黑曲霉Ⅵ号主要水解酶类的酶系分析及最佳产酶条件的研究

乾氏曲霉又名琉球曲霉，是属于黑曲霉群中具有重要应用的菌株。而黑曲霉６号是本实验室工作人员诱变氏曲霉得到的一株纤维素酶，蛋白酶等酶活较高的菌株。本实验对黑曲霉６号的一般生物学特性及培养特性进行了研究，并对其主要酶系－纤维素酶、蛋白酶、淀粉糖化酶和果胶酶进行了酶系分析，活性测定，最佳产酶条件的分析及应用实验。     

黑曲霉6号主要水解酶类的酶系分析及最佳产酶条件的研究

乾钉曲霉又名琉球曲霉,是属于黑曲霉群中具有重要应用前景的菌株。而黑曲霉６号是本实验室工作人员诱变乾氏曲霉得到的一株纤维素酶、蛋白酶等酶活较高的菌株。本实验对黑曲霉６号的一般生物学特性及培养特性进行了摸索,并对其主要酶系－纤维素酶、蛋白酶、淀粉糖化酶和果胶酶进行了系分析、活性测定、最佳产酶条件的分析,为应用试验打下基础。     

营养和非营养复合型酶制剂菌株的选育及在酱油和食醋酿造中的应用

黑曲霉（Aspergillus niger van tieghem），是黑曲霉群中具有重要应用前景的菌株。而黑曲霉1号是本实验室工作人员诱变黑曲霉6号得到的一株产纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶等酶活较高的菌株。本实验对黑曲霉1号的一般生物学特性及培养特征进行了研究，并对其主要酶系——蛋白酶、糖化酶、纤维素酶、木浆糖酶、β-葡浆糖酶和果胶酶进行了酶系分析、活性测定和最佳产酶条件的分析，为在酱油和食醋酿造应用试验打下基础。     

营养和非营养复合型酶制剂菌株的选育及在酱油和食醋酿造中的应用

黑曲霉（Aspergillus niger van tieghem）是黑曲霉群中具有重要应用前景的菌株。而黑曲霉1号是诱变黑曲霉6号得到的1株产纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶等酶活较高的菌株。对黑曲霉1号的一般生物学特性及培养特征进行了研究,并对其主要酶系——蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶和果胶酶进行了酶系分析、活性测定和最佳产酶条件的分析,为酱油和食醋酿造的应用实验打下了基础。     

乾氏曲霉78B2的生物学特性、酶系 分析及其在食醋酿造中的应用试验

乾氏曲霉（Aspergillus inuii）又名琉球曲霉（Aspergillus luchensis）是属于黑曲霉群中具有重要应用前景的菌株。本实验对乾氏曲霉78B2的一般生物学特性及培养特性进行了摸索,并对其主要酶系--酸性蛋白酶、淀粉糖化酶、纤维素酶和果胶酶进行了酶系分析、活性测定和应用试验。     

复合菌株共培养制曲改善郫县豆瓣成曲酶系活力

为改善郫县豆瓣成曲酶系活力,对传统酿造酱制品中高产蛋白酶霉菌进行分离鉴定,并以蚕豆瓣为原料,利用单一菌株和复合菌株共培养制曲,比较2种制曲方式主要酶活力。实验中分离到2株高产蛋白酶菌株QM-6和QH-3,经形态学和生物学鉴定分别为米曲霉(Aspergillus oryzae)和黑曲霉(Aspergillus niger)。米曲霉QM-6和黑曲霉QH-3共培养制曲比单一菌株周期短,且豆瓣成曲曲香浓郁;利用复合菌株制曲,中性蛋白酶、碱性蛋白酶、氨肽酶比单一米曲霉制曲酶活力高,最高分别为1 532、1 164和151 U/g,酸性蛋白酶、纤维素酶和淀粉酶活力最高分别为513、121和574 U/g,比单一米曲霉或黑曲霉制曲提高约1倍。综合制曲过程中的曲料菌丝、孢子、颜色、气味、质地等变化与酶活力比较,米曲霉QM-6和黑曲霉QH-3共培养复合制曲能有效提高蚕豆曲酶系活力,弥补单菌株制曲酶活力不足的缺陷,且成曲品质优良。     

不同类型丝状真菌发酵产酶性能比较及其混菌发酵性能研究

比较了实验室前期从福建红曲黄酒酿造用曲中分离及台湾生物资源研究及保存中心(BCRC)的不同丝状真菌菌株(黑曲霉AN19、黄曲霉AF20、米曲霉AO35、米根霉RO45、黑曲霉BCRC31494、黄曲霉BCRC31654、米曲霉BCRC30222和米根霉BCRC32229)的产酶性能,从中筛选出产液化酶、糖化酶和蛋白酶活力较高的4株菌株:黄曲霉AF20、米根霉RO45、黑曲霉BCRC31494和米曲霉BCRC30222。将此4株丝状真菌菌株分别进行单一和两两混合发酵糯米,研究其产酶及产糖性能。结果表明:接种纯种米根霉RO45到糯米培养基中,测得的液化酶活力和还原糖产量最高,然而整个发酵过程蛋白酶活力始终较低;米根霉RO45与米曲霉BCRC30222混合发酵,不仅保持较高的液化酶活力和还原糖产量,还能够显著提升发酵体系中的蛋白酶活力。本研究结果对于黄酒传统酿造工艺的改进和优良产酶菌株的筛选提供了重要的基础数据。     

