大豆肽超滤分离纯化过程的研究

用板框型超滤器以全回流的方式对大豆肽粗品进行处理 ,通过测定不同浓度的大豆肽溶液在不同循环时间内滤出液的膜通量变化及截留液中固形物的含量 ,对超滤膜效能及其选择性进行了评价和分析。试验结果表明 ,超滤技术不仅能直接从发酵产物中分离出纯度较高的大豆肽 ,而且可以作为一种检测手段用来分析发酵产物中组分的相对分子质量分布     

远东拟沙丁鱼抗氧化肽的分离纯化及结构解析

通过动物蛋白酶和风味酶联合水解,采用超滤等膜分离技术制备远东拟沙丁鱼蛋白多肽,得到不同分子质量区间的多肽样品F1(100～3000 u)、F2(3000～10000 u)和F3(大于10000 u).以DPPH、ABTS和羟基自由基清除能力为检测指标,测定各组分的抗氧化活性,结果显示:组分F1的抗氧化活性最强.进一步对...     

花生降血压肽的超滤分离研究

采用超滤技术对花生降血压肽进行分离,一级超滤用截留分子量为5000的超滤膜,二级超滤用截留分子量为1000的超滤膜。研究了操作压力、料液浓度和操作温度对超滤过程的影响。结果表明:一级超滤的最适操作条件为操作压力174Pa,料液浓度5%～7.5%,操作温度35℃;二级超滤的最适操作条件为操作压力209Pa,料液浓度7.5%,操作温度40℃;经超滤分离后,分子量小于1000的短肽降血压活性非常突出,IC50达到0.4mg/mL。     

超滤法分离纯化酪蛋白糖巨肽的研究

酪蛋白糖巨肽(Casein glycoma cropeptide,简称CGMP)是蛋白酶酶解κ-酪蛋白得到的C末端亲水性糖肽,具有多种生理功能。研究了超滤法分离纯化CGMP的条件,得到超滤的最佳条件是在室温下,压差为0.02MPa,浓缩比为8。通过此方得到了比较纯的CGMP,蛋白回收率为1.77%,糖基化程度(唾液酸/蛋白质)为70.1μg/mg,并且此方法适用于工业化生产。     

超滤法分离牛初乳中免疫球蛋白IgG

用实验级切向流浓缩纯化系统装置以梯度洗脱方式对牛初乳中的免疫球蛋白IgG乳清液进行分离浓缩,及SDS-聚丙烯酰胺电泳检测分离后的纯度,并同SephadexG-200层析后的IgG纯度进行比较分析。实验结果显示,梯度洗脱方法中超滤膜对牛初乳中的免疫球蛋白IgG具有分离纯化作用。超滤技术可以作为一种分离纯化牛初乳免疫球蛋白的有效手段。      

超滤法分离牛初乳中免疫球蛋白IgG

用实验级切向流浓缩纯化系统装置以梯度洗脱方式对牛初乳中的免疫球蛋白IgG乳清液进行分离浓缩,及SDS-聚丙烯酰胺电泳检测分离后的纯度,并同SephadexG-200层析后的IgG纯度进行比较分析。实验结果显示,梯度洗脱方法中超滤膜对牛初乳中的免疫球蛋白IgG具有分离纯化作用。超滤技术可以作为一种分离纯化牛初乳免疫球蛋白的有效手段。     

超滤在大豆多肽分离纯化中应用

本试验应用超滤技术对大豆多肽进行分离,研究了超滤系统几个主要参数对膜通量的影响。研究结果表明:截留分子量30000Da的超滤膜应在压力0.12MPa、温度40℃、pH值7.0下运行40min为一个周期,膜通量为19L/m2·h左右;截留分子量10000Da的超滤膜应在压力0.10MPa、温度<45℃、自然pH值下运行60min为一个周期,膜通量为25L/m2·h左右;截留分子量5000Da的超滤膜应在压力0.10MPa、温度<45℃、自然pH值下运行80min为一个周期,膜通量为22L/m2·h左右;经分离得到分子量>30000Da的大豆多肽约占13.21%,分子量10000～30000Da的大豆多肽约占4.05%,分子量5000～10000Da的大豆多肽约占6.41%,分子量<5000Da的大豆多肽约占76.11%。     

