波纹巴非蛤酶解蛋白脱腥技术研究

研究比较了NaCl盐析法、菊花茶掩蔽法、活性炭吸附法、β-环糊精包埋法4种方法对波纹巴非蛤酶解蛋白脱腥效果的影响。结果表明,活性炭吸附法脱腥效果最佳。进一步通过正交实验确定了活性炭对波纹巴非蛤酶解蛋白腥味脱除的最佳吸附条件:活性炭添加量为3.0%,作用温度为40℃,作用时间为35min,其脱腥值为2。      

波纹巴非蛤氨基多糖的分离纯化及其理化性质的初步研究

以波纹巴非蛤全脏器为原料,经酶解、脱色、离心去蛋白、醇沉、干燥等工序得到氨基多糖粗制品(波纹巴非蛤CPG),CPG再经吸附、透析、CTAB络合等方法进行纯化,得到波纹巴非蛤氨基多糖较纯级分(波纹巴非蛤GAG-2)。成分分析表明:波纹巴非蛤GAG-2含有氨基己糖、己糖醛酸、硫酸基和少量的岩藻糖(Fuc)、半乳糖(Gal)。波纹巴非蛤GAG-2经琼脂糖凝胶电泳可再分为F-1、F-2两个级分;红外光谱与CS-6相似;体外抗肿瘤试验表明:0·5mg/mL波纹巴非蛤CPG对HL-60细胞的抑制率可达32·3%,与抗癌药物5-Fu合用时可使抑瘤率提高到56·7%,具显著增敏作用。     

波纹巴非蛤净化中试研究

采用紫外线制备无菌海水,根据最佳净化工艺(室温:29～30℃,湿度:80%～95%,每24 h海水循环36次)对波纹巴非蛤进行中试研究,综合分析了中试净化的微生物指标、重金属和贝类毒素指标、物理指标,并对经济成奉进行了核算.结果表明:波纹巴非蛤净化中试后,微生物指标、量金属和贝类毒素指标均符合净化海水贝类(DB35/575-2004);产品得率在95%以上;净化成本645元/吨.     

波纹巴非蛤生物活性肽的分离与提纯研究

以波纹巴非蛤为原料,根据最佳酶解条件制备酶解液。通过凝胶层析柱(Sephadex G-25)分离水解所得粗品波纹巴非蛤酶解液,并用紫外可见分光光度计测定收集后的各管溶液,然后根据各吸光度值绘制的管数-吸光度曲线图得出第三个峰附近的管数为小分子段。根据标准曲线计算出活性肽的分子量为753.58D,最后通过反相高效液相色谱-质谱联用技术测出活性肽的分子量为679.4D。     

波纹巴非蛤糖胺聚糖抗氧化作用的研究

目的:研究波纹巴非蛤糖胺聚糖体外清除自由基作用及对衰老模型小鼠的体内抗氧化作用。方法:采用体外实验研究波纹巴非蛤糖胺聚糖对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH·的清除作用。体内实验采用小鼠腹腔注射D-半乳糖建立衰老模型,同时给药组灌服高、中、低3个剂量的波纹巴非蛤糖胺聚糖溶液,4周后检测各组小鼠超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量。结果:波纹巴非蛤糖胺聚糖精制品(PUG-1)体外对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基均具有较好的清除作用,IC50分别为:4.23、3.19、4.36mg/mL。与衰老模型组小鼠比较,200、400mg/kg·dPUG-1可以极显著提高衰老小鼠血清、肝脏、脑组织中SOD、GSH-Px和CAT含量(p<0.01),降低MDA含量(p<0.05)。结论:波纹巴非蛤糖胺聚糖具有体外清除自由基作用,其体内抗衰老作用可能与提高机体抗氧化酶活性有关。     

波纹巴非蛤糖胺聚糖抗氧化作用的研究

目的:研究波纹巴非蛤糖胺聚糖体外清除自由基作用及对衰老模型小鼠的体内抗氧化作用。方法:采用体外实验研究波纹巴非蛤糖胺聚糖对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH·的清除作用。体内实验采用小鼠腹腔注射D-半乳糖建立衰老模型,同时给药组灌服高、中、低3个剂量的波纹巴非蛤糖胺聚糖溶液,4周后检测各组小鼠超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）含量。结果:波纹巴非蛤糖胺聚糖精制品（PUG-1）体外对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基均具有较好的清除作用,IC50分别为:4.23、3.19、4.36mg/mL。与衰老模型组小鼠比较,200、400mg/kg·dPUG-1可以极显著提高衰老小鼠血清、肝脏、脑组织中SOD、GSH-Px和CAT含量（p<0.01）,降低MDA含量（p<0.05）。结论:波纹巴非蛤糖胺聚糖具有体外清除自由基作用,其体内抗衰老作用可能与提高机体抗氧化酶活性有关。      

