谷物中DON、ZEA毒素的净化、检测、 毒性与生物脱毒技术的研究

禾谷镰刀菌在侵染谷物过程中所产生的次生代谢产物——单端孢霉烯族毒素[脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol, DON)、雪腐镰刀菌烯醇(nivalenol, NIV)]以及玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEA)是世界上粮食安全的一个重大问题。毒素经固液萃取技术提取后, 需要通过净化处理才能进行检测与分析。目前有多种净化技术用于毒素的净化, 如免疫亲和柱、多功能净化柱等固相萃取柱等, 以及广泛使用且简便经济的QuEChERS前处理技术。本文还介绍了禾谷镰刀菌毒素中DON、ZEA的检测方法、产毒条件、毒性以及生物脱毒技术等方面的研究进展, 旨在开发与应用更安全、高效、经济的生物脱毒技术进行毒素的防御与去除, 以提供安全、优质的粮食与食品。     

真菌毒素DON和ZEN的体外联合毒性评价

选取BEL7402细胞对脱氧雪腐镰刀菌烯醇（Deoxynivalenol,DON）和玉米赤霉烯酮（Zearalenone,ZEN）的联合毒性进行评价。首先将不同浓度的DON、ZEN以及其混合物染毒对数期的BEL7402细胞,刺激24 h后,对细胞增殖率、ROS活性氧水平、钙离子水平、细胞凋亡率以及凋亡相关靶点基因的表达等指标进行监测分析,并对两种毒素的联合毒性作用进行评价。结果表明,真菌毒素DON、ZEN均可抑制细胞活性,IC₅₀分别为9.3、27.2μg/m L,可导致细胞氧化应激损伤,提高细胞内活性氧水平以及钙离子浓度,显著上调凋亡关键基因p53、Bax,下调Bal-2基因,诱导细胞产生早期凋亡甚至坏死,多种毒性指标验证了这两种毒素对细胞的联合毒性作用表现为加和作用。      

呕吐毒素生物脱毒研究进展

脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）又名呕吐毒素（VT）,是镰刀菌属（Fusarium spp.）产生的最常见的真菌毒素之一,广泛存在于谷物及其相关制品中,给世界粮食生产造成巨大经济损失,也给人类和动物健康带来重大威胁。目前,利用微生物和酶对DON进行生物脱毒的方法展现出良好的应用前景。很多真菌和细菌能够通过自身吸附或降解的方式在DON的脱毒过程中发挥作用。本文概述了食物中DON的发生、毒性作用及DON生物转化机制,对近年来利用真菌、细菌和植物进行DON脱毒以及脱毒材料的应用进行了较为详细的阐述,以期为食品和饲料中DON的生物防控提供参考。     

液质联用同时检测小麦中三种镰刀菌毒素

研究了小麦面粉中玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、雪腐镰刀菌烯醇三种镰刀菌毒素液相色谱-质谱联用同时检测的方法。小麦样品中的毒素提取液经Mycosep 226多功能净化柱净化后，以反相C18柱为色谱柱，甲醇、0．1％乙酸铵水溶液梯度洗脱为流动相，大气压化学电离离子源电离后质谱检测。该方法玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇和雪腐镰刀菌烯醇标准溶液的提取离子峰面积与标品浓度分别在3～4500ng／mL、8～5000ng／mL范围内呈良好的线性关系，加标实验中三种毒素平均回收率在70．9％～93．7％之间，检出限分别为5、10、12ng／g，RSD均小于10％，具有很好的精密度。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇生物脱毒的研究进展

