RT-PCR法检测庚型肝炎病毒C(GBV-C)RNA

应用RT－PCR法在非甲～非戊型肝炎患者血清及单采浆站供血员血浆中检测到GBV－CRNA，扩增产物经序列测定进一步确证，在30例非甲～非戊型肝炎患者中阳性率为6．6％；在600例单采浆供血者血浆中阳性率为0．33％。提示GBV－C可能不是非甲～非戊型肝炎的主要致病因子，可能存在GBV－C健康携带者。     

几家HCV抗体诊断试剂盒检测系列血清的比较

应用Abbott、UBI及国内几家的HCV第二代抗体诊断试剂盒A、B、c及D检测25名HCV感染者的210份感染后不同时期的系列血清,首次采用ELISA及RIBA分片段检测抗体,并与敏感的PCR法检测血清中HCV RNA结果相比较。虽然各试剂盒的总体检测符合率无显著性差异,但个别国产试剂盒的早期检测能力尚有待提高。用任何一家抗体检测试剂盒均会漏检小部分标本,抗体检测阴性的血清在100000倍稀释后仍可检出HCV RNA,因此,有必要发展包括更多片段包被的第三代HCV抗体诊断试剂盒。     

丙型肝炎病毒RNA室内质控品的制备及其临床应用评估

目的探讨自制丙型肝炎病毒(hepatitis C Virus,HCV)RNA定量检测室内质控品的可行性,并评估其临床应用价值。方法收集已发过HCV-RNA临床报告的血浆样本,分别将HCV-RNA阴性血浆(<50 IU/m L)、弱阳性血浆(10²～10³ IU/mL)和强阳性血浆(10⁵～10⁶ IU/mL)混合、离心后,获得阴性质控品(HCV-RNA-N)、弱阳性质控品(HCV-RNA-L)和强阳性质控品(HCV-RNA-H),小量分装后于-80℃冻存。确定靶值后,评价其均一性、重复性、准确性和稳定性。结果自制HCV RNA室内质控品具有良好的均一性、重复性和准确性,可在-80℃保持稳定至少12个月。结论 HCV RNA室内质控品制备过程简单,样品均一,重复性好,准确性高,稳定性良好,可用于临床检测HCV-RNA。     

CPARH的合成及Ag（Ⅰ）－CPARH络合物的光度性质研究

合成了５－（２－（４－氯苯酚）偶氮）－罗丹宁。在ｐＨ６．９５的ＮＨ４Ａｃ缓冲溶液中，当有０．１８％的ＳＬＳ存在时，Ａｇ（Ⅰ）与ＣＰＡＲＨ形成１：１络合物，λｍａｘ为４８０ｎｍ，ε为１．０×１０５Ｌ·ｍｏｌ－１·ｃｍ－１，Ａｇ（Ⅰ）含量在０．０１１～５．４０μｇ／ｍＬ范围内服从Ｂｅｅｒ定律。所提出的方法用于精铜矿中微量银的测定，相对误差在５．０％以内。     

茶叶中核糖核酸的分析检测

通过对几种茶叶中核糖核酸（ＲＮＡ）的分离与定性鉴定、电泳分离鉴定及紫外分光光度计定量测定，表明茶叶中确实存在ＲＮＡ，其含量随产地不同而有一定差异，其中滇红、滇绿含量较高，可达１％水平。     

献血清HCV核心抗原的初步检测及意义

<正>丙型肝炎主要经血液传播,目前尚没有特殊的预防和治疗方法。我国《献血法》规定,献血者的血液必须经过包括抗-HCV在内的初复检合格后方可用于临床,然而,抗-HCV的出现为HCV感染后的6～12周（窗口期）,所以,献血者抗-HCV检测阴性者不能排除携带HCV的可能。此时通过HCV核心抗原（HCV C抗原）的检测可提高检出率,降低 HCV漏检的风险。作者采用美国强生公司 HCV C抗原检测试剂对1100份无偿献血者血样进行检测,报告如下。 本次检测正常的血样824份中没有检出 HCV C抗原,可能是由于检测数量小的原因。检测HBsAg（+）者43份中有     

四元共聚乳液的合成及性能研究

采用异相粒子成核阶段滴加单体乳液的改进种子乳液聚合方法合成了 PBMA／P（BMA－AA－AM）和 PBMA／P（BMA－AA－HMA）2种功能复合聚合物乳液。研究了乳化剂,功能单体对乳液的影响。结果表明：随着乳化剂SLS、OS－15含量的增大,乳液粒径减小,乳液稳定性有一极佳值存在;随着功能单体含量增大,乳液粒径增大。     

长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因对骨肉瘤作用机制的研究进展

骨肉瘤(Osteosarcoma,OS)是儿童及青少年最常见的骨恶性肿瘤,恶性程度高,治疗手段虽不断进步,但患者长期生存率仍较低.长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)小核仁RNA宿主基因(small nucleolar RNA host gene,SNHG)对肿瘤的发生发展起重要作用,...     