传统酿造酱油酱醪中的霉菌筛选及其部分酶系特征分析

传统酿造酱油发酵过程中,微生物种类繁多,多数为环境中自然落入并参与发酵,本研究旨在从传统酿造酱醪中筛选不同的霉菌并探究其酶活力特性。本研究从酱醪中分离到49株霉菌,挑选形态有差异的18株霉菌进行分子生物学鉴定,鉴定结果归属于4个菌属,即青霉属、枝孢霉属、曲霉属和链格孢菌。对这些霉菌进行酶系分析,结果表明霉菌的酶系特点与霉菌类型密切相关,其中黑曲霉的酸性蛋白酶和β-葡萄糖苷酶突出,米曲霉、红绶曲霉和链格孢菌中性蛋白酶、糖化酶和氨肽酶活力突出。根据酶活及菌种特性,选用黑曲霉AN1和AN2分别与米曲霉进行混合制曲,发现黑曲霉AN2和米曲霉混合制曲效果更佳,相比于米曲霉大曲,其中性蛋白酶与酸性蛋白酶分别提高了42.84%和22.27%,且糖化酶和氨肽酶提高117.54%和15.10%,具有较好的应用价值,该研究为筛选酱醪中优质的霉菌提供理论依据。     

米曲霉与酱油曲霉高酶活菌株的诱变选育

酱油酿造过程中菌株所分泌的酶系直接影响原料的利用率和最终产品的品质.实验通过紫外诱变、亚硝基胍诱变以及紫外-亚硝基胍复合诱变方法分别对米曲霉和酱油曲霉菌株进行了诱变,采州酪蛋白透明圈法初筛以及福林酚法和DNS法复筛,根据碱性蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、纤维素酶和α-淀粉晦酶活水平的变化,选育出数株米曲霉和酱油曲霉高酶活菌株.并对初筛方法的可行性和不同诱变方法对菌株改良的效果进行了探讨.     

米曲霉固态发酵产酶条件及酶活力研究

以酱油生产用米曲霉沪酿3.042进行固态发酵,考查了影响米曲霉蛋白酶、木聚糖酶、纤维素酶生产的固态发酵条件,包括碳源、氮源、初始pH值及温度等因素.实验表明,此菌株产酶的最佳碳、氨源分别为麸皮及蛋白胨,最适合产酶的初始pH值为6.0～8.0,温度为30℃.实验并对菌株所产的蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶进行了活力分析,为深入研究及应用米曲霉酶系提供理论依据.     

常压室温等离子体诱变技术选育曲霉型豆豉发酵菌种研究

为了提高曲霉型豆豉曲醅中蛋白酶活力,本研究对实验室前期筛选得到的一株蛋白酶活力较高的Aspergillus oryzae NCU-110为原始菌株,采用常压室温等离子体(ARTP)技术进行诱变。结果表明:ARTP处理6min为最佳诱变时间,米曲霉致死率达到91.05%。对诱变处理的菌株进行两轮筛选及遗传稳定性验证实验后发现,突变株A.oryzae NCU-A55显示出高产中性蛋白酶活力和良好的遗传稳定性,酶活力较原始菌株提升了21.0%,达到741.6U/g;蛋白酶系对比实验进一步证实了突变株蛋白酶系以中性酶活力为主的特点,且酶系完整。在制曲60h后中性蛋白酶活力最高,达到958.8U/g,比原始菌株提升了14.7%;形态观察及产孢子能力对比,发现突变株具有菌丝生长速度加快、产孢子能力显著增强的有利表型。这些结果综合表明突变菌株A.oryzaeNCU-A55较高的产中性蛋白酶活性可能与其菌丝体快速生长及产孢子能力增强有关,且比较适合曲霉型豆豉的纯种发酵。     

双菌株在酱油制曲中的应用

研究以豆饼、麸皮为原料,利用米曲霉、黑曲霉双菌株进行酱油制曲,通过单因素实验和正交试验确定了酱油制曲工艺中最合适的培养条件。结果表明:选用米曲霉、黑曲霉种曲配比为6∶2,将双菌株以2%的接种量接入到曲料中,控制制曲温度32℃,制曲时间43h,得到的成曲蛋白酶酶活力高达2787U/g,得到的成曲菌丝丰满,曲味芳香。     

两株曲霉糖化性质的比较研究

本文系统地研究了两株曲霉─黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ）ＵＶ－４８和米曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｏｒｙｚｏｅ）花－４的酶系及糖化性质。米曲霉花－４具有远比黑曲霉ＵＶ－４８为高的液化酶活性和略高的糖化酶活性，但米曲霉花－４酶生产对温度比较敏感，其辅助酶系（纤维素酶和蛋白酶）生产早于黑曲霉ＵＶ－４８，而ＵＶ－４８的蛋白酶生产有两次活性高峰期。米曲霉花－４液化酶热稳定性低，糖化酶热稳定性高，但二者均耐酸酸；黑曲霉ＵＶ－４８液化酶热稳定性高但不耐酸，糖化酶热稳定性低但耐酸和碱。     