脱氧雪腐镰刀茵烯醇作为谷物及其制品中最常见的真菌毒素之一,严重威胁着人类和动物的健康。由于物理、化学脱毒方法存在着营养成分流失、脱毒不彻底等问题,而不能被广泛应用。微生物通过酶促反应将毒素转化成低毒或者无毒物质的生物脱毒方法不仅避免了这些缺点,还具有条件温和、安全环保的优点,是一种理想的脱毒方法。对近年来国内外脱氧雪腐镰刀茵烯醇的生物脱毒研究进展进行了概述,并对脱毒菌株、脱毒酶、脱毒方式及脱毒产物等研究内容作了重点介绍,旨在为脱氧雪腐镰刀菌烯醇的生物脱毒研究提供参考。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇的毒性及脱毒研究进展

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)是B型单端孢霉烯族毒素中分布最广的一种,广泛存在于受污染的谷物及饲料中,对人和动物危害很大。本文总结了DON的毒性,包括急、慢性毒性、致癌、致畸、致突变以及细胞毒性等。概述了DON的脱毒方法,包括热处理、辐照和吸附等物理方法,臭氧和化学药物处理等化学方法,以及微生物处理及基因工程等生物方法。同时,分析了当前研究中存在的问题,并对未来的发展趋势进行了展望。      

超高效液相色谱-串联质谱法检测小米及面粉中4种镰刀菌毒素

目的建立小米及面粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)、3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇(3-acetyl deoxidized snow-scylienol,3-AC-DON)、15-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇(15-acetyl deoxidized snow-scyloxanol,15-AC-DON)和玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)的超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱测定方法。方法经乙腈-水(84:16,V:V)提取样品,通过多功能净化柱净化,以BEH C_(18)柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)分离,流动相为0.2%氨水:乙腈梯度洗脱,电喷雾离子(multiple reaction monitoring,MRM)模式检测。结果玉米赤霉烯酮检出限为0.1μg/kg,定量限为0.3μg/kg,线性范围为2.0～30.0μg/L;脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其衍生物的检出限为0.2μg/kg,定量限为0.6μg/kg,线性范围为10.0～150.0μg/L。加标回收率88.9%～106.0%。结论本方法快速、准确、灵敏度高,能满足4种镰刀菌毒素的同时检测。     

河北地区面制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其衍生物和玉米赤霉烯酮污染水平调查与分析

目的了解河北地区面制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)及其衍生物3-ADON、15-ADON和玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)污染状况。方法对河北地区79份烘烤食品(饼干、面包)、87份生面制品和89份馒头样品进行调查分析。样品经乙腈:水(84:16, V:V)溶液超声离心提取后,通过多功能固相萃取柱进行净化处理,采用高效液相色谱-串联质谱法进行检测。结果 255份样品中,3A-DON、15A-DON和ZEN检出率均不高;DON检出率较高,共检出阳性样品252份,检出率为98.8%,超标样品10份,超标率为3.9%。4种真菌毒素污染较为严重的样品为饼干样品,其检出率和超标率明显高于其他面制品。结论在面制品中,主要的污染物为DON,污染最严重的样品类别为饼干样品,其污染状况应引起关注。     

镰刀菌毒素与黄曲霉菌毒素的联合毒性研究—DON、NIV和AFB_1的UDS试验

用非程序ＤＮＡ合成（ＵＤＳ）试验以研究镰刀菌毒素的脱氧雪腐镰刀菌烯醇（ＤＯＮ）、雪腐镰刀菌烯醇（ＮＩＶ）和黄曲霉毒素（ＡＦＢ１）的联合毒性。结果表明，这三种毒素均可造成ＤＮＡ损伤；ＤＯＮ和ＮＩＶ及ＮＩＶ与ＡＦＢ１对ＤＮＡ损伤有交互作用，产生增毒影响。     

