大豆β-淀粉酶基因在毕赤酵母中的高密度发酵表达

大豆β-淀粉酶在麦芽糖浆生产上具有应用优势。该研究应用毕赤酵母表达系统异源表达大豆β-淀粉酶,并对重组酶的酶学性质进行了分析,结果显示,其酶学性质没有改变。为了增强重组β-淀粉酶的表达,采用甲醇/山梨醇混合碳源诱导的毕赤酵母表达策略,10 L发酵罐发酵表达的重组β-淀粉酶酶活力为310 U/mL,比单一甲醇诱导提高了36%。研究结果表明,发酵条件优化对提高异源β-淀粉酶在毕赤酵母中的表达有重要参考价值。     

β-淀粉酶酶解甘薯淀粉条件分析

麦芽糖可以诱导枯草芽孢杆菌产生中温α-淀粉酶,甘薯淀粉的β-淀粉酶酶解产物主要为麦芽糖。应用高效液相色谱示差折光检测法对不同酶解条件下甘薯淀粉β-淀粉酶酶解产物进行分析。结果表明,液化酶加入量为5~10U/g干淀粉时,酶解产物中葡萄糖的含量最高可达0.94%±0.048%,其含量较低,不会对枯草芽孢杆菌产α-淀粉酶具有阻遏作用。酶解最佳条件为液化酶加入量5U/g干淀粉,β-淀粉酶最佳加入量为200U/g干淀粉,酶解最佳温度为60℃,最佳酶解时间为28h时,此条件下甘薯淀粉酶解产物中麦芽糖含量达75.8%±1.7%。甘薯淀粉β-淀粉酶酶解产物可以诱导β-淀粉酶酶解产物枯草芽孢杆菌发酵生产中温α-淀粉酶。研究对枯草芽孢杆菌发酵生产中温α-淀粉酶碳源优化具有重要意义。     

大豆β-淀粉酶和大麦β-淀粉酶糖化特性的比较

本实验参照淀粉糖车间现有糖化工艺条件,对大豆β-淀粉酶和正在使用的大麦β-淀粉酶糖化能力及两种酶的低pH和高温的耐受性进行了对比研究.结果显示大豆β-淀粉酶添加量为大麦淀粉酶的1.2倍时与其有等效的麦芽糖生产能力,且大豆β-淀粉酶比大麦β-淀粉酶对低pH和高温有更好的耐受性.     

大豆β-淀粉酶的制备及酶学性质的研究

研究了从大豆中提取β-淀粉酶的方法，大豆β-淀粉酶的酶学性质，并对提酶后的大豆蛋白进行制备酱油和分离大豆蛋白的研究。经工厂批量生产．成品酶制剂的活力达30OKu／g左右，收率平均为56％，经纸层析分析，酶系纯，是高麦芽糖浆工业理想的酶制剂。制备酱油的全氮利用率达80％，分离大豆蛋白的蛋白质含量达92％。     

甘薯淀粉高麦芽糖浆的生产技术与应用

甘薯淀粉蛋白质含量低，结构松散，容易糊化、液化，便于过滤，是生产高麦芽糖浆的优质原料。本文报道高麦芽糖浆的两种生产技术。多酶法是甘薯淀粉先经耐高温α－淀粉酶液化，再经β－淀粉酶和异淀粉酶糖化。另一种方法是甘薯淀粉用真菌α－淀粉酶水解，或用真菌α－淀粉酶与普鲁兰酶水解。得到的糖化液再经过滤、脱色和浓缩，得到高麦芽糖浆。高麦芽糖浆在食品工业、医药工业具有广泛用途。     

双酶法生产高麦芽糖浆研究

首先研究了双酶的部分酶学性质。以玉米淀粉为原料，用耐高温α-淀粉酶水解至DE值为16．5％，再用真菌α-淀粉酶在最佳条件下作用21h，可得到含纯麦芽糖0．311g／mL的产品。该产品葡萄糖；量为0.017g／mL，糊精含量为2．7％，生产出优质高麦芽糖浆。     

大麦麦芽替代大麦β-淀粉酶生产高麦芽糖的初步研究

对大麦麦芽替代大麦β-粉酶生产高麦芽糖进行了初步研究,结果表明:2.50～2.60g/kg(以固形物计,下同)的大麦麦芽添加量与0.23 g/kg的大麦β-淀粉酶添加量所生成的麦芽糖含量相当;在大麦麦芽和大麦β-淀粉酶中添加普鲁兰酶后都能够提高麦芽糖含量;随着糖化温度的升高,大麦麦芽的耐高温糖化能力高于大麦β-淀粉酶.     

