荞麦蛋白的碱性蛋白酶酶解动力学研究

为掌握碱性蛋白酶对荞麦蛋白的酶解特性,实现对荞麦蛋白的深加工利用及生物活性肽的开发.采用pH-stat法,系统分析了底物浓度、酶浓度、pH及温度对荞麦蛋白水解度的影响,并运用对数函数对水解动力学过程进行描述和拟合.结果表明:在碱性蛋白酶水解荞麦蛋白的过程中,水解度随水解时间的变化呈现对数函数关系,可用公式h=(1/b)ln(1+abt)对其水解动力学过程进行描述;底物具有促进水解反应速度和抑制酶活性的双重作用,在低底物浓度条件下,荞麦蛋白的水解度较高;当底物浓度增加到6%时,蛋白水解度与底物浓度的关系曲线出现转折,水解度较低且趋于平缓;在酶浓度为0.002 g/mL时,水解反应的临界底物浓度为12.27%;在pH9.8、水解温度为50℃、水解时间30 min的条件下,碱性蛋白酶催化水解荞麦蛋白的动力学方程为h=1.218 2 ln(1+12.6([E]/[S]+0.58)t)     

响应面法优化荞麦蛋白酶解工艺

以荞麦蛋白为研究对象,在单因素试验基础上,采用响应面分析法优化荞麦蛋白酶解工艺。结果表明:水解温度64℃、pH9、酶用量3704U/g、底物质量浓度7.8g/L,荞麦蛋白的水解度达到最大值。该条件下荞麦蛋白水解度预测值为37.43%,验证实验所得实际值为37.35%,实测结果与预测值符合良好。     

酶法水解荞麦蛋白的研究

采用枯草杆菌蛋白酶水解荞麦蛋白，对酶解过程的主要影响因素进行了研究。正交法试验结果表明：枯苹杆菌蛋白酶在底物浓度为3%、温度35℃、pH7.5、加酶量为500u/g 的条件下，酶解反应4h，其水解度可达36.09%。     

酶解制备高得率大豆肽工艺条件优化

用Alcalage碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白制备大豆肽.通过单因素实验研究了底物质量分数、酶解pH、酶解温度、加酶量对蛋白水解度和大豆肽得率的影响,并通过响应面分析法对酶解条件进行了优化,得出最佳条件为:底物质量分数5%,酶解pH9.5,酶解温度55℃,加酶量5 400 U/g蛋白.在此条件下,大豆分离蛋白水解度为20.16%,大豆肽得率为92.30%.     

胰蛋白酶限制性水解脱酚棉籽蛋白的研究

采用胰蛋白酶对脱酚棉籽蛋白进行限制性酶解,以改善棉籽蛋白在中性条件下的溶解性.以酶解棉籽蛋白水解度和溶解度为指标,对胰蛋白酶水解脱酚棉籽蛋白的条件进行了优化.结果表明,胰蛋白酶水解脱酚棉籽蛋白的优化条件为:酶底比2∶ 1(50 000 U/g),底物质量浓度100 g/L,pH 10,于20 ℃下酶解3 h.在此条件下,酶解棉籽蛋白的水解度为10.87%,溶解度为63.48%.与酶解前相比,溶解度提高了43.82%.溶解度分析结果表明,限制性酶解棉籽蛋白在pH 1～11范围内均具有较好的溶解度,仍然保持了棉籽蛋白酸溶性的特点.     

