酶法生产低聚异麦芽糖及酵母分离纯化研究

以玉米淀粉为原料生产低聚异麦芽糖(IMO)的工艺,主要涉及酶法获得低纯度IMO和酵母纯化工艺两部分。首先将玉米淀粉液化和糖化,然后转苷生成低纯度IMO。低纯度IMO通过酵母发酵法除去可代谢糖类(葡萄糖、麦芽糖和麦芽三糖等),有效地转化成高纯度的IMO。酿酒酵母可以发酵除去IMO糖浆中的葡萄糖,在麦芽汁中培养的酵母还可以发酵麦芽糖和麦芽三糖。发酵3d后,生成高纯度的IMO,主要成分为异麦芽糖、潘糖、异麦芽三糖占总糖98%以上。酵母发酵过程中,酵母细胞的死亡率的增加取决于发酵策略和低纯度IMO的浓度,对数期的酵母细胞发酵效果优于稳定期的酵母细胞。     

异麦芽低聚糖的生产

<正> 在现今的食品工业中,消费者对功能性食品的需求日益增加,相关的产品与行业异军突起。作为一种能防止蛀牙,又含双歧杆菌的增长因子,能改善肠内菌丛的食品添加剂,异麦芽低聚糖深受市场的关注,并已得到广泛的应用。 异麦芽低聚糖通常被称为“ALO混合物” (Anomalously LinkedOligosaccharides,不规则连接的低聚糖),成分包括异麦芽糖、潘糖、异麦芽三糖及其他几种支链低聚糖。它带有甜味,不被酵母发酵,具有低粘度、高保温性、抗微生物污染、防焙烤产品老化等功能特性。     

木薯淀粉生产异麦芽低聚糖粉的工艺研究

:研究了木薯淀粉工业化生产异麦芽低聚糖粉的工艺条件、工艺控制和产品特性。分析结果显示 ,异麦芽低聚糖粉产品中异麦芽糖、异麦芽三糖、潘糖三种糖含量达到 35 %以上 ,分支低聚糖总量达 5 7.5 % ,葡萄糖含量则相对较低 ,从而大大改善了产品的喷雾干燥性能。     

木薯淀粉生产异麦芽低聚糖粉的工艺研究

研究了木薯淀粉工业区化生产异麦芽低聚糖粉的工艺条件、工艺控制和产品特性。分析结果显示,异麦芽低聚糖粉产品中异麦芽糖、异麦芽三糖、潘糖三种糖含量达到３５％以上,分支低聚糖总量达５７．５％,葡萄糖含量则相对较低,从而大大改善了产品的喷雾干燥性能。     

发酵过程酵母对麦汁糖的吸收和代谢

麦汁中含有五种可发酵性糖葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖和麦芽三糖.在大多数麦汁中,麦芽糖的浓度最高,其次是麦芽三糖和葡萄糖.酵母对以上糖的吸收按一定顺序,葡萄糖抑制了麦芽三糖的吸收,酵母吸收葡萄糖不需要消耗其代谢的能量,而对麦芽糖和麦芽三糖的吸收需要能量(活性传递).各种糖的浓度和它们相关的比例会影响到酵母对总体麦汁的发酵速率和程度.Ale啤酒酵母菌株和Lager酵母菌株对麦汁糖的吸收各有不同的特性.例如,与Lager酵母菌株相比,Ale啤酒酵母菌株很少能利用麦芽三糖.此外,麦汁中葡萄糖和麦芽三糖的浓度会影响到啤酒的风味.特别是,用提高了葡萄糖浓度的麦汁酿造的啤酒其所含的酯浓度会升高(特别是乙酸乙酯和乙酸异戊酯).而用含高浓度麦芽糖的麦汁所酿造的啤酒,其酯的浓度大大减少了.高浓酿造(＞16°P)容易发生此现象.     

高效生物防腐剂纳他霉素发酵的研究

通过探索各种碳源、氮源及PO43-对发酵生产纳他霉素的影响,发现生产纳他霉素的最佳培养基为0.25%葡萄糖、4%低聚糖、0.15%酵母粉、4%鱼粉、1%麦芽浸膏。     

粗柄羊肚菌液体发酵条件研究

对粗柄羊肚菌菌丝体液体发酵的条件进行了研究.结果表明,在PYG(0.5%酵母提取物的PDA)培养基上,合适的摇瓶培养条件是:发酵温度25℃,发酵摇瓶转速150 r/min,培养基装量为150mL/500mL(加10粒玻璃珠),添加0.7%的羧甲基纤微素(CMC)可以明显地提高菌丝体的生物量.在上述摇瓶培养条件基础上,通过6种发酵培养基发酵实验,获得生物量最高的发酵培养基,其组成为麦芽汁50%、玉米粉2%、酵母提取物0.5%,发酵生物量为16.4g,再生率为9%.     

