高效液相色谱柱前衍生法测定乳制品中亚硝酸盐的含量

通过采用2,3-二氨基萘作为柱前衍生试剂,建立了HPLC法用于测定乳制品中亚硝酸盐的含量。C18为色谱柱,水和乙腈流动相,检测波长为233 nm;在这一色谱条件下,亚硝酸盐的衍生产物具有良好分离效果,达到亚硝酸盐检测的效果。测得亚硝酸盐标准曲线的相关系数均大于0.999,回收率在88.6%～108.6%之间,重复性在1.57%～5.45%之间。该方法的灵敏度、准确度、重复性和回收率均满足实际检测需求。     

柱前衍生高效液相色谱法测定乳制品中甘氨酸的含量

采用单磺酰氯柱前衍生高效液相色谱法测定乳制品中甘氨酸的含量.应用单磺酰氯作为柱前衍生试剂,55℃温度下,反应15min.衍生产物用C18柱(3.9mm×150mm,5μm)分离,0.1mol/L醋酸钠(pH7.2):乙腈75 : 25为流动相进行洗脱,流速1.0mL/min,在330nm的波长下,能准确检测出乳制品中游离甘氨酸.方法回收率在98.2%102%之间,在0205mg/L范围内,线性方程相关系数为0.99994,相对标准偏差RSD为0.87%.该方法衍生反应简单,时间短.衍生产物在330nm具有较强的紫外吸收,且产物单一稳定,冰箱中存放可稳定一星期以上,分析速度快,7min内可与其他峰完全分离.本方法具有操作简单﹑结果重复性好﹑准确等优点.     

在线柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测法测定牛奶中乙酰氨基阿维菌素残留量

目的建立一种在线柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测法测定牛奶中乙酰氨基阿维菌素残留量。方法试样经饱和氯化钠水溶液盐析后,利用乙腈-二氯甲烷溶液提取,氮气吹干、10%(体积分数)N-甲基咪唑-乙腈溶液复溶、乙腈饱和正己烷多次净化。利用进样程序对净化后的溶液进行在线柱前衍生,高效液相色谱仪分离,荧光检测器检测,以保留时间定性,峰面积定量。结果结果表明,在25～400 ng/mL浓度范围内,标准曲线线性关系良好,相关系数r2大于0.999;该方法的回收率在94.8%～103.8%之间,相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)均小于1.5。结论该方法非常简便,且具有较高的准确度、灵敏度和稳定性,适用于牛奶中乙酰氨基阿维菌素残留的检测。     

高效液相色谱柱后衍生方法测定乳制品中皮革水解蛋白

本文使用岛津氨基酸柱后衍生系统锂型分析柱建立了24种氨基酸的高效液相色谱柱后衍生分析方法。5个不同浓度标准品进样（10,50,100,250,1000ug/L）,对于大多数目标物校准曲线相关系数可达0.9999;对于L（-）-羟脯氨酸,方法的检测限（S/N=3.3）为20ug/L,定量限（S/N=10）为50ug/L。连续7针进样（250ug/L,10uL）保留时间相对标准偏差为0.01-1.38,峰面积相对标准偏差为0.01-0.83。市售某两种品牌牛奶样品检测结果表明均含有L-羟脯氨酸,为皮革水解蛋白阳性样品。     

柱前衍生-高效液相色谱法同时测定乳及乳制品中5种黄曲霉毒素

目的建立柱前衍生-高效液相色谱法同时测定乳及乳制品中黄曲霉毒素M_1、G_1、B_1、G_2和B_2残留的分析方法。方法样品用乙腈作为提取溶剂辅以超声波提取、离心,上清液浓缩至近干,加入0.25 mL三氟乙酸在50℃的温度下衍生15 min后氮吹浓缩近干。采用Thermo scientific Hypersil Green PAH(4.6 mm×250 mm i.d,5μm)色谱柱,乙腈和水作为流动相,激发波长为367 nm,发射波长为436 nm荧光检测。结果 5种黄曲霉毒素在0.20~50.0μg/L范围内具有良好的线性关系(0.9991~0.9998),检出限为0.05~0.08μg/L。在0.50μg/kg、1.0μg/kg和2.0μg/kg三个添加水平的平均回收率为77.6%~122.7%,85.8%~112.7%和89.7%~115.6%;相对标准偏差(RSD)均小于8.92%。结论与其他方法相比,本法具有简便、灵敏、准确和可重复等优点,适合乳及乳制品中5种黄曲霉毒素残留的同时检测和定量。     

