三联吡啶钌(Ⅲ)光敏损伤DNA的凝胶电泳研究

采用琼脂糖凝胶电泳研究了以可见光引发的三联吡啶钌（Ⅲ）与ＤＮＡ之间的光敏反应。发现在有氢气条件下,三联吡啶钌（Ⅲ）经４２７～４５７ｎｍ光照可导致ＤＮＡ的光敏损伤,其途径主要是通过单线态氧与ＤＮＡ反应引起的碱其损伤,另外则是通过ＤＮＡ与三联吡啶钌阳离子自由基（「Ｒｕ＾２＋（ｂｐｙ＾＋．）」＾３＋）反应导致碱基损伤而产生的,而且操作损伤ＤＮＡ和联吡啶钌之间的浓度比存在着一定关系。结照单链ＤＮＡ及比链Ｄ     

黄素类光核酸酶对DNA定位损伤的直接检测

近来研究人工合成能使ＤＮＡ定位损伤的光核酸酶成为光医学、光化学和光生物学领域的研究热点[1] 。然而 ,目前光核酸酶对癌细胞ＤＮＡ的作用机制尚不完全了解。尽管已公认ＤＮＡ碱基阳离子自由基 (或氧化性自由基 )是核酸光敏氧化反应的最初、最重要的瞬态产物 ,然而至今未能直接观察到光氧化产生的碱基阳离子自由基的瞬态吸收光谱。这一问题已成为国际同行关注的难题。因为它是激光束进入细胞时激发生物大分子动态过程的关键 ,是阐明电荷转移光氧化治疗畸变基因、调控基因表达机制的原初证据。现有的研究主要集中在稳态分析上[1.2 ] ,尽管…     

γ射线诱导DNA损伤中DNA浓度的影响

作为生物体中的一类基本生物大分子，DNA是离子辐射引致生物效应的关钆靶分子。双链断裂（DSB）是辐射所致生物效应中最重要的原初损伤，非重接性的DSB则被认为是细胞杀伤效应的最重要的损伤。在辐射损伤过程中，射线品质、剂量以及生物体的辐射敏感性等对生物体的损伤程度都有重要影响，已有很多涉及这些方面的报道。DNA浓度可能也是影响辐射致DNA损伤程度的重要因素。     

氡及其子体对大鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤效应

将大鼠暴露于10、20和30WLM（working level months)的氡浓度后,采用H－TdR掺入法和碱性单细胞凝胶电泳技术（SCGE）,研究吸入氡及其子体后大鼠外周血淋巴细胞的DNA损伤效应。结果表明,各暴露剂量组大鼠外周血淋巴细胞转化均显著低于对照组;淋巴细胞在碱性单细胞凝胶电泳条件下DNA的迁移距离均显著高于对照组,且呈剂量－效应关系。大鼠吸入氡及其子体可引起淋巴细胞DNA合成抑制及淋巴细胞转化能力下降。     

单能电子诱发DNA损伤的理论计算

利用径迹结构的方法模拟了单能电子从入射DNA水溶液到最终产生DNA损伤的早期物理和化学变化过程。着重研究了直接能量沉积导致碱基损伤的判断方法、DNA损伤穷举分类的定义及计算机实现方法,以及确定自由基产生位置的随机抽样方法。结果表明：物理、化学径迹与DNA的反应主要以NB（nobreak）的形式存在,而在链断裂中,主要也以易修复的单链断裂(SSB)为主;在为数不多的双链断裂（DSB）中,复杂DSB占到相当数量的份额。验证了DNA是辐射作用主要“靶”的假定。     

DNA损伤修复能力对辐射适应性反应的影响

采用野生型的中国仓鼠卵母细胞(CHO-9)及其DNA损伤修复缺陷型细胞:EM-C11(DNA单链断裂修复缺陷)和XR-C1(DNA双链断裂修复缺陷),首先进行低剂量(0.016 Gy或0.08 Gy)的初始照射,间隔4 h或7 h后再进行高剂量(1 Gy)的攻击照射,然后检测细胞微核形成率和克隆形成率的变化.结果显示:当初始剂量为0.08 Gy,间隔4 h后再施以1 Gy的攻击照射时,三株细胞只有野生型的CHO-9有辐射适应性反应产生;但当间隔时间延长到7 h时,CHO-9和EM-C11均产生了辐射适应性反应.当把初始照射剂量降低为0.016 Gy,间隔4 h再施以1 Gy的攻击照射时,三株细胞均产生了辐射适应性反应.表明辐射适应性反应不仅与初始照射剂量及间隔时间有关,还与DNA损伤修复密切相关.     

