水提醇沉法提取昭通野生黄丝菌中的多糖

以云南省昭通市山上的野生鲜黄丝菌为原料,去除泥土,阴干,捣碎研磨,过筛,采用水提醇沉法提取野生黄丝菌干粉中的多糖,粗多糖经Sevage法(氯仿-正丁醇体积比为4︰1)脱蛋白,乙醇沉淀,黄丝菌多糖纯品干燥,提取率约为0.95%。     

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Z05065 箬叶多糖的提取方法 公开号：CN1468868A，公开日：2004．1．21从箬叶中提取多糖或箬叶硒多糖的方法。箬叶(或含硒箬叶)在pH值为2—11水中，温度为0—80℃下用纤维素酶(或含纤维素酶的混合酶)酶促反应提取数次，合并提取液浓缩、去沉淀，澄清液加入酒精沉淀24h以上，分出多糖沉淀、脱水、真空干燥即得箬叶多糖(或箬叶硒多糖)。     

白沙参多糖与真鱿多糖的对比研究

采用蛋白酶水解白沙参与真鱿软骨,从组织中释放出多糖糖链,乙醇沉淀去除蛋白质,得到白沙参多糖与真鱿多糖,检测两种多糖中硫酸软骨素的二糖组分、多糖分子量及其抗凝活性。结果表明,白沙参多糖与真鱿多糖中硫酸软骨素均含有硫酸软骨素E二糖单位,在硫酸软骨素中的含量分别为34.8%和31.1%,两种硫酸软骨素分子量分别为105 000和259 000。两种多糖的硫酸化程度高,硫酸基含量分别为13.4%和10.2%。白沙参多糖与真鱿多糖均具有一定的抗凝活性,白沙参多糖的抗凝活性更高。     

茶多糖的纯化工艺研究

实验研究了茶多糖的提取纯化工艺,主要考察醇沉、除蛋白、脱色工艺条件,得适宜的纯化工艺:提取液浓缩至1/4倍体积后,加入4倍体积95%乙醇沉淀6h,离心得茶多糖粗品。多糖粗品溶于水,并用Sevag法去除蛋白质,多糖溶液与Sevag试剂比为4:1,析出的蛋白质离心除去。清液最后经非极性大孔吸附树脂ADS-8脱色,冷冻干燥得到茶多糖制品,多糖含量65%,产率2.05%。     

壳聚糖沉淀分离灵芝多糖的研究

研究高分子絮凝剂壳聚糖沉淀分离灵芝多糖及其与氢氧化钙复合使用分离灵芝多糖的工艺条件。结果表明:单组分壳聚糖不能沉淀分离灵芝水提液中的多糖,它与氢氧化钙复合使用,先在水提液中加入氢氧化钙,使灵芝多糖与氢氧化钙形成复合物,再加入壳聚糖水溶液,进一步架桥絮凝可应用于灵芝多糖的分离,沉淀分离的最佳温度为45℃。     

卡介菌基因组DNA制备工艺研究

目的　摸索制备高纯度卡介菌 (MycobacteriumbovisBacillusCalmette Gu啨ｒｉｎ ,BCG)基因组DNA(BCG -DNA)的制备工艺。方法　采用超声破碎结核杆菌 ,加热使蛋白变性初步去除菌体蛋白 ,进一步经蛋白酶消化 ,乙醇沉淀DNA组分 ,再经离子交换和凝胶过滤层析 ,去除残余菌体蛋白和多糖 ,精制DNA ,并进行质量检测。结果　所制备的BCG -DNA片段大小介于 2 0 0～ 2 5 0bp之间 ,纯度大于 95 % ,蛋白含量占 0 . 1% ,多糖残留占 3 .5 %。结论此方法制备的BCG- DNA纯度较高 ,且无有机溶剂残留 ,适用于BCG DNA制备。     

地下水中酸度对硫酸盐还原菌和生物沉淀的影响

为了检测地下水中通过生物沉淀对金属补救阶段性降低的影响，进行了大型柱子的研究。在一个柱子中使用约1g／L的EtOH对金属污染的、pH为5．5的地下水进行处理，该柱子使用聚合物EtOH传输系统刺激生物沉淀，而另外的柱子未被处理，作为空白。8周后观察到硫酸盐被还原且锌被去除。硫酸盐还原区域锌的去除说明发生了ZnS沉淀，铜在反硝化作用区域被去除。一旦建立了锌的生物沉淀的稳定状态，金属污染的地下水的pH逐步从5．5降到4．25。     

一株海洋放线菌胞外多糖的初步研究

对南海石珊瑚Di ploria strigosa中一株共生放线菌ZJG1进行发酵,采用热水提取、乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白、乙醇分级沉淀分离的方法提取纯化多糖,采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,并以Vc为对照,采用DPPH清除法研究多糖对自由基的清除作用.结果表明,放线菌ZJG1多糖总提取率为12.70％,乙醇分级沉淀下...     

