大豆分离蛋白肽钙螯合物的制备及表征

研究了酶解时间和酸法脱酰胺改性对脱植酸大豆分离蛋白肽钙离子螯合能力的影响,并对螯合物的结构特性及营养特性进行表征。结果表明:酶解240 min的肽有较好的钙结合量(57.85mg/g),螯合物得率为28.43%,脱酰胺后钙结合量和螯合物得率分别增加到75.37 mg/g、34.55%;氨基酸分析结果表明酸性氨基酸是参与螯合物形成的重要氨基酸;相对分子质量分布实验结果说明钙离子更倾向于结合相对分子质量大于等于1 000的肽段,螯合物得率高,但相对分子质量小于等于500的肽段是获得更高钙结合量螯合物的重要肽源;红外光谱分析表明钙结合后引起肽段结构的变化,肽链羧基中的O及氨基中的N是主要配位原子;体外消化吸收模拟实验制备的肽钙螯合物有较好的胃胰酶耐受性,经消化后肽段相对分子质量几乎没有变化,钙保留率稳定在87%左右,生物利用率达81.81%。     

花生肽钙复合物钙结合特性及氨基酸组成研究

利用花生分离蛋白通过酶解法制备花生肽,将花生肽脱酰胺处理,制备花生肽钙复合物。研究脱酰胺处理对花生肽钙结合量的影响,并分析花生肽钙复合物钙结合特性及氨基酸组成。结果表明:脱酰胺处理240 min后花生肽的钙结合量由82. 05 mg/g显著增加到135. 26 mg/g,表明脱酰胺处理可以显著提高花生肽的钙结合量;扫描电镜分析结果表明加钙反应后花生肽微观结构发生明显变化,由疏松片状结构聚合为颗粒状结构;傅里叶红外光谱分析结果表明花生肽肽链上的氨基及羧基是钙离子的主要结合位点,经脱酰胺处理羧基伸缩振动带进一步发生移动,表明脱酰胺后羧基上的氧原子与钙的配位作用得到增强,促进了花生肽钙结合量的提高;花生肽钙复合物中天冬氨酸含量为10. 76%,谷氨酸含量为23. 49%,表明酸性氨基酸含量是花生肽具有高钙结合量的重要因素。     

罗非鱼骨胶原钙螯合肽的酶解制备

本研究以罗非鱼骨胶原蛋白为原料酶解制备具有良好钙螯能力性的活性肽。以钙螯合活性为指标,将罗非鱼骨架经过脱肉、脱钙等前处理获得的罗非鱼骨胶原蛋白通过木瓜蛋白酶酶解制备得到罗非鱼骨胶原蛋白肽,通过单因素及正交试验对制备罗非鱼骨胶原螯合肽的酶解工艺进行优化。同时对最优条件下酶解获得的罗非鱼骨胶原钙螯合肽的分子量及氨基酸组成进行分析。结果表明,最优酶解工艺条件为:酶解时间4.5 h,pH 6.5,酶解温度62℃,酶底比0.6%。罗非鱼骨胶原钙螯合肽是一类小分子功能活性肽。同时通过对比罗非鱼骨胶原钙螯合肽及其钙-肽螯合物氨基酸组成,发现胱氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸和赖氨酸等氨基酸对活性肽的钙螯合能力起到重要作用。     

大豆肽钙螯合物的制备、稳定性及表征

豆粕通过醇洗、酸沉、水解工艺制备大豆肽,并将大豆肽与钙离子进行螯合反应,制备大豆肽钙螯合物。测定了大豆肽钙螯合物的氨基酸组成及在磷酸盐溶液中、不同pH下的稳定性,并对大豆肽钙螯合物进行DSC、TGA、Zeta电位、XRD分析。结果表明:大豆肽钙螯合物的钙结合量为53. 03 mg/g,与CaCl_2相比,大豆肽钙螯合物具有更高的钙保留率;具有较高钙螯合能力的大豆肽的相对分子质量主要集中在小于1 kDa的范围内;大豆肽与钙离子螯合后,谷氨酸和天冬氨酸含量由34. 33%提高至49. 83%;大豆肽钙螯合物在不同pH条件下均未发生较大程度的解离;大豆肽与钙离子反应后,电负值由-37. 73 mV降到-12. 32 mV;大豆肽钙螯合物在XRD图谱中的衍射峰收窄,峰值由20°偏移至22. 5°,同时在42. 5°出现1个微弱的衍射峰,且氯化钙的特征峰消失,表明大豆肽与钙离子形成了新的化合物;大豆肽钙螯合物具有更好的热稳定性。     

