黄粉虫蛋白质提取及初步纯化研究

以脱脂黄粉虫为原料,通过优化提取条件采用1．0％NaOH溶液,料液比1：15、于50℃下搅拌2h,离心、过滤后采用盐析法沉淀蛋白,并经丙酮脱色、透析脱盐、真空干燥后得到含蛋白质80．1％的浅灰白色蛋白质产品,提取得率为77．8％,初步纯化得率为83．9％。     

羊血中SOD的提取工艺研究

本文采用乙醇-氯仿提取法对羊血中的SOD进行提取。在研究提取温度、缓冲溶液的pH值等单因素对SOD得率的影响的基础上,通过正交试验确定出最佳的提取条件：提取时间为15min,温度为65℃,缓冲溶液pH为7.4。     

黄粉虫蛋白质的提取工艺研究

以黄粉虫(Tenebriomolitor)幼虫脱脂虫粉为原料,用碱提法和盐提法提取了黄粉虫幼虫蛋白质,研究了两种提取方法的工艺条件。通过蛋白质提取效率的比较,得出盐提法优于碱提法。并对盐提法制得的蛋白质氨基酸组成进行了分析,为开发利用黄粉虫蛋白质资源提供了一条合理的新方法。     

盐提法提取黄粉虫蛋白质工艺研究

采用"盐溶酸沉"的原理,以黄粉虫脱脂虫粉为原料提取黄粉虫蛋白,研究NaCl浓度、提取液pH值、提取时间、提取温度等条件对蛋白提取率的影响.结果表明,盐提法提取黄粉虫蛋白的最佳工艺为:NaCl浓度0.5%,提取温度70℃,液固比8:1(v:m),提取时间3 h,蛋白质沉淀pH值4.8.在该条件下黄粉虫蛋白提取率可达到71.30%,纯度为90.20%.     

花生种子铜锌超氧物歧化酶的纯化及理化性质研究

花生种子铜锌超氧物歧化酶经氯仿-乙醇处理、硫酸铵盐析、凝胶过滤和离子交换柱层析等步骤被分离纯化到均一程度。该酶相对分子量为31500Da,由两个相同亚基组成,亚基分子量为16010Da,它在紫外区最大吸收波长为253nm,等电点为4.2,每摩尔酶含2个原子Cu和2个原子Zn,2mmol/L H2O2和0.2mmol/L KCN能完全抑制其活性,该酶由303个氨基酸残基组成,含有较高的丝氨酸和缬氨酸,不含色氨酸和半胱氨酸。纯化后的SOD比活性为5029U/mg,活力回收率为34%。     

花生种子铜锌超氧物歧化酶的纯化及理化性质研究

花生种子铜锌超氧物歧化酶经氯仿-乙醇处理、硫酸铵盐析、凝胶过滤和离子交换柱层析等步骤被分离纯化到均一程度。该酶相对分子量为31500Da,由两个相同亚基组成,亚基分子量为16010Da,它在紫外区最大吸收波长为253nm,等电点为4.2,每摩尔酶含2个原子Cu和2个原子Zn,2mmol/L H2O2和0.2mmol/L KCN能完全抑制其活性,该酶由303个氨基酸残基组成,含有较高的丝氨酸和缬氨酸,不含色氨酸和半胱氨酸。纯化后的SOD比活性为5029U/mg,活力回收率为34%。      

利用溶剂法对黄粉虫油脂提取工艺的初探

以黄粉虫幼虫为原料进行黄粉虫油脂的提取工艺研究。对影响黄粉虫油脂提取的因素:提取溶剂、提取温度、提取时间以及固液比等条件进行研究,初步确定出了最大提取率的条件,即以石油醚(60～90)作提取剂,提取温度为60℃,提取时间为4h,固液比为1:5。      

茶皂素的提取及纯化研究

采用超声波法提取茶皂素的工艺,确定最佳的工艺参数为:乙醇浓度80%、料液比1:4、提取温度40℃、超声波功率320W、超声波作用时间60min。最佳工艺条件下的茶皂素粗品得率为18.54%,茶皂素含量60.3%。用硅胶层析法对粗品进行分离纯化。能将茶皂素粗品中的杂质有效地分离,适用于茶皂素的分离纯化。     

茶叶粗多糖的提取及纯化研究

利用Sevag法脱游离蛋白、乙醇沉淀、二次透析等手段得到了初步纯化的茶叶粗多糖,该粗多糖经SephadexG100凝胶柱层析纯化,0.1mol/LNaCl洗脱,获得一较大组分,命名为TGP,通过凝胶渗透法测定其平均分子量为6×104道尔顿.     