食源性抗氧化肽分离纯化方法研究进展

食源性抗氧化肽是以食用蛋白质为原料经过酶解制备的具有抗氧化活性的肽。近几年来,食源性抗氧化肽因为具有分子质量小、结构简单、易于人体吸收、抗氧化活性高、在不同环境条件下稳定性强等特点,逐渐成为一种安全有效的抗氧化剂。分离纯化是获得较纯的食源性抗氧化肽的重要的一步,本文综述了几种抗氧化肽的分离纯化的方法,分别介绍了大孔树脂法,膜分离技术,色谱法,毛细管电泳法,质谱法,阐述了其在提高食源性抗氧化肽纯度方面的优缺点。未来,食源性抗氧化肽的分离纯化将是食品科学领域发展的重要研究方向。     

藜麦糠抗氧化肽的超滤分离及其体外抗氧化活性

为了大批量生产抗氧化活性最好的藜麦糠抗氧化肽,采用风味酶与碱性蛋白酶组合对藜麦糠蛋白进行酶解,制备酶解液。利用超滤技术分离纯化藜麦糠抗氧化肽,并评价分离得到的不同分子质量段抗氧化肽的体外抗氧化活性,优选出抗氧化活性最好的抗氧化肽。以膜通量为指标,压力、时间和滤液质量分数为3个工艺参数,通过单因素和正交实验,探究超滤分离截留分子量为10 ku的藜麦糠抗氧化肽的最佳工艺条件。结果表明,不同分子量段的超滤组分具有不同的抗氧化活性,其中分子量为5~10 ku的抗氧化肽较其他分子量范围的超滤组分的抗氧化活性最好。藜麦糠抗氧化肽的最佳超滤条件为压力0.16 MPa,时间20 min,滤液质量分数2%,在此条件下得到膜通量为(41.22±0.50) L/m²·h。由此可实现5~10 ku的抗氧化肽的大量生产。     

猪骨免疫活性肽的分离纯化

为了从猪骨中分离纯化出免疫活性肽,使用超滤、sephadex G-25凝胶层析、SP-sephadex C-25离子交换层析等手段对鲜猪骨的Alcalase碱性蛋白酶的酶解液进行分离纯化,采用MTT法测定各分离产物对小鼠脾淋巴细胞的增殖活性。结果显示:猪骨酶解液经超滤分离获得的分子质量小于2 ku的组分对小鼠脾淋巴细胞增殖率最高;对分子质量小于2 ku的组分采用凝胶过滤层析,对层析后活性最高的组分再进行离子交换层析,最终得到的组分质量浓度为100μg/m L时,对小鼠脾淋巴细胞的增殖率为114.30%。     

超滤法分离酪蛋白酶解物中的ACE抑制肽

采用不同截留分子质量的超滤膜对酪蛋白酶解物中ACE抑制肽进行初步分离,确定了超滤的条件,并测定超滤前后酶解物的ACE抑制活性。结果表明,截留分子质量为10 ku和3 ku的超滤膜能不同程度地提高酪蛋白酶解物的ACE抑制活性,但3 ku的超滤膜能更有效地提高其ACE抑制活性,并且超滤液半抑制浓度值(IC50)为0.46 mg/mL。证明超滤技术可作为一种分离ACE抑制肽的手段。     

D-塔格糖的分离纯化

以化学法合成的D-塔格糖为原料,采用Ca~(2+)型离子交换层析、阴阳离子交换树脂脱盐脱色的方法分离纯化D-塔格糖。Ca~(2+)型离子交换柱层析条件为;柱温70℃,流速1.0 mL/min,进样体积20 mL,D-举格糖回收率达到了83%,纯度达到98%。经强酸性阳离子和弱碱性阴离子交换树脂一次串联脱盐脱色,脱盐率达93%,D-塔格糖回收率为87%。将分离得到的样品浓缩、乙醇结晶获得晶体。通过红外光谱分析,结果表明,分离纯化后的产物是D-塔格糖。     

