猪骨呈味物质提取的研究(I)——酶解猪骨最佳工艺条件

本实验对猪骨酶解前的热处理和超声波预处理等前处理方法及木瓜蛋白酶和胰蛋白酶双酶水解猪骨工艺进行了研究。结果表明:猪骨热处理的最佳条件为温度90℃,时间10min;猪骨超声波预处理最佳反应条件是:总超声时间为10min、超声波功率为400W。猪骨酶解前经热处理后,水解度和氮收率分别提高了30.84%、10.99%;经超声波预处理后,水解度和氮收率分别提高了84.57%、66.45%;因此,超声波预处理要明显比热水预处理好。试验确定最佳的双酶水解工艺条件为底物浓度15%、E/S6000U/g、酶解时间4h、酶解温度50℃、酶解pH值7.5、木瓜蛋白酶量:胰蛋白酶量1:1。在确定的最佳条件下对猪骨进行超声波预处理和双酶水解,水解度为25.99%、氮收率为66.35%。     

猪骨蛋白生物活性肽酶法制备工艺的研究

为充分挖掘骨蛋白资源及开发具有保健功能的高附加值骨蛋白深加工产品,本实验以猪骨为原料,以猪骨蛋白质为研究对象,确定了蒸煮猪骨提取骨蛋白的最佳条件为:温度121℃,压力0.1MPa,时间4h;骨蛋白酶解预处理的最佳条件为:温度121℃,压力0.1MPa,时间30min。在此基础上本实验采用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶及AS1.398中性蛋白酶3种食品级内切蛋白酶对猪骨蛋白进行酶解,以水解度为评价指标,筛选出木瓜蛋白酶为最佳水解用酶,其水解产物具有较高的生物活性肽含量,并通过单因素实验得出其最佳水解条件为:时间5h,底物浓度9%,pH7.0,加酶量8000U/g,温度55℃。     

分步酶解猪骨粉提取猪骨素的工艺研究

本文以三氯乙酸可溶性氮(SN-TCA)的含量与水解度(DH)为测定指标,研究了中性蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶复配后与风味蛋白酶分步酶解猪骨粉的工艺,优化了复合酶的最佳配比和酶解工艺参数。研究结果表明,第一步酶解三种酶的最佳配比为中性蛋白酶添加量5000 U/g、胰蛋白酶添加量4420 U/g和木瓜蛋白酶添加量3000 U/g,此时所得SN-TCA的最大含量为52.6%;复合酶最优的酶解工艺参数为酶解温度43.4℃、酶解时间6 h、pH 7.6、加酶量0.31%、料液比1:5.4,此时SN-TCA含量最高为55.42%;第一步酶解液灭酶后进行第二步酶解,保持体系料液比和pH不变,加入风味酶酶解温度为45℃、酶解时间为4 h、加酶量为0.4%,此时酶解效果最好,水解度可达到13.71%。     

复合酶解可溶性蛋膜蛋白制备多肽的工艺优化

为研究蛋膜蛋白的利用,采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶及胃蛋白酶进行单一酶解筛选实验,然后进行复合酶解实验。采用二次正交旋转组合设计,以水解度、氮收率为指标,研究酶制剂种类、加酶方式、复合酶比例、总加酶量、酶解时间、pH 值及温度对制备多肽工艺的影响。综合考虑水解度和氮收率因素,最终确定复合酶解可溶性蛋膜蛋白制备多肽的最佳工艺条件为：总加酶量16000U/g,并以碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶的酶活力配比为8:2 先后加入;酶解时间为碱性蛋白酶2h、木瓜蛋白酶1h;pH 值为碱性蛋白酶9.0、木瓜蛋白酶5.5;酶解温度为50℃。该条件下制备的蛋膜蛋白酶解产物水解度和氮收率分别为46.12%、85.56%。     