离子致DNA损伤的实验研究

脱氧核糖核酸(DNA)是辐射生物学效应最重要的靶分子,研究其电离辐射损伤具有重要意义。DNA双链断裂被认为是最重要的原初损伤。此实验用原子力显微镜研究重离子致DNA双链断裂。 首先设计了~(241)Am放射源辐照装置,用它产生的能量为5.48 MeV的α粒子(在水中的LET约为90 keV/μm),对大肠杆菌的超螺旋状ρ GEM-T质粒DNA进行了辐照。辐照剂量为1、4、8和12 Gy。     

辐射致DNA损伤中DNA浓度的影响

在水溶液中，DNA以微观的形态存在，由于布朗运动以及DNA之间的相互作用的存在，使得DNA的浓度可能影响着DNA的微观分布，从而影响DNA损伤，这在我们以前的实验中已有了初步的观测与发现。关于DNA浓度对DNA损伤的影响的报道很少，实验结果不统一，也不系统，且以前的报道均为低LET射线辐射后的结果。关于高LET的重离子的研究目前尚未见诸报道。     

质子剂量和DNA浓度对DNA损伤的影响

利用HI-13串列加速器产生的16 MeV质子,使用凝胶电泳技术对添加和未添加甘露醇的pUC19质粒DNA溶液中DNA分子形态变化进行了观测,研究了同一剂量下不同DNA浓度及同一DNA浓度下不同剂量对DNA链断裂产额的影响.结果表明,未添加甘露醇溶液中DNA浓度效应较明显.两种体系下DNA均表现出明显的剂量响应,即分子...     

生物还原剂的作用机理研究概况

乏氧现象存在于多数实体肿瘤中。生物还原剂是一种具有肿瘤乏氧靶向性的前药，它会在还原性环境中被还原产生具有细胞毒性的代谢物。目前，生物还原剂主要有硝基杂环类、杂环氮氧类、醌类等几类。生物还原剂不仅可以作为放射增敏剂、化学增敏剂，还可以用于基因向导的酶前药治疗(GDEPT)。总之生物还原剂的研究对未来恶性肿瘤治疗有很大的意义。     

重离子辐照诱导DNA双链断裂的剂量率效应

利用不同剂量率的50MeV/u^12C^6 辐照B16黑色素瘤细胞的脱蛋白DNA,采用脉冲场凝胶电泳技术对DNA双链断裂（DSB）的诱导和片段的分布进行了研究。结果发现,在剂量率分别为3Gy/min和30Gy/min的情况下,DNA片段释放百分比（PR）都随着剂量的增加而增加,并在超过一定剂量之后趋于相似的准阈值;3Gy/min辐照诱导DSB的产额为0.40DSBs(100Mbp.Gy）,30Gy/min辐照诱导的DSB产额准确值无法得到;30Gy/min辐照诱导DSB的截面为2.14μm^2,是3Gy/min的3.1掊。所有结果都表明剂量率越高,诱导DSB越有效。另外,3Gy／min辐照诱导DSB片段在－860kbp处有一个片段峰,而30Gy/min没有,说明剂量率可以影响DSB片段的分布。     

ADE光诱导原初过程的时间分辨研究:II. 生物分子复合物中的光化学

利用激光光解结合稳态吸收光谱技术，对放线菌素D的模型化合物ADE与DNA和牛血清蛋白的相互作用进行了系统研究。结果发现，ADE与ssDNA、dsDNA以及BSA都能发生非共价结合，并能发生光诱导的电子转移反应。结果表明，放线菌素类化合物有可能被用作Ⅰ型的光敏治疗药物，并将为这类化合物的结构改造提供一些有益的启示。     