济南部分地区谷物制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及玉米赤霉烯酮的污染状况

目的 了解济南部分地区常见的即食谷物加工制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol, DON)和玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEN)的污染情况。方法 在济南市区内4个不同地点随机采集即食谷物加工制品共50份, 酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测DON、ZEN的含量, 根据食品安全国家标准GB 2761-2017食品中真菌毒素限量对结果进行分析。结果 50份样品中, DON和ZEN的检出率分别为90.0%、76.0%, 超标率分别为48.0%、16.0%, 中位数分别为975.0、39.2 μg/kg。12份有食品包装批号和38份无食品包装批号的样品中, DON超标率分别为33.3%、52.6%, ZEN超标率分别为8.3%、18.4%, 差别均无统计学意义(DON: X2=1.361, P=0.243>0.05; ZEN: X2=0.144, P=0.704>0.05)。DON、ZEN超标率在不同采样点的差别均无统计学意义(DON: X2=2.985, P=0.225>0.05; ZEN: X2=1.453, P=0.484>0.05)。在零食类谷物制品和主食类谷物制品中, DON超标率的差别无统计学意义(P=0.749>0.05), ZEN超标率的差别有统计学意义(P=0.010<0.05)。结论 济南部分地区即食谷物加工制品中存在一定程度的DON、ZEN污染, 其中DON污染更严重, 这种污染情况同时存在于两种包装形式、零食和主食两大类以及不同售卖地点的谷物制品中。提示济南部分地区谷物加工制品的DON、ZEN污染情况应引起相关监管机构的重视。     

谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇控制的研究进展

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)属B型单端孢霉烯族毒素,是目前谷物及其制品中污染最为普遍的一种真菌毒素,食用后会导致人体多种急、慢性中毒,增加人体患胃癌、食管癌等恶性肿瘤的几率,具有明显的毒理学危害.为了保护消费者健康及最大限度的减少经济损失,国内外学者一直在积极的寻找控制DON的方法,反复测...     

玉米赤霉烯酮和脱氧雪腐镰刀菌烯醇双特异性抗体的制备及检测方法构建

玉米赤霉烯酮（zearalenone,ZEN）和脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deoxynivalenol,DON）是粮食中常见的真菌毒素,长期的饮食暴露会对生物体造成严重危害。目前针对ZEN和DON同步免疫检测分别依赖各自对应的单克隆抗体,而传统单克隆抗体制备周期长、成本高。作者利用重组抗体表达技术在短时间内获得了可同时识别ZEN和DON的双特异性抗体（Bis-scFv）,并构建了基于Bis-scFv的间接竞争酶联免疫检测方法（indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,IC-ELISA）,获得ZEN和DON标准曲线的半数抑制质量浓度（IC₅₀）分别为20.64 ng/mL和132.29 ng/mL;Bis-scFv具有良好的特异性,与其他真菌毒素均无显著的交叉反应。同时,将IC-ELISA方法对玉米中的ZEN和DON进行加标回收实验,其回收率为86.02%～108.14%。本研究证明了所开发的Bis-scFv未来可应用于粮食样本中ZEN与DON的同步快速检测方法的开发。     

小麦及其制品加工过程主要真菌毒素含量的变化

脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮是小麦感染赤霉病后产生较多的两种真菌毒素,综述了这两种真菌毒素的产生条件、理化特性、毒理效应、形成的危害和分布范围,以及在小麦清理、研磨以及烘焙和蒸煮等加工过程中含量的变化情况,以期对小麦及其制品生产过程中毒素含量的变化情况做出进一步探究。     

2017年上半年我国部分地区饲料及饲料原料中霉菌毒素的污染状况分析

应用酶联免疫吸附法结合高效液相色谱对我国部分地区饲料及原料中黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)3种霉菌毒素的含量进行检测。结果表明：356份样品中AFB1、ZEN和DON检出率分别是87.8%、95.0%和98.3%,平均含量分别为11.2、689.0和1 855.2 μg/kg,说明我国部分地区饲料及饲料原料霉菌毒素污染比较普遍。玉米、玉米副产物、配合饲料和粕类中ZEN和DON污染较严重,AFB1污染主要存在于粕类中,青贮料及发酵料中3种霉菌毒素的污染程度相对较轻,但污染范围较广,建议饲料生产企业应加强对饲料和饲料原料的品控管理。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇脱毒方法研究进展