双酶水解法制备羊胎盘活性肽

采用现代生物酶解技术制备羊胎盘生物活性肽 ,以水解度 (DH)和酸溶性肽得率(YASP)为指标 ,在单酶水解的基础上探索更加有效的新工艺———双酶水解工艺。实验确定了木瓜蛋白酶 (Papain)与胰蛋白酶 (Trypsin)的等活力混合酶为水解羊胎盘的最佳双酶组合 ,其最佳酶解工艺条件为 :pH7 0、温度 5 2℃、酶活添加量 3 0 0 0u/ g(料 )、底物浓度 10 %、水解时间 3h ,酶解前最佳热处理条件为沸水浴 15min。     

木瓜蛋白酶酶解猪骨素蛋白工艺的研究

在单因素实验基础上,通过正交实验探讨了木瓜蛋白酶酶解猪骨骨素蛋白的工艺条件.结果显示,在本实验条件下,木瓜蛋白酶酶解猪骨骨素蛋白的最佳工艺为:温度55℃,pH6.5,加酶量10000U/g,料液比1:12.5g/mL,酶解3h,此条件下水解度可以达到16.95%.     

猪骨抗氧化肽的酶解制备研究

本文以水解度和自由基清除率为双指标,较深入地研究了两种蛋白酶在生产猪骨抗氧化肽中的应用特性,结果表明中性蛋白酶比木瓜蛋白酶适合水解猪骨明胶制备抗氧化肽,其最佳酶解工艺参数为:pH7,温度40℃,[E]/[S]=10%,[S]=2%,水解时间4h,该条件下制备的抗氧化肽对O2-·有很强的清除作用,清除率达到83.22%.     

骨肉酶解工艺条件研究

为了进行猪骨肉的综合利用,本实验以猪骨为原料,研究木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶的水解效果以及最适蛋白酶的酶解温度、pH、酶用量、料液比和酶解时间对骨肉蛋白水解度和总氮回收率的影响。结果表明：胰蛋白酶为最佳骨肉水解酶,胰蛋白酶水解猪骨的最佳工艺参数为：酶解时间为5h、酶解温度60℃、pH8、酶用量5000U／g原料、料液比为1：5。     

酶解条件对猪骨浆水解物还原能力及水解度的影响

研究不同的酶解条件对猪骨浆水解物抗氧化能力和水解度的影响。将猪骨用碎骨机和骨泥机制成骨浆,用碱性蛋白酶水解,测定不同底物浓度、酶添加量、p H、温度等条件下猪骨浆水解物的亚铁还原能力和水解度。经过单因素试验最终确定碱性蛋白酶水解猪骨浆的最佳酶解条件为:底物浓度30%、加酶量1.5%、温度55℃、p H9.0、水解时间3 h。在此条件下得到的猪骨浆水解物的FRAP值为625μmol/L,水解度为8.6%。     

酶解罗非鱼鱼骨粉制备可溶性钙的工艺研究

采用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶酶解罗非鱼鱼骨粉,以酶解液中可溶性钙含量、水解度和氮收率为特征性指标,利用L16（54）正交实验设计优化水解鱼骨粉的工艺条件。结果表明：采用胃蛋白酶水解鱼骨粉,效果优于其它三种酶;胃蛋白酶水解鱼骨粉的最佳条件是：pH2.0、料液比1∶3、酶用量0.3%、时间5h、温度37℃;所得酶解液中钙含量为23.68g/L,水解度和氮收率分别达14.07%和56.35%,可溶性氮含量达97.43%,Fe、Zn、Mg、P的含量分别为0.36、3.84、716.67mg/L和10.89g/L。     

猪骨胶原蛋白多肽制备过程中的脱色研究

对猪骨泥进行酶解,探讨酶的种类对酶解效果(水解度和酶解液颜色)的影响.在单酶水解的基础上,探讨复配酶对酶解效果的影响.结果表明:先用风味蛋白酶水解4h,再加入木瓜蛋白酶水解2h,双酶活力比为2:1,此时酶解效果最好.以脱色率和肽氮类物质损失率为考察指标进一步研究酶解液的脱色工艺,较优的脱色条件为添加4%的颗粒状活性炭室温下脱色1.5h,脱色率达到73.29%,肽氮类物质损失率为11.97%.     

