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在悬浮培养的南方红豆杉细胞体系中 ,细胞进入指数生长期末期时 ,加入真菌诱导子 (即尖孢镰刀菌胞壁成分的粗提出物 ,其主要成分为糖类和多肽 ) ,对几个主要的细胞次生代谢指标进行了监测 .实验结果表明 ,诱导子引起了南方红豆杉细胞次生代谢结构的变化 ,胞内酶蛋白的含量呈先上升后下降的趋势 ,而胞外酶蛋白的含量显著上升 ;苯丙烷类代谢途径中重要的酶PAL的活性显著升高 ;次生代谢产物中 ,酚类物质的含量增加 ,且于 4天后急速上升 ,同时多酚氧化酶的活力也加强 ,萜类产物中紫杉烷类的生物合成均得到了加强 ,其中紫杉醇的含量得到了大幅度的提高 ,达到对照组的 5倍左右 . 相似文献
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运用顺磁共振、电镜、能谱等手段研究了寡聚糖对红豆杉细胞氧化还原生理态势的影响 .结果表明 ,诱导前红豆杉细胞处于相对稳定的生长态势 ,细胞完整 ,细胞器发达 ;氧化还原电势较低 ,活性氧相关酶系统相对稳定 ,细胞初生代谢旺盛 ,紫杉醇合成速率很低 .诱导后红豆杉细胞向产物合成态势转移 ,SOD酶活性迅速提高 ,CAT和POD酶活被强烈抑制 ;细胞出现活性氧迸发 ,4h达最大值 ;细胞的氧化还原电势增高 ,细胞膜上离子通道被激活 ,H+ 和Ca2 + 内流 ,Cl-外流 ;液胞内出现大量含Ca2 + 离子的高电子致密区并呈规律性变化 ,培养环境碱化 ;细胞生长被抑制 ,紫杉醇合成速率升高 ,其产量提高了 5.5倍 ,达 76.1mg·L-1. 相似文献
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以红豆杉悬浮培养细胞为材料产紫杉醇,在细胞生长的不同时期分别用脉冲电刺激及微交流电刺激处理。结果表明,两种电刺激均不同程度促进了红豆杉悬浮培养细胞的生长、紫杉醇的产生,其中脉冲电刺激效果优于微交流电刺激。最佳作用时间是在红豆杉细胞生长的衰亡期,微交流电刺激的紫杉醇含量较对照提高3倍多,脉冲电刺激的紫杉醇含量约为对照的7~9倍,最高达到12.24 mg.L-1。脉冲电刺激可有效提高紫杉醇的胞外释放率,达对照的4~5倍。 相似文献
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硝酸银作用下南方红豆杉细胞悬浮培养生产紫杉醇动力学研究 总被引:4,自引:0,他引:4
研究了诱导子硝酸银对红豆杉细胞培养生产紫杉醇的影响,表明10μmolL^-1的硝酸银量有利于紫杉醇的生成,并通过动力学模型对硝酸银的作用位点进行分析,确定了硝酸银在紫杉醇代谢路径中的作用位点位于BaccatinⅡ和紫杉醇之间。 相似文献
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The production of paclitaxel from suspension culture of Taxus chinensis var,mairei was improved by in situ extraction with organic solvents to avoid feedback repression and product degradation.Oleic acid and dibutyl phthalate were proved to be suitable solvents .The optimal volumetric percentage of organic solvents in the culture medium was found to be around 8%,and the favorable time for their introduction was at the exponential phase of cell growth,Paclitaxel production with the in situ extraction was ca 3-fold of that without extraction. 相似文献
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剪切应力对红豆杉细胞悬浮培养的影响及CFD模拟研究 总被引:2,自引:3,他引:2
在同轴圆筒装置的均匀剪切场中研究了不同剪切应力(0.16, 0.46, 0.78Pa)对悬浮培养的南方红豆杉细胞生理的短期影响。结果表明剪切应力为0.16~0.46Pa时,有利于细胞的生长和初生代谢;剪切应力为0.46~0.78Pa时, 有利于细胞的次生代谢;另一方面利用计算流体力学(CFD)对20L生物搅拌釜(45-斜向上桨(45-PBT),桨距为(1/3)T的流场进行了三维模拟,获得搅拌釜内部的剪切场。结果表明搅拌釜内剪切应力分布极不均匀, 且主要集中在搅拌桨区和尾流区,约为主流区和挡板区值的3~5倍,有时甚至高达7倍。通过将实验结果和CFD模拟相结合,预测了20L生物搅拌釜剪切应力对南方红豆杉细胞生理的影响。表明当搅拌转速小于150 rmin-1时,搅拌釜内相应的剪切应力有利于细胞的生长和初生代谢;而当搅拌转速大于200 rmin-1时,则不宜于南方红豆杉细胞的培养。 相似文献
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利用显微照相和DNA提取等技术,研究了外源紫杉醇作用于服浮培养南方红豆杉细胞(Taxus chinensis var.Mairei)的凋亡和对紫杉醇(taxol)的耐受性。利用荧光显微照相技术观察到,外源紫杉醇作用下,随培养时间延长,南方红豆杉细胞发生明显核分化,应用DNA电泳观察到细胞DNA断裂形成典型的180bp及其整数倍梯形条带(DNA.ladders) ,应用TUNEL检测发现DNA的3'-OH断端可被特异性标记,证实了加入紫杉醇后南方红豆杉细胞发生了凋亡。研究结果说明南方红豆杉细胞对紫杉醇的耐受性是有限度。并证明了植物细胞有类似于动物细胞的凋亡特征,也表明该体系可以作为研究植物细胞凋亡的实验模型。 相似文献
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