植物胆碱酯酶提取纯化方法研究

比较了几个小麦品种中胆碱酯酶的活性，筛选出“辽春10号”小麦品种为胆碱酯酶制备适宜的酶源。以“辽春10号”小麦为试材，测试分析了提取液种类、用量及其pH值，过滤方式和离心分离条件等对粗酶液胆碱酯酶活性的影响；研究了胆碱酯酶的硫酸铵最大盐溶、盐析饱和度，以及硫酸铵分段盐析、透析和凝胶柱层析对胆碱酯酶纯化效果的影响，确定了胆碱酯酶提取纯化方法。     

黄粉虫抗氧化活性肽的分离纯化研究

为制备具有抗氧化活性的黄粉虫生物活性肽,采用双酶水解黄粉虫蛋白粉,对酶解产物进行葡聚糖SephadexG-25 凝胶柱层析和阳阴离子交换柱层析分离纯化,并对其各组分分子量分布及其抗氧化性进行研究,对抗氧化活性最佳的肽段进行氨基酸组成分析。结果显示,纯化得到的抗氧化多肽对羟自由基和超氧阴离子自由基具有很强的清除作用,清除率可分别达到74.20% 和87.32%。     

酿酒酵母超氧化物歧化酶的分离纯化研究

酿酒酵母CNU94经发酵培养后,离心收集菌体,将菌体用甲苯法破壁得到的粗酶液调节pH除杂蛋白,丙酮二次沉淀后,用DEAE32纤维素柱层析梯度洗脱,得到纯化的SOD,其比活为3500u/mg,收率为58.3%。PAGE电泳后的活性染色显示,酵母超氧化物歧化酶具4条明显的同功酶。该样品经KCN,H2O2,CHCl3乙醇抑制试验,酶类型为Cu/ZnSOD。     

黄粉虫幼虫蛋白质的提取研究

研究了不同的介质pH值、提取时间、提取温度和加水比例对黄粉虫幼虫蛋白质的可溶出率(提取率)的影响,分析了3种不同pH值提取的蛋白质的氨基酸组成。结果表明,pH值极大地影响着黄粉虫幼虫蛋白质的溶出率,pH值5.8时溶出率最低,此时可能为黄粉虫蛋白的等电点;pH值10.0或高于此值具有较高的溶出率;水与虫之比为10时蛋白质的可溶出率较其它比例为高;其它的因素对幼虫蛋白质的溶出率影响不大。在pH值2.4、5.8和12.1下提取的蛋白质其氨基酸组成不同,提取的黄粉虫蛋白质必需氨基酸占总氨基酸的含量达40％以上。     

蜂蛹超氧化物歧化酶(SOD)的提取及理化性质研究

对蜂蛹超氧化物歧化酶(SOD)的提取工艺及理化性质进行了研究。结果表明,用磷酸盐缓冲液可以对蜂蛹SOD进行有效的提取,最佳提取工艺条件为:用pH7.6的磷酸盐缓冲液于室温下静置提取4h后于55℃条件下加热20min,按该工艺条件进行提取,蜂蛹SOD的活力为110.41U/mgpro。蜂蛹SOD最适温度为40～60℃,最适pH为pH7.0～9.0,氰化钾和H2O2是蜂蛹SOD的抑制剂,可以有效地抑制蜂蛹SOD的活性。     

玉米超氧化物歧化酶的提取与纯化工艺

为优化玉米超氧化物歧化酶(SOD)提取与纯化工艺。研究不同浸提条件及沉淀分离工艺对玉米SOD提取及纯化效果的影响。最佳诱导和浸提的原料与缓冲液配比分别为1∶1.5~1∶3、1∶2,最佳诱导和浸提时间分别为25 h~30 h、1.5 h。采用50、60℃分别处理15、10 min两次热变性除杂蛋白、丙酮沉淀SOD的纯化效果最好。DEAE-纤维素柱层析纯化后,SOD比活为1 699.7 U/mg,回收率为31%,纯化倍数为30.7。该方法高效且低毒污染少,适于工业化生产。     