麦芽糖浆制取中的糖化工艺研究

本文对麦芽糖浆加工中的糖化工艺进行了研究。选取β-淀粉酶、真菌α-淀粉酶、普鲁兰酶组成复合糖化剂,以糖化结束后糖化液中的麦芽糖含量作为评价指标,通过单因素试验和正交试验研究了β-淀粉酶、真菌α-淀粉酶、普鲁兰酶及糖化时间对糖化效果的影响。结果表明,在β-淀粉酶添加量为0.8kg/t干物质,真菌α-淀粉酶添加量为0.6kg/t干物质,普鲁兰酶添加量为0.8kg/t干物质的条件下糖化50min,糖化效果最佳。     

超高麦芽糖浆的生产

本文研究了超高麦芽糖浆的生产，结果发现，普通β－淀粉酶和脱支酶共同作用适于制造普通非结晶性麦芽糖浆，组成大致为８０％左右的麦芽糖和１０％左右的麦芽三糖，而外切型α－麦芽糖－α－小淀粉酶（Ｍａｌｔｏ－ｇｅｎａｓｅ）由于价格及水解方式两方面的原因，不适合用于此类麦芽糖浆的生产。但生产用于制造结晶麦芽糖的超高麦芽糖浆时，则宜用β－淀粉酶、Ｍａｌｔｏｇｅｎａｓｅ和脱支酶共同作用，通常的组成为８０％以上的麦芽糖，４％以下的麦芽三糖。     

真菌α-淀粉酶和麦芽糖α-淀粉酶对馒头粉品质改良的比较研究

从提高小麦粉质量、延长馒头货架期的角度出发,以国产小麦粉作为试验用粉,通过粉质试验、降落数值测试、蒸馒头试验及质构测试等分析方法,研究了真菌α-淀粉酶和麦芽糖α-淀粉酶在国产小麦粉中发挥改良作用的应用效果。结果表明:真菌α-淀粉酶对馒头粉综合品质的提高优于麦芽糖α-淀粉酶,而麦芽糖α-淀粉酶在馒头贮存过程中的抗老化效果优于真菌α-淀粉酶。     

樟绒枝霉α-淀粉酶在毕赤酵母中的高效表达及在麦芽糖浆制备中的作用

从嗜热真菌樟绒枝霉(Malbranchea cinnamomea)中克隆α-淀粉酶基因McAmyA,并在毕赤酵母GS115中高效表达,经高密度发酵至168 h时,胞外酶活力达到13 440. 6 U/mL。重组α-淀粉酶McAmyA粗酶液经QSFF强阴离子交换层析纯化得到电泳级纯酶,比酶活力为1 230. 2 U/mg。酶学性质研究表明,重组α-淀粉酶McAmyA的最适pH和最适温度分别是6. 5和65℃。以淀粉液化液为底物,在温度60℃,加酶量120 U/g,水解24 h的条件下,重组α-淀粉酶McAmyA水解液化液,制备得到麦芽糖含量为50. 0%(质量分数)的麦芽糖浆。该真菌α-淀粉酶在毕赤酵母中表达水平高,具有很大的应用潜力。     

酶解工艺对燕麦浆稳定性和糖组分的影响

淀粉酶解是解决燕麦浆稳定性下降的一种有效手段,研究了α-淀粉酶和糖化酶酶解工艺对燕麦浆稳定性的影响,确定了最优的酶解工艺条件,并对比分析了2种酶酶解后燕麦浆中糖组分的变化情况。结果表明,使用0.5%α-淀粉酶70℃酶解1.0 h和使用0.8%糖化酶40℃、p H 4.0~5.0酶解4.0 h时的燕麦浆稳定性最好,α-淀粉酶酶解的浆液酶解效果和稳定性均优于使用糖化酶的浆液。α-淀粉酶酶解后的燕麦浆中糖组分以葡萄糖和麦芽低聚糖为主;糖化酶酶解的燕麦浆中糖组分几乎全部为葡萄糖。α-淀粉酶酶解是较好的一种酶解工艺。     

耐高温α-淀粉酶的酶学性质研究

耐高温α-淀粉酶是淀粉生产麦芽糖的关键酶。本文对两种耐高温α-淀粉酶的酶学性质进行了对比研究。结果表明：两种酶的耐高温能力差别较大，酶活差别明显；最适pH值均为7．0，耐酸性较差：当Ca^2＋浓度在7～9mmol／L时，酶活提高明显。     

全酶法生产高麦芽糖浆及其工艺研究

本文在综述麦芽糖生产现状的基础上,进行了不同的酶制剂对麦芽糖生产影响的研究,特别深入系统研究了β-淀粉酶和Maltogenase酶对糖化工艺的增效作用以及合并糖化过程的优化等.这就为麦芽糖生产提供了理论基础和可靠的工艺参数,同时也为我国制糖工业提出了新的发展趋势.     