小鼠扁桃体免疫细胞受照射后DNA双链断裂损伤修复的忠实性

观察了受照射小鼠瓦尔代尔扁桃体环（WRE）在体细胞出现DNA双链断裂修复的忠实性，用^60Coγ射线照后观察WRE细胞凋亡的最高峰，在此时间点处死小鼠，取WRE细胞分别有脂质体和电穿孔方法介导的基因转染技术，将双标记基因质粒pPMH16导入细胞。研究WRE细胞DNA双链修复的忠实性。结果表明，未照射WRE细胞的抗G418转化克隆有69．75％的gpt基因表达，说明大部分断裂的gpt基因被忠实性地修复；2Gy、4Gy射线照射的WRE细胞的转化克隆只有36．05％和21．50％的克隆能正确表达gpt基因功能，说明WRE细胞照射后DNA双链断裂的修复显著低于正常细胞，且剂量越大，修复的忠实性质越低。脂质体和电穿孔方法介导的基因转染技术可用于原代细胞基因转染的研究，照射后的WRE细胞易发生DNA双链断裂错误重接。     

哺乳动物细胞DNA损伤修复的研究——病毒探针的利用

用病毒探针研究DNA修复具有显著的优越性。由于病毒DNA结构及复制方式远比真核细胞的简单,病毒探针法可使真核细胞DNA修复的研究大为简化。双链DNA病毒的宿主细胞回复和多重感染回复被用来研究细胞的结构性修复功能。单链DNA病毒如细小病毒被用来探测诱导性修复过程。真核细胞内可能存在一个类似于原核细胞中的SOS功能的诱导性易错修复功能,诱导信号是DNA损伤本身。一些DNA损伤,如无碱基位损伤可充作此修复功能的底物。     

浓缩铀内污染对小鼠脾淋巴细胞DNA损伤修复的作用

研究了不同水平浓缩铀(235UO2F2)对淋巴细胞DNA损伤修复的作用及其机理.应用紫外线诱导的非程序DNA合成 (UDS) 检测,观察浓缩铀(235UO2F2)内污染对小鼠脾淋巴细胞DNA损伤修复的影响.结果表明, 浓缩铀摄入量为0.1-20μg/kg 体重时, 脾淋巴细胞紫外线诱导的UDS显著高于对照组 (p<0.05或p<0.01); 浓缩铀内污染12d时, 脾淋巴细胞未经紫外线照射的UDS显著增加 (p<0.05或p<0.01); PHA组脾淋巴细胞紫外线诱导的UDS显著低于未加PHA组.在一定剂量范围内,低剂量浓缩铀内污染对淋巴细胞DNA损伤修复功能具有明显的刺激作用,并且该剂量范围明显大于外照射;浓缩铀内污染对淋巴细胞DNA具有持续的损伤作用,继而诱发细胞DNA修复功能的增强;PHA刺激但未增殖的脾淋巴细胞DNA损伤修复功能明显减低.     

脉冲辐解研究 DNA 羟基加成自由基快速修复过程

脉冲辐解研究ＤＮＡ羟基加成自由基快速修复过程⒇姜岳姚思德林念芸（中国科学院辐射化学开放研究实验室中国科学院上海原子核研究所上海２０１８００）氧自由基由于具有极其活泼的化学活性和致癌、致心血管疾病、感染及促进衰老等作用而引起人们的广泛关注。而羟自由基氧...     

双标记碱性洗脱法研究电离辐射引起的细胞DNA单链断裂与修复

本文应用双标记碱性洗脱法对X射线照射引起的正常人纤母细胞、毛细血管扩张性共济失调症(AT)纤母细胞、AT肿瘤突变细胞DNA单链断裂及重接修复进行了研究。结果提示10GyX射线照射对三种不同类型纤母细胞DNA的单链断裂与各自的不照射对照组比较有显著差别。而三种不同细胞株之间比较则无明显差别。细胞接受10GyX射线照射后在37℃孵箱中孵育15、30和60min可见三种细胞株DNA单链断裂都能立即进行重接修复,60min内大部分已重接,细胞在10Gy照射后加5×10~(-4)mol/L aphidicolin/皿抑制聚合酶α,经37℃孵育60min也有一定程度的修复。