高灵敏的磁酶免疫吸附分析法用于谷物中伏马菌素FB_1的快速检测

建立谷物中伏马菌素FB1磁酶免疫吸附分析法(Magnetic enzyme-linked immunoassay,MELISA),并对实际样品进行测定。以自制磁性纳米颗粒为固相载体,负载伏马菌素FB1-卵清蛋白偶联物(FB1-OVA),建立检测FB1的MELISA方法,并与传统ELISA法和国标方法(HPLC,GB/T 255228—2010)进行比较。该方法线性回归方程为y=-0.229 5x+0.569 3(x为lg(CFB 1),y为OD/OD0),线性范围0.1~25.0 ng/m L,相关系数r=0.995 4,检测限为0.071 ng/m L,与其他4种真菌毒素交叉反应率均低于2.0%。在不同的加标水平下,玉米和小麦批内加标回收率分别为95.2%~120.0%和84.4%~120.0%,对应的批间加标回收率分别为90.0%~100.0%和90.0%~110.0%(其相应的批内和批间RSD分别小于6.5%和12.8%)。与传统的ELISA和HPLC法相比,MELISA具有更低的检测限和更高的灵敏度。本研究所建立的MELISA灵敏度高、操作简单、检测快速,适用于大批量谷物样品中FB1含量的快速测定。     

谷物中伏马菌素B1残留的直接竞争ELISA检测方法研究

以抗伏马菌素B(1Fumonisin B1,FB1)单抗作为包被抗体,辣根过氧化物酶(HRP-FB1)作为标记抗原,建立检测谷物中FB1的直接竞争酶联免疫吸附法(dc-ELISA);并与国家标准方法(HPLC,GB/T 255228—2010)进行比较,选取真菌毒素呕吐毒素、玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B1考察方法的特异性.结果显示:该dc-ELISA方法线性范围在200~800 ng/mL之间,回归方程为Y=-0.000 8X+0.978 9,决定系数R2为0.997 4,检出限为182.4 ng/mL,6份样品的批内和批间变异系数分别为7.4%和7.7%,平均加标回收率为98.5%(n=6).样品检测显示dc-ELISA与HPLC方法具有良好的相关性(r=0.999 6),与其他真菌毒素无交叉反应.因此,dc-ELISA法可应用检测玉米等谷物中FB1的含量,适合大批量筛选样品.     

小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定及方法研究

利用免疫亲和柱对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的特异吸附性,使用高效液相色谱法对样品进行测定.研究了提取方式、样品粒度、样品溶液稳定性、振荡提取时间等因素对检测结果的影响.当标准曲线在0～2.0 μg/mL之间,线性关系良好,相关系数达到0.999 1.检测结果RSD小于8.0％,不同水平的加标回收率处于92.0％～107.4％之间,通过回收率试验和标准物质试验验证了方法的可靠性和准确性.     

悬浮液进样-火焰原子吸收光谱法直接测定湘玉竹中铜

用悬浮液进样-火焰原子吸收光谱法测定湘玉竹中铜,样品经烘干、研磨、过筛配制琼脂悬浮液,直接喷入空气-乙炔火焰测定.本法测定加标回收率为97.8%~99.7%.方法的RSD小于2.5%(n=6),检测限为0.0038μg.mL-1.     

用酶联免疫法测定水产品中氯霉素的残留量

运用酶联免疫法测定水产品中的氯霉素残留，氯霉素浓度在0.05-4.05μg/kg范围内呈线性，线性方程为Y=0.31211-0.34014X,r=0.994，向样品中分别添加0.45,1.35,4.05μg/kg 3个浓度水平的氯霉素，平均回收率分别为84.5%,88.4%和79.9%,最低检测限为90ng/kg，批内变异系数为6.0%-8.5%，批间变异系数为5.8%-14.3%。结果表明该方法灵敏度高，重复性好，适合水产品中氯霉素残留筛选检测。     

浊点萃取-火焰原子吸收光谱法测定大米样品中的痕量镉

以Triton X-114为表面活性剂,基于甲基绿(MG)与CdI42-形成疏水性离子缔合物的浊点萃取新体系.详细考察了pH值、KI及MG溶液浓度、Triton X-114体积分数等因素对浊点萃取的影响,建立了浊点萃取-火焰原子吸收光谱法测定大米样品中痕量镉的新方法.在最佳条件下,该法检测限(3σ)为0.90 ng/mL,相对标准偏差RSD为4.2%(c=50.0 ng/mL,n=7).将该法成功应用于大米样品中痕量镉的测定,其回收率在91.0%~107.0%.     

