蜜环菌多糖分离纯化及性质的研究

进行了蜜环菌胞外多糖分离纯化及性质的研究，得到如下结果：发酵液浓缩，三们体积乙醇沉积，75％乙醇洗涤、Sevage法除蛋白、20％H2O2脱色，得到的多粗多糖上DEAE－纤维素（OH^-）柱层析，用蒸馏水、0．05－0．5mol/l的NaCl梯度洗脱，可以得到中性多糖和几种酸性多糖，中性多糖上SephadexG-150柱层析，用蒸馏水洗脱得到一种多糖A，多糖A显纯多糖，400－4000cm^-1范围内摄得多糖A的红外光谱表明其含有β－糖苷健。多糖A的完全酸水解液用硅胶GF254薄层层析，氯仿－甲醇（60：40）与丙酮－水（96：4）展层，以及纸层析，丙酮－水（96：4）展层，苯胺－二胺显色，证明其组成单糖为葡萄糖，考马斯亮兰G－250反应阴性，茚三酮反应阴性，双缩脲反应阴性，聚丙烯酰胺凝胶电泳后，考马斯亮兰R－250染色无蛋白质带，都证明其不含蛋白质。     

紫苏叶多糖的提取工艺优化及理化特性分析

以紫苏叶为原料,对紫苏叶多糖的提取工艺及理化特性进行研究。通过单因素试验探究料液比、提取时间和醇沉浓度对紫苏叶多糖得率的影响,在单因素试验基础上进行响应面优化试验后对紫苏叶粗多糖进行分离纯化,纯化后得到均一组分多糖并命名为PFP（Perilla frutescens var.frutescens polysaccharide）,其总糖含量为（89.73±0.23）%。通过热重分析仪、差示扫描量热仪、X-射线衍射仪对PFP的理化特性进行分析。结果表明,最佳提取工艺条件为料液比1∶30（g/mL）、提取时间4 h、醇沉浓度60%。此时,紫苏叶多糖得率达到（5.22±0.17）%。理化特性分析结果表明,紫苏叶多糖在200℃以下有较好的热稳定性,其热解过程主要分为2个阶段,无结晶现象,是一种无定型结构。     

竹茹多糖提取工艺优化及其理化性质分析

以蒸汽爆破预处理后的竹茹为研究对象,采用水提醇沉法提取竹茹多糖,在单因素实验基础上进行正交实验优化粗多糖的制备,粗多糖经过复溶、过滤、二次醇沉等处理纯化得到精制竹茹多糖,并对其理化性质进行分析测试。竹茹多糖提取的优化工艺参数为:料液比1∶15(g/m L),提取温度100℃,提取时间2.5 h,粗多糖得率为2.65%;粗多糖进一步精制获得纯度为80.75%的精制竹茹多糖(BSP),得率为2.25%。理化性质分析结果表明,BSP的化学组成主要有多糖(80.75%)、木质素(5.45%)和酚酸(3.21%),BSP的单糖组成主要有木糖和葡萄糖,重均分子量约为7.6 ku,BSP水溶液为假塑性流体。     

山茱萸多糖的提取及纯化工艺研究

本实验对山茱萸中水溶性多糖的提取纯化工艺进行了研究。通过单因素试验和均匀设计试验,研究了温度、时间、料液比对多糖提取得率的影响,结果显示:提取温度是影响多糖提取得率的主要因素,最佳提取工艺为料液比1:36,温度100℃,时间180min,在此条件下,山茱萸多糖提取得率为199.36mg/g。通过乙醇沉淀、透析、DE-52柱层析对提取的山茱萸粗多糖进行纯化。纯化的山茱萸多糖经紫外光谱分析不含蛋白质和核酸,琼脂糖凝胶电泳得到单一区带,表明为分子大小均一的单一组分多糖。     

小球藻胞内多糖提取纯化及其抗氧化活性

为提高小球藻胞内粗多糖得率,并探究小球藻胞内多糖纯化组分的抗氧化作用。本研究采取超声波破碎和热水浸提相结合的方法提取小球藻胞内粗多糖,利用响应面法进行提取条件优化,在此基础上,采用阴离子交换柱和葡聚糖凝胶柱层析对提取得到的粗多糖进行分离纯化,并进行结构表征和抗氧化试验。响应面结果显示,小球藻胞内粗多糖最优提取条件为:NaOH质量分数为2.0%,料液比为1:25（g/mL）,超声功率为200 W,超声时间为20 min,提取温度为80 ℃,提取时间为1.5 h,在此条件下,小球藻胞内粗多糖的得率为18.086%±0.143%。结构表征和体外抗氧化结果显示,纯化多糖（Purification of intracellular polysaccharide,SCIP）,主要由葡萄糖、鼠李糖及半乳糖成分组成,是一种含有糖醛酸的吡喃糖。其在20 mg/mL时,对1,1-二苯基-2-苦基肼（1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基的清除率最大,为75.64%±1.56%,在25 mg/mL时,对羟基自由基清除率最大,为71.08%±0.58%,IC₅₀分别6.42 mg/mL和8.59 mg/mL。研究结果为深入了解小球藻胞内多糖理化性质及小球藻多糖的开发利用提供基础。     