高压脉冲电场技术制备大豆肽螯合钙

目的研究大豆肽螯合钙最佳工艺参数以及高压脉冲电场对螯合效果的影响。方法以鸡蛋壳粉和大豆肽粉为原料,以螯合率为衡量指标,研究了大豆肽粉和蛋壳粉的质量比、反应体系pH、螯合过程中电场强度以及电场的频率等因素对螯合反应的影响情况,并利用响应面试验设计的方法。结果回归方程为:Y=94.96-0.074X_1+0.30X_2-0.14X_3-0.45X_4+0.012X_1X_2+0.060X_1X_3+0.37X_1X_4-0.32X_2X_3+0.64X_2X_4-0.085X_3X_4-0.42X_1~2-0.93X_2~2-0.34X_3~2-0.15X_4~2,优化出大豆肽螯合钙的最佳工艺条件为:大豆肽粉和蛋壳粉质量比1:1.75、pH 8.0、电场强度15 kV/cm、电场频率1200 Hz。在此条件下,螯合率高达95.38%±0.18%。结论本研究为大豆肽螯合钙技术研究提供一种新思路。     

胶原肽螯合钙的吸收试验研究

以胶原肽螯合钙为受试物,碳酸钙(CaCO3)作为阳性对照,检测受试动物的血清钙、股骨钙含量及股骨指数,评价胶原肽螯合钙对缺钙模型小鼠的补钙功能。结果显示,各试验组小鼠体重增长无显著性差异(P>0.05),胶原肽螯合钙高剂量组和低剂量组血清钙含量及股骨钙含量均高于模型组且差异具有极显著性(P<0.01),同时胶原肽螯合钙高剂量组股骨钙含量高于CaCO3组且差异具有显著性(P<0.05),胶原肽螯合钙高剂量组股骨指数高于模型组及CaCO3组其差异具有极显著性(P<0.01)。说明胶原肽螯合钙具有一定的补充钙质的功能。     

食源性钙螯合肽的研究概况

食源性螯合肽是本身具有螯合矿物质元素活性,并可提高机体对矿物质元素生物利用度的一类肽。具有钙结合活性的肽可有效地运输钙离子通过肠上皮细胞,被机体利用吸收。文章对近年来国内外文献报道的食源性钙螯合肽的制备、分离纯化、结构特征、生物活性和生物利用度进行梳理总结,以期为补钙产品的研发及资源的高效、高值化、可持续开发利用提供参考。     

鳗鱼钙螯合肽制备工艺研究

本文以鳗鱼尾为原料,采用现代酶解技术高效制备鳗鱼钙螯合肽。系统研究了单酶的种类、多酶复配、酶解时间和酶添加量对蛋白回收率、肽得率以及产物钙螯合能力的影响规律,并获得最佳酶解工艺:添加鳗鱼尾蛋白3.5‰的胰酶,调整pH至8.0在55℃下酶解3 h,然后调整体系pH至4.0,加入鳗鱼尾蛋白3.5‰的酸性蛋白酶在55℃下继续酶解2 h得到鳗鱼肽,蛋白回收率和肽得率分别为66.61%和52.46%。并在此基础上,研究了螯合温度、pH值以及质量比对鳗鱼肽螯合能力的影响,优化获得螯合条件为:鳗鱼肽在30℃,pH值为9.0条件下按肽钙质量比1:2,与钙离子螯合30 min得到鳗鱼钙螯合肽,螯合物的钙离子含量为56.78 mg/g。通过氨基酸成分分析,发现鳗鱼肽与钙的螯合反应中,谷氨酸和天冬氨酸等酸性氨基酸的贡献最大。     