液相色谱检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇前处理过程的优化

在利用液相色谱检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的过程中,前处理过程尤为重要,对液相色谱检测结果影响很大.在GB/T 23503-2009前处理方法的基础上,通过对称量定容,均质仪器的选择、洗脱之后氮吹与否、氮吹之后定容比例等关键点的调整优化,消除了由于称样方式和均质方法造成的测定误差.所得的测定结果与通过酶联免疫得到的DON含量相比较,由偏离很大回归到正常的误差范围以内.研究发现,在消除前处理造成的影响的同时,利用浓缩定容DON,使得DON液相响应值提高.     

高效液相色谱法测定呋喃西林原料药的含量

建立了高效液相色谱法测定呋喃西林原料药含量的方法.采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱作为分析柱,以0.05 mol/L磷酸二氢铵(p H=4.5)-乙腈(体积比80∶20)为流动相,检测波长为375 nm.呋喃西林在质量浓度为3.2~11.2 mg/L的范围内与峰面积呈良好的线性关系,R20.999;检出限(S/N=3)为5μg/L;回收率(n=9)在99.55%~100.3%之间.方法应用于3批实际样品分析,获得了令人满意的结果.     

HPLC法测定辣椒红色素中辣椒素及二氢辣椒素含量

利用高效液相色谱法(HPLC)测定辣椒红色素中辣椒素及二氢辣椒素的含量,结果表明:辣椒素在10~70μg/m L范围内,回归方程为:y=34 158x+974 053,r=0.999 4,测定结果 RSD为1.61(n=9),回收率为:94.23%(RSD=1.21,n=9),检测限为:0.5 mg/kg;二氢辣椒素在5~35μg/m L范围内,回归方程为:y=41 404+588 906,r=0.9 995,测定结果 RSD为1.55(n=9),回收率为:93.17%(RSD=1.28,n=9),检测限为:1.0 mg/kg.该方法简便快捷,具有较高的灵敏度和精密度.     

电位滴定法测定过硫酸氢钾复合粉中氯化钠含量

为建立一种测定过硫酸氢钾复合粉中氯化钠含量的方法,本试验以氯化钠基准试剂为对照,采用电位滴定-水溶液银量法在常温下进行测定.结果表明:该方法测定线性范围为10.0～55.0 mg,r=0.999 7;方法重复性好(RSD=1.11%,n=5);准确度高,回收率为99.6%(RSD=0.88%,n=6),加样回收率为99.1%(RSD=1.39%,n=6).可作为过硫酸氢钾复合粉中氯化钠含量的测定方法.     

禾谷镰刀菌DON毒素生物合成调控研究进展

禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)是农作物赤霉病的主要病原真菌,其产生的真菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)广泛分布于小麦、玉米及其制品中,影响食品的安全性。从物理因素、化学因素及生物因素等方面对禾谷镰刀菌DON毒素的生物合成调控机理和研究进展进行综述,为禾谷镰刀菌DON毒素的防控提供参考。     

鲭鱼罐头中7种多氯联苯的测定——亚临界水萃取-气相色谱法

建立了同时检测鲭鱼罐头中7种多氯联苯(PCBs)的亚临界水萃取-气相色谱分析方法。亚临界水中加入活性炭纤维为固相萃取剂,在200℃的条件下,提取40 min,随后,用2 mL乙酸乙酯洗脱。结果表明,该方法测定PCBs含量的线性范围为0.001~0.100μg/mL;在2.0、10.0、50.0μg/kg(n=6)的添加水平下,回收率在79.4%~91.0%之间,测定结果的相对标准偏差(RSD)为3.1%~12.3%;检出限(S/N=3)为0.016~0.046μg/kg;定量限(S/N=10)为0.048~0.139μg/kg。该方法绿色环保、稳定、可靠,适用于鲭鱼罐头中多氯联苯的检测。     

中药材黄芪中农药残留量检测方法研究

建立了中药黄芪中8种有机氯农药残留气相色谱分析方法。样品用石油醚-乙酸乙酯(体积比2∶1)的混和溶液超声提取,提取液用弗罗里硅土柱净化,用电子捕获检测器(ECD)检测。3个水平添加的回收率(n=5)分别为98.60%~110.2%、95.8~107.5和96.40~102.5%,RSD分别为3.0%~7.5%、3.2%~7.4%和3.1%~7.0%,方法的检出限为:0.000 4~0.004 0μg.mL-1,线性相关系数R2为0.996 3~0.999 7。该方法时间短,操作简单,满足农药残留分析的要求。     

野菊叶中绿原酸及木犀草素-7-O-葡萄糖苷测定

建立应用高效液相色谱测定野菊叶中绿原酸及木犀草素-7-O-葡萄糖苷含量的方法.以0.04%磷酸-乙腈为流动相,流速为1.0 mL/min,梯度洗脱,检测波长355 nm,结果表明绿原酸浓度10-100μg/mL范围内线性关系良好,相关系数r=0.997;平均回收率为96.7%,相对标准偏差（RSD）为0.85%（n=6）.木犀草素-7-O-葡萄糖苷浓度1-10μg/mL范围内线性关系良好,r=0.999;平均回收率为92.6%,RSD为0.63%（n=6）.     

