血管抑素的131I标记及其对裸鼠A549肺肿瘤的作用

采用一步法从人血浆中分离血管抑素(Angiostatin,AS),并用L-Lysine Sepharose 4B作亲和层析纯化;将提纯的AS用Iodogen固相法进行131I标记,分析131I-AS的标记率、比活度,并评价其体外稳定性;32只荷A549肺肿瘤的裸鼠随机分为4组,腹腔注射131I-AS(含11.1 MBq131I,AS为12.5 mg/kg)1、31I 11.1MBq、AS 12.5 mg/kg和生理盐水0.3 mL,1次/周,治疗4周,观察28 d内肿瘤体积的变化。结果显示,131I-AS标记率为77.8%~86.7%,比活度为1.28~3.96 TBq/g,放化纯度为98.6±0.26%。标记产物-20℃存放7 d,放化纯度降至72%;治疗28 d后,131I-AS组1、31I组、AS组和生理盐水组小鼠肿瘤的体积分别是(1 956±98)(、5 284±123)(、3 948±115)(、7 350±153)mm3。以上结果提示,131I-AS能较强地抑制小鼠体内移植肿瘤的生长,其抑制作用优于单纯应用等浓度的AS及131I,131I-AS在治疗肿瘤中有潜在的应用前景。     

Iodogen法~(125)I标记单克隆抗体10D9

采用Iodogen法,选择最佳标记条件进行12525I标记单克隆抗体10D9.标记产物用Sephadex G-50分离纯化,三氯醋酸(TCA)法测定标记率和放化纯,并对标记物的免疫活性及稳定性进行分析.结果显示,125I标记10D9的最佳条件为Iodogen用量10μg、10D9用量20μg、加入Na125I22.2MBq、室温反应8min,125I-10D9的标记率为(84.10±3.18)%,放化纯为(98.49±1.14)%,比活度为933.51 MBq/mg;125I-10D9与Daudi细胞的特异性结合率为(23.21±1.14)%;标记物加到含1%BSA的PBS中放置3W后放化纯度仍>90%.结果表明:Iodogen法125I标记10D9标记率和放化纯高,方法简便,标记物的稳定性好且能较好地保持其免疫活性.     

23-羟基白桦酸的碘标记及其在荷肝癌HepA肿瘤鼠体内的分布

采用双氧水法对23-羟基白桦酸进行131I标记;以硅胶纸为支持介质,V=氧甲烷∶V甲醇=9∶1为展开剂,测定标记率及标记物放化纯;ICR小鼠和荷肝癌HepA肿瘤鼠尾静脉注射131I-23-羟基白桦酸(0.74 MBq/只)后考察标记物的药代动力学性质及荷瘤鼠体内分布.结果显示,131I-23-羟基白桦酸标记率达98%,其放化纯在1、4、8 d分别为98.5%、97.3%、95.8%.131I-23-羟基白桦酸在正常小鼠体内血液清除较快,其药代动力学模型符合二室模型.注射后0.5 h荷肝癌HepA肿瘤鼠肝摄取最高(9.14%ID·g-1组织),其次为肾、血、脾、肠、肺、肿瘤,脑中分布最少,仅为0.28%ID·g-1组织;肿瘤/肌肉比值＞3.表明碘标23-羟基白桦酸标记率高,标记物稳定;碘标记物在荷肝癌HepA肿瘤鼠中的肿瘤靶向摄取提高2倍,可能是一新型增效的核素靶向治疗药物.     

3H11的~(123)I标记及其生物分布

采用Iodogen氧化法对胃癌单克隆抗体3 H11进行了123I标记,用PD-10层析柱分离纯化标记物,纸层析法测定标记物的标记率和放化纯度,评价标记物的体外稳定性,并观察了标记物在正常小鼠体内的生物分布。标记结果显示,123I-3 H11的优化标记条件为:Iodogen 10μg、3 H11 30μg、Na123I溶液20μL(13.3 MBq)、磷酸盐缓冲溶液100μL(pH7.4、0.2 mol/L)、常温下反应8 min,123I-3 H11标记率70%~80%;稳定性结果显示,标记物在4℃人血清中的体外稳定性较好,放置48 h后放化纯度92%;正常昆明鼠体内生物学分布显示,全抗3 H11血液半清除时间为12.25±0.25 h,胃组织有明显摄取。以上结果提示,123I-3 H11是一种很有前景的肿瘤放射免疫显像剂。     