珍珠肽螯合钙的制备与性质表征

为提高珍珠的利用率,生产易被人体高效吸收利用的补钙剂。以珍珠粉为原料制备珍珠肽,并对其进行钙螯合处理。以螯合物得率和螯合物中钙含量为考察指标,确定珍珠肽螯合钙的最佳制备方法。采用紫外-可见吸收光谱分析（UV-vis）、傅里叶红外光谱分析（FTIR）、圆二色谱分析（CD）、X射线衍射分析（XRD）、差示扫描量热分析（DSC）和扫描电镜分析（SEM）等比较螯合前后的变化。结果表明:珍珠粉经过丙酸酸解、重复离心除杂后得到珍珠蛋白。使用地衣芽孢杆菌蛋白酶（Bacillus licheniformis proteinase, BLP）对珍珠蛋白进行酶解得到珍珠肽,最终珍珠肽螯合钙得率为27.24%±1.29%,珍珠肽螯合钙中钙含量为48.75%±1.20%。对此条件下制备的珍珠肽和珍珠肽钙螯合物进行结构分析,发现珍珠肽的氨基和羧基都参加了螯合反应,并且螯合物的二级结构由原来的无序结构向有序、紧密的结构转变,螯合物的结晶度大幅度提高并生成结构更加稳定的新物质,而且有明显的分子聚集现象。     

肽钙螯合物的研究进展

利用酪蛋白磷酸肽螯合钙离子的特性,以钙离子浓度为尺度,分级制取不同钙螯合能力的CPPs,同时提高其纯度。以酪蛋白的胰蛋白酶酶解产物为原料,通过逐级增加Ca²⁺添加量,在终浓度为55%（v/v）的乙醇溶液中分级沉淀出三个酪蛋白磷酸肽-钙螯合物级分（CPP1-Ca、CPP2-Ca和CPP3-Ca）,并利用PBS脱钙得到三个级分相应的酪蛋白磷酸肽（CPP1、CPP2和CPP3）。以传统钙乙醇沉淀法得到的肽钙螯合物（CPP-Ca）为对照,分析并对比三个酪蛋白磷酸肽-钙螯合物级分的理化性质以及持钙特性。结果表明,三个酪蛋白磷酸肽-钙螯合物级分中,CPP3-Ca含有最高的纯度和钙螯合量,分别为89.42%和69.59 mg/g,明显高于未分级CPP-Ca的83.77%和55.05 mg/g。氨基酸组成及N/P（摩尔比）分析发现CPP3-Ca含有更高磷酸丝氨酸基团,进而能够结合更多的Ca²⁺。不同酪蛋白磷酸肽级分持钙能力分析结果显示CPP3能够更好地延迟和阻止磷酸钙沉淀的形成,具有更高的持钙能力。同时CPP3-Ca在模拟肠道环境中具有更高的钙溶解度,表明分级后的酪蛋白磷酸肽-钙螯合物的体外生物利用度提高。

     

食源性钙结合多肽的研究进展

钙是维持人体生命活动所必需的常量元素。然而,我国居民膳食中钙的摄入量仅为推荐摄入量的一半,传统补钙制剂存在生物利用率低等缺点,因此开发安全高效的补钙制剂势在必行。食源性钙结合多肽因其天然性更为安全可靠,越来越成为研究的热点。本文对常见的食源性钙结合多肽及其分离纯化、鉴定方法进行综述,以寻找食源性钙结合多肽的新路径,以期为食源性钙结合多肽的制备和开发提供参考。      

猪骨蛋白酶解制取多肽钙的研究综述

综述了猪骨的酶法处理及骨胶原多肽钙合成、结构表征、螯合机理等方面的研究成果,指出目前有关猪骨蛋白酶解制取多肽钙的研究多集中在合成方面,对于多肽与钙的具体螯合机理研究只是简单地通过产物表征反推配位机理,不能真正反应出螯合过程的每步变化,有待进一步深化．     

微生物发酵法制备大豆多肽的研究

对微生物发酵方法制备大豆多肽的发酵条件进行研究,以脱脂豆粕为原料,在其发酵过程中通过对各种条件进行控制,选择出最佳的调控方案,通过比较各种调控因素如底物浓度、pH值、温度、发酵周期对肽转化率的影响,选择出转化率相对较高的最佳发酵条件:底物浓度为10%、最适pH值为7.0、最佳发酵温度为36℃、发酵周期为30 h,肽比率可达79.33%。     

