磁性壳聚糖微球固定化脂肪酶的研究

以纳米级磁性壳聚糖微球为载体,戊二醛为交联剂固定化脂肪酶,对固定化脂肪酶条件进行优化,同时对固定化脂肪酶的理化性质、活性回收率、热稳定性和储存稳定性进行研究.结果表明,固定化脂肪酶的最佳时间为7 h,最佳pH为8,最佳温度为50 ℃,最佳酶加量为每100 mg磁性微球加酶10 mg.和自由酶相比,脂肪酶被磁性壳聚糖固定...     

壳聚糖微球固定化脂肪酶催化性质研究

以壳聚糖微球为载体制备固定化脂肪酶制剂并研究其催化性质.首先,制备壳聚糖微球,用2%醋酸溶液溶解壳聚糖,以液体石蜡为分散剂制成壳聚糖微球;然后,通过戊二醛交联制备固定化脂肪酶制剂,并研究其催化性质.结果表明:壳聚糖微球在2%戊二醛浓度下常温下交联9 h,脂肪酶固载率可达60%.与游离脂肪酶相比,壳聚糖微球固定化脂肪酶的最适底物、最适p H值及最适温度分别转变为4-硝基苯基辛酸酯,p H 8.57及50℃.固定化脂肪酶重复实验6次后仍保留有47.7%的催化活性,置于60℃下4 h酶活保留73%,其金属离子K+和Mg2+最适浓度分别为0.15 mol/L,0.10 mol/L.     

磁性壳聚糖表面离子液体固定化及其对丙烯酰胺吸附性能研究

以Fe3O4作为磁性纳米粒子,悬浮交联法制备磁性壳聚糖微球;以戊二醛作为交联剂在磁性壳聚糖微球表面固定离子液体;利用紫外分光光度法研究磁性壳聚糖固定化离子液体对丙烯酰胺的吸附性能.吸附动力学实验表明：2 h吸附容量为1.45 mg/g,3 h吸附基本达到平衡.结果显示：制备的磁性壳聚糖固定化离子液体对丙烯酰胺具有良好的吸附性能.     

啤酒酵母RNA提取条件的优化及其磁性固定化

通过浓盐法对啤酒酵母RNA进行提取,以磁性壳聚糖微球为载体,戊二醛交联法对RNA进行磁性固定化。通过比较反应体系中的无机磷和总磷的质量分数,对RNA的提取条件和固定化条件进行优化。结果表明,RNA提取温度对提取率的影响最为显著;在提取时间4h、提取温度100℃、氯化钠质量分数为10%和酵母质量分数为8%的最优条件下,RNA提取率达到6.13%。戊二醛交联法磁性固定化RNA的最佳条件为:反应时间4h,温度40℃;RNA最佳添加量为30mL(质量浓度2mg/mL)。     

α-乙酰乳酸脱羧酶的磁性固定化条件研究

采用分散聚合法,在Fe3O4磁流体存在下,通过PVA分子单体共聚制备出磁性聚乙烯醇微球.微球粒径分布在2.5×10-2～5×10^-2 μm,其中3.7×10-2～4.1×10^-2 μm的微球占总微球的44%,制备微球粒径分布均匀.以磁性聚乙烯醇微球为载体,通过戊二醛交联法进行ALDC的固定化,制备固定化酶,并对其固定化条件进行了初步研究.结果显示,在酶固定化过程中,自由酶的添加量为20 mL/g微球,戊二醛的添加量为0.98%.在其固定化最佳条件下,制备的固定化ALDC的活力为65 180 U/g,而且其比活、活性回收率分别可达872.32 U/mg和42.33%.     

磁性壳聚糖微球固定化漆酶催化肾上腺素

用交联法制备磁性壳聚糖微球，对微球的形貌和结构进行表征和分析，结果表明：微球呈规则的球形，分散比较均匀，粒径在3μm左右。磁性粒子矫顽力为210．6A／m，接近超顺磁性。以戊二醛为交联剂，将漆酶固定在此磁性壳聚糖微球表面，分别研究了该固定化漆酶和游离漆酶催化肾上腺素的性质。结果表明：固定化漆酶催化肾上腺素的最适温度为55℃，比游离酶升高了10℃，最佳pH值为5．2，游离酶为5．0。在60℃下保温300min后，固定化酶的催化活性仍保持为原来的75％以上，而在相同条件下游离酶仅保持为原来的10％。固定化酶连续催化肾上腺素10次以后．催化活性仍保持为原来的85％。     