超声波辅助酶法水解鱼鳞胶原蛋白的工艺研究

采用超声波辅助木瓜蛋白酶水解鱼鳞胶原蛋白。研究超声波功率和作用时间对酶解反应的影响,应用正交设计优化酶解工艺条件。结果表明,最佳酶解工艺条件为:酶用量4 g/L、温度55℃、pH 5.5,在超声波功率为500 W、作用20 min后,继续酶解5 h。在此条件下,鱼鳞胶原蛋白的水解度为25.6%。与常规酶解方法比较,常规酶解8 h水解度为16.6%。说明超声波对木瓜蛋白酶水解鱼鳞胶原蛋白有促进作用。     

胰酶酶解猪骨素的工艺条件

利用胰酶酶解猪骨素并测定其酶解液的水解度.通过单因素试验确定胰酶水解猪骨素的酶解温度、pH值、酶用量、料液比(底物浓度)及水解时间,在此基础上用正交试验分析酶解的最佳工艺,在本试验条件下,酶解的最佳工艺为在温度45℃,pH7.5,酶用量8750U/g以及料液比1:12.5g/mL条件下酶解3h,此条件下水解度可以达到25.88%.     

超声辅助处理促进鹅血蛋白酶解效果的研究

鹅血蛋白是一种非常宝贵的蛋白资源。实验通过选用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶,在各自合适的作用条件下水解鹅血蛋白,以水解度和三氯乙酸氮溶解指数为测定标准,筛选鹅血蛋白的最适水解酶,然后将超声波技术辅助于酶水解中,促进鹅血蛋白的降解。实验结果表明:木瓜蛋白酶的水解度为7.6%、三氯乙酸氮溶解指数为86.32%,均高于其他2种酶,水解效果最好,所以选用木瓜蛋白酶作为鹅血蛋白的水解酶。然后运用超声波技术分别处理木瓜蛋白酶、酶解底物、以及酶解过程,结果发现超声辅助处理酶解过程的水解效果显著优于超声单独处理酶或者底物。在超声功率为40 W,频率为20 k Hz,超声时间6 min的条件下,水解度提高了4.34%,三氯乙酸氮溶解指数提高了3.48%。     

Protamex复合蛋白酶酶解猪骨的工艺研究

研究并优化采用Protamex复合蛋白酶酶解猪骨的工艺条件。以酶解温度、时间、pH值、加酶量、料液比为因素,以水解度为指标,采用正交试验对酶解工艺参数进行优化。结果表明,利用Protamex复合蛋白酶酶解猪骨的最佳条件是:酶解温度45℃、pH7.0、酶解时间6 h、加酶量0.4%(W/W)、料液比1∶10(W/V)。在此条件下,水解度可达到10.08%。研究结果为工业化猪骨副产物的综合利用提供理论依据和技术支持。     

大豆粕蛋白酶酶解条件和产物分析研究

以水解度为衡量指标,通过正交试验设计,对木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和As1.398蛋白酶酶解大豆粕的最佳水解条件进行了筛选.试验结果表明:木瓜蛋白酶水解大豆粕的最佳条件为pH7.0、温度60℃、时间5 h、酶浓度5%.胰蛋白酶水解大豆粕的最佳条件为pH7.0、温度50℃、时间7 h、酶浓度5%;As1.398蛋白酶水解大豆粕的最佳条件为pH6.5、温度50℃、时间7 h、酶浓度5%.对酶解产物进行超滤和SDS-PAGE电泳分析表明,因酶解条件不同,大豆粕酶解产物中蛋白质和肽的组成及其数量也不同;酶的种类不同,大豆粕酶解产物组成也不同;大豆粕水解度越高,其酶解产物中小分子肽数量越多.     

