正交实验及响应面法在银杏愈伤组织黄酮提取条件优化中的比较

以银杏愈伤组织为材料,运用正交实验和响应面法对银杏黄酮的提取条件进行优化,并对二者结果进行比较。正交实验的最佳条件是:提取剂选用50%乙醇,微波辐射60 s,70℃水浴浸提2 h,此条件下的黄酮得率为(24.18±0.20)mg/g。响应面实验结果显示,提取剂为46.39%乙醇,微波辐射62.23 s,70℃水浴浸提2 h,黄酮得率达到(24.55±0.28)mg/g,与预测值24.57 mg/g相符。双样本T检验结果表明,响应面最优条件下的黄酮得率较正交实验高1.7%,但差异不显著。     

正交实验及响应面法在银杏愈伤组织黄酮提取条件优化中的比较

以银杏愈伤组织为材料,运用正交实验和响应面法对银杏黄酮的提取条件进行优化,并对二者结果进行比较。正交实验的最佳条件是:提取剂选用50%乙醇,微波辐射60 s,70℃水浴浸提2 h,此条件下的黄酮得率为(24.18±0.20)mg/g。响应面实验结果显示,提取剂为46.39%乙醇,微波辐射62.23 s,70℃水浴浸提2 h,黄酮得率达到(24.55±0.28)mg/g,与预测值24.57 mg/g相符。双样本T检验结果表明,响应面最优条件下的黄酮得率较正交实验高1.7%,但差异不显著。     

正交实验优化酶解预处理提取银杏叶黄酮和内酯的工艺

采用酶法预处理银杏叶,考察酶用量、酶解时间、酶解温度、pH值对银杏叶总黄酮和总内酯提取率的影响。结果表明,采用复合酶(纤维素酶∶果胶酶=1∶1)、用量为银杏叶的1/300、酶解4.0 h、温度50℃、初始pH为5.0时酶解效果最佳,该工艺条件下,总黄酮提取率为92.38%,总内酯提取率为91.74%。     

正交实验优化酶解预处理提取银杏叶黄酮和内酯的工艺

采用酶法预处理银杏叶,考察酶用量、酶解时间、酶解温度、pH值对银杏叶总黄酮和总内酯提取率的影响。结果表明,采用复合酶(纤维素酶∶果胶酶=1∶1)、用量为银杏叶的1/300、酶解4.0 h、温度50℃、初始pH为5.0时酶解效果最佳,该工艺条件下,总黄酮提取率为92.38%,总内酯提取率为91.74%。     

女贞子胚培养及愈伤组织诱导

采用不同培养基对女贞子的胚进行培养,并对其幼苗的叶片和嫩茎进行愈伤组织诱导.结果表明,在胚的萌发诱导中,以MS+1.00 mg·L-1 6-BA培养时,女贞子幼苗的叶长和根长最长;以MS+1.50 mg·L-1 6-BA培养时,女贞子幼苗的茎高最高;MS+1.50 mg·L-1 6-BA+0.30 mg·L-1 2,4...     

去内酯银杏叶粗提物提取黄酮工艺条件的优化

为了优化从去内酯银杏叶粗提物中提取黄酮的工艺,采用L(934)正交实验设计方法,对浸提和超临界CO2萃取—结晶工艺进行了优化试验研究。结果表明:浸提较优工艺为浸提温度55℃,浸提时间4.0h,浸提次数1次,液固比30∶1;超临界CO2萃取—结晶较优工艺为萃取—结晶压力15MPa,萃取—结晶温度45℃,萃取—结晶时间1.0h,夹带剂为甲醇。整个工艺简单可行,总黄酮的含量由22.40%提高到79.80%。     

肉苁蓉愈伤组织的超低温保藏方法

提出了一个优化的简单的超低温保藏方法,成功地运用于肉苁蓉愈伤组织的低温保藏. 为了获得最佳的实验结果,肉苁蓉愈伤组织首先在添加了6%二甲亚砜的B5培养基中进行预培养,然后用玻璃化保护剂在25℃处理20 min,最后投入液氮中进行冷冻. 玻璃化保护剂的成分为30%(j)甘油+15%(j)乙二醇+10%(j)二甲亚砜+0.5 mol/L蔗糖. 冷冻后的愈伤组织在30℃的水浴中迅速解冻,接着用25℃的1.0 mol/L蔗糖溶液洗净愈伤组织上附着的玻璃化保护剂,最后在B5培养基上对愈伤组织进行恢复性培养. 经过上述冻存处理的肉苁蓉愈伤组织存活率可达86％. 恢复培养5个月后,愈伤组织中苯乙醇糖甙类化合物的含量和产量分别达到冷冻前的97%和95%.     

