胞的活性及其机理的研究

在体外观察了用rIL－2激活的人胎胸腺细胞（Th－LAK细胞），对K562癌细胞（以下称靶细胞）的杀伤过程、在倒置显微镜下，可见Th－LAK细胞呈花环状围绕靶细胞，继而靶细胞内出现颗粒，后被破坏。在扫描电镜下，Th-LAK细胞和靶细胞先互相接触．然后细胞胞浆互相融合，4h时靶细胞核膜出现孔洞，微绒毛消失，靶细胞逐渐破裂死亡。在透射电镜下Th－LAK细胞和靶细胞混合培养30min后，就可见ThLAK细胞胞浆绒毛伸向靶细胞，互相融合，染色体浓缩，溶酶体可见，细胞膜不完整，形成凋落小体以至碎裂死亡。部分Th-LAK细胞中发现微管泡结构。     

二代测序法分析儿童肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液中Th1/Th2的平衡

目的应用二代测序技术(next-generation sequencing,NGS)检测肺炎支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)患儿肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中,Th1细胞因子IFNγ、Th2细胞因子IL-4的表达水平及免疫应答的平衡变化趋势。方法提取支气管异物、MPP轻症及重症患儿BALF样本,应用NGS技术中转录组测序技术进行深度测序,根据基因表达量检测IFNγ、IL-4表达水平,并计算IL-4/IFNγ比值;采用Real-time q PCR法对样本的IFNγ、IL-4、IL-4/IFNγ相关趋势进行验证。结果 MPP轻症患儿BALF中IL-4、IFNγ表达水平及IL-4/IFNγ比值均较支气管异物对照组升高,MPP重症患儿BALF中IL-4、IFNγ水平较轻症组和支气管异物对照组升高,IL-4/IFNγ比值较支气管异物对照组升高,较轻症组有所下降。结论在MPP患儿免疫反应中,MPP轻症及重症患儿BALF中两类细胞因子均有所升高,IL-4/IFNγ比值变化趋势表明Th1/Th2存在失衡现象,MPP轻症组、重症组与支气管异物对照组相比,平衡向Th2移动,因此,平衡以Th2反应占优势为主。     

HIV—1CN与IL—2基因共表达核酸疫苗诱导产生CTL的观察

目的 观察HIV－1CN gp120基因与IL－2基因共表达核酸疫苗质粒pGPIL-2诱导产生CTL。方法 脂质体介导共表达中国流行株HIV－1 Gag-gp120基因与IL－2基因的核酸疫苗质粒pGPIL-2转染BHK－21细胞,以间接免疫荧光法鉴定其表达,取pGPIL-2免疫鼠脾细胞,检测pGPIL-2诱导的细胞毒性T细胞杀伤活性。结果 pGPIL-2可有效地诱导CTL的产生,并可杀伤HIV－1CN嵌合基因转染的靶细胞,结论 为进一步设计中国流行株HIV－1核酸疫苗提供了重要实验依据。     

1,4-二氯-2-丁炔的合成

1，4－二氯－2－丁炔是合成链状脂肪烃类化合物的中间体，按照3－氯－1－丙烯的合成方法，在吡啶的存在下，2－丁炔－1，4－二醇与PCl3作用合成，采用CH2C2溶剂稀释反应物浓度，反应温度低，产物和溶剂均比水重，分离效率高，加入少量的相转移催化剂HMPA，反应收率可达72％。     

1-环丙基-7-氯-6-(1-哌嗪基)-4-氧-1,4-二氢-3-喹啉羧酸盐酸盐的熔化与离解性质研究

1－环丙基－7－氯－6－（1－哌嗪基）－4－氧－1，4－二氢－3－喹啉羧酸盐酸盐为环丙沙星合成中主要的杂质之一，研究其物化性质对于改善环丙沙星的结晶分离提纯具有重要意义。本文研究了1－环丙基－7－氯－6－（1－哌嗪基）－4－氧－1，4－二氢－3－喹啉羧酸盐酸盐的熔化，分解特性，溶解度与离子强度，温度和pH值的关系，并测定了该物质的离解常数，估算了该物质在水溶液中的活度积。     

以1—（2，4，7—三硝基）芴基—2，6—二甲基苯胺为电子传输材料的单层结构有机光导体的研究

系统地研究了在由1－（2，4，7－三硝基）芴基－2，6－二甲基苯胺（DMT－NF），4－（二乙氨基）－苯甲醛－1，1－二苯基腙（DEH）和Y晶型氧肽酞菁（Y－TiOPc)或非金属酞菁（H2Pc)构成的单层结构有机光导体的性能，考查了电荷产生材料（CGM）浓度、电场强度和CGM的种类对光导体静电照相性能的影响。研究结果表明，光导体的量子收率和感光度与CGM浓度有很大关系，正充电时随CGM的浓度的增加而增加，负充电时随CGM的浓度增加而降低。两种光导体在近红外光谱区表现出良好的光敏性，适合LD扫描成像。Y－TiOPc光导体的最高峰在780nm处，半衰曝光量为0.588μJ/cm^2（正充电），0.828μJ/cm^2(负充电）；H2Pc光导体正充电最高峰在800nm处，半衰曝光量为1.50μJ/cm^2，负充电最高峰在820nm处，半衰曝光量为1.97μJ/cm^2。     

