石刁柏内生真菌的多样性研究

为探索百合科天门冬属石刁柏内生真菌的多样性及组织分布特点,为进一步深入研究内生真菌与宿主活性成分互作机制奠定基础。研究采用组织块分离法,对石刁柏不同部位的内生真菌进行了分离鉴定。通过分离率、分离频率、多样性指数和丰富度指数等分析石刁柏内生真菌的分布特点和多样性。共分离得到内生真菌88株,经形态和分子生物学鉴定归属为5纲8目10科13属,其中,镰孢菌属和青霉菌属为根和茎部优势菌群,分别占总菌株数量的37.50%和31.82%;不同组织的石刁柏中,根部位的Shannon-Wiener多样性指数(H')和Margalef丰富度指数(R)最高,分别为1.45和2.03,均匀度(E)最低为0.59。叶与茎的相似性系数稍高,达到0.55。表明石刁柏不同部位中内生真菌分布及组成存在较大差异,且具有一定的组织的专一性。     

牡蛎壳粉对烟草根际土壤微生物代谢多样性及青枯病发生的影响

为揭示牡蛎壳粉等土壤改良剂对烟草根际土壤微生物代谢多样性及烟草青枯病发生的影响,通过田间试验,设置牡蛎壳粉、生石灰、草木灰和对照4个处理,研究了不同土壤改良剂对发病地块土壤pH和微生物群落代谢多样性的影响,以及对烟草青枯病的防控效果。结果表明,牡蛎壳粉可以显著提高土壤pH,增强土壤微生物对碳源的利用程度(AWCD),增加微生物代谢多样性(Shannon指数),同时提高土壤微生物群落内物种的均匀度(McIntosh指数)。主成分分析表明,烟草根际土壤微生物群落利用的主要碳源为羧酸类、氨基酸类和碳水化合物类,但不同土壤改良剂处理土壤微生物碳源利用特征存在差异。牡蛎壳粉处理后的地块烟草青枯病发病率最低,较对照降低43.33%。Pearson相关分析表明,土壤pH与土壤微生物代谢多样性指数呈正相关,而与发病率呈负相关。因此,施用土壤改良剂牡蛎壳粉可提高土壤pH和增加土壤微生物代谢多样性,进而提高土壤微生态环境的稳定性,对烟草青枯病起到较好的防控效果。     

烟草内生真菌多样性及其功能研究进展

烟草内生真菌是烟田微生物生态的重要组成部分。其种类丰富,生物学功能多样,对促进烟苗生长、提高宿主的生态适应性、降低烟草有害物质等方面具有积极作用,在医药、植物生长促进剂、生物农药等领域具有广阔的应用前景。从烟草内生真菌的分离鉴定方法、生物多样性和种群分布特征、功能应用以及开发应用前景方面,对烟草内生真菌当前的研究状况进行了概述,归纳出烟草内生真菌在不同时期的主要分布规律及当前的应用现状。最后,分析了当前研究面临的难题及发展趋势,并对其应用前景进行了展望。     

海藻多糖与有机物料对烟草青枯病的防控效果

为探究海藻多糖与其他有机物料混合使用对烟草青枯病的防控效果,以烤烟品种NC102为试验材料进行田间试验,设置不同用量海藻多糖与微生物菌肥、草木灰、贝壳粉、生物炭等有机物料的组合处理,分析了不同处理对烟草农艺性状和经济性状、土壤理化性质、烤后烟叶化学成分的影响,以及土壤理化性质与烟草青枯病发病率和病情指数的相关性。结果表明,与对照相比,海藻多糖与有机物料的施用普遍促进了团棵期和旺长期的烟株生长发育,提高了土壤pH和有机质含量,降低了烟草青枯病的发病率和病情指数;烤后烟叶经济性状和主要化学成分也有不同程度的提升。Pearson相关性分析表明,土壤有机质含量和pH与青枯病发病率和病情指数之间存在极显著的负相关关系。500倍海藻多糖稀释液在50~100 mL/株的范围内,用量越高,效果越好;组合处理中草木灰+海藻多糖75 mL/株处理效果最好。通过增加海藻多糖和有机物料,调节土壤pH或增加土壤有机质含量有助于控制青枯病的发生。     