蓖麻愈伤组织对铜的抗性研究

为了探讨蓖麻愈伤组织对铜的抗性．研究了铜胁迫下蓖麻愈伤组织的增长及其铜吸收作用。结果显示,铜浓度为60mg·L^-1时,愈伤组织的增长受到抑制,抗性指数仅为33．87％;铜浓度为40mg·L^-1时,愈伤组织呈淡黄色,生长较快,抗性指数达到61．29％,并且这种抗性可以保持至连续继代培养6周之后。培养至第4周,铜浓度（mg·L^-1）为10、20、30、40各处理的抗性指数都高于第3周．各处理愈伤组织铜含量（mg·g^-1）依次为0．33、0．54、1．16、1．40。培养基铜浓度为40mg·L^-1。可作为筛选铜抗性蓖麻愈伤组织的临界值。     

水母雪莲愈伤组织超低温保存条件的初探

初步研究了水母雪莲愈伤组织的超低温保存方法. 结果表明，预培养、保护剂、预处理、冰冻后处理对愈伤组织存活率都有一定影响. 水母雪莲愈伤组织预培养基为添加5%二甲基亚砜的MS培养基，优化的冰冻保护剂是15%二甲基亚砜+15%乙二醇+30%甘油的0.4 mol/L蔗糖液，冰冻保护剂的预处理温度是15℃，时间为10 min，解冻温度25~35℃；在25℃水浴中用含1.2 mol/L蔗糖的MS溶液反复洗3次，每次10 min. 用TTC法测定细胞存活率可达58.5%.     

应用二次回归正交设计优化生姜黄酮的提取工艺

以总黄酮的提取率为目标,应用单因素试验方法考查原料质量与乙醇体积分数的比值,乙醇体积分数,提取温度对生姜中总黄酮的影响,并在此基础上应用回归正交试验设计方法建立三元二次方程优化生姜黄酮的提取工艺。结果表明,最佳工艺条件是:原料质量与乙醇体积的比值为1∶40,乙醇体积分数为0.77,提取温度为67℃。同时,建立的方程能较好的预测和优化生姜中总黄酮的得率。     

响应面优化银杏叶中总黄酮的超声提取工艺研究

采用响应曲面法对银杏叶中黄酮的提取工艺进行优化,以乙醇浓度、提取温度和时间为响应值进行Box-Behnken实验设计,探究银杏叶黄酮的最佳提取条件。结果表明:银杏叶中黄酮的最佳实验条件为乙醇浓度63%,提取时间32 min,提取温度50℃。在优化后的条件下进行实验,银杏叶中黄酮提取率为5.328%,与预测值5.316%接近,说明该模型方程能够较好地预测实验结果。     

分光光度法测定银杏叶提取液中总黄酮含量

采用分光光度法测定银杏叶提取液中总黄酮含量.检测波长为415 nm,在6.32×10-4～0.476 g/L的浓度范围内,黄酮含量(c)与吸光度(A)呈良好的线性关系,回归方程为A=4.748c 0.0091(n=7),线性相关系数r=0.999,平均回收率和相对标准偏差分别为103.2%、0.02%(n=6),方法简单快速、准确.     

银杏叶中黄酮类化合物提取研究

银杏为裸子植物的"活化石",是我国特有植物。其主要药用成分为黄酮类和萜内酯类化合物。黄酮类化合物具有降血脂、血压等多种药理及保健作用。本实验采用索氏提取法,探究不同溶剂、浸泡时间对提取量的改变。采用分光光度法测量提取量。并采用最佳提取方案对栽培和野生银杏叶中黄酮类化合物含量进行对比。     

蒸汽爆破提取银杏叶黄酮类化合物的工艺研究

采用新近发展的蒸汽爆破技术对银杏叶进行预处理提取黄酮类物质,通过单因素实验,采用响应面法进行处理过程中的多因素组合的工艺优化,研究汽爆压力、汽爆时间、固液比对黄酮提取效率的影响,建立并分析了各因素与处理后黄酮提取率的数学模型。得到的优化条件为:汽爆压力0.38 MPa,汽爆时间235 s,固液比1∶15。与传统有机溶剂提取法相比,蒸汽爆破预处理使提取率提高了2.1倍。     