α-乙酰乳酸脱羧酶的磁性固定化条件研究

采用分散聚合法,在Fe3O4磁流体存在下,通过PVA分子单体共聚制备出磁性聚乙烯醇微球。微球粒径分布在2.5×10-2~5×10-2μm,其中3.7×10-2~4.1×10-2μm的微球占总微球的44%,制备微球粒径分布均匀。以磁性聚乙烯醇微球为载体,通过戊二醛交联法进行ALDC的固定化,制备固定化酶,并对其固定化条件进行了初步研究。结果显示,在酶固定化过程中,自由酶的添加量为20 mL/g微球,戊二醛的添加量为0.98%。在其固定化最佳条件下,制备的固定化ALDC的活力为65 180 U/g,而且其比活、活性回收率分别可达872.32 U/mg和42.33%。     

正交设计优化酵母RNA的磁性固定化条件

以纳米级磁性壳聚糖微球为载体、戊二醛为交联剂,固定化酵母RNA。以反应体系中的总磷含量和无机磷含量的对比,进行正交设计,对酵母RNA的磁性固定化条件进行优化。结果表明,酵母RNA磁性固定化最佳反应时间为4h,最佳反应温度为40℃,最佳反应pH为5.5,最佳RNA添加量为20mL(2mg/mL),最佳戊二醛添加量为100μL(质量分数为50%)。     

仿生合成SiO2载体及其固定脂肪酶的条件研究

采用L-脯氨酸为模板,仿生制备用于固定脂肪酶的二氧化硅载体．SEM、IR表征得知,制备的仿生载体为粒径约3um的SiO2微球,氮气吸附表征得知,SiO2微球内部孔径大小约16．8nm．载体固定脂肪酶的实验结果表明,固定化脂肪酶的相对最佳条件：酶液质量浓度5mg／mL,反应温度40℃,反应时间7h,pH=8,最高固载率可达82．3％,酶活1067U／g载体．     

含锰磁性纳米粒子固定脂肪酶的研究

用无皂乳液聚合制备了P(AM-co-St)-Mn(Ⅱ)磁性高分子纳米微球,在此基础上通过共价键合固定脂肪酶。结果表明,固定脂肪酶后的磁性纳米微球具有优异的磁分离能力;锰离子对固定化酶有明显的激活作用,当锰离子质量分数为1.4%时,偶联率和活力回收率分别提高88%和71%;脂肪酶被固定化后其pH稳定性比自由酶明显提高。     

磁性固定化纤维素酶的交联法制备及其磁致酶学性质

以磁性壳聚糖微球为载体,采用交联法制备磁性固定化纤维素酶.分别研究了活化剂乙基[3-(二甲胺基)丙基]碳二亚胺盐酸盐(EDC)与戊二醛的活化时间及活化温度对酶固载量的影响.比较磁性固定化纤维素酶与游离纤维素酶在外加磁场作用下,其酶活力的变化.结果表明,磁性固定化纤维素酶的酶活受磁场作用影响较小;当磁场强度<500 mT与曝磁时间<60 min时,游离纤维素酶的酶活随着磁场强度与曝磁时间的增加而增加,但超过这范围,酶活就急速下降.     

羧基化磁性微球固定化Aeromonos sp.F3的研究

采用化学共沉淀法结合高锰酸钾氧化制得表面羧基化的磁性微球,并吸附于Aeromonos sp.F3菌体表面,在磁场的作用下实现细胞分离。分别从菌/磁性微球相对质量比、pH、温度等方面对固定化菌体细胞的影响做了研究。Aeromonos sp.F3菌体的固定化最佳条件确定为,菌/磁性微球相对质量比为3.1,反应环境的pH和温度分别为8和25℃,固定化时间为0.5h。在磁场下分离并更换新鲜发酵培养液的条件下,该磁性固定化菌体可重复利用7次,其产生的胞外酶的相对活力仍保持在50%~60%。该方法可以实现Aeromonos sp.F3菌体细胞的磁场分离和重复利用。     

戊二醛交联壳聚糖球固定化脲酶的制备

在微波辐射下以戊二醛为交联剂,将壳聚糖球交联引入醛基,然后将交联的壳聚糖球浸泡在脲酶溶液中24 h,制备了壳聚糖球固定化脲酶,其酶比活为10.83 U.g-1载体。最优固定化条件是戊二醛的体积分数φ(GA)1%,脲酶与湿壳聚糖球的质量比m(E)∶m(CB)为0.01,固定化时间为24 h,固定化所用溶液的pH值为6.5。研究表明,固定化脲酶具有良好的重复使用性和贮存稳定性。戊二醛交联壳聚糖球可作为酶固定化的优良载体。     

响应面法优化固定化碱性蛋白酶工艺

采用多孔壳聚糖微球吸附和戊二醛交联的方法,将碱性蛋白酶固定于壳聚糖上.在pH、加酶量、温度、戊二醛体积分数和固定化时间5个单因素试验的基础上,利用响应面分析法对固定化碱性蛋白酶的工艺条件进行了优化.结果表明:在pH 9.20、加酶量7 512 U/g、固定化温度44.58℃、戊二醛体积分数0.20%、固定化时间8.11 h的最佳工艺条件下,酶的回收率高达56.73%.     