杏鲍菇水溶性多糖提取工艺研究

本实验研究了热水浸提法提取杏鲍菇粗多糖的最佳工艺流程及工艺条件。用热水浸提杏鲍菇多糖,乙醇沉淀和Sevage法脱蛋白得到初步纯化的多糖,采用硫酸-苯酚法测定多糖的含量。在单因素试验的基础上,通过正交试验进一步优化提取工艺条件,确定影响杏鲍菇多糖得率的主次因素分别为提取温度、提取时间、料液比和乙醇浓度。结果表明,提取最优工艺为:时间3h,水温为90℃,乙醇的体积为提取液体积的70%,料液比为1:20时多糖沉淀量最大。此工艺条件下杏鲍菇多糖的得率为2.88%。     

茶多糖提取分离工艺的研究

对低档乌龙茶多糖提取工艺及粗分离纯化条件进行了研究，得到的最佳浸提条件为70℃下浸提30min．最佳浸提比为1：30，微波加热10min多糖提取率8．1％，采用乙醇法沉淀再利用三氯乙酸脱除蛋白的方法可使多糖得率为7．5％，同时浸提液中的蛋白质得到有效去除。该提取分离纯化方法不仅缩短了提取时间而且使多糖的收率提高将近一倍，这一发现对于茶多糖的提取分离具有极大的现实意义，从而为低档茶叶的综合利用开辟了一条新途径。     

厚壳贻贝多糖的提取工艺优化及体外生物活性研究

以抗氧化和抗肿瘤活性为指导优化提取工艺,分别采用热水提取,两步联合酶解法（木瓜蛋白酶和胰蛋白酶）从厚壳贻贝中提取和分离纯化具有生物活性的贻贝多糖,对其进行基本理化性质分析和DEAE-Cellulose 52 柱层析分离纯化并进行体外抗氧化、抗肿瘤生物活性研究。通过对热水提取法,单一酶提法和联合酶提取法得到的贻贝多糖粗品进行理化性质分析和活性筛选,发现联合酶解提取得到的贻贝粗多糖在得率、纯度和生物活性上均优于其他方法提取得到的粗多糖,其提取粗多糖的得率为23.69%。联合酶提粗多糖体外抗氧化研究表明其对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和脂质过氧化物清除的半最大效应浓度（concentration for 50% of maximal effect,EC50）分别为3.75、5.01 mg/mL和2.41 mg/mL;对体外前列腺癌DU-145细胞48 h,IC50为2.93 mg/mL。通过分离纯化后对各组分的得率和组成分析表明：联合酶提可提高贻贝多糖类糖胺聚糖（MT3）的含量,并达到13.5%,单糖组成主要为Man、GlcN、GlcUA、Gal和Fuc,分子质量约为18 kD。和其他组分相比,MT3 组分表现出良好的体外抗肿瘤活性,对体外前列腺癌DU-145细胞48 h,IC50 为2.71 mg/mL。通过活性追踪和工艺优化结果表明,热水提取后酶解工艺不仅可以降解蛋白提高多糖的纯度,而且还可以显著提高贻贝多糖中类糖胺聚糖的含量,而贻贝类糖胺聚糖是贻贝多糖的主要活性组分,具有良好的抗肿瘤活性。     

不同体积分数乙醇沉淀桑黄胞内多糖的理化性质及抗氧化活性

研究桑黄胞内多糖醇沉过程中乙醇体积分数对多糖得率、纯度、理化性质和抗氧化活性等的影响。结果表明：随着乙醇体积分数的增加,沉淀粗多糖的得率增加,而粗多糖中多糖含量呈现不规则的变化;不同体积分数乙醇沉淀获得的桑黄多糖中均含有木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖。扫描电镜图像显示,低体积分数（65%、75%、85%）乙醇沉淀的多糖呈现均匀球状,高体积分数（95%)乙醇沉淀的多糖连成大块片状。桑黄胞内多糖体外抗氧化能力存在明显的量-效关系,95%乙醇沉淀的多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、羟自由基、2,2’-联氮-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS）自由基的清除效果最好,对Fe3＋的还原能力最强,抗氧化活性最高。     

天麻多糖提取与自由基清除作用研究

目的:研究活性天麻多糖的提取与自由基清除作用.方法:以水提醇沉法制备天麻粗多糖,CTAB季铵盐络合法、凝胶过滤柱层析进一步纯化;利用Feton体系和邻苯三酚自氧化反应,采用比色法测定天麻多糖对OH·及O2-·自由基的清除作用.结果:通过正交实验获得天麻多糖提取工艺为料水比1:40、浸提温度80℃、提取次数2次,75%乙醇沉淀;在相同的试验体系浓度下,天麻粗多糖及纯化多糖对OH·的IC50分别为1.18、1.62 mg/mL;对O2-·的IC50分别为0.81、1.03 mg/mL.结论:天麻多糖对氧自由基具有较佳清除能力.