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)是粮食和饲料中污染广泛的真菌毒素之一,其化学性质稳定,毒性强,严重威胁人类和动物的健康。目前DON脱毒方法主要有物理脱毒法、化学脱毒法和生物脱毒法,其中生物脱毒法具有安全环保、特异性强、解毒效果显著等优点而备受推崇。生物脱毒法主要包括微生物的吸附作用和酶降解方式等。微生物的酶降解作用是通过破坏DON的毒性基团,例如C12, 13位脱环氧、C3-OH氧化和C3-OH异构化等,将DON代谢转化为毒性较小甚至无毒的物质。某些种类的乳酸菌、芽孢杆菌、德沃斯氏菌和酵母菌等细菌和真菌都具备降解DON的能力,乳酸菌作为食品级的益生菌,在降解DON和防控食品真菌毒素污染具有广阔的应用前景。本文综述了DON脱毒方法的研究进展,将其优缺点进行分析总结,旨在为防控食品和饲料中DON污染,尤其是微生物对DON脱毒作用的进一步拓展和深入研究提供参考。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇的物理和化学脱毒方法研究进展

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)主要污染小麦、玉米、大麦和燕麦等谷类作物,并可带入至面包、面条、麦片、饼干、啤酒和饲料中,是一种世界性粮食及其制品污染物。DON毒素具有较强的化学稳定性,在食物链中可持续对人和动物造成危害。DON毒素的脱毒方法主要包括物理、化学及生物脱毒。详细论述了加热、吸附、辐照等物理方法及碱性试剂、氧化试剂、还原试剂等化学试剂对DON毒素的影响,为降低DON毒素的潜在危害提供参考。     

粮谷中脱氧雪腐镰刀菌烯醇净化检测技术研究进展

脱氧雪腐镰刀菌烯醇是粮谷中一种普遍存在的真菌毒素,对它的检测和限量非常重要,对其提取、净化、检测技术的新进展等方面进行了综述.     

高效液相色谱同步检测小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮的方法研究

文章建立了二合一免疫亲和柱净化、紫外检测器串联荧光检测器的高效液相色谱同步检测小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮的方法。样品用60%乙腈水提取,涡旋、振荡、离心、过滤等步骤,滤液过二合一免疫亲和柱净化,甲醇洗脱后氮气吹干,50%甲醇水复溶上机分析。该方法可在25 min内完成2种真菌毒素的同步检测,脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮的线性关系r值均大于0.999。在不同水平的加标试验中,脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮的回收率分别是85.8%～95.5%和87.8%～92.3%,相对标准偏差分别是3.2%～7.8%和3.2%～7.5%,检出限分别是50μg/kg和5μg/kg,定量限分别是100μg/kg和10μg/kg。该方法用外标法进行定量检测,灵敏度高、操作简单,准确性和重复性好。     

谷物类食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）及其衍生物的研究现状

脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）是由镰刀菌在侵染小麦等禾谷类作物过程中产生的一种有毒次级代谢产物,广泛分布于谷物及其相关制品中,给世界粮食产业造成巨大经济损失,也给人类健康带来重大威胁。DON在植物、微生物作用下会转化形成各种衍生物,且这些衍生物可与DON原型同时存在,增加了谷物及相关制品的安全风险。本文对DON的理化性质、影响产生的因素及其衍生物类型进行了讨论,并重点阐述了DON及其衍生物的污染状况以及在食品加工过程中的变化等方面的研究进展,以期为谷物及其制品中DON的风险评估及防控策略的制定提供有利参考。     

ELISA检测谷物中DON的影响因素及质量控制

酶联免疫吸附法(ELISA)检测DON,具有特异性强、灵敏度高、实验操作较简单等优点.本文就样品、仪器设备、前处理、试剂盒操作、质量控制等影响因素作分析,以提高检测数据的真实性和可靠性.