125I标记重组人血小板生成素的分布和代谢特征

摘要：目的: 建立125I标记重组人血小板生成素（rhTPO）的分析方法并研究小鼠尾静脉注射125I- rhTPO后的体内分布及药动学特征。方法: Iodogen法制备125I- rhTPO，经Sephadex-G25凝胶柱分离纯化，纸层析法检测放化纯度。按1g.kg-1剂量经尾静脉给药，于不同时间检测血浆中的放射性变化，并计算相应的血药浓度及药动学参数。同时于各时间点观察125I- rhTPO在各组织器官的分布情况。结果和结论: 制备的125I- rhTPO标记率为96.25%，放化纯度95.85%。尾静脉注射125I- rhTPO 1g.kg-1在小鼠体内可以二室模型拟合血药浓度的动态变化，T1/2为0.30h，T1/2为6.20h。125I- rhTPO在小鼠体内主要经肾脏排泄，部分可经肝胆系统代谢。在各骨组织中以富含骨髓细胞的胸骨放射性计数最高，股骨次之，而乏骨髓的胫骨放射性计数最低，提示骨髓是TPO作用的靶组织。     

^131I标记肿瘤血管靶向多肽的实验研究

设计合成含精氨酸-精氨酸-亮氨酸（RRL）序列的多肽,并用氯胺-T法对其进行^131I标记,标记率约60％,放化纯度〉99％。体外放置24h放化纯度仍≥90％。肿瘤对^131I标记多肽的摄取在注射后明显高于其他器官,注药后24h,肿瘤对^131I-多肽的摄取约为0．65％ID／g,肿瘤与肌肉的放射性摄取比（T／NT）达9．08。以上结果表明：通过氯胺-T法对该多肽进行^131I标记是可行的,标记物可在体外稳定存放24h;^131I-多肽可以靶向肿瘤血管,有进一步研究的价值。     

靶向CD93分子探针制备及其生物学实验研究

CD93分子作为一种新型新生血管生成激活剂,有可能成为肿瘤监测的重要分子靶点,因此制备125I标记抗CD93单抗(125I-anti-CD93 mAb),研究其在荷瘤鼠体内生物学分布及磷屏显像特点,探讨其对A549肺癌靶向性及CD93阳性肿瘤监测的可行性。本文制备125I-anti-CD93 mAb及125I-IgG并进行鉴定;建立A549肺癌荷瘤小鼠模型,经尾静脉注射125I标记抗CD93单抗,并设125I-IgG为对照组,注药后不同时间进行生物学分布及磷屏放射自显影;肿瘤组织行HE染色及CD93免疫组织化学染色;采用统计软件对定量数据(x+s)进行统计学处理,组间数据用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果表明,125I-anti-CD93 mAb及125I-IgG标记率、放射性比活度、放化纯度分别为91.37%和90.24%,1096.44 MBq/mg和1082.88 MBq/mg,96.49%和94.82%,放置72 h后两标记物的稳定性仍>90%,两者间无统计学差异(生理盐水组P=0.93,t=0.09,血清组P=0.13,t=1.90)。荷瘤鼠生物学分布结果显示125I-anti-CD93 mAb主要经肝肾代谢,注射后48 h时肿瘤组织放射性摄取率为(6.42±0.71)%ID/g,T/NT(瘤/对侧肌肉)摄取比值为4.45±0.86,显著高于对照组125I-IgG组(2.45±0.33/1.71±0.24),P<0.05,t=3.07和P<0.01,t=5.10。动态全身磷屏自显影结果可见,24 h两组小鼠轮廓清楚,48 h时实验组肿瘤显像最清晰,肿瘤放射性摄取比(肿瘤/对侧肌肉)为3.34±0.18,明显高于对照组(1.62±0.19),P<0.01,t=6.52。免疫组化染色结果证实肿瘤高表达CD93。125I-anti-CD93 mAb制备简便,对A549肺癌组织靶向性好,有望成为CD93阳性肿瘤监测的新型分子探针。     