烟草内生真菌多样性及其细胞毒活性初步研究

为研究烟草内生真菌的生物多样性,揭示其在烟草中的分布规律及种群结构,对烟草栽培种的内生真菌进行了系统的分离和鉴定,并对其发酵粗提物进行了初步的细胞毒活性筛选。结果发现,采用组织分离法从健康烟株的根、茎、叶中共分离纯化到62株内生真菌,形态学和分子生物学鉴定为4目7科9属。发现叶部内生真菌的分离率最高,其次为茎,根部最少。采用CCK-8法对内生真菌的体外细胞毒活性进行筛选,发现多数菌株对人肾癌Caki-1细胞和人肝癌Hep G2细胞均具有不同程度的抑制活性,菌株TE-6L的PDB发酵液及大米发酵物对Caki-1细胞48 h内的IC50分别为13.28和0.36μg/m L。结合形态学特征和分子生物学鉴定TE-6L菌株为Fusarium sambucinum。研究表明,烟草中蕴含丰富的具有细胞毒活性的内生真菌资源,为寻找细胞毒活性物质新来源、开发新型抗肿瘤药物提供了新的途径。     

曲靖市植烟土壤有效锌含量状况及与土壤因素的关系分析

研究了曲靖烟区土壤有效锌的分布状况及其与土壤类型、土壤质地与机械组成、pH、有机质的关系.结果表明:(1)曲靖烟区土壤有效锌含量较高,平均为4.37±8.45 mg/kg,变幅为0.05~194.19 mg/kg,变异系数高达193.09%,少部分烟区存在缺锌状况;(2)土壤有效锌含量随海拔升高、有机质含量增加而增大,随土壤粘粒含量增加、pH值升高呈现抛物线趋势;(3)不同土壤类型有效锌含量表现为:红壤>新积土>水稻土>石灰岩土>黄壤>酸性紫色土.     

豫中烟区土壤微生物特性及其与土壤理化性质的关系

为明确豫中烟区土壤微生物的特性及其与土壤理化性质的关系,采用基于MiSeq平台的高通量测序技术、方差分析和逐步回归分析等方法对其进行了研究。结果表明:(1)豫中烟区土壤细菌多样性高于真菌。酸杆菌门、变形菌门、放线菌门和浮霉菌门为细菌的优势菌门,子囊菌门、担子菌门和接合菌门为真菌的优势菌门。(2)郏县和襄城县植烟土壤细菌含量、Chao指数和香农指数均极显著高于泌阳县,3个植烟县土壤真菌多样性没有显著差异。泌阳县和郏县土壤酸杆菌门比例显著高于襄城县;郏县和襄城县土壤放线菌门比例显著低于泌阳县,但浮霉菌门比例显著高于泌阳县;襄城县植烟土壤子囊菌门比例显著高于泌阳县和郏县。(3)细菌含量与pH值、有机质呈极显著正相关;细菌Chao指数与pH值呈极显著正相关,与碱解氮呈极显著负相关,与速效磷呈显著负相关;细菌香农指数与pH值呈极显著正相关,与碱解氮呈极显著负相关,与水稳性团聚体含量呈显著负相关。土壤真菌含量与pH值呈显著负相关,与速效磷呈极显著正相关;真菌香农指数与土壤表层硬度呈极显著负相关;真菌Chao指数与土壤理化性质没有显著相关性。建立的细菌含量、真菌含量、Chao指数和香农指数与土壤理化性质的回归方程都达到极显著水平,且自变量的回归系数相伴概率均达到了0.01极显著水平。因此,豫中烟区土壤微生物特性与土壤理化性质紧密相关,主要受土壤pH、有机质、速效磷、土壤表层硬度等因素的影响。     

烤烟根腐病对烟株根际土壤真菌群落结构的影响

为从微生物生态学角度探求烤烟根腐病的发生原因并为其防控提供理论依据,利用Illumina MiSeq高通量测序分析了烟草根腐病发病和健康植株根际土壤真菌群落结构的差异,结果表明,烤烟根腐病发生对烤烟根际土壤真菌的丰富度有显著影响,其中健康和患病烟株根际土壤样品中真菌OTU数分别为904个和647个,健康烟株真菌OTU总数为患病烟株的1.40倍,特有OTUs数是患病烟株的2.59倍;患病烟株根际土壤真菌群落多样性水平显著低于健康烟株土壤,患病烟株根际土壤的Shannon、ACE和Chao1指数分别较健康植株降低了29.81%、40.12%和40.61%;同时,患病烟株与健康烟株根际土壤真菌群落的优势物种显著不同,患病烟株根际土壤中烤烟根腐病病原菌茄镰刀菌（F.solani）相对丰度较健康烟株根际土壤增加了303.45%,为健康烟株的4.03倍,且棘孢木霉（Trichoderma asperellum）和青霉菌（Penicillium raperi）的相对丰度亦较健康烟株分别增加了17.62%和50.46%。烟草植株根际土壤中真菌群落结构改变及物种多样性降低是烤烟根腐病发生的重要特征。研究可为该病害的早期预防或生态调控提供科学依据。     