程序进样-柱前衍生-高效液相色谱法测定乳制品中牛磺酸含量

建立快速高效检测乳制品中牛磺酸含量的程序进样-柱前衍生-高效液相色谱法。该方法对牛磺酸提取试剂、衍生化试剂、衍生方式、仪器色谱条件进行优化。通过设定进样程序,简化样品前处理衍生操作,大幅度缩短了检测时间。试验结果表明,方法加标回收率为99.2%～104.0%,相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）为3.22%～5.25%,线性相关系数R2=0.999 9,定量限为0.2 mg/100 g。同时对牛乳羊乳中的牛磺酸含量进行测定,结果显示全脂牛奶粉和全脂羊奶粉中牛磺酸的含量范围分别为2.89mg/100g～7.42mg/100g和36.6 mg/100 g～60.4 mg/100 g;纯牛奶和纯羊奶中牛磺酸的含量范围分别为0.37mg/100 g～0.68 mg/100 g和4.20 mg/100 g～6.10 mg/100 g。羊乳的牛磺酸均明显高于牛乳,其含量比值≥9,差异显著。     

柱前衍生液相色谱荧光检测法测定婴幼儿配方乳粉中的低聚半乳糖

目的建立一种柱前衍生高效液相色谱荧光检测法测定婴幼儿配方乳粉中的低聚半乳糖含量的分析方法。方法样品用2-氨基苯甲酰胺衍生后,经色谱柱分离,用高效液相色谱-荧光检测器检测,外标峰加和分段法定量。结果建立的方法可以测定婴幼儿配方乳粉中的低聚半乳糖含量。采用麦芽糖、麦芽三糖、麦芽四糖、麦芽五糖、麦芽六糖和麦芽七糖建立标准曲线,在1～250μg/mL线性范围内相关系数(r~2)大于0.999。回收率为85.9%～103.5%,相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)小于5%,检出限为1.0 g/kg,定量限为3.0 g/kg。结论本方法方法重现性好,精密度高,解决了婴幼儿配方乳粉中高含量乳糖对低聚半乳糖测定的干扰问题,可以为食品中低聚半乳糖的定量提供良好的解决方案。     

柱前衍生-高效液相色谱-荧光法测定乳制品中左旋肉碱含量

本文研究了柱前衍生．高效液相色谱（HPLC）-荧光检测技术测定乳制品中左旋肉破皿．肉碱）含量的分析方法。经优化后的前处理条件为：提取液采用10％（V／V）甲醇水溶液（经磷酸调节pH至2．7～2．8）,经超声提取20min过滤后调节pH至6．0,取一定滤液加热浓缩近干,用20mL乙醇溶解。经重复两次高速离心（12000r／min、5min）、旋转蒸发浓缩后,残留物用乙醇溶解,以L-丙酰胺-β-萘胺为衍生化试剂于50℃恒温衍生5min后终止反应,于激发波长280nlTl、发射波长328nnl下经HPLC分析测定。乳粉检出限为4．0mg／kg,液体乳检出限0．5mg／kg、0．2～20．0mg／L范围内线性关系良好,相关系数0．9990,平均回收率为80--90％,相对标准偏差RSD小于10％。同时,利用该方法对不同配方奶粉及液体乳中L-肉碱进行了含量测定。该方法灵敏度高,准确性好,适用于乳制品中L．肉碱的含量测定。     

液相色谱柱前衍生测定大曲中的氨基酸

采用液相色谱法，以２，４－硝基氟苯为衍生剂，测定大曲中的氨基酸含量，以求通过测定氨基酸含量来达到了解其与大曲质量的关系。故文章介绍了测定方法，对不同等级的大曲，人工曲、微机曲和机械曲，以及大曲在贮存期等方面的氨基酸含量与变化进行了研究、介绍。最后认为，人工曲和机械曲的Ｔｙｒ含量较稳定，对大曲质量较有影响力的是Ａｒｇ－Ａｌａ１ｌｌｅ、Ｆｕｒ４种。     