利卡汀的人体显像和组织分布

摘要：研究我国具有自主知识产权的国家一类新药—碘[131I]-肝癌单抗片段HAb18 F(ab’)2注射液的人体显像和组织分布特征。拟定纳入标准、排除标准和剔除标准，严格按标准选择患原发性肝细胞肝癌的受试者24例，平均分为3组，分别为低剂量组（注入量18.5 MBq/ kg人体）、中剂量组（注入量27.75 MBq/ kg人体）和高剂量组（注入量37 MBq/ kg人体），每组8例。再采用溴代琥珀酰亚胺法标记制备碘[131I]-肝癌单抗片段 HAb18 F(ab’)2注射液后，各组每位受试者经插至肝固有动脉或肿瘤的供血肝动脉的导管注入相应的碘[131I]-肝癌单抗片段HAb18 F(ab’)2注射液，并在给药后不同时刻进行全身显像，用感性趣区技术测定受试者组织的放射性计数率，计算受试者组织的放射性药物摄取率及肝肿瘤组织/非瘤组织（T/NT）比值，以观察药物在各组织及肿瘤内分布的动态变化。研究显示：碘[131I]-肝癌单抗片段HAb18 F(ab’)2在肝癌组织中有明显的摄取，早期主要浓聚于肝癌组织及肝组织中，体内其他组织的浓聚甚少；随着时间的延长，肝癌组织的放射性浓聚相对于肝组织持续增强，而肝组织的放射性逐渐减少；在显像期间（8 d），除肝外的其他正常组织的T/NT值为1.04～3.79，而肝脏的T/NT值随时间推延而增加，至d8时为1.09。因此，碘[131I]-肝癌单抗片段 HAb18 F(ab’)2注射液能特异性结合肝癌组织。     

~(123)I-3H11在荷瘤裸鼠体内的SPECT显像

研究了123I标记单克隆抗体3H11在荷瘤裸鼠体内的生物分布和SPECT显像。体内生物学分布显示,肿瘤摄取24 h时达最大值(11.06±1.86)%ID/g,注射123I-3H11 24 h T/NT比值分别为:肿瘤/血,2.90±0.06;肿瘤/甲状腺,1.51±0.42;肿瘤/胃,9.96±0.56。注射7.4 MBq123I-3H11于2、24 h行SPECT显像,显像结果表明,24 h后能清晰显像。标记抗体的裸鼠体内生物学分布结果与显像结果基本一致。生物分布和显像表明,123I-3H11可能成为一种新的胃癌SPECT显像剂。     

~(131)Ⅰ标记NGR聚乙二醇修饰物及其生物分布

天门冬酰胺酰甘氨酰精氨酸(NGR)是特异性地定位于肿瘤新生血管受体的多肽基序,在肿瘤诊断和治疗方面具有潜在的应用前景.首先用两种单甲基化聚乙二醇(mPEG1900,mPEG5000)对YGGCNGRC环肽进行化学修饰,并进行131 Ⅰ标记.考察了这些标记物在正常小鼠以及荷乳腺癌MCF-7裸鼠体内的分布.结果表明,131 Ⅰ-mPEG 1900-YGGCNGRC和131 Ⅰ-mPEG5000-YGGCNGRC在各个器官和组织中的摄取率与131 Ⅰ-YGGCNGRC相比都有所降低,但在肾脏中的摄取率增高.血液初始摄取稍有下降,从血液中清除的速率则无显著差别.用mPEG5000修饰的NGR环肽显著地降低了131 Ⅰ的脱落.虽然131 Ⅰ-mPEG5000-YGGCNGRC在肿瘤中的摄取比131 Ⅰ-YGGCNGRC稍低,但肿瘤组织与正常组织的摄取比对多数器官和组织都有所提高,其中肿瘤与肌肉的摄取比由3.5±1.7提高到5.7±2.2.修饰与否对肿瘤与血的摄取比影响不大,由0.73±0.33变化至0.80±0.22.     