银杏外种皮多糖的提取及开发应用前景

银杏外种皮经乙醚脱脂后，用热水抽提，D900大孔弱碱阴离子交换树脂脱色提纯，浓缩后，乙醇沉淀得银杏外种皮粗多糖。银杏外种皮多糖具有抗癌、提高免疫力、降血脂、止咳祛痰等功能，所以利用银杏外种皮多糖可以配制抗癌的药品和保健食品，具有开发和应用前景。     

Sevag法去除白及多糖中蛋白的研究

本文采用Ｓｅｖａｇ法对白及多糖中的游离蛋白进行去除,并根据不同条件时的去除效果进行分析,找出了Ｓｅｖａｇ法在白及多糖游离蛋白去除中的实际应用条件。     

伤寒Vi多糖柱层析纯化工艺的优化

目的优化伤寒Vi多糖柱层析纯化工艺,以替代传统苯酚抽提、乙醇分级沉淀法。方法采用DEAE离子交换层析柱,分别在缓冲液(20 mmol/L Tris-Cl)pH值为6.0、7.0和8.0的条件下纯化1批伤寒Vi多糖粗糖,并与传统苯酚抽提、乙醇分级沉淀法进行比较。按《中国药典》三部(2010版)要求检测纯化样品的蛋白质含量、核酸含量、O-乙酰基含量、分子大小及内毒素含量,并计算样品的多糖回收率。采用优化的DEAE柱层析纯化工艺纯化3批伤寒Vi多糖粗糖,验证该工艺的稳定性。结果 DEAE离子交换柱缓冲液(20 mmol/L Tris-Cl)pH值为7.0和8.0时,可有效将伤寒Vi多糖的杂质与纯化产物分离,多糖回收率分别为36.52%和38.35%,明显高于传统工艺的多糖回收率(15.52%),且纯化产物的内毒素含量(10 EU/μg)明显低于传统工艺(200 EU/μg)。以优化工艺(pH 7.0)纯化3批伤寒Vi多糖粗糖获得的6批精糖的蛋白质含量、核酸含量、O-乙酰基含量、分子大小、内毒素含量及多糖回收率差异较小,标准偏差均小于5%。结论优化了伤寒Vi多糖柱层析的纯化工艺,该工艺稳定性良好,可替代传统苯酚抽提、乙醇分级沉淀法,应用于伤寒Vi多糖的纯化。     

A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗大规模接种后的速发型接种反应观察

目的观察A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗大规模接种后的速发接种反应。方法以A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗为观察组,伤寒Vi多糖疫苗为对照组,按组群随机分层配对的原则,将观察现场分为108个组群,观察组和对照组各分配54个组群进行接种。建立接种反应监测系统,按统一表格和方法对两组的速发接种反应进行监测。结果两组共接种34 543人,其中A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗接种18 167人,伤寒Vi多糖疫苗接种16 376人。A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗速发接种反应率为0.44‰;伤寒Vi多糖疫苗速发接种反应率为0.79‰,二者差异无统计学意义;速发接种反应均出现在接种后15 min内,最早的出现在接种后5 min,速发接种反应中有2例为异常反应,但未出现严重反应。结论A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗速发接种反应发生率低,预后良好。     

伤寒Vi多糖疫苗的接种反应及其免疫效果

目的观察伤寒Vi多糖疫苗的接种反应及免疫效果。方法采用随机、双盲、对照设计的原则,评价观察组和对照组疫苗接种后的反应发生率、抗体阳转率和抗体几何平均滴度(GMT)。结果疫苗接种后观察组和对照组全身反应总发生率分别为2.04%(11/540)和2.59%(7/270),均为轻度反应;局部反应发生率分别为3.52%(19/540)和4.07%(11/270)。伤寒Vi抗体阳转率分别为88.37%和85.46%,GMT分别为1∶134.31和1∶125.40,两者差异均无显著意义。结论伤寒Vi多糖疫苗在5岁以上人群接种后反应率低,免疫效果好。     

伤寒Vi多糖菌苗的安全性和免疫效果研究

对我国首次研究成功的伤寒Vi多糖菌酋进行了人体接种安全性、反应性、血清学效果和流行病学效果观察,各期观察达21万余人,结果证实伤寒Vi多糖茵茵安全世良好,反应轻微。血清学效果显示,30μg一次免疫,Vi抗体4倍增长可达91．6％。两次流行病学效果考核,按血培养伤寒杆菌阳性病例统计,保护率可达70％左右,茵茵的效果指数为3．29～3．49。该菌苗性质稳定,初免只需注射一针,替代现行菌体菌苗推广应用是完全可行的。     

