何首乌饮对自然衰老大鼠肾脏形态学的影响

目的:通过实验,研究何首乌饮对自然衰老大鼠肾脏的影响。方法 :Wistar大鼠分为青年对照组,自然衰老对照组和何首乌饮干预组,何首乌饮连续灌胃,肾组织切片HE染色,显微镜下观察肾组织形态学的变化。结果:何首乌饮干预组的肾小球数目高于衰老对照组(P<0.01),与青年对照组接近;肾小管间质距离小于衰老对照组(P<0.01)。结论 :何首乌饮能有效改善自然衰老大鼠肾脏的组织形态学结构,有延缓肾脏衰老的作用。     

TSA对发育期大鼠癫痫后脑损伤的保护作用及其机制

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑素A(TSA)在癫痫后脑损伤发病中的作用及其机制。方法将32只雄性SD大鼠随机分为4组:对照组、海人酸(KA)组、小剂量TSA干预组(0.03 mg/kg)及大剂量TSA干预组(0.1 mg/kg)组,通过腹腔注射海人酸(KA)制作发育期大鼠癫痫模型,TSA于KA诱导癫痫前2 h腹腔注射给药,评估惊厥发作的等级及记录惊厥的潜伏期。癫痫后24 h处死大鼠,HE染色观察脑组织病理变化;TUNEL染色检测大鼠海马神经元细胞凋亡;CD68染色检测活化的小胶质细胞;Western blot检测IL-1β和TNF-α蛋白的表达。结果 KA组均达到Ⅳ~V级惊厥发作,而TSA干预组能减轻惊厥发作的等级和延长惊厥的潜伏期。HE染色可见KA组明显的神经元凋亡及细胞水肿,伴有较多的炎症细胞浸润,而TSA干预组能减轻神经元凋亡及细胞水肿,同时减少炎症细胞浸润。与对照组比较,KA组神经元凋亡数、小胶质细胞活化数及炎症因子的表达均显著增加(P<0.05),而TSA能抑制KA诱导的改变。相对于0.03 mg/kg TSA干预组,0.1 mg/kg TSA干预组治疗作用更明显(P<0.05)。结论 TSA能抑制癫痫后海马神经元凋亡、小胶质细胞活化及炎症因子的表达,同时能减轻惊厥发作的等级和延长惊厥的潜伏期,从而对癫痫后脑损伤起到保护作用。     

LTA对BALB/c幼鼠肠黏膜TLR4表达的影响

目的探讨脂磷壁酸(LTA)对BALB/c幼鼠肠黏膜Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法将30只1周龄BALB/c幼鼠随机分为正常组、溶媒组和LTA组,分别给予NS、DMSO和LTA各0.1 mL一次性灌胃处理,并于处理后第1周、第2周和第4周分别取幼鼠回肠末端、回盲部及结肠组织,HE染色观察各段组织病理学变化,免疫组化检测TLR4蛋白表达情况。结果 HE染色显示与正常组相比,溶媒组和LTA组幼鼠肠黏膜组织均有炎性浸润尤以经LTA处理后第1周的回肠末端最明显:其黏膜结构完整性受损,黏膜间隙增宽,炎性细胞浸润,大量细胞气球样变性甚至坏死。免疫组化结果表明各组不同组织不同时间段均表达TLR4;LTA组表达量最高,与正常组和溶媒组相比差异均有显著性(P<0.05);各组同一组织TLR4表达随时间延迟表达量增多以第4周最高,与第1周和第2周相比差异有显著性(P<0.05);相同组织在不同组别以结肠表达最高并随时间延长而增加(P<0.05);第4周LTA组结肠组织表达量最高,差异均有显著性(P<0.05)。结论 LTA能上调肠黏膜TLR4表达并随着时间延长而增加,其对LTA识别和反应部位可能主要位于结肠。     

包埋固定化菌深度处理污水厂出水的研究

采用包埋固定化菌颗粒对苏州市某污水处理厂的出水进行深度处理,考察了其对氨氮和COD的去除效果。结果表明,在DO=3mg/L、pH=6．5～8．0、自然温度条件下,包埋固定化菌对氨氮具有较强的去除能力和良好的耐冲击负荷能力,出水氨氮〈2mg/L,达到了《城镇污水处理厂污染物排放标准》（C-B18918-2002）的一级A标准;对COD有一定的去除效果,大部分出水COD〈50mg／L。     

丙泊酚对Wistar大鼠肝癌模型中Bax与Bcl-2表达的影响

目的:探讨不同浓度丙泊酚对Wistar大鼠肝癌模型中凋亡促进基因Bax和凋亡抑制基因Bcl-2表达的影响。方法:将50只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为五组,每组10只,分别为正常对照组(A组),肝癌模型组(B组),低剂量丙泊酚(3 mg/kg)组(C1组),中等剂量丙泊酚(6 mg/kg)组(C2组),高剂量丙泊酚(12 mg/kg)组(C3组)。给药结束后24 h处死大鼠,取肝脏标本观察肝脏特征,并做组织切片行苏木精-伊红(HE)染色及S-P免疫组化检测Bcl-2及Bax的表达,TUNEL法检测肝细胞凋亡指数(AI)。结果:(1)大体标本检查及HE染色:与A组比较,B组大鼠肝脏表面粗糙,部分肝叶表面出现黄色斑点,肝细胞脂肪变性,点状坏死及炎细胞浸润,少量胶原纤维增生;与B组比较,C1、C2、C3组肝细胞变性坏死以及胶原纤维增生程度有所减轻;(2)TUNEL检测结果:随丙泊酚剂量增加,肝癌细胞中凋亡细胞逐渐增多,AI逐渐递增,具有显著差异性(P<0.05);(3)与A组比较,B组肝脏细胞Bcl-2表达上调,Bax表达下降,差异均有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C组(C1、C2、C3)肝脏细胞Bcl-2表达均下降,且随着丙泊酚剂量的增加而呈递减趋势,差异有统计学意义(P<0.05);Bax表达均上调,且随着丙泊酚剂量的增加而呈递增趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:丙泊酚可导致Wistar大鼠肝癌细胞中Bcl-2/Bax表达比例降低,促进肝癌细胞的凋亡,进而抑制肝癌细胞的增殖能力。     