泸型大曲中产酯酵母的筛选鉴定及产酯条件优化

乙酸乙酯是构成浓香型白酒香味的主要物质之一,其含量对白酒的风味和质量起着非常重要的作用。该试验在泸州大曲中分离出了8株酵母菌,经菌落形态和生理生化实验鉴定分别为假丝酵母属（Candida sp.）、汉逊酵母属（Hansenula sp.）、酒香酵母属（Brettanomyces sp.）和德克酵母属（Dekkera sp.）,并筛选出4#菌株为高效产酯酵母。利用此汉逊酵母进行发酵并对其产酯条件进行优化。正交试验结果表明,汉逊酵母的适宜培养条件为在麦芽汁培养基中添加10%葡萄糖、0.5%乙酸、体积分数95%的乙醇5%,发酵温度30 ℃,发酵时间3 d,摇瓶转速120 r/min,在此条件下产酯量最高可达1.479 g/L。     

葡萄糖苷酶在啤酒酿造中的应用

由Aspergillus niger发酵提纯得来的α-葡萄糖苷酶，在淀粉糖行业生产异麦芽低聚糖(IMO)中得到了广泛的应用。利用它的特性应用于啤酒酿造中，添加的工序不同，会产生不同的效应：在糖化过程加入α-葡萄糖苷酶，可以提高麦汁中异麦芽低聚糖含量而使啤酒的发酵度降低，为生产低浓度啤酒、改善啤酒口感找到了又一新途径。若在发酵罐里添加α-葡萄糖苷酶，     

异麦芽低聚糖面包的研制

通过探讨添加异麦芽低聚糖对面粉粉质、面包焙烤品质以及面包贮存过程中老化程度的影响,以期制作高质量的异麦芽低聚糖面包。试验结果表明,异麦芽低聚糖可改善面团的流变特性,面粉吸水率下降,面团的形成时间、稳定时间延长,面团弹性增加,但面团的延伸性在添加量0%~20%时逐渐增大,超过20%时有所减弱,添加异麦芽低聚糖可有效降低失水率,改善面包的硬度,延长其货架期。在本试验条件下,异麦芽低聚糖的添加量以不超过20%为宜。     

白酒酒曲中9株酵母菌的分离与特性研究

从本地白酒酒曲中成功分离出9株酵母菌,依次命名为Y-1～Y-9。比较了这9个菌株的生理生化特性、耐高温能力和耐酒精能力等特性。结果表明:分离的9株酵母菌上述特性差别较大,其中,Y-4各方面均表现突出,该菌株能利用木糖在内的多种糖源,在45℃下生长良好,能耐14%的酒精度。对橘子汁为原料进行的发酵实验表明,上述菌株均能以橘子汁为原料生产酒精,其中,Y-4发酵能力最强,发酵84h后,CO2失重为12.913g。综上所述,Y-4是一株极具潜力的燃料乙醇生产工程菌株。     

富硒酵母的分离鉴定及富硒条件的优化

富硒酵母生产发酵食品是补充硒元素的有效方法,以实验室保存的酵母菌为材料,通过选择培养基平板稀释法,分离纯化得 到四株富硒酵母,经形态学和分子生物学鉴定,初步鉴定菌株Z4、Z5、Z7、Z9均为库德毕赤酵母（Pichia kudriavzevii）。 通过对比四株菌 的生长曲线及富硒能力,发现Z5菌株生长状况最好,选取接种量、碳源（葡萄糖）和氮源（蛋白胨）添加量作为单一因素,通过单因素 试验和正交试验,探究各影响因素对菌株Z5富硒能力的影响。 结果表明,Z5菌株的最佳富硒发酵条件为接种量10%,葡萄糖2.4%,蛋 白胨1.8%。 在此最佳条件下,菌株Z5生物量为9.63 g/L,总硒含量可达到862 μg/g。     

均匀设计法优化廉价型牛凝乳酶工程菌发酵培养基

为了获得生产用廉价型牛凝乳酶工程菌发酵培养基,通过单因素试验考察发酵培养基中各组分对产酶的影响。结果显示：葡萄糖、玉米浆、酵母提取物、尿素质量浓度对产酶影响显著。以上述因素作为随机因子,进行均匀设计试验,采用逐步回归方法对试验结果进行分析。结果表明：在葡萄糖45g/L、玉米浆17g/L、酵母提取物6g/L、尿素12g/L的条件下,凝乳酶活性达342.86SU/mL,比优化前提高了1.22倍。所得培养基为重组牛凝乳酶的高效低成本生产提供了参考。     

热带醋酸杆菌B104发酵条件的优化研究

从自然发酵的苹果醋醪中筛选鉴定得到1株热带醋酸杆菌（Acetobacter tropicalis）B104,为进一步提高这株热带醋酸杆菌的产酸能力,对其培养条件和培养基成分进行了优化。结果表明,最佳培养条件和培养基组成为接种量4.0%,培养温度30 ℃,摇床转速120 r/min,培养基初始pH值为5.5,10.0 g/L葡萄糖和体积分数为5.0%的无水乙醇为碳源,20.0 g/L酵母膏为氮源。在此条件下培养12 d,该菌株产酸量达到55.4 g/L,是优化前的1.5倍。     