苯胺柱前衍生麦芽糊精的高效液相色谱-电喷雾质谱分析

研究苯胺柱前衍生寡糖混合物麦芽糊精的高效液相色谱-电喷雾质谱分析方法。优化色谱及质谱分析的条件,采用反相C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);乙腈和乙酸铵溶液(pH4.5、10mmol/L)为流动相进行梯度洗脱;在239nm波长处检测,并采用高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术对寡糖衍生物进行分析,建立苯胺衍生寡糖的高效液相色谱(HPLC)分离分析、电喷雾质谱(ESI-MS)及液相色谱-电喷雾质谱联用(LC-ESI-MS)组分分析方法。在液质联用条件下,麦芽糊精衍生物分离效果良好。该方法衍生化产物稳定,后处理简单,在食品体系寡糖混合物分离分析方面有潜在的应用前景。     

乳酰-N-新四糖的生理功能、生物合成及其衍生化研究进展

本文合成并表征P2Mo17Ni、P2Mo17Cr、P2Mo17Co和P2Mo18 4种Dawson型多金属氧酸盐,通过循环伏安法研究不同多酸浓度和不同扫速下4种多酸水溶液的电化学性能,并在适宜条件下催化不同浓度的酪氨酸酶,研究多金属氧酸盐水溶液对酪氨酸酶的催化作用,研究果表明:4种化合物的氧化还原过程均属于扩散控制过程,对酪氨酸酶的电化学传感均显示出良好的稳定性,且响应电流与酪氨酸酶含量之间具有良好的线性关系,其中P2Mo17Ni的检测效果是4种化合物中最优的。通过计时安培曲线可知P2Mo17Ni对酪氨酸酶的最低检出限(S/N=3)可以达到0.4095 U/mL。将此方法应用于对虾中酪氨酸酶含量的检测,样品的回收率为98.0477%～99.5872%。此方法的选择性好,在多种干扰物质共存时,其检测结果几乎不受影响。这说明该修饰电极具有较高的准确性和稳定性。本研究为用此法检测南美白对虾及其它水产品中的酪氨酸酶含量,进而实现对它们的质量评价提供理论依据。     

柱前衍生高效液相色谱法检测水产品中甲醛的含量

目的建立柱前衍生高效液相色谱法检测水产品中甲醛含量。方法样品经绞碎匀浆后,经2,4-二硝基苯肼-乙酸钠缓冲液衍生液(1:1,V:V)于60℃衍生1 h,冰浴冷却后的衍生物直接上高效液相色谱检测,以ODS-C_(18)柱子为分离柱,甲醇-水(70:30,V:V)为流动相等度洗脱,二极管阵列检测器在365 nm波长处检测,外标法定量。结果甲醛在0~10 mg/L浓度范围内线性关系良好,线性相关系数为0.9994,方法检出限为0.5mg/kg。空白样品在1.0、5.0和20.0 mg/kg添加水平下,回收率在88.2%~95.3%之间,RSD在0.75%~1.82%之间。对水产品9种样品中的甲醛进行了测定,其中6个样品检出甲醛,含量范围为1.51~64.04 mg/kg。结论该方法简便、灵敏、准确,可适用于水产品中甲醛含量的分析。     

Comparative composition,diversity, and abundance of oligosaccharides in early lactation milk from commercial dairy and beef cows