波纹巴非蛤酶解过程的肽谱变化

以波纹巴非蛤为原料,酶解1～6h制备酶解液。在SDS-PAGE电泳法测定肽谱的基础上,再利用液相色谱-质谱联用测定波纹巴非蛤酶解的肽谱变化。结果表明：酶解前3h时酶解液的肽分子的分子质量大概主要集中在100、50、2kD,酶解液大都是大分子肽或者中分子肽;酶解4、5、6h时酶解液的肽分子的分子质量基本没变化,其分子质量主要集中在400～600D,即为小分子肽,酶解4h时为酶解终点。     

响应面法优化波纹巴非蛤糖胺聚糖提取工艺的研究

利用SAS和响应面分析相结合的方法,对波纹巴非蛤糖胺聚糖的提取工艺进行优化.确定酶解法(酶由枯草杆菌中性蛋白酶与胰酶按2:3的酶活比混合组成)提取糖胺聚糖的最佳条件为:水料比2.5:1、酶解时间3.5 h、酶添加量的质量分数为1%(以底物质量计).在此条件下,糖胺聚糖提取率可达到0.413%.     

波纹巴非蛤糖蛋白的分离提取及体外清除羟自由基活性的研究

分离提取波纹巴非蛤(Paphia undulate)全脏器中的糖蛋白,并探讨其体外清除羟自由基的活性。结果表明,以水为浸提剂,料水比为1:10,80℃水浴浸提60 min,60℃旋转蒸发浓缩,提取效果较好;用饱和度为20%、40%的硫酸铵盐分级分离得到的2个主要级分F1、F2,得率分别为0.60%和0.16%,总糖与可溶性蛋白含量分别为19.5%、30.7%和23.6%、20.9%。体外对羟自由基的清除率分别为35.8%和11.7%。波纹巴非蛤水提糖蛋白在体外对羟自由基有一定的清除作用。     

低温条件对波纹巴非蛤营养成分的影响研究

采取常规方法分析常温(25.0℃)和低温(5.0±0.5℃)下波纹巴非蛤(Paphia undulata)的营养成分和氨基酸组成,并对蛋白质进行营养评价,从而分析低温对贝肉成分的影响。结果表明,波纹巴非蛤是一种高蛋白、低脂肪的食品;两种状态下呈味氨基酸和必需氨基酸含量丰富,组成均衡;两种状态下的第一限制氨基酸均为色氨酸。实验表明,波纹巴非蛤是一种优良的蛋白质源。      

调味波纹巴非蛤肉干制品的试制

波纹巴非蛤经过调味、浸渍和干燥制得的调味干制品具 有色香味俱佳、营养丰富的特点。试制品分清淡型和香辣 型两种,清淡型水分含量为16.1％、蛋白质含量29.7％、粗 脂肪9.28％、灰分9.31％;香辣型水分含量为16.2％、蛋白 质含量27.8％、粗脂肪9.31％、灰分9.46％。     

以波纹巴非蛤为原料制备海洋生物活性肽

目的:以波纹巴非蛤为原料,制备海洋生物活性肽,并确定最佳酶解条件。方法:选用木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶为水解酶,以水解度为考察指标,通过正交试验对酶解实验条件进行优化。结果:木瓜蛋白酶在50℃、酶解时间4h、加酶量4%、pH6.3、料水比1:3时水解度最高为40.83%,总氮回收率为89.85%,平均肽链长度为2.20;菠萝蛋白酶在温度55℃、酶解时间4h、加酶量12%、pH6.3、料水比1:3时水解度最高为34.61%,总氮回收率为89.58%,平均肽链长度为2.58。结论:在本实验条件下,木瓜蛋白酶对以波纹巴非蛤为原料制备海洋生物活性肽效果优于菠萝蛋白酶。     

超声波技术在波纹巴非蛤酶解反应中的应用

将超声波技术应用到波纹巴非蛤制备的酶解反应中,在单因素试验的基础上采用响应面分析法对试验条件进行优化。运用Box-Benhnken 的中心组合试验设计原理,选择对短肽产率显著影响的4 个因素：辐照时间、辐照温度、超声功率和固液比,进行四因素五水平的响应面分析试验,确定在超声波条件下波纹巴非蛤的酶解反应最佳工艺条件为辐照时间4h、辐照温度55℃、超声功率140W、固液比1:2(g/mL)。对模型预测结果进行验证,得到短肽产率为样品的5.15%,是无超声波作用下的短肽产率的1.1 倍。     

巴菲蛤壳和白碟贝壳酸解氨基酸及矿物元素成分的分析

以巴菲蛤壳和白碟贝壳为原料,采用离子色谱和电感耦合等离子体发射光谱测试方法,分别分析了两种壳中水解氨基酸和矿物元素种类及含量。结果表明,白碟贝壳水解氨基酸及矿物元素均为13种,巴菲蛤壳含8种水解氨基酸及13种矿物元素,为开发利用巴菲蛤壳和白碟贝壳提供了可靠的科学依据。