云南省烟草根结线虫发病土壤生态因子分析

采集云南省主要植烟区24个县共106个烟草根结线虫发病土样,每个县以1个土样为代表,分别测定其真菌、细菌和放线菌的总量及类群数。结果看出,不同土样中真菌、放线菌总量相差达到2个数量级,细菌相差达到3个数量级,在不同土样的各类微生物种类组成上真菌为3~10类,细菌为2~13类,放线菌为4~10类。对这些样品土壤pH、有机质、碱解氮、有效磷、速效钾、Ca、Mg、Al等主要营养元素的测定结果表明,不同样品pH在5.03~8.64之间,有机质含量在1.50%~7.01%之间,碱解氮在63.8~314.3mg/kg之间,有效磷在11.2~221.2mg/kg之间,速效钾在74.6~1313.4mg/kg之间,Ca离子含量在0.20%~10.54%之间,Mg离子含量在0.08%~4.56%之间,Al离子含量在1.52%~12.79%之间。研究结果表明,云南省烟草根结线虫发病土壤的各种生态因子存在明显的多样性和复杂性。      

酸碱度对烟草青枯菌生长特性的影响

为探究酸碱度对烟草青枯菌生长特性的影响,在混合青枯菌的不同酸碱度土壤中测定烟草青枯病的发病情况。应用qRT-PCR方法测定不同酸碱度条件下烟草青枯菌的消长动态,通过结晶紫法和半固体培养基法分别测定青枯菌的生物膜和运动性在不同酸碱度条件下的变化。结果表明:烟草青枯病在弱酸性和中性(pH 6.0~7.0)土壤中发病严重。烟草青枯菌的消长动态结果显示,青枯菌数量在pH 6.5的土壤中最多,为9.1×108cfu·g~(-1) FW。烟草青枯菌生物膜成膜能力在pH 5.5时最强,pH 7.0时最弱。pH6.5时烟草青枯菌的运动性最强,pH 8.0时最弱。土壤酸碱度通过影响青枯病菌的消长、成膜能力和运动性进而影响烟草青枯菌对烟株的侵染。     

耕作方式对山地烟田烤烟根际土壤真菌群落结构的影响

[目的]探究深耕、深松措施对山地烟田土壤真菌群落结构的影响.[方法]采用大田试验,设置常规旋耕20 cm(RT20,对照)、深耕30 cm(DT30)、深松30 cm(ST30)和深松40 cm(ST40)4个处理,利用Illumina MiSeq高通量测序技术分析了不同耕作处理下旺长期烤烟根际土壤真菌群落结构的变化情...     

南阳植烟土壤养分时空演变特征及肥力评价

采用定点取样方法,分别于2000年和2020年采集南阳市代表性植烟土壤样品,进行土壤养分时空变化特征分析和肥力评价。结果显示,与2000年相比,2020年全市植烟土壤pH均值下降了1.26,速效磷和水溶性氯平均含量分别下降了11.39%和36.47%,有机质和碱解氮平均含量分别增加了19.69%和90.92%,速效钾平均含量无显著变化。经过20年持续利用,南阳植烟土壤肥力显著提升,肥力指数由0.46提高至0.57,适宜性指数等级由以Ⅴ级为主提升至以Ⅲ级为主,中等及以上区域达到植烟总面积的70.70%。2020年全市分别有55.87%、42.21%和63.09%的植烟土壤有机质、有效磷和速效钾含量低于适宜范围,52.13%的土壤水溶性氯含量高于阈值。根据土壤肥力时空演变特征和当前肥力水平,建议分区采用“补磷钾、增施有机肥、降氯”措施,改善土壤质量状况。     