Prebiotics are nondigestible dietary ingredients, usually oligosaccharides (OS), that provide a health benefit to the host by directly modulating the gut microbiota. Although there is some information describing OS content in dairy-source milk, no information is available to describe the OS content of beef-source milk. Given the different trait emphasis between dairy and beef for milk production and calf survivability, it is plausible that OS composition, diversity, and abundance differ between production types. The goal of this study was to compare OS in milk from commercial dairy and beef cows in early lactation. Early-lactation multiparous cows (5–12 d in milk) from 5 commercial Holstein dairy herds and 5 Angus or Angus hybrid beef herds were sampled once. Milk was obtained from each enrolled cow and frozen on the farm. Subsequently, each milk sample was assessed for total solids, pH, and OS content and relative abundance. Oligosaccharide diversity and abundance within and between samples was transformed through principal component analysis to reduce data complexity. Factors from principal component analysis were used to create similarity clusters, which were subsequently used in a multivariate logistic regression. In total, 30 OS were identified in early-lactation cow milk, including 21 distinct OS and 9 isomers with unique retention times. The majority of OS detected in the milk samples were present in all individual samples regardless of production type. Two clusters described distribution patterns of OS for the study sample; when median OS abundance was compared between the 2 clusters, we found that overall OS relative abundance was consistently greater in the cluster dominated by beef cows. For several of the structures, including those with known prebiotic effect, the difference in abundance was 2- to 4-fold greater in the beef-dominated cluster. Assuming that beef OS content in milk is the gold standard for cattle, it is likely that preweaning dairy calves are deprived of dietary-source OS. Although supplementing rations with OS is an approach to rectify this deficiency, understanding the health and productivity effects of improving OS abundance being fed to preweaning calves is a necessary next step before recommending supplementation. These studies should account for the observation that OS products are variable for both OS diversity and structural complexity, and some products may not be suitable as prebiotics.     

柱前衍生-高效液相色谱-质谱联用法鉴定糖浆 掺假蜂蜜

目的建立蜂蜜中掺假的快速鉴定方法。方法将蜂蜜样品溶解后进行真空干燥,然后对样品中的低聚糖进行荧光标记,以氨基柱为分析柱,采用乙腈和甲酸铵为流动相,对标记低聚糖进行高效液相色谱分离,采用ESI-MS的SIR模式对标记低聚糖进行定性测定。结果基于荧光标记试剂2-氨基苯甲酰胺(2-AB)和毒性较低的还原剂2-甲基吡啶-N-甲硼烷(2-PB)的还原氨化反应能有效地对蜂蜜中的带还原端的低聚糖进行荧光标记。天然蜂蜜含有单糖(DP1)、双糖(DP2)和少量三糖(DP3),掺假蜂蜜除此以外还含有少量四糖(DP4)、五糖(DP5)和六糖(DP6)。结论采用此法对蜂蜜样品进行蜂蜜掺假判定与国标方法测试结果基本吻合,而且不需对样品进行净化处理即可上机分析,为建立蜂蜜掺假的快速筛查方法提供参考。     

生牛乳中游离寡糖的提取工艺优化

为提取生牛乳中游离寡糖,并且排除乳中蛋白质和乳糖的干扰,利用乙腈在不同提取条件（反应时间、相对离心力、反应温度和料液比）下去除蛋白质沉淀并提取总糖,并通过优化Sep-Pak C18固相柱和石墨碳柱条件对游离寡糖进行富集、纯化,减少乳糖的干扰,利用高效液相色谱法测定乳糖去除率。结果显示,生牛乳中寡糖最佳提取条件为反应时间2.5 h,相对离心力4 000×g,反应温度-1℃,料液比1∶2(g/mL)。在该提取条件下,蛋白质去除率为93.5%,总糖含量为48.42 mg/mL。利用4%乙腈（含0.1%三氟乙酸）冲洗石墨碳柱可将游离寡糖样品中大部分乳糖去除,乳糖去除率达98.91%。     

QuEChERS-高效液相色谱-三重四极杆质谱法检测乳及乳制品中2-己基吡啶含量

目的 建立高效液相色谱-三重四极杆质谱法（high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, HPLC-MS/MS）测定乳及乳制品中2-己基吡啶含量的分析方法。方法 样品经乙腈涡旋提取,分析液经QuEChERS dSPE EMR-Lipid除脂专用管净化,离心后过膜上机检测。测试方法以乙腈-一级水为流动相,流速设置为0.25 mL/min,应用梯度洗脱程序,采用GL Sciences InertSustain C₁₈色谱柱进行分离,电喷雾正离子（electro spray ionization, ESI⁺）模式,多反应监测（multiple