Bacillus flexus β-淀粉酶低pH值突变体的构建及在麦芽糖制备中的应用

工业上将β-淀粉酶与其他淀粉水解酶进行复配可获得高纯度的麦芽糖浆。相对于目前常用的植物来源β-淀粉酶,微生物β-淀粉酶具有生产工艺简单、不受原料限制、质量稳定、纯度高等优势,但其最适作用pH多为6.0～8.0,难以与其他淀粉水解酶(pH多为4.5～5.5)进行复配。本实验室前期获得的弯曲芽孢杆菌β-淀粉酶其最适pH值为7.0,本研究在此β-淀粉酶基础上构建T47K,Y164K,L396K三个突变体,其最适pH由突变前的7.0分别下降为6.0,4.5,5.5,其中L396K的最适温度也由突变前的50℃提高为60℃。以马铃薯淀粉(10%w/v)为底物进一步对L396K制备麦芽糖的转化条件进行探索与优化。结果表明,在反应初始pH为5.5,温度60℃,β-淀粉酶加酶量为100 U/g干淀粉时麦芽糖最大转化率达到80.2%,符合高纯度麦芽糖浆的生产要求。     

α-淀粉酶对芦荟叶浆粘性物质水解条件研究

通过测定 α-淀粉酶在不同条件下水解后的吸光度和粘度 ,研究 α-淀粉酶对芦荟叶浆粘性水解作用。结果表明 ,α-淀粉酶对芦荟叶浆粘性物质水解的最佳条件为 :p H=6.0、温度为 60℃、酶激活剂 Ca2 的浓度 50～ 70 mg/kg、酶 -底物 ( E∶ S)比 2 0 U/g,反应时间 4h,表观消化率为 89.95%。     

两级酶解工艺制备超高麦芽糖浆的研究

本实验利用两级糖化法制备超高麦芽糖浆,并对其工业参数对麦芽糖含量的影响进行了初步研究。大麦β-淀粉酶与普鲁兰酶协同糖化作为一级糖化工序,其用量分别为0.8、1.2kg/t干物质,酶解糖化44h,酶解液中麦芽糖含量高达79.62%。利用中温淀粉酶对酶解液进行二级糖化,糖化结束后麦芽糖含量稍有提高,达到81.75%,且残余淀粉含量显著降低,碘试颜色由一级糖化的红棕色变为黄色。本工艺在提高产品中麦芽糖含量的同时,有效低降低了麦芽糖浆中残余淀粉含量,各项检测指标都符合超高麦芽糖浆标准。     

中国大豆核心种质β-淀粉酶的酶学特性研究

本研究对172份中国大豆核心种质β-淀粉酶的酶活力、热稳定性以及6种大豆β-淀粉酶的部分酶学性质进行了分析。172份大豆均含有β-淀粉酶，所分析的6份大豆其β-淀粉酶的最适作用pH、最适作用温度以及最稳定pH均相同，说明其作用功能具有高度保守性。大豆种质之间酶活力差异极大（最低仅6784U／g，最高达69060U／g），纬度之间酶活力差异亦明显，但春播与夏播，国内与国外大豆之间无显著差异；大豆种质之间粗酶液的热稳定性也存在较大差异。所分析的6种大豆β-淀粉酶均具有较好的酶学性质和热稳定性。     

复合淀粉酶水解米粉的工艺优化

用α-淀粉酶和β-淀粉酶对米粉进行酶法水解,以还原糖含量为指标,采用响应面分析法得到大米粉的最佳酶解工艺:α-淀粉酶添加量为0.5μg/g,β-淀粉酶添加量为0.9 μg/g,酶解温度58.5℃,pH5.5,酶水解时间为2.5h.在此条件下,大米粉的酶解程度最高,DE值为49.77％,经过酶解后大米粉颗粒直径由20.63 μm降低到8.54 μm.     

小麦β-淀粉酶生产啤酒用糖浆糖化工艺条件的优化

本文以新型淀粉酶(小麦β-淀粉酶)替代传统工艺使用的大麦β-淀粉酶糖化淀粉液化液生产啤酒用糖浆,同时,探讨了小麦β-淀粉酶的添加量、糖化温度、pH值、时间等因素对麦芽糖含量的影响.试验结果结合经济效益,得出最适合的工艺条件为:小麦β-淀粉酶添加0.010％(m/m),糖化温度61℃,pH值5.5、糖化24h.