新型多肽示踪剂131I-RRL肿瘤分子显像研究

研究能与肿瘤血管内皮细胞特异结合的小分子多肽显像剂精氨酸-精氨酸-亮氨酸（RRL）对黑色素瘤小鼠模型的肿瘤分子显像应用价值。采用氯胺-T法对小分子多肽RRL进行¹³¹I标记,并对标记条件进行了优化;最佳标记条件为：RRL用量50 μg,Na¹³¹I用量10 μL（74 MBq）,氯胺-T用量90 μg,反应总体积100 μL,振荡反应 3 min。标记率＞69%。用Sephadex G25柱对标记产物进行纯化,纯化后放化纯度＞95%。采用绿色荧光素（FITC）标记RRL,并进行体外细胞结合实验,通过荧光信号的强弱观察RRL在不同细胞中的结合能力。体外细胞结合实验结果显示,RRL不仅能够特异性结合于肿瘤来源的血管内皮细胞,而且能够与肿瘤实质细胞结合;¹³¹I-RRL对黑色素瘤动物模型进行SPECT显像结果显示,¹³¹I-RRL能够特异性浓聚于肿瘤组织,24 h后放射性浓聚灶清晰可见。以上结果表明,小分子多肽RRL是一种很有潜力的肿瘤放射性核素分子显像与治疗的载体。     

Dosimetry of chimeric TNT in lung tumor patients

The purpose of this study was to assess the absorbed dose of tumor and main critical organs in 131I labeled chimeric tumor necrotic treatment (chTNT). In 9 patients, a single intravenous dose of (29.6±3.7) MBq/kg was administered. Blood samples were drawn at different time intervals, and urine was collected for up to one week. Tissue distribution of 131I -chTNT was followed for up to one week by gamma camera imaging. Absorbed doses to the whole body and to normal organs were computed according to the MIRD scheme using Mirdose-3 software. S-factors for lung tumors were estimated by comparison with lungs of similar mass and position in the body. It was found that mean serum disappearance half time values for 131I-chTNT were (4.93±9.36) h and (61.7±21.2) h for α, β respectively,while that for whole body was(99±10) h. Mean urine biological clearance half time value was (90±10) h. The absorbed dose to tumor was (8.28±2.65) Gy, and the tumor-to-nontumor dose ratio was 3.95±1.55. And the mean effective dose to patients was (1.02±0.29) mSv/MBq.     

诊断剂量131Ⅰ对分化型甲状腺癌摄131Ⅰ功能影响的定量研究

分析131Ⅰ治疗的52例分化型甲状腺癌术后患者,30例试验组患者手术后和131Ⅰ治疗前均口服131Ⅰ,诊断剂量为74 MBq,并行诊断性全身显像和治疗性全身显像,两次显像的残余甲状腺组织或功能性转移灶的放射性计数分别以Dx、Tx表示.22例对照组患者术后直接给予131Ⅰ治疗,并行治疗性全身显像.结果表明,试验组患者Tx显著小于Dx和对照组患者Tx,根据服用诊断性131Ⅰ到131 Ⅰ治疗的时间间隔为1～2 d、3～7d和8～32 d,试验组患者分为A、B、C组,A组、C组患者的Tx/Dx值显著大于B组,A组和C组患者的Tx/Dx差异无统计学意义.以上结果表明,74 MBq诊断剂量131Ⅰ可产生“顿抑效应”,且“顿抑效应”在服用诊断剂量131Ⅰ后3～7 d更明显.     

小鼠灌胃3H-β,β-二甲基丙烯酰紫草素后放射活性的组织分布与排泄研究

摘要：采用氧化燃烧炉技术处理小鼠灌胃给予3H-β,β-二甲基丙烯酰紫草素后的组织、粪样（尿样直接加闪烁液测定）,用液闪计数仪测定其放射性水平,并采用HPLC 技术分析生物样品,以研究其放射性在小鼠体内的组织分布与排泄情况。研究结果显示,胃肠道放射性浓度最高,肝脏、肺脏、肾脏、心脏等组织内放射性浓度次之,骨骼肌、脊髓、脑中分布较少;小鼠灌服 3H-β,β-二甲基丙烯酰紫草素（84mg/kg,22.3MBq/kg）后336h从粪中收集到给药总放射剂量的（72.879.92）%,尿液中回收到（6.810.18）%,粪尿合计（79.68±0.18）%;小鼠粪便中以原形药物为主,血浆、尿样中均未检测到原形药物。上述结果提示,3H-β,β-二甲基丙烯酰紫草素在小鼠体内分布广,排泄较完全,经粪便排泄为主,经肾排泄为辅。     

Human sodium/iodide symporter gene induced iodine uptake in human lung adenocarcinoma via baculovirus