吸附菌体的霉菌筛选试验

探索出一种新的吸附发酵液中菌体的方法。以曲霉菌作为试验菌株对异养小球藻发酵液进行吸附试验,通过霉菌筛选试验找出一株吸附效果良好的黑曲霉,并得出最佳的吸附条件为发酵液初始糖含量3.0 g/100 mL,小球藻初始质量浓度10.0 g/L,在此条件下接种后24～72 h霉菌的吸附能力最强,发酵液的质量浓度下降38.69%,吸光度值下降32.34%。通过酵母菌发酵液试验黑曲霉的吸附效果得到进一步验证。     

锁掷孢酵母产胞外多糖发酵条件优化

为进一步提高酵母菌产酵母胞外多糖（EPS）的能力,该研究以近粉红锁掷孢酵母（Sporidiobolus pararoseus）PFY-Z1为出发菌株,筛选出其最适产糖发酵培养基,并以此为基础,联合应用单因素试验、Plackett-Burman（PB）试验和中心组合设计（CCD）试验,优化菌株产EPS的最佳发酵条件。结果表明,菌株最佳培养基配方为葡萄糖15 g/L,硫酸铵15 g/L,硫酸镁1.8 g/L,氯化钙0.28 g/L,磷酸氢二钾0.24 g/L,氯化钠0.6 g/L。菌株最佳培养条件为培养温度28 ℃、摇床转速210 r/min、接种量5%、装液量100 mL/250 mL、培养时间6 d,培养基初始pH值5.10条件下,EPS含量最高,为（4.60±0.13）g/L,是优化前的1.40倍。该研究为今后利用S. pararoseus PFY-Z1产胞外多糖奠定了基础,同时也为酵母菌EPS的工业化制备和生产提供了理论依据。     

发酵法分离提纯大豆糖蜜中低聚糖的研究

对3 种酵母菌,1 种乳酸菌,1 种曲霉进行筛选实验,选出了消耗蔗糖最多,水苏糖、棉子糖保留率最高的1 株酵母菌。经单因素试验证明,其发酵大豆糖蜜的最佳条件为：发酵初始pH 值为5.0,接种量为2%(V/V),大豆糖蜜稀释8 倍,不添加任何生长因子,28℃、180r/min 的条件下发酵 12h。大豆糖蜜发酵液中各糖分的保留率为：蔗糖8.76%、棉子糖99.61%、水苏糖95.72%。     

耐高温酵母的筛选鉴定及发酵性能的初步研究

为获得耐高温酵母菌,从白酒糟醅中分离筛选出1株在45℃生长良好且产乙醇能力较高的酵母菌株.经ITS和26S rDNAD1/D2区域序列分析比对,结合菌落菌体形态鉴定其为库德毕赤酵母.其最适生长温度为30℃,与安琪酵母相比较,高温条件下生长优势明显.以浓度为10％ (w/v)的葡萄糖为底物,在45℃进行静置发酵,其产乙醇浓度为18.74g/L,安琪酵母产乙醇浓度为11.40g/L,该菌株较安琪酵母表现出明显的优势.     

米曲霉giF-10内切葡聚糖酶基因的克隆表达及酶学性质分析

根据NCBI(GenBank Accession No.:D83732.1)中注册的米曲霉内切葡聚糖酶CelB基因序列设计引物,以本实验室自行筛选的天然米曲霉基因组DNA为模板,PCR高保真扩增出内切葡聚糖酶基因eg,将其定向插入到酵母表达载体pPICZαA上,转化酵母宿主菌X33,刚果红水解圈筛选结果表明已成功表达。SDS-PAGE分析表明,表达产物分子量约为65 ku。对酵母表达工程菌X33-eg进行发酵条件优化,结果显示最适甲醇诱导浓度为0.75%,用1 L三角瓶诱导培养5天达到最高酶活120 U/mL。对重组酶的酶学性质分析表明,其最适反应pH值和温度分别为pH4.0和45℃,在30～45℃和pH3.4～pH6.9范围内可保持内切葡聚糖酶最高酶活力70%以上。     

丛梗孢酵母发酵产赤藓糖醇条件的优化

丛梗孢酵母BH010是从蜂蜜样品中分离得到的产赤藓糖醇菌株。该实验研究了发酵培养基及发酵条件对丛梗孢酵母赤藓糖醇产量的影响。单因素实验及正交实验的结果表明,最佳发酵培养基及发酵条件为:葡萄糖含量(质量浓度)35%、酵母膏含量(质量浓度)1%、CaCl2.2H2O(质量浓度)0.2%,初始pH6.0,接种量1%,30℃摇瓶培养9d。最终赤藓糖醇产量为110.61g/L发酵液,比普通发酵条件下提高85.56%。