烟草青枯病发病烟株根际土壤细菌群落分析

  目的  研究青枯病发生对根际土壤细菌群落组成的影响, 探明影响根际土壤细菌群落的环境因子。  方法  采用宏基因组学高通量测序技术, 比较发病烟株和健康烟株根际土壤细菌群落差异。  结果  (1) 健康烟株根际土壤细菌Ace指数、Chao指数和Shannon指数有高于发病烟株的趋势, 而Simpson指数有低于发病烟株的趋势; (2)发病烟株根际土壤中芽孢杆菌属(Bacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)和链霉菌属(Streptomyces)等益生菌减少, 而劳尔氏菌属(Ralstonia)和Rudaea等病原菌增加; (3)土壤pH、有效磷(AP)、交换性钙(Ca)和有效铜(Cu)含量在发病烟株根际土壤中显著减少, 而速效钾(AK)含量显著增加。  结论  与健康烟株根际土壤相比, 发病烟株根际土壤细菌多样性、有益菌丰度、土壤pH和养分含量都较低; pH、P、K、Ca、Cu是对根际土壤细菌群落影响较大的土壤环境因子。      

喀斯特山区不同种植方式下烟田土壤微生物特征分析

为明确喀斯特山区烤烟由常规种植转为有机种植方式后烟田土壤微生物特征的变化,在贵州省金沙县以常规种植方式为对照,选择连续3年进行有机种植的烟田为试验对象,研究了两种种植方式下烟田土壤基本性质、细菌和真菌群落结构特征及其关键影响因素。结果表明,喀斯特山区烤烟种植方式由常规种植转换为有机种植后,土壤有机质、微生物生物量碳显著增加,而全氮、全钾、速效磷、速效钾等养分含量(质量分数)显著降低(p<0.05);两种种植方式下,土壤微生物丰富度和多样性均以细菌高于真菌,土壤细菌和真菌多样性以及在“门”分类上的群落结构差异不大,细菌以变形菌门、放线菌门、酸杆菌门占优势(54.2%~62.0%),真菌以子囊菌门占绝对优势(74.4%);常规种植转为有机种植方式后,烟田土壤有益微生物类群数量增加。喀斯特山区烟田土壤微生物群落结构主要受土壤有机质、养分和容重的影响。      

连作对不同类型植烟土壤化学性状、酶活性及细菌群落的影响

为探明不同类型植烟土壤对连作的响应差异,以云南的红壤、水稻土和紫色土为研究对象,分析烤烟连作5年土壤化学指标、酶活性和细菌群落特征的变化。结果表明,连作5年后,与轮作处理比较,水稻土和红壤的有机质、全氮、全磷、碱解氮、有效磷含量显著增加,pH、速效钾含量显著降低,紫色土仅速效钾含量显著增加,其他指标无明显变化。3种土壤的过氧化氢酶活性显著下降,脲酶活性不同程度增加,但紫色土增加不显著;水稻土的蔗糖酶活性显著下降,红壤和紫色土则变化不明显。3种类型土壤均以变形菌门、蓝细菌门、酸杆菌门、绿弯菌门和拟杆菌门等5个菌门为优势菌群。连作5年后,不同类型土壤的细菌群落相对丰度与活性存在一定差异,其中紫色土的细菌群落结构组成与轮作处理最为相似,其ACE和Shannon指数在3种土壤中变幅较小。综合比较来看,烤烟连作对紫色土的主要生化指标微生物群落结构影响较小,说明紫色土对烤烟连作响应相对不敏感。     

环神农架地区植烟土壤养分分析与丰缺状况评价

采用调查收集、取样分析等方法对环神农架地区1700多个耕层土壤样品的pH、有机质和土壤养分进行了分析。结果表明:环神农架地区植烟土壤pH、有机质、碱解氮、速效磷和有效钾含量的一般范围分别为5.02~7.92,11.19~52.24 g/kg,58.69~216.20 mg/kg,3.92~39.00 mg/kg和51.84~332.14 mg/kg,以土壤pH变异最小,土壤速效磷含量变异最大。环神农架地区植烟土壤pH 5.5~7.5的样品占总数的82.5%,多数土壤pH适宜优质烟叶生长,土壤有机质含量和氮含量总体较高,磷和钾含量相对较低。以该区烤烟产值为目标的土壤养分丰缺状况评价结果表明,环神农架地区绝大多数烟区处于供氮能力中等和高的范畴,土壤供磷和钾的能力则多处于中等和低的范畴;土壤供钾能力呈现出明显的区域分布特征,土壤供氮和供磷能力地域分布不明显。     

