牛血清蛋白的超滤提取工艺研究

采用超滤技术提取牛血中的血清蛋白,主要研究了超滤液温度、超滤压力、超滤液pH和超滤时间对牛血清蛋白提取时膜通量、提取率和得率的影响。实验结果表明,超滤技术可应用于牛血清蛋白的提取,其最佳提取工艺参数为超滤液温度30℃,超滤压力0.1MPa,超滤液pH6.5,超滤时间20min,在此提取工艺参数条件下提取牛血清蛋白时,膜通量达54.58L/m2.h,牛血清蛋白提取率达98.13%,得率达24.09g/L。      

银杏渣多糖的提取及超滤工艺研究

以银杏渣为原料,通过单因素和正交试验探讨多糖提取工艺中温度、时间、料液比和提取次数等因素对提取效果的影响。确定了最佳工艺条件：纯水为溶剂。料液比1：20,100℃回流提取3次,每次2h．多糖提取率达5．97％。采用超滤技术纯化多糖提取液,研究了不同分子质量超滤膜、超滤压力和料液温度对超滤的影响,结果表明：以相对分子质量2万的超滤膜在0．05MPa下,对25℃的多糖提取液超滤10min,即可使提取液得到明显浓缩．Sevag法除去浓缩液中蛋白质可得到纯度51．42％的银杏渣多糖。     

超滤法在番木瓜提取木瓜蛋白酶工艺中的应用研究

采用超滤对番木瓜中木瓜蛋白酶粗液进行提取,并通过紫外法测定其酶的活性。研究分析了各种影响因素并确定出几组最佳工艺参数,结果表明：在提取工艺中,L-cys和EDTA添加量分别为0.06 mol/L和0.002 mol/L时对木瓜蛋白酶活性能起到最佳保护作用,操作压力、温度及时间分别为0.175 MPa、60℃及5 min时能获得最佳提取效果。     

超滤法提取橙皮苷工艺研究

采用超滤法分离柑橘皮提取液中的橙皮苷,研究了跨膜压差、温度、流速、体积浓缩比对膜通量的影响和不同清洗剂对膜通量的恢复情况,从而确定了最佳的超滤工艺和膜清洗方法.结果表明:截流分子量为30kD的聚丙烯腈膜在超滤压力为0.25MPa,温度为35℃,进料流速为80L/h,体积浓缩比为3.4时,膜渗透通量相对较高;经结晶后,可得到纯度在85%以上的橙皮苷;先后利用0.1%HCl和0.1%NaOH洗涤超滤膜效果最好.     

超滤法提取大豆低聚糖的研究

本研究采用调酸、加金属盐和加热方法沉淀大豆乳清蛋白,大豆乳清预处理工艺参数为ｐＨ４．３,ＣａＣｌ浓度３％～５％,加热温度为８０℃～９０℃,加热时间为２０ｍｉｎ,该处理过程蛋白质沉淀率为８５．２０％,大豆低聚糖的保存率为９１．２４％。经预处理的大豆乳清采用截留分子量为１００００的膜超滤,超滤压力ｐ：３．０ｐｓｉ～４．５ｐｓｉ,超滤温度：４０℃～５０℃,蛋白质的截留率为８７．３２％,大豆低聚糖的截留率为８．９１％。     

鸡血清蛋白的提取及其乳化性初探

目的:借助正交设计,确立鸡血清蛋白提取的最优工艺,同时研究其乳化性。方法:以鸡血离心后的血清为原料,比较了pH、硫酸铵添加量、正辛酸钠添加量对鸡血清蛋白提取的影响。结果:以沉淀质量为指标,正交实验的最优条件是pH4,硫酸铵添加量0.35g/mL,正辛酸钠添加量为0.0068g/mL,测定其乳化能力(EC)值为0.52,乳化稳定性(ES)值为0.48。同鸡蛋清蛋白、大豆蛋白相比较,血清蛋白的色泽气味、质地形态较差,发泡性能良好,乳化性能一般。结论:鸡血清蛋白的提取及其乳化性研究为鸡血的综合深加工开辟一条可行之路。     

鸡血清蛋白的提取及其乳化性初探

目的:借助正交设计,确立鸡血清蛋白提取的最优工艺,同时研究其乳化性。方法:以鸡血离心后的血清为原料,比较了pH、硫酸铵添加量、正辛酸钠添加量对鸡血清蛋白提取的影响。结果:以沉淀质量为指标,正交实验的最优条件是pH4,硫酸铵添加量0.35g/mL,正辛酸钠添加量为0.0068g/mL,测定其乳化能力(EC)值为0.52,乳化稳定性(ES)值为0.48。同鸡蛋清蛋白、大豆蛋白相比较,血清蛋白的色泽气味、质地形态较差,发泡性能良好,乳化性能一般。结论:鸡血清蛋白的提取及其乳化性研究为鸡血的综合深加工开辟一条可行之路。      