流动注射化学发光法测定啶氧菌酯

基于啶氧菌酯对鲁米诺-高锰酸钾化学发光体系的增敏作用,建立流动注射化学发光分析法测定啶氧菌酯的方法,确定测定的最佳条件.测定啶氧菌酯的线性范围为1 ～ 100 mg/L,检出限(3σ)为5 ng/mL,相对标准偏差(n=11)为1.8％.用于水样中啶氧菌酯的测定,结果满意.     

分散液液微萃取-气质联用法测定水样中的菊酯类农药

研究了用分散液液微萃取-气质联用法分析测定水样中的三种拟除虫菊酯类农药残留(联苯菊酯、氯氰菊酯和溴氰菊酯)的方法。通过实验确定了当样品体积为5 mL时的最佳萃取条件为:14μL氯苯作萃取剂,1.0 mL乙腈作分散剂,超声萃取1 min。在最佳实验条件下,该方法对水样中三种拟除虫菊酯类农药的富集倍数在318~363之间;线性范围分别在0.05~50μg/L和0.5~100μg/L之间;最低检出限在0.002~0.04μg/L之间;相对标准偏差RSD(n=6)在3.7%~11.2%之间;加标水样的回收率在86.0%~117.0%之间。     

ELISA法检测玉米中AFB1样品提取方法改进的研究

在用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定玉米AFB1含量的过程中,通过改进样品提取方法,将样品本身的影响因素所造成的误差降至最小.结果表明:ELISA定量检测的标准工作溶液与样品提取液内成分相当时,样品检测结果准确,回收率稳定在83%以上.     

水果中钾含量的快速测定

建立了浓度直读法快速测定水果中钾含量的方法。研究了总离子强度调节缓冲溶液的种类、用量、酸度及干扰元素对测定结果的影响,同时对浓度直读法和标准曲线法进行了比较。结果表明,浓度直读法在10-1~10-5mol/L浓度范围内线性关系良好,相关系数R2=0.998 6,检测限为0.216 mg/L,样品中钾含量的相对标准偏差(RSD)为1.65%~6.00%,回收率为94.59%~100.7%。实验表明,浓度直读法准确、简便、快速,结果满意。     

国标中铝的测定方法改进研究

针对GB/T5009.182-2003《面制食品中铝的测定方法》中,铝的测定常因高氯酸残留而导致铬天青S显色不均,从而影响检测结果。文章通过实验研究、探索改进方法,旨在提高检测结果的准确性。方法:对铬天青显色剂的稳定性进行研究,以确定最佳显色时间;采用干法和湿法两种消解方法处理样品,通过氨水和盐酸调节pH值,以对硝基酚作为指示剂,使测定液酸度一致;比较干法和湿法两种方法的测定结果的准确度和精密度。结果:铬天青显色剂放置20 min左右反应完全且稳定,线性较好,R2=0.9974;干灰化法相对标准偏差(RSD)为3.3%,回收率为94.8%~103.2%;湿法相对标准偏差(RSD)为4.1%,回收率为92.7%~97.6%。两种方法检测结果无显著性差异(P>0.05)。结论:改进后的方法与GB/T5009.182-2003相比具有显色均匀,结果准确,精密度高,更易于操作等优点,可作为食品中铝的测定参考方法。     

贝莱斯芽孢杆菌降解脱氧雪腐镰刀菌烯醇及抑制禾谷镰刀菌的研究

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol, DON)是由禾谷镰刀菌等真菌产生的一类真菌毒素,会严重污染玉米和小麦等农产品,利用微生物降解真菌毒素是一种高效且污染小的方法。从猪肠道中分离得到1株可高效降解DON的菌株,对该菌株进行形态学、生理生化鉴定和16S rDNA序列比对分析;将该菌株与DON共同孵育,检测不同孵育时间的降解效果;取该菌株上清液、菌体细胞、胞内提取物以及经蛋白酶k、加热处理的上清液分别对DON进行降解;将菌株与禾谷镰刀菌共同培养,观察禾谷镰刀菌的生长情况。结果表明：经16S rDNA序列比对分析确定筛选得到的菌株为贝莱斯芽孢杆菌,其发酵上清液能在72 h内降解76.7%的DON,上清液经蛋白酶k、加热处理后,降解效果变弱,初步判断其中存在能降解DON的胞外酶;该菌株能够抑制禾谷镰刀菌的生长,且其发酵上清液对禾谷镰刀菌也具有很好的拮抗效果。