大蒜降压肽的制备及超滤分离

为了研究大蒜降压肽的酶解制备与超滤分离工艺,采用响应面法优化制备工艺,酶解后利用超滤技术获得不同分子量范围的组分并进行ACE抑制活性评价。最佳制备工艺为碱性蛋白酶处理、温度50℃、pH11、底物浓度45 g/L、酶底比3%、酶解时间1 h,该条件下ACE抑制率为83.91%±0.13%,半抑制浓度为(157.87±0.44)μg/mL。分子量3 kDa以下部位活性最为显著(P<0.05),优化后的超滤工艺为操作压力0.25 MPa,温度25℃,溶液浓度4%,此时3 kDa超滤膜的膜通量为7.32 L/(m²·h),ACE的半抑制浓度为(63.27±0.25)μg/mL。氨基酸分析结果表明酸性氨基酸、疏水性氨基酸及天冬氨酸、谷氨酸含量较高,分别为35.78、32.86、21.66、14.12 mg/100 mL,分子量分布显示2000~2500 Da部分最为丰富,占比为49.50%。本研究为大蒜蛋白的开发利用提供了新的思路,具有一定的理论水平和实际应用价值。     

聚酰胺分离纯化茶黄素类物质研究

本实验利用聚酰胺分离茶黄素类,研究发现其最佳的分离条件为:上样量250mg/50ml聚酰胺,上样浓度20%,洗脱剂为甲醇:氯仿:丙酮:冰醋酸=3:5:8:0.5,等度洗脱,流速0.6BV/h。得到TF、TF-3’-G两个组分,含量分别为93%、85%。这是一种简单、有效的茶黄素类分离方法。     

麦麸多肽的分离纯化及抗氧化功能研究

采用碱性蛋白酶Alcalase 水解麦麸蛋白制备麦麸多肽,利用SephadexG-25 和DEAE-32 对麦麸多肽进行纯化,醋酸纤维素薄膜电泳法测定麦麸多肽纯度,用硝基四氮唑蓝(NBT)还原实验、脱氧核糖法检测其对超氧阴离子自由基(O2·)和羟自由基(·OH)的清除能力,分光光度法测定小鼠红细胞溶血和肝线粒体膨胀程度。结果表明,分离纯化的麦麸多肽对O2·和·OH 的清除率别为53.16%、62.39%,并且具有明显抑制氧化溶血现象和·OH 诱导线粒体肿胀的作用,说明麦麸多肽具有较强的抗氧化功能。     

黄粉虫抗氧化活性肽的分离纯化研究

为制备具有抗氧化活性的黄粉虫生物活性肽,采用双酶水解黄粉虫蛋白粉,对酶解产物进行葡聚糖SephadexG-25 凝胶柱层析和阳阴离子交换柱层析分离纯化,并对其各组分分子量分布及其抗氧化性进行研究,对抗氧化活性最佳的肽段进行氨基酸组成分析。结果显示,纯化得到的抗氧化多肽对羟自由基和超氧阴离子自由基具有很强的清除作用,清除率可分别达到74.20% 和87.32%。     

发酵芝麻粕中芝麻小肽的分离纯化及其体外抗氧化活性

研究芝麻粕固态发酵过程中产生的小肽的抗氧化活性。从发酵芝麻粕中提取活性小肽,通过SephadexG-15分离纯化,得到3个分子质量不同的小肽,经测定分别是三肽、四肽、六肽。分别测定其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的活性、用水杨酸法测定其清除羟自由基(·OH)的活性、用铁离子还原法测定其的总还原力。1mg/mL小肽粗提液、三肽和四肽的DPPH自由基清除率为90%,六肽为80%;0.6mg/mL三肽和四肽的·OH清除率均达到100%,而小肽粗提液和六肽为90%;4mg/mL的小肽粗提液、四肽、六肽和2mg/mL三肽的总还原力相当于0.5mg/mL谷胱甘肽。结果表明:固态发酵芝麻粕中的小肽具有较强的还原力,对DPPH自由基和·OH均具有较强的清除作用,且抗氧化性随着小肽分子质量的降低而增强。     

丁二酸发酵液的膜分离过程研究

通过微滤、超滤等膜分离技术对丁二酸发酵液进行了分离纯化,考察了温度、压力差、pH值、循环流速等因素及操作方式对丁二酸分离的影响。丁二酸发酵液经稀释后可直接进行微滤操作,微滤的优化工艺条件为:pH5.0,40℃,△P=0.03MPa,循环流速0.71m/s,采用间歇反冲可降低膜污染程度,维持较高通量;微滤除菌率达99.6%,蛋白质去除率87%,脱色率92%。将得到的微滤液在20℃,pH5.0,△P=0.05MPa,0.83 m/s循环流速下进行超滤,滤液透光率≥60%,蛋白质质量浓度仅5mg/L。经2步膜分离,蛋白质去除率达99.45%,丁二酸收率达93%。