To investigate human sodium/iodide symporter (hNIS) induced iodine uptake in human lung adeno- carcinoma via baculovirus, a recombinant baculovirus encoding hNIS gene was constructed under the control of CMV promoter (Bac-CMV-hNIS). In vitro, baculovirus infected A549 cells accumulated about 27 times more 125I than that of noninfected cells. The 125I uptake was maximal after 30-min incubation of the cells, and efflux of the radioactivity was rapid, with 50% lost during the first 2 min after 125I-containing medium had been replaced by nonradioactive medium. Competition experiments in the presence of sodium perchlorate revealed a dose-dependent decrease of 125I uptake. Bac-CMV-hNIS infected tumor cells were selectively killed by exposure to 131I, as revealed by clonogenic assays. In nude mice, Bac-CMV-hNIS infected A549 cells accumulated more 131I than that of the control monitored by 1-h scintigraphy after 131I administration. The transduction of hNIS gene through baculovirus is sufficient to induce iodine transporting in A549 cells in vitro and in vivo, outlining the potential of this novel tumor gene imaging approach. But a rapid efflux of radioactivity from the tumor was shown in vivo and the in vivo therapy test showed no sign of effect.     

Changes in percentage of lymphocyte subsets after ^131I treatment in patients with differentiated thyroid cancer

To monitor the extent and the duration of lymphocyte subset changes in patients with thyroid carcinoma undergoing therapeutic ^131I administration, the percentage of lymphocyte subsets were serially analyzed before and after ^131I treatment. In patients who received 1850 MBq of ^131I for ablation of thyroid remnants, only tor NK cells and B cells showed a significant reduction. In patients received 3700 MBq of ^131I for treatment of local lymph node metastases, NK cells, B cells and CD4＋ were found decreased. In patients received 7400 MBq of ^131I for treatment of distant metastases, NK cells, B cells and CD4＋ and CD8＋ were all affected. However, there is no significant reduction compared to the baseline in the percentage of all lymphocyte subsets three months after ^131I treatment. The results show that the sensitivity of lymphocytes to ^131I internal radiation depends upon lymphocyte phenotype and ^131I activity. The immunosuppression effects are temporary and reversible.     

99Tcm标记NGR及其在荷人HePG2肝癌裸鼠体内的生物分布及SPECT显像

用⁹⁹Tc^m标记了含有天冬酰胺-甘氨酸-精氨酸（Asn-Gly-Arg）序列的血管靶向性短肽NGR,评价了标记物⁹⁹Tc^m-NGR的放化性质以及在荷HePG2肝癌模型裸鼠体内的生物分布和SPECT显像。标记结果显示,⁹⁹Tc^m-NGR的标记率>90%,放化纯度>95%。荷瘤裸鼠体内生物分布结果显示,⁹⁹Tc^m-NGR在肾脏和肝脏的摄取率较高,注射后1 h肿瘤摄取达（2.52±0.62）%ID/g,最高达（7.26±2.71）%ID/g,12 h仍然达（3.93±1.93）%ID/g,但在竞争性抑制组中摄取率为（1.29±0.85）%ID/g。荷瘤裸鼠的SPECT显像结果显示,除肿瘤外,其他组织器官的放射性摄取随时间延长逐渐降低,肿瘤与肌肉组织的放射性攝取比（T/NT）4 h时最高,可达3.25。注射后1 h肿瘤可见,12 h时最为清晰。以上结果提示,⁹⁹Tc^m-NGR易于制备,具有良好的靶向性, 在肿瘤的诊疗中具有良好的研究前景。     

131I标记卟啉化合物结合光动力治疗对肿瘤生长的抑制作用

利用放射性核素¹³¹I标记了卟啉化合物TPPOH和TPPNH₂得到¹³¹I-TPPOH和¹³¹I-TPPNH₂。建立了接种人肝癌细胞系SMMC-7721的裸鼠皮下肿瘤模型。将¹³¹I-TPPOH和¹³¹I-TPPNH₂直接注入肿瘤,考察了卟啉化合物、¹³¹I和光照对肿瘤生长的抑制效果。结果显示,¹³¹I-TPPOH和¹³¹I-TPPNH₂在注射14 d后仍大量滞留在肿瘤组织中。在β射线和光动力的双重作用下,两种¹³¹I标记的卟啉化合物均表现出对肿瘤生长较强的抑制能力。以上结果提示,基于“卟啉+¹³¹I+光动力治疗”结合的概念可开发一种新的实体肿瘤治疗剂。