超滤法浓缩提取菠萝蛋白酶机理研究

从溶质分子传递机制出发，对超滤法浓缩提取菠萝蛋白酶过程中，透过通量和酶失活率与膜材料、截留率、压力差、循环速度、分子扩散系数及分子半径等的关系进行了详细研讨，建立了一套数学模型。     

牛血清蛋白涂膜保鲜圣女果和小黄瓜的研究

以牛血清蛋白为主要原料对圣女果和小黄瓜进行涂膜保鲜实验,在20～25℃下测定果蔬的失重率,烂果率,维生素C、总叶绿素、总类胡萝卜素含量以及可溶性固形物含量.结果表明:涂膜处理对圣女果和小黄瓜具有良好的保鲜效果,能够明显抑制果蔬营养物质的消耗,降低失水、烂果率,抑制其呼吸强度,货架期分别达到15 d和10 d.     

牛血清蛋白对纤维素酶水解小麦秸秆的影响

在以分别被稀硫酸和氢氧化钠处理的小麦秸秆为底物进行纤维素酶解时添加牛血清蛋白（BSA）来评估BSA对酶解的影响,当接入纤维素酶40Ug秸秆,添加牛血清蛋白0.04g时,反应48h,还原糖得率分别提高30%和22%,添加牛血清蛋白后酸处理的秸秆水解速率更快,酶解液中酶失活趋势减小,以滤纸为底物测定纤维素酶活力时添加牛血清蛋白能将酶活提高1倍以上,从而推断牛血清蛋白可以提高纤维素酶的稳定性并减少酶因吸附木质素而失活,提高酶的水解效率。     

超声波处理对牛血清白蛋白结构和乳化性的影响

采用圆二色谱（CD）、聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）、8-苯胺-1-萘磺酸（ANS）荧光探针及紫外（UV）光谱研究了不同超声强度和处理时间对牛血清白蛋白（BSA）结构和乳化性的影响。结果表明:超声波处理对BSA的一级结构无明显影响,但对其二级结构、三级结构有显著影响（p<0.05）。经过超声处理后,BSA中的α-螺旋明显降低、β-折叠含量明显增加、无规则卷曲总体上无显著变化（p>0.05）,β-转角含量随功率的增加而增大、随超声时间的延长先增加后减小,内源性荧光强度、表面疏水性及乳化性均随超声处理强度和时间的延长呈先增加后降低的趋势,当超声功率为240 W/cm²、超声时间为10 min时,乳化活性（EAI）和乳化稳定性（ESI）达到最大。这表明,超声波处理是一种潜在改变BSA结构与乳化性的方法,同时也为超声处理在乳化蛋白时对蛋白的改性机理提供理论依据。      

分子对接模拟与光谱法研究没食子酸丙酯和牛血清白蛋白的相互作用

运用荧光光谱法、紫外吸收光谱法等方法对没食子酸丙酯（PG）与牛血清白蛋白（BSA）之间的相互作用进行了研究。荧光猝灭计算结果表明PG与BSA间的结合作用较强,猝灭机制为静态猝灭,测得其299 K时的结合常数KA为1.03×105L·mol-1,两者的作用距离为1.71 nm。热力学参数计算结果表明PG与BSA相互作用力主要为范德华力与氢键作用力。通过探针分子取代反应确定了PG在BSA上的结合位点是亚级结构域IIA。圆二色谱的测定结果表明PG的结合导致了蛋白中α-螺旋结构的减少以及无规则卷曲的增加。本文最后通过计算机模拟分子Dock的方法模拟出了PG与BSA的结合构象,所得到的结合参数与之前的计算结果相符。      

纤维素金属螯合亲和膜的制备及其对牛血清白蛋白的吸附研究

以纤维素分析滤纸为载体、环氧氯丙烷(EPI)为交联活化剂、亚氨基二乙酸(IDA)为配基、铜离子为金属螯合离子,可制得Cu2 -IDA型固定化金属螯合膜。实验表明,滤纸先用4mol／L的NaOH浸润45min,再在75℃水浴中活化反应45min,所得亲和膜环氧基密度可达3.97μmol／cm2。最佳配基偶联反应条件为:25mgIDA／cm2膜、60℃、15h时可获得对Cu2 最大螯合量。牛血清白蛋白(BSA)等温吸附线基本符合Langmuir形式,经曲线拟合得最大吸附量为59.52mg/g干膜。     