应用单克隆抗体分析β_2微球蛋白抗原决定簇

应用一株T淋巴母细胞CEM免疫BALB／c小鼠后，取脾细胞与SP2／O职合，分别筛选出3株分泌抗β_2-微球蛋白（β_2－m）单抗细胞株，它们的反应性均能被纯化的可溶性β_2-m完全抑制，但D_(11)E_3、H_5B_2两种单抗既能与游离的β2m反应，亦能与细胞膜表面HLA-β_2－m复合物反应，它们识别相同或者权相近的抗原决定簇。相反，D_8E_3抗体不与细胞膜表面抗原反应，经抗体竞争实验及加成实验，均证实D_8E_3抗体所识别的抗原决定簇，与D_(11)E_3、H5B2不同。推测在细胞膜表面，D_8E_3抗体所识别的抗原决定簇可能被HLA重链相关区域所覆盖。     

1—羟乙基—2—苯并咪唑氨基甲酸甲酯和1—乙基（2‘—丙烯酸酯—1’—基）—2—苯并咪唑氨基甲酸甲酯的合成及用薄层一紫外分光光度法测定其含量

1－乙基（2‘－丙烯酸酯－1‘－基）－2－苯并咪唑氨基甲酸甲酯是合成多菌灵高分子化学型缓释剂的重要单体。本文报道了1－乙基（2‘－丙烯酸酯－1‘－基）－2－苯并咪唑氨基甲酸甲酯及其制备过程中的中间体－1－羟乙基－2－苯并咪唑氨基甲酸甲酯的合成和分析方法。     

糖基化磷脂酰肌醇锚定型人B7-1基因重组蛋白锚定自体肿瘤细胞膜提高抗肿瘤免疫反应的实验研究

目的研制抗肿瘤免疫治疗的新疫苗。方法用含目的基因的质粒pcDNA3-GPI-B7-1转染CHO/DHFR+细胞,提取膜蛋白GPI-B7-1,经Western blot鉴定后,用蛋白转化法锚定在肿瘤细胞膜上,免疫C57BL/6小鼠后,取小鼠脾细胞进行T细胞扩增和CTL功能检测,并检测细胞培养液和小鼠血清中IL-2、TNF-α和IFN-γ水平。结果用GPI-B7-1修饰的肿瘤细胞膜免疫小鼠后可诱发肿瘤特异性T细胞扩增和CTL活性增强,细胞培养液中细胞因子检测为阳性。结论该疫苗能激发小鼠的免疫功能,具有一定的保护小鼠免受肿瘤细胞侵袭的作用。     

消旋联苯胺的氧化偶合法合成

通过2－萘胺的直接氧化偶合法制备了1，1′－联苯－2，2′－二胺，收率中等，较文献方法有了一定的距离，而且操作简便，适于大量制备。     

2′,4′-二氟-4-羟基-(1,1′-联苯)-3-羧酸的制备

以2，4－二氟苯胺为起始原料，经联苯化作用，Friedel-Crafts酰化反应、Baeyer-Villiger重排、水解和羧基化作用5步反应制得2′，4′－二氟－4－羟基－（1，1′－联苯）－3－羧酸，总收率可达38．4％。     

7-乙基-α-氧代-1H-吲哚-3-乙酸乙酯的合成

7－乙基－α－氧代－1H－吲哚－3－乙酸乙酯是新型消炎镇痛药──依托度酸的一个重要中间体。本文以邻硝基乙苯为原料，经过还原、Sandmeyer反应、环合、还原、SPceter－Anthony法五步合成了该化合物。     

LFA-1基因对胶原诱导小鼠关节炎关节局部引流淋巴结T细胞活性的影响

目的探讨淋巴细胞功能相关抗原1(LFA-1)在类风湿性关节炎形成中的作用。方法采用Ⅱ型胶原诱导小鼠关节炎模型,观察LFA-1基因敲除小鼠引流淋巴结T细胞增殖和细胞因子水平。结果LFA-1基因敲除小鼠在应用Ⅱ型胶原免疫后,引流淋巴结和关节局部Th1型细胞因子IFN-γ和IL-12p40mRNA水平明显低于野生型对照小鼠,Th2型细胞因子IL-4mRNA水平无明显变化。LFA-1基因敲除小鼠引流淋巴结来源的CD4+T细胞在体外受Ⅱ型胶原刺激后,其特异性增殖和细胞因子IFN-γ的产生也明显低于野生型对照小鼠。结论LFA-1基因缺失抑制了辅助性T细胞的活化和向Th1方向的分化,进而抑制关节炎的发生。     

B113-2/B205-1型一氧化碳变换催化剂应用总结

总结辽河牌B113－2／B205－1型一氧化碳变换催化剂的性能特点、工业应用、运行评价及使用时应注意事项。     

B117-1型催化剂在中变串低变工艺中应用效果浅析

介绍该厂在中串低和中低低两套流程中使用B117－1型中变催化剂的应用情况。该厂自1990年始采用沙市催化剂厂生产的B117－1型中变催化剂，效益显著：1）吨氨蒸汽耗量＜150kg，当控制中变出口CO在2．5％时（生产甲醇）吨氨蒸汽消耗则不足30kg；2）使用周期长，一般在3．5～4．0年。