银杏叶活性成分萃取工艺的研究

采用 φ(乙醇 ) =70 %的乙醇热回流法和超临界CO2 萃取法提取银杏叶中的活性成分 ,并用定性、定量的方法测定了银杏叶提取物中活性成分及其质量分数 ;结果表明 :两种方法萃取的物质是相同的。φ(乙醇 ) =70 %的乙醇热回流法提取率为 2 5 6 % ,总黄酮质量分数为 2 7 1% ;超临界CO2 萃取法提取率为 3 95 % ,总黄酮质量分数为 35 2 8% ,超临界CO2 萃取法有着明显的优越性。     

回流法提取银杏叶总黄酮的研究

研究了乙醇回流法提取银杏叶总黄酮的工艺条件。通过单因素实验考察料液比、乙醇体积分数、提取时间、提取温度对银杏叶总黄酮提取率的影响,通过正交实验确定优化的提取工艺条件为:料液比1∶45(g∶mL)、乙醇体积分数50%、提取时间2.0h、提取温度70℃,在此条件下,银杏叶总黄酮提取率为0.918%。以优化的工艺条件为基础进一步运用微波辅助提取银杏叶总黄酮,发现在微波功率为640W时,采用间歇式提取,提取时间为15×10s,总黄酮提取率达到0.91%,接近传统方法提取3h的提取率。     

近红外光谱法测定银杏叶提取液中总黄酮含量

应用近红外光谱技术建立了快速测定银杏叶提取液中总黄酮含量的方法.将高效液相色谱法测定的总黄酮含量作为参考标准值用于建模,考察预测残差平方和(Predictive residual error sum of square,PRESS)与主成分之间的关系,主成分数为2时得到PRESS最小;用偏最小二乘法(PLS)进行回归分析得到的回归系数为0.98206、交叉验证结果的回归系数为0.96322,表明预测模型具有良好的稳定性.高效液相色谱法测定的银杏叶提取液中总黄酮含量与本方法的预测值之间存在良好的线性关系,t-检验结果表明,两种方法测得的总黄酮含量无显著性差异.本方法快速、简便,能准确地预测银杏叶提取液中总黄酮的含量.     

银杏外种皮黄酮类化合物的提取方法研究

分别以水、乙醇、丙酮作为提取溶剂,对银杏外种皮黄酮类化合物的不同提取方法进行了比较研究。结果表明,以乙醇作为提取溶剂,采用回流提取法提取银杏外种皮黄酮类化合物的效果最好,提取率超过84％,标准偏差为0.0009,RSD为0.10％。为银杏外种皮资源的开发利用提供了依据。     

环糊精对黄酮的包合作用及其在银杏黄酮提取中的应用

对β-环糊精(-βCD)进行甲基化修饰和表征,并通过相溶解度法研究了β-CD以及甲基化β-环糊精(M-β-CD)对银杏黄酮的替代品———芦丁的包合作用。实验表明,两种环糊精都能有效增加芦丁在水中的溶解度,尤其是M--βCD可使溶解度增加30倍。以此为依据,该研究用含有β-CD和M-β-CD的水溶液来提取银杏叶中的黄酮,探讨了环糊精与黄酮的摩尔比、提取温度和提取时间对提取效果的影响,结果发现:当n(M--βCD)∶n(黄酮)=3∶1,60℃下提取3 h后,黄酮的提取率达72%,w(黄酮)=12.4%,较传统的水浸法〔提取率42%,w(黄酮)=4.5%〕和醇提法〔提取率63%,w(黄酮)=6.1%〕有明显的提高。这表明通过-βCD及M--βCD对银杏黄酮的溶解和包合作用,可有效地提高黄酮的提取率以及提取物纯度。     

微波-超声波协同萃取银杏黄酮的工艺研究

以银杏叶为材料,研究了乙醇浓度、微波功率、微波处理时间、料液比、银杏叶粉碎颗粒大小以及微波-超声波协同作用对银杏黄酮提取效率的影响。结果表明微波处理,微波-超声波协同处理可以显著提高银杏黄酮的提取率。确定了最佳的微波处理条件:70%乙醇为萃取液,料液比1∶20,粉末颗粒80目,微波功率50W,微波处理时间4 m in,处理后水浴回流提取2 h所得提取液的黄酮提取率达到81.76%,比直接水浴提取提高了1.3倍,微波-超声波协同处理的黄酮提取率达到83.54%。