树脂固定脂肪酶技术的研究

采用大孔树脂D3520作载体以载体涂布法来固定化脂肪酶,对固定化条件进行了优化并分析固定化酶的性能,在水分含量为3%~5%,pH 9.0,反应温度为40℃条件下,固定化酶具有最佳的催化活力(91.49 U/g).与游离酶相比,固定化酶具有更好的性能.     

214型离子交换树脂固定化假丝酵母脂肪酶的研究

以假丝酵母脂肪酶(Candida rugosa lipase)催化脂肪酸甲酯化是植物油精制副产物中提取天然维生素E的重要预处理反应.为提高预处理效果,通过固定化假丝酵母脂肪酶提高其酯化能力,降低水解反应的能力.笔者在不同性能树脂筛选的基础上,开展了离子交换树脂214型固定化假丝酵母脂肪酶的研究.以酶固定化率为指标,开展了酶质量浓度、树脂的量、缓冲液pH、固定化温度、时间和振荡速率等条件试验和响应面试验,得到的最适固定化条件为酶质量浓度6.09mg/mL,5mL酶液中加入0.75g树脂,缓冲液pH 8.4,振荡转速134.26r/min,固定化温度30℃,固定化时间4h.该条件下,假丝酵母脂肪酶与树脂的结合率最高,酶的水解作用基本消失,酯化能力得到保持,可以获得较好的维生素E提纯预处理效果.     

多胺化壳聚糖微球固定化AS1.398中性蛋白酶

从自制的单分散微米级壳聚糖微球出发,经C2氨基苯甲醛保护、C6羟基环氧化后接枝亲水性多胺,进一步制备多胺化壳聚糖载体,采用该载体对AS1.398中性蛋白酶进行固定化.结果表明：制备的固定化酶活力回收率达49%以上,是采用未改性壳聚糖微球固定化的2.7倍.固定化酶连续重复使用9批次后仍保留有原活力的一半.     

磁性壳聚糖微球的制备及其性能

用共沉淀法制备纳米级Fe3O4磁流体,并对其用油酸进行表面改性。采用化学交联法,在分散有磁流体的壳聚糖溶液中,加入适量的戊二醛交联剂,制得内核为磁性Fe3O4,外层包有壳聚糖的纳米级的磁性壳聚糖复合微球。考察了壳聚糖质量浓度、NaOH滴加量及搅拌速度等因素对磁性壳聚糖微球粒径、粒径分布以及形貌等对复合过程的影响,确定了制备磁性壳聚糖微球的最佳条件,并用电镜、红外光谱图、粒径分析仪等方法对磁性壳聚糖微球的形态和组成特性进行分析。最后得出平均粒径为348.5 nm,表面富含羟基、氨基和醇羟基等官能团,磁性明显、分散性良好的磁性壳聚糖微球。     

磁性Fe_3O_4/SiO_2复合粒子固定化漆酶及催化去除酚类污染物

利用溶胶凝胶法制备磁性Fe_3O_4/SiO_2复合粒子,并用-氨丙基三乙基硅烷(3-APTES)对复合粒子进行修饰,作为固定化漆酶的载体,研究了固定化漆酶适宜的催化条件.结果发现,固定化漆酶的最佳反应温度为30℃,p H为4.5,固定化酶的酶活为180 U/g,酶活回收率为68.45%.考察了固定化漆酶的热稳定性、p H稳定性和储存稳定性,与游离酶相比,固定化漆酶更加稳定,便于连续操作.将固定化漆酶用于去除废水中的2,4-二氯酚,反应12 h,去除率最高为68.35%,该固定化酶重复重复使用12次后,对2,4-二氯酚的去除率可保持在52.85%.     

壳聚糖固定脂肪酶的方法研究

介绍近年有关壳聚糖为载体固定脂肪酶的研究进展。壳聚糖及其衍生物的固定化脂肪酶酶具有酶活性高、回收率高和耐贮藏等特点。壳聚糖及其衍生物在固定化脂肪酶酶技术领域有着广阔的应用前景。