苦味酸与牛血清蛋白相互作用的光谱研究

运用荧光和紫外光谱法并结合分子模拟技术研究了人体生理条件下苦味酸(Picric acid,简称PA)与牛血清白蛋白(BSA)的结合作用。实验结果表明,苦味酸对BSA的荧光猝灭作用较强,该猝灭属于生成复合物的静态猝灭。根据实验结果求得了不同温度下苦味酸与牛血清白蛋白结合作用的结合位点数和结合常数。根据van’t Hoff方程计算出的热力学参数,确定它们之间的相互作用力由以氢键和范德华力为主转变为以疏水作用力为主。根据Foster非辐射能量转移理论,求得苦味酸在距色氨酸残基距离3.14nm的位置与BSA结合。三种探针竞争标记药物实验表明,苦味酸主要结合在BSA上site I位点,分子模拟证实了该结合位点。同步荧光光谱结果表明苦味酸的加入使BSA的构象发生了变化。      

Improvement of functional properties of bovine serum albumin through phosphorylation by dry-heating in the presence of pyrophosphate

ABSTRACT:  Bovine serum albumin (BSA) was phosphorylated by 2 methods. One is dry-heating in the presence of pyrophosphate, and the other is conjugation with maltopentaose through the Maillard reaction and subsequent dry-heating in the presence of pyrophosphate. The phosphorus content of BSA was increased to approximately 0.45% by dry-heating at pH 4.0 and 85 °C for 5 d in the presence of pyrophosphate, and approximately 0.91% by glycation and subsequent phosphorylation. The circular dichroism spectra showed that the change of secondary structure in the BSA molecule by phosphorylation was mild. However, tryptophan fluorescence intensity of BSA decreased by phosphorylation. The differential scanning calorimetry thermograms of BSA showed a disappearing of the 1st peak and a lowering of the 2nd peak denaturation temperature by phosphorylation. These results indicated molten (partially unfolded) conformations of BSA formed by both phosphorylation methods. The functional properties of BSA such as heat stability and calcium phosphate solubilizing ability were improved by phosphorylation alone and further by phosphorylation after glycation. Transparent gels of BSA with relatively high water-holding capacity were obtained by phosphorylation alone, and the immunogenicity of BSA was reduced significantly by glycation and phosphorylation, respectively.     

Effect of gamma-irradiation on the molecular properties of bovine serum albumin

To investigate the effect of oxygen radicals on the molecular properties of bovine serum albumin (BSA), the secondary and tertiary structures, molecular weight and optical anisotropy of BSA were examined after the irradiation of the protein at various doses. gamma-Irradiation of the protein solution caused the disruption of the ordered structure of protein molecules as well as degradation, cross-linking and aggregation of polypeptide chains. Fluorescence spectroscopy indicated that irradiation quenched the emission intensity excited at 280 nm. Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) indicated that irradiation caused transformation from beta-turns into beta-sheets. A light scattering study showed that increasing the radiation dose decreased the molecular weight of the protein. Optical anisotropy data showed that radiation changed the ordered structure of the protein. Ultraviolet absorption spectroscopy indicated that fragmentation and aggregation might occur in response to radiation exposure.     

牛血清白蛋白与不同糖美拉德反应体系的荧光光谱学研究

目的本文研究了牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)与不同单糖(木糖、葡萄糖、半乳糖)和双糖(乳糖、麦芽糖)美拉德反应体系的荧光特性。方法首先将BSA与不同糖按摩尔浓度比1:667混合于磷酸盐缓冲溶液(p H 7.4)中,在50℃加热7 d后得到BSA与不同糖的美拉德反应体系;进一步用三维荧光光谱及同步荧光光谱研究了BSA与不同糖美拉德反应体系的荧光变化。结果 BSA与不同糖美拉德反应体系在三维荧光光谱中产生了一个新的特征荧光峰(λex 330~340 nm,λem 400~425 nm),其荧光强度随反应时间的延长逐渐增大。同步荧光光谱(Δλ=15 nm和Δλ=60 nm)的最大发射波长均发生了不同程度的蓝移。三维荧光光谱及同步荧光光谱的变化幅度均与体系美拉德反应进程一致,即美拉德反应程度由高到低依次为:BSA-XylBSA-GalBSA-Glu,BSA-Mal,BSA-Lac。结论 BSA与不同糖美拉德反应体系中出现特征性新的荧光峰及蓝移,可作为监测美拉德反应进程及BSA构象改变的指标。     

光谱法研究绿原酸和牛血清白蛋白的相互作用

为了解绿原酸和牛血清白蛋白的相互作用,在模拟动物生理条件下,采用荧光光谱和紫外-可见吸收光谱结合Stern-Volmer方程、double-reciprocal方程和热力学公式来研究绿原酸与牛血清白蛋白相互作用特征。结果表明:绿原酸和牛血清白蛋白在298K和310K两个温度下的结合常数分别为1.869×105L·mol-1和1.574×105L·mol-1;结合位点分别为1.18和1.16;且热力学参数ΔH0、ΔS0、ΔG0;结合距离小于7nm。因此,绿原酸对牛血清白蛋白有较强的荧光静态猝灭作用,符合静态猝灭过程,结合力为疏水作用。