一步法分离石蜡切片DNA的改进与鉴定

目的改进一种以含蛋白酶K的裂解液作用于石蜡包埋处理的细胞、分离DNA粗提液用于PCR扩增的实验方案。方法石蜡包埋组织切片经常规脱蜡处理,用蛋白酶K裂解液洗脱细胞,55℃消化3 h后离心,吸取上清液;分光光度法检测DNA酶裂解液质量和浓度;以之为模板分别扩增人线粒体基因微卫星多态D310区、ATPase6基因区和核基因HBB、BRCA1等的DNA片段,琼脂糖凝胶电泳检测分析PCR扩增情况,并测序验证扩增产物。结果以石蜡切片的DNA裂解粗提液为模板,扩增目的 DNA片段阳性率可达100%;获得序列分析验证。结论改进的蛋白酶K裂解液一步洗脱消化法操作简单、过程快捷、费用低廉,能快速有效地分离石蜡组织切片DNA,用于后续PCR扩增检测,具有较高效率。     

包埋固定化异养硝化菌强化处理氨氮有机废水

以异养硝化菌Burkholderia sp.YX02为目标物,采用聚乙烯醇(PVA)和海藻酸钠(SA)为载体对菌株进行包埋固定化,考察包埋固定化异养硝化菌Burkholderia sp.YX02强化连续流反应器处理氨氮有机废水的性能。结果表明,包埋固定化异养硝化菌Burkholderia sp.YX02强化处理氨氮有机废水的最佳反应条件如下:温度为25℃、p H值为7.0、C/N值为10、包埋球量为80 g/L,在此条件下对氨氮和COD的去除率分别为90.7%、82.4%,其中包埋球量对处理效果的影响最大。在不同的进水流量和氨氮浓度条件下,与直接投加菌株强化相比,菌株经包埋固定化后不仅能显著提高反应器对氨氮和COD的去除率,而且还能提高反应器抗氨氮负荷和有机负荷冲击能力。     

TGF-β1与自噬基因Beclin1、LC3在椎间盘退变组织中的表达

目的：观察兔椎间盘退变组织中TGF-β1与Beclin1、LC3的表达。方法：制作新西兰大白兔腰椎间盘退变模型，HE染色检测兔椎间盘退变程度。RT-PCR检测TGF-β1与自噬基因LC3、Beclin1的表达。结果：与空白组比较，模型组HE染色显示椎间盘组织形态学评分明显增加（P<0.05）；RT-PCR显示TGF-β1与Beclin1、LC3基因表达明显上调（P<0.01）。结论：兔腰椎间盘退变组织中TGF-β1与Beclin1、LC3基因表达量增加。     

舌下含服粉尘螨疫苗免疫治疗法对哮喘小鼠树突状细胞及NF-κB的影响

目的通过对哮喘模型小鼠舌下含服粉尘螨疫苗进行治疗,研究治疗前后树突状细胞（dendritic cell,DC）和NF-κB在颌下淋巴结和肺部的变化,比较高剂量疫苗和低剂量疫苗对哮喘小鼠的治疗疗效。方法采用常规方法制备舌下含服粉尘螨疫苗。28只BALB/c小鼠按随机数字表法分为正常组（A组）、哮喘模型组（B组）、粉尘螨高剂量治疗组（C组）、粉尘螨低剂量治疗组（D组）,每组7只。检测小鼠气道高反应性,观察支气管肺胞灌洗液（BALF）中细胞计数和分类,肺组织HE染色观察小鼠肺部炎症状况;通过免疫组织化学染色和体视学测量观察各组小鼠肺组织NF-κB阳性细胞的变化和颌下淋巴结33D1阳性DC的表达。结果 C组BALF中嗜酸性细胞计数、肺组织炎症细胞浸润较B组显著减少（P〈0.05）,气道高反应性下降（P〈0.01）。C、D组哮喘小鼠颌下淋巴结33D1阳性DC和肺部NF-κB阳性细胞的数密度、体密度、表面积密度均下降,C组比D组下降更明显（P〈0.01）。结论高剂量舌下含服粉尘螨疫苗治疗哮喘小鼠有显著疗效,与DC的免疫耐受和NF-κB的下调密切相关。     

丹参对大鼠肝组织Bcl-2表达的影响及意义

目的探讨丹参对大鼠肝组织Bcl-2基因表达的影响和对肝纤维化的作用及其机制。方法利用CCl4诱导形成大鼠肝纤维化模型。将30只SD大鼠按随机数字表法分成纤维化模型组（A组,n=15）和丹参干预组（B组,n=15）。用RT-PCR法检测各组大鼠肝脏Bcl-2的表达,常规HE和网状纤维染色检测肝组织标本。结果大鼠肝纤维化模型成功建立。丹参干预组纤维化程度、肝细胞脂肪变性及肝组织炎症较纤维化模型组显著减轻。丹参干预组和纤维化模型组Bcl-2基因表达量分别为（0.84±0.02）%（、1.03±0.03）%。丹参干预组Bcl-2基因的表达显著低于纤维化模型组（P〈0.01）。结论丹参能够阻断CCl4诱导的肝纤维化和减少肝脂肪变性。其机制不仅直接通过抗炎作用,也可能通过调节Bcl-2基因表达从而阻断肝纤维化。