木瓜蛋白酶制备草鱼鳞胶原肽的工艺优化及产物特性分析

以草鱼鱼鳞为对象,研究木瓜蛋白酶酶解条件对鱼鳞蛋白酶解产物水解度和氮收率的影响,以获得较高氮收率及水解度的鱼鳞胶原肽。结果表明,水解温度、起始pH值、底物浓度和加酶量对木瓜蛋白酶水解产物的水解度和氮收率都有显著影响(p<0.05);木瓜蛋白酶在底物浓度为5%、起始pH值为5.0、加酶量为3000 U/g蛋白、水解温度为60℃条件下水解鱼鳞120 min,鱼鳞水解产物的水解度和氮收率都较好,其水解度为12.68%、氮收率为89.42%;且水解产物在酸性、中性及碱性条件下的溶解性均在97%以上,分子量呈连续分布,主要分布在200～ 5000 u之间。     

超声预处理双酶分步水解制备滑菇抗氧化肽

研究超声预处理双酶分步水解滑菇蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,为滑菇蛋白高附加值产品的开发提供理论依据。以羟自由基(·OH)清除率为指标,单因素试验研究功率、温度、时间等超声预处理参数对碱性蛋白酶水解效果的影响。从中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶等4种酶中筛选第二步水解的最适酶,通过正交试验优化其水解工艺。结果表明,超声波预处理的最佳工艺参数为:功率300 W、温度40℃、时间20 min,碱性蛋白酶水解产物的·OH清除率最高,为86.15%。风味蛋白酶作为第二步水解的最适酶,各因素对·OH清除率的影响程度依次为:水解时间酶浓度p H温度,其最佳水解工艺条件为:酶浓度3 000 U/g、p H 7.0、温度55℃、水解时间1.5 h。在此条件下,水解产物·OH清除率为93.17%。超声波预处理双酶分步水解滑菇蛋白制备抗氧化肽的工艺可行。     

贻贝酶解物对羟自由基清除作用的试验研究

通过测定贻贝酶解物对离体实验系统（Fenton体系）产生的羟自由基的清除效果，从胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶3种酶中筛选出木瓜蛋白酶和胰蛋白酶作为酶解贻贝制备具有较高清除羟自由基活性酶解物的理想水解酶；并通过正交实验L9（3^4）对2种酶的水解条件进行优化。结果表明木瓜蛋白酶在温度60℃、酶解时间15min、DH7．5、酶质量分数1．00％的水解条件下，酶解物对羟自由基的清除效果最佳；胰蛋白酶在温度45℃、酶解时间35min,pH8，5、酶质量分数0．75％的水解条件下，酶解物对羟自由基清除效果最佳。木瓜蛋白酶酶解物在最大洗脱峰时有最大羟基自由基清除率峰，清除率为76．15％，在最大峰处酶解物中活性肽的分子量为1．4kDa；胰蛋白酶酶解物在最大洗脱峰时也有最大羟基自由基清除率峰，其清除率为69．13％，该峰处活性肽的分子量也为1．4kDa。     

贻贝酶解物体外抗氧化试验研究

为了鉴定世界食品产品中受到很高评价的海洋生物的抗氧化性,研究了贻贝的抗氧化性。通过测定酶解物的抗氧化性,从胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶3种酶中,筛选出木瓜蛋白酶和胰蛋白酶作为酶解贻贝制备具有较高抗氧化性酶解物的理想水解酶,用正交试验L9(34)对2种酶的水解条件进行了优化。结果表明,木瓜蛋白酶在温度60℃、酶解时间15min、pH7.5、酶质量分数1.00%的水解条件下,酶解物的抗氧化性最好;胰蛋白酶在温度50℃、酶解时间60min、pH8.5、酶质量分数0.75%的水解条件下,酶解物的抗氧化效果最佳。