3-溴-1-氯-5,5-二甲基海因及相关化合物的合成

由５,５－二甲基海因（ＤＭＨ）一锅法合成３－溴－１－氯－５,５－二甲基海因（ＢＣＤＭＨ）。合成了中间体一溴－５,５－二甲基海因（ＢＤＭＨ）及一氯－５,５－二甲基海因（ＣＤＭＨ）,并由这两种中间体合成了３－溴－１－氯－５,５－二甲基海因和１－溴－３－氯－５,５－二甲基海因。     

两神噻唑偶氮三酚类星色剂的合成及分析应用

以２－氨基噻唑和２－氨基苯并噻唑为原料，经溴化和重氮化，与连苯三酚偶联合成了４－（５－溴－２－噻唑偶氮）连本三酚和４－（６－溴－２－苯并噻唑偶氮）连苯三酚，通过了元素分析和波谱鉴定。研究了两种试剂的一般性质及其与高价金属离子的显色反应，发现在阳离子表面活性剂存在下它们与Ｍｏ（Ⅵ）、Ｗ（Ⅵ）、Ｔｉ（Ⅵ）等显色反应有较高的灵敏度。     

检测HCV RNA的PCR试剂质控试行参考品的建立

选慢性丙型肝炎病人中HCVRNA含量不等的阳性血清作为阳性标准，采用选自HCV基因5’端非编码区的不同引物来扩增病毒基因，扩增产物与分子量标准进行比较，部分产物用酶切初步分析进行确证。选国家HCV抗体诊断试剂盒临床验证参考品中的阴性样品作为阴性标准，经反复检测显示HCVRNA为阴性。选强阳性血清经5%小牛血清稀释作为灵敏度标准，检测范围为10－5～10－7。应用该参考品对北医肝病研究所的三批HCVRNA诊断试剂盒进行检测，阳性和阴性标准均符合要求，灵敏度为10-5～10-6。     

Quantum‐dots‐based detection of hepatitis C virus (HCV) NS3 using RNA aptamer on chip

BACKGROUND: Over 170 million people, more than 3% of the world's population, suffer from the hepatitis C virus (HCV) infection and the rate of death from liver‐related mortality to HCV has increased. In respect of this, the development of assays for biological imaging should be urgently considered as an essential factor in diagnosis. RESULTS: A novel HCV‐detecting technique using a nanoparticle‐supported aptamer probe was demonstrated. With the aid of nanoparticle quantum dots (QDs) with carboxyl group as an imaging probe, and 5′‐end‐amine‐modified RNA oligonucleotide as a capturing probe, target HCV NS3 was visually detected on chip. The QDs‐based RNA aptamer for HCV NS3 showed high selectivity and specificity against other protein such as BSA. The detection limit of HCV NS3 protein was 5 ng mL^?1 level. CONCLUSION: With a novel strategy for protein–aptamer interaction, the feasibility of applying QDs‐based fluorescent detection technique to HCV viral protein assay for the development of a protein biochip was demonstrated. This scheme of QDs‐mediated imaging with a target‐oriented specific RNA aptamer for the detection of infectious HCV diseases provides an efficient strategy and a promising new platform for monitoring applications. Copyright © 2010 Society of Chemical Industry     

(S)-4-(甲硫基)-2-[2-羰基-1-吡咯烷基]丁酰胺的合成

(S) 2 氨基 4 (甲硫基)丁酸甲酯盐酸盐于浓氨水中,发生酰胺化反应,制得(S) 2 氨基 4 (甲硫基)丁酰胺,收率63%;(S) 2 氨基 4 (甲硫基)丁酰胺用甲醇溶解,与浓盐酸成盐,得(S) 2 氨基 4 (甲硫基)丁酰胺盐酸盐,收率66%;(S) 2 氨基 4 (甲硫基)丁酰胺盐酸盐在相转移催化剂四丁基溴化铵(TBAB)及研细氢氧化钾的作用下,与4 氯丁酰氯发生取代、环化反应,制得(S) 4 (甲硫基) 2 [2 羰基 1 吡咯烷基]丁酰胺,收率61%。产品的结构经TLC、IR、1HNMR等进行了表征。     