有机物料对植烟土壤养分、酶活性和微生物群落功能多样性的影响

  目的  为探究有机物料施用对土壤养分和生物学特性的影响。  方法  采用盆栽试验,研究了草炭、花生壳炭、蒸汽爆破烟梗和玉米秸秆对植烟土壤的影响,采用BIOLOG ECO平板培养技术分析了土壤微生物群落功能多样性。  结果  施用有机物料能够显著提高土壤有机碳、速效氮、速效磷和速效钾含量;汽爆玉米秸秆处理土壤MBC、MBN含量及脲酶、蔗糖酶活性提高幅度最大。BIOLOG分析结果表明,有机物料提高了土壤微生物AWCD和多样性指数。主成分分析结果表明,生物炭促进了以羧酸类和多聚物类物质为碳源的微生物的生长,汽爆玉米秸秆有利于以碳水化合物类、氨基酸类、酚酸类和胺类物质为碳源微生物的生长。  结论  施用有机物料可提高植烟土壤养分含量,改善土壤微生态环境,其中以汽爆玉米秸秆效果最好。      

重庆典型烟区土壤团聚体中有机质及活性组分的分布特征

为有效调控植烟土壤肥力及合理进行田间碳素管理,采集了重庆彭水、丰都和巫山3个典型烟区的土壤样品。利用干筛法将土壤分成不同粒径的团聚体,分别用浓度33、167和333 mmol·L-1的KMnO₄溶液氧化处理,测定团聚体中高活性有机质(HLOM)、中活性有机质(MLOM)和活性有机质(LOM)含量(质量分数),并分析了各粒径团聚体中有机质及活性有机质的分布特征。结果表明,3个烟区土壤团聚体的组成均以1~2 mm的团聚体为主,占团聚体总量(质量分数)的40.16%~42.02%。除巫山烟区土壤0.25~0.50 mm团聚体含量(质量分数)显著高于彭水和丰都两个烟区外,其余粒径团聚体含量在3个典型烟区间的差异不显著(P>0.05)。随着粒径的增大,土壤团聚体中的总有机质(TOM)和LOM含量均降低,但HLOM和MLOM含量的变化因烟区的不同而异。在彭水和巫山烟区,HLOM和MLOM含量随团聚体粒径增大呈下降趋势,但在丰都烟区则表现为先降低后增加的变化趋势。土壤TOM、HLOM、MLOM和LOM在团聚体中的分布均以1~2 mm粒径最大,分别达29.99%~31.58%、24.29%~33.36%、24.15%~29.09%和18.46%~21.69%,因此将1~2 mm团聚体作为重庆市典型烟区的土壤有机质固定的特征团聚体。土壤TOM和LOM含量均分别与<0.25 mm团聚体中的TOM和LOM含量呈极显著正相关,表明该粒径团聚体有机质和活性有机质可以作为衡量重庆植烟土壤有机质含量变化动态的敏感性指标。      

PGPR菌剂配合化肥减施对植烟土壤nosZ型细菌群落的影响

研究化肥减施情况下PGPR（plant growth promoting rhizobacteria）菌剂对植烟土壤反硝化作用的微生物调控机制，为植烟土壤科学施肥、培肥地力提供理论依据。本试验在四川攀枝花米易县的传统烤烟种植区通过化学分析和末端限制性长度多态性分析手段（T-RFLP）分别对PGPR菌剂配合化肥减肥处理下的植烟土壤理化性质及土壤nosZ型细菌群落组成和多样性进行研究。结果表明，与常规施肥相比，PGPR菌剂配合化肥减施的处理土壤pH和碱解氮含量显著提高，有机质、全氮含量提高但未达显著水平，部分处理速效磷、速效钾含量显著提高。PGPR菌剂配合化肥减施改变了nosZ型细菌的物种组成，Rhodobacter（红杆菌属）和Bacterium（杆菌属）为5个施肥处理共有的优势菌属，而Bradyrhizobium（慢生根瘤菌属）和Azospirillum（固氮螺菌属）仅为施用PGPR菌剂处理的优势菌。全量化肥配施PGPR菌剂处理下的Shannon多样性指数和均匀度显著低于其他处理，其他各处理细菌群落多样性之间无显著差异。冗余分析表明，土壤pH、有机质和速效钾是影响植烟土壤nosZ型细菌群落结构变化的主要因子。综上所述，PGPR菌剂配合化肥减施影响了土壤理化性质进而导致土壤nosZ型细菌群落结构组成发生改变。     

安徽省主要烟区土壤养分状况及平衡施肥

对安徽省主要烟区832个土壤样品进行了分析,结果表明全省土壤有机质含量适中,土壤水解氮含量较高,速效磷含量中等,速效钾含量偏低,氯离子含量不高,皖南烟区土壤酸性较强.针对土壤养分状况,提出了控氮调磷补钾的烤烟施肥原则,并对各烟区提出了详细的烤烟施肥方案.