A study of the soluble complexes formed during calcium binding by soybean protein hydrolysates

ABSTRACT:  The soluble complexes formed between hydrolyzed soybean protein and calcium at pH 7.4 were investigated using dialysis, gel chromatography, and Fourier transform infrared spectrometry (FTIR). The results demonstrate that the amount of calcium bound was significantly different for soybean protein hydrolysates obtained using the proteases neutrase, flavourzyme, protease M, and pepsin. Maximum levels of calcium binding (66.9 mg/g) occurred with hydrolysates produced using protease M. Peptide fragments exhibiting high calcium binding capacity had molecular weights of either 14.4 kDa or 8 to 9 kDa, and the calcium binding capacity was linearly correlated with carboxyl group content ( R ²= 0.8204). FTIR experiments revealed that upon binding calcium, the amide I band underwent a shift to lower wave numbers. A wide, intense Ca–O absorption band also appeared between 400 and 100 cm⁻¹ in the far-infrared spectrum. The width and intensity of this band increased after treatment of samples with glutaminase. The amount of bound calcium was related to both the molecular weight of the peptides and to the carboxyl group content, and the most likely sites for calcium binding are the carboxyl groups of Asp and Glu.     

大豆肽生理功能的研究进展

介绍了大豆肽的定义,综述了大豆肽抗氧化、降血压、抗疲劳、降血脂减肥、免疫调节、血糖调节的生理功能,为大豆肽的开发利用提供参考。      

酶解豆清液制备生物活性多肽工艺优化及抗氧化能力研究

目的 探究木瓜蛋白酶酶解豆清液制备生物活性多肽的最佳工艺条件,评价该生物活性多肽的抗氧化能力。方法 以三氯乙酸-双缩脲法测得的多肽产率为参考指标,在单因素实验结果基础上,通过响应面实验确定酶解豆清液的最优酶解条件,并通过测定2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐（2,2''-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid,ABTS+·）、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除率,分析豆清多肽的抗氧化活性。结果 最佳酶解条件：木瓜蛋白酶添加量2.0%、初始pH 5.0、酶解温度53 ℃、酶解时间7 h,在该条件下豆清液的多肽产率为115.50%与预测值范围内。抗氧化实验测得Vc（维生素C, vitamin C）与样品对ABTS自由基清除能力EC50值分别为0.003、1.871 mg/mL,对DPPH自由基清除能力EC50值分别为0.006、6.459 mg/mL,说明样品具有一定的抗氧化能力。结论 木瓜蛋白酶酶解豆清液制备生物活性多肽不仅降低豆清液排放,提高豆清液附加值提供技术支撑,同时为豆清液生物活性多肽的多元化使用提供来源。     

蚕蛹多肽螯合钙的制备工艺优化及结构表征

利用蚕蛹多肽为原料制备多肽螯合钙,以可溶性钙含量为主要指标,综合考察螯合率和得率,研究了螯合pH、温度、时间以及肽钙比等单因素的影响,并进一步通过响应面优化法对制备工艺进行优化,确定最优的反应条件为反应时间80min、反应温度73℃、pH 10、肽钙质量比3.41.0,该条件下蚕蛹多肽螯合钙的含钙量为14.51%。傅利叶红外光谱分析表明蚕蛹多肽主要通过羧基、胺基和磷酸基团与钙离子结合。     

水解度对螺旋藻肽乳化性、起泡性及抗氧化性的影响

研究了水解度对螺旋藻肽乳化性、起泡性以及抗氧化能力的影响。结果表明,随着水解时间的延长,螺旋藻肽的水解度逐渐增大。水解过程中,螺旋藻肽的起泡性、DPPH自由基清除能力以及还原力均随着水解度的增加先增大后减小,羟基自由基清除能力随着水解的进行先减小后增大,达到最大后再减小。而泡沫稳定性、乳化性、乳化稳定性则随着水解度的增大逐渐减小。这说明,在螺旋藻肽的生产过程中,并不是水解度越大越好,而应根据对产品物化性质与抗氧化能力的要求,确认最佳水解度。