米曲霉酶活力与孢子特征关系的研究

本文对不同来源的19个米曲霉菌株的蛋白酶活力、脂酶活力、孢子颜色、孢子梗长度进行了分析测定,并研究了米曲霉酶活力与孢子特征的关系,发现米曲霉蛋白酶活力与孢子颜色之间具有相关性,孢子颜色为黄色的菌株蛋白酶活力低;孢子颜色为绿色的菌株蛋白酶活力高;孢子颜色为黄与绿之间的菌株,蛋白酶活力表现出广泛的差异。     

2株米曲霉的特色酶系对酱油理化指标及品质的影响

选取酶系差异较大的2株米曲霉菌株进行酱油发酵,通过形态学分析、发酵酱油理化指标及滋味感官测定,探究米曲霉酶系组成特点与酱油品质形成的关系。研究表明:米曲霉SWJS-AO-K具有蛋白类酶活力优势,中性蛋白酶、酸性蛋白酶和氨肽酶活力分别为米曲霉SWJS-AO-D成曲的2.2倍、2.6倍和4.4倍。然而,米曲霉SWJS-AO-D降解碳水化合物类酶活力突出,如糖化酶和纤维素酶等酶活力分别为米曲霉SWJS-AO-K的1.8倍和1.3倍。酶活力的差异与后期酱油理化指标及感官特性存在紧密联系。具有高活力蛋白酶类的米曲霉SWJS-AO-K在发酵酱油过程中具有较高的总氮含量和美拉德反应程度,且其苦味氨基酸含量也相对较高。具有高活力降解碳水化合物酶类的米曲霉SWJS-AO-D在还原糖以及鲜、甜味氨基酸总含量上具有优势,相对米曲霉SWJS-AO-K发酵酱油分别提高了80.80%,5.14%和4.10%,这与米曲霉SWJS-AO-D发酵酱油具有较高的鲜、甜味相符,表明具有降解碳水化合物酶类优势的米曲霉对发酵酱油的鲜味、甜味物质生成具有积极影响,这与行业内一直以来侧重筛选高蛋白酶活力的米曲霉基础导向有所不同。本研究结果将对米曲霉筛选、育种及差异化发酵应用提供重要的理论依据。     

高产酸性蛋白酶白曲霉培养条件的优化研究

以实验室保藏的白曲霉菌株为目标菌株，从生长条件、产酶活力的关键工艺因素进行研究分析，以提高白曲霉菌株酸性蛋白酶活力为目的，探究高产酸性蛋白酶白曲霉的实验室最佳培养条件。研究结果表明，以麸皮为主要原料，培养基水分添加量为100%，培养基pH值为5，培养温度38℃，培养时间72 h，为该实验菌株的实验室最佳培养条件。     

传统甜面酱种曲中优势菌种的分离及初步鉴定

为进一步提高传统甜面酱的质量,本研究从不同地区采集传统甜面酱种曲,利用稀释平板法从曲样中分离获得14株优势霉菌,并对所分离霉菌进行菌落形态观察,采用湿室培养法结合显微镜观察进行初步鉴定.鉴定结果为曲霉科黑曲霉6株;曲霉科米曲霉7株;根霉1株.再把分离所得14株形态不同的霉菌分为三组,分别与实验室的菌株D(沪酿3.042)、C(黑曲霉属)和E(根霉属)进行分类比较其蛋白酶和糖化酶活力,实验结果表明8株霉菌表现出较高的酶活力,可考虑作为生产甜面酱的理想制曲菌种.     

酱油多菌种制曲改善酶系组成的研究

通过对米曲霉3.042、黑曲霉3.350、根霉3.010进行混合制曲试验,以蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶为指标,研究不同比例、制曲温度、制曲时间对复合菌种酶活力的影响.结果表明,三菌种米曲霉3.042、黑曲霉3.350、根霉3.010的比例为3:2:0.5,制曲温度36℃,制曲时间48h,在此条件下,制曲酶系丰富,酶活力高...     

温度对曲霉产酶的影响

研究了本实验室保存的两种曲霉my-1及my-2的温度特性、温度对曲霉产三种蛋白酶酶活力的影响及三种蛋白酶对温度的稳定性。     

多菌种在固态低盐发酵工艺中的应用

多菌种的应用，是在现行工艺的基础上，适当调整了原料的配比结构，采用了黑曲霉Ｆ－２７菌株与原有的米曲霉ＡＳ３．９５１菌株进行混合制曲，丰富了成曲的酶系，提高了酸性蛋白酶活力和纤维毒酶活力，并将原有的移池发酵池改造成为回浇发酵池，在发酵后期通过回的方法添加生香酵母，提高了原料的蛋白质利用率和原料的出品率，改善了酱油的风味。