Alcalase 2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味酶酶解大豆分离蛋白及脱苦工艺优化

以大豆分离蛋白为原料,选用Alcalase 2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味蛋白酶对大豆分离蛋白进行酶法水解及脱苦工艺研究。以水解度和苦味分值为考察值,对酶解工艺进行优化,确定最佳条件。结果表明:Alcalase2.4L碱性内切酶最佳酶解条件为加酶量14 000 U/g、酶解温度60℃、酶解pH8.5、底物质量分数5%,酶解时间2h,最终水解度为45.34%,此时水解液苦味值为4。Flavourzyme风味蛋白酶对水解液进行二次水解的最优酶解条件为加酶量300 U/g、酶解温度55℃、酶解pH 7.0、酶解时间3 h,此条件下大豆分离蛋白水解液苦味值最低为1.2。Alcalase2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味蛋白酶水解大豆分离蛋白使水解度得到较大提高的同时也解决了水解液的苦味问题。     

液压压榨澳洲坚果粕酶解制备多肽工艺优化

以液压压榨澳洲坚果粕为原料,分析了其常规营养成分含量与氨基酸组成。采用碱性蛋白酶与中性蛋白酶催化酶解澳洲坚果粕蛋白制备多肽。以水解度为指标,利用单因素试验与正交试验考察了各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度的影响。结果表明：液压压榨澳洲坚果粕中含有32.25%的蛋白质,17 种氨基酸,含量为25.05%。碱性蛋白酶各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度影响的主次顺序为：酶解时间＞酶解温度＞加酶量＞酶解pH值＞底物质量浓度,最佳工艺条件为：酶解温度60 ℃、酶解时间3.5 h、底物质量浓度110 g/L、酶解pH 8.0、加酶量2 400 U/g,在此条件下水解度达到了22.83%。中性蛋白酶各因素影响水解度的主次顺序为：加酶量＞酶解时间＞底物质量浓度＞酶解温度＞酶解pH值,最佳工艺条件为酶解温度55 ℃、酶解时间3.5 h、底物质量浓度100 g/L、酶解pH 7.0、加酶量3 200 U/g,水解度达到了22.78%。碱性蛋白酶与中性蛋白酶各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度的影响均达到了极显著水平（P＜0.01）。在最佳工艺条件下,碱性蛋白酶酶解液压压榨澳洲坚果粕制备多肽的效果优于中性蛋白酶。     

响应面法优化玉米黄粉蛋白的酶解工艺

利用pH-stat法测定碱性蛋白酶和中性蛋白酶对玉米黄粉蛋白的水解度,通过Box-Benhnken响应曲面法优化水解条件。根据单因素试验结果设计中心组合试验,以水解度为指标,采用响应面分析法确定最优水解工艺参数。结果表明：蛋白酶水解的最适条件为酶解pH11.10、酶解温度55.00℃、底物质量浓度112g/L、碱性蛋白酶与中性蛋白酶酶活单位比值5:1、加酶量48000U/g、酶解时间120min;在此条件下,玉米黄粉蛋白水解度实测值为30.23%,模型的预期值为30.84%。采用复合酶水解可提高玉米黄粉蛋白水解度,且工艺简单。     

酶法水解罗非鱼蛋白及产物脱腥

采用Alcalase蛋白酶酶解罗非鱼蛋白,优化水解的各项参数.利用D113型阳离子交换树脂脱除酶解液腥味.结果表明:罗非鱼肉经冷冻处理有利于提高水解度(DH),Alcalase最佳酶解条件为pH8.0,温度60.0℃、每克底物蛋白中酶加量为3 000 U,液料比3:1(g/g)、酶解时间3.0 h,在此条件下水解度为18.23%.酶解液经D113树脂处理后,腥味显著降低,溶液颜色透明澄清,略带金黄色,感官品质有所改善.     

固定化碱性蛋白酶制备大豆肽及其体外抗氧化活性研究

采用固定化碱性蛋白酶对大豆分离蛋白进行水解,以水解度（DH）为指标对酶解过程进行研究,在单因素试验基础上以水解度和还原力为指标进行酶解正交试验。结果表明制备抗氧化能力较强的大豆分离蛋白水解物的最佳条件为：温度60℃、pH值9.2、加酶量0.20g/g底物。在此条件下进行水解试验,水解度为24.34%,水解物还原力为0.614。