Triton X-114萃取法去除脑膜炎球菌荚膜多糖中的内毒素

目的采用Triton X-114萃取法去除A群脑膜炎球菌荚膜多糖中的内毒素。方法1% Triton X-114与多糖溶液在0℃混合均匀,分别加热至25、37和56℃,观察分层情况。离心后收集上层水相,对其中残余萃取剂Triton X-114进行去除方法的选择。比较多糖浓度对萃取的影响及二次萃取的效果,并对终产物进行全面检定。对W135群和Y群脑膜炎球菌多糖进行萃取效果比较。结果最终选择56℃10min作为升温条件,3000r/min离心10min后,上清中多糖的内毒率含量均减少85%以上,多糖回收率不低于80%。残余的Triton X-114选择透析法去除。多糖浓度越低,越易于萃取。二次萃取多糖回收率大于85%。内毒素含量可降低至0.706EU/μg多糖。经检测,终产物多糖的相对分子质量未发生改变,免疫原性与萃取前差异无显著意义,异常毒性、多糖及内毒素含量合格。蛋白含量稍有增加,核酸含量降低。W135群和Y群脑膜炎球菌多糖的萃取结果与A群多糖相似。结论Triton X-114萃取法可以用于去除脑膜炎球菌多糖中的内毒素。     

香菇多糖脱蛋白质方法的研究

在弱碱性溶液环境下,将热水浸提过的香菇提取液用CAS脱蛋白质,再结合“酶解-透析”和活性炭处理,最后用有机混合试剂回收、冷冻干燥,得到香菇多糖。经检测,产品中的蛋白质和葡萄糖醛酸基本除尽,多糖回收率为0.67%,产品颜色为白色片状。结果证明,该方法能够有效地去除香菇多糖中的蛋白质、果胶、核酸等杂质。     

伤寒、副伤寒甲沙门菌毒性和抗原性的稳定性

目的观察伤寒Vi多糖结合疫苗生产用菌株伤寒沙门菌CMCC50098株和副伤寒甲沙门菌CMCC50073株毒性和抗原性的稳定性。方法将CMCC50098和CMCC50073菌株分别连续传代至30代,取3、5、10、15、20、25、30代次菌,进行小鼠毒性试验,免疫家兔制备血清,进行抗原性试验。结果CMCC50098和CMCC50073菌株连续传30代,毒性均未改变,抗原性均未下降,血清凝集效价均达到1∶12800。结论CMCC50098和CMCC50073菌株连续传代至30代,毒性及抗原性均稳定。     

A、C、W_(135)、Y群脑膜炎球菌多糖疫苗的研制

目的研制A、C、W135、Y群脑膜炎球菌四价多糖疫苗,并采用新方法去除细菌内毒素。方法经细菌培养后,分别提取A、C、W135和Y群脑膜炎球菌荚膜多糖,纯化后,采用超速离心和层析技术相结合去除内毒素,按一定的配比制成四价多糖原液,加入保护剂,制成冻干疫苗,并进行检定。结果所研制的A、C、W135、Y群脑膜炎球菌多糖疫苗各项指标均达到了质控标准,内毒素含量小于10EU/μg,具有良好的安全性及有效性。结论已成功制备了A、C、W135、Y群脑膜炎球菌多糖疫苗。     

伤寒-鼠伤寒基因重组菌株Vi4072与伤寒Ty2株和枸橼酸杆菌的Vi抗原比较

将来源于枸橼酸杆菌编码产生Vi抗原的ViaB基因片段,通过基因重组技术引入减毒的鼠伤寒杆菌而组建的Vi4072重组株与伤寒沙门氏菌Ty2株和枸橼酸杆菌的Vi抗原,通过琼脂双向扩散试验、被动血凝试验、对BALB/c小鼠的免疫力试验以及对Vi抗原分子的化学元素含量、红外光谱、超导核磁C谱、H谱分析测试。结果表明上述三种菌株产生的Vi抗原其血清学特性、免疫保护作用及化学分子结构等基本相同。且Vi4072重组株表达Vi抗原量高于伤寒Ty2株。     

生漆多糖的分离和分析

由云南镇雄采取新鲜生漆,经丙酮除去漆酚,沸水浴提取,三氯醋酸—正丁醇除杂蛋白,乙醇沉淀。再应用CTAB络合法进一步精制,得到生漆漆多糖精制品,含糖量占90％以上,经纸层析,醋酶纤维素薄膜电泳、琼脂糖电泳分析表明,其组成为单一斑点。经分析,分子中含有已糖醛酸、阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖和葡萄糖。组成中不含蛋白和核酸类物质。