3-(S)-(-)-(1-氨甲酰基-1,1-二苯基甲基)吡咯烷的制备

3-(S)-(-)-1-氨甲酰基-1,1-二苯基甲基)吡咯烷是合成抗尿失禁药物达非那新的重要中间体。它由3-(S)-( )-3-羟基吡咯烷盐酸盐经磺酰化和烷基化反应得到3-(S)-( )-(1-氰基-1,1-二苯基甲基)-1-甲苯磺酰基吡咯烷,再经过去磺酰化和水解4步反应制得,总产率为5.1%。     

(S)-2-(ethyl propionate)-(O-ethyl xanthate)- and (S)-2-(Ethyl isobutyrate)-(O-ethyl xanthate)-mediated RAFT polymerization of vinyl acetate

(S)-2-(Ethyl propionate)-(O-ethyl xanthate) (X1) and (S)-2-(Ethyl isobutyrate)-(O-ethyl xanthate) (X2) were used as the reversible addition-fragmentation chain transfer (RAFT) agents for the radical polymerization of vinyl acetate (VAc). The former showed the better chain transfer ability in the polymerization at 60°C. Kinetic study with both RAFT agents showed pseudo-first order kinetics up to around 85% monomer conversion. Molecular weight of the resulting polymer increased linearly with increase in the monomer conversion up to around 85%. The observed molecular weights calculated from ¹H-NMR spectrum [M_n(NMR)] are close to the corresponding theoretical molecular weights [M_n(theor)]. The corresponding polydispersity index (PDI) of the resulting polymers remained almost constant at around 1.2 up to ∼ 65% monomer conversion and then increased gradually with the further increase in the monomer conversion. Chain-end analysis of the resulting polymers by ¹H-NMR showed clearly that polymerization started with the radical forming out of the xanthate mediator. The negligible homo-chain extension and the hetero-chain extension involving synthesis of poly(VAc)-b-poly(NVP) diblock copolymer were occurred. © 2012 Wiley Periodicals, Inc. J Appl Polym Sci, 2012     

1-(2-氯苯基)-2-(4-氟苯基)-3-溴-1-丙烯的合成

1-(2-氯苯基)-2-(4-氟苯基)-3-溴-1-丙烯(2)是氟环唑的关键中间体。以1,2-二氯乙烷和水为溶剂,1-(2-氯苯基)-2-(4-氟苯基)-1-丙烯(1)在氢溴酸/双氧水体系中发生α-溴代反应得到该化合物。通过使用氢溴酸/双氧水代替溴素或N-溴代丁二酰亚胺,提高了溴的利用率及产品的收率,避免了烯烃的加成,减少了副反应的发生,减少了三废。通过实验获得了反应的优惠条件:二氯乙烷和水为溶剂,回流反应,n(1)∶n(HBr)∶n(H2O2)=1∶1.1∶2.5,氢溴酸和双氧水的滴加时间为6 h,在上述反应条件下,反应收率为90.6%,选择性90.6%。     

4-溴-1-溴甲基-2-对氯苯基-5-三氟甲基吡咯-3-腈的合成

以2 对氯苯基1 甲基5 三氟甲基2 吡咯啉3 腈为原料,经三步反应合成了4 溴1溴甲基2 对氯苯基5 三氟甲基吡咯3 腈,合成总收率为29.8%。     

氨噻肟酸乙酯的合成研究

以乙酰乙酸乙酯为原料,经肟化、甲基化、卤化及环合合成了(Z)-2-(2-氨基-4-噻唑)-2-甲氧基亚胺基乙酸乙酯。其中,肟化、甲基化无需分离提纯,简化了操作步骤,卤化过程用磺酰氯代替了传统的卤化试剂溴素,降低了反应的成本,并考察卤化反应中各因素对收率的影响。采用红外、核磁及液质连用色谱等确定其结构,通过高效液相色谱测定该工艺制得的氨噻肟酸乙酯的纯度可达到98%以上。产品的总收率达到46%(以乙酰乙酸乙酯计)。     

3-(S)-巯基-1-(N-对硝基苄氧羰基乙酰亚胺)四氢吡咯的合成

对标题化合物的合成工艺作了改进。以L-羟基脯氨酸为原料,环己酮作催化剂,经脱羧获得的3-(R)-羟基四氢吡咯盐酸盐,与由乙醇和乙腈反应得到的乙氧基乙酰亚胺盐酸盐,经5步反应成功地合成了目标产物,总收率为15.6%,关键中间体及目标化合物经过1HNMR检测,还探讨了标题化合物及其前体的构型转化问题。