猪肝超氧化物歧化酶的分离纯化与初步表征

研究猪肝SOD的分离提取、纯化以及初步表征。以猪肝为原料,通过抽提液加热、丙酮沉淀和Sephadex G-200层析柱色谱提取、纯化Cu,Zn-SOD;在单因素试验的基础上,采用L(934)设计对提取工艺进行系统优化。结果表明:经过热变性,可以除去大部分杂蛋白,提高了SOD的比活力;最佳的提取条件是:在1.4%的盐浓度下,于70℃水浴中热变性10 min,然后加1.6倍体积的丙酮获得SOD粗沉淀;溶解后的粗酶液经Sephadex G-200层析柱纯化后,经SDS-PAGE电泳检测为单一条带,HPLC检测显示为单一对称峰,均表明最终得到了高纯度的SOD;紫外-可见吸收光谱和ICP-MS分析结果均表明得到的是含铜、锌的SOD,即Cu,Zn-SOD;以邻苯三酚为底物,该酶的Km值为1.574,Vmax为0.268。     

黄粉虫多糖响应面法提取及抗氧化活性

采用响应面分析法研究黄粉虫多糖提取的工艺条件,同时检测提取多糖的抗氧化活性。通过对关键影响因子的最佳水平范围的研究,依据回归分析确定了黄粉虫多糖最佳提取条件为:提取温度90℃、液固比12、提取时间158 min,在此条件下黄粉虫多糖提取率的理论值为1.99%,实测值为1.94%。分析表明,黄粉虫多糖主要由葡萄糖组成,并含少量甘露糖和半乳糖。体外抗氧化试验显示,黄粉虫多糖具有一定的抗氧化作用,可作为潜在的天然抗氧化剂来源。     

大麦虫超氧化物歧化酶分离纯化及性质研究

目的：探讨大麦虫超氧化物歧化酶(SOD)分离纯化条件及其性质,为大麦虫利用提供科学依据。方法：以大麦虫为原料,经盐析沉淀、DEAE-Sepharose FF阴离子交换柱层析和Sephadex G-75凝胶过滤层析等纯化, 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法对蛋白质的组分进行分离并确定其分子质量,原子吸收光谱仪鉴定酶的类型。结果：获得了一种酶比活力较高的大麦虫SOD,酶的纯化倍数为68.54倍,分子质量为37.30kD,属于含铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD),且在278nm波长处有紫外吸收峰,稳定性较好,最适温度为40℃,最适pH值为6.0,对H2O2、β-巯基乙醇试剂十分敏感,受氯仿-乙醇混合液(3:5,V/V)的影响较小。结论：大麦虫SOD具有较高的酶比活力,稳定性好,具有较高的利用价值。     

玉米超氧化物歧化酶超声波提取技术的研究

以玉米湿法加工淀粉副产物玉米胚芽为原料,经超临界CO2萃取脱脂、低温超细粉碎处理后超声波破碎提取超氧化物歧化酶(SOD)。实验结果表明,最佳超声波提取工艺条件为固液比1:25、超声波处理时间6s、次数40次、间隔时间2s;采用热变性和丙酮沉淀及SephadexG-75葡聚糖凝胶过滤纯化后得到的SOD样品酶活收率为40.56%,蛋白去除率99.36%,比活力为3079.41U/mg,纯化倍数达到63.09;紫外波长扫描的结果表明其最大紫外吸收峰在260nm处,说明玉米胚SOD类型为Cu/Zn-SOD。     

有机溶剂二次沉淀法提取纯化酵母菌超氧化物歧化酶的研究

酿酒酵母BUV094经发酵培养后，离心收集菌体，将菌体用甲苯法破壁得到粗酶液，粗酶液经调节PH除杂蛋白，丙酮二次沉淀三步纯化工艺，得到纯化的SOD，其比活为1015U／mg，收率为65．2％。PAGE电泳后的活性染色显示，酵母超氧化物歧化酶具四条同功酶。该样品经KCN，H2O2，氯仿—乙醇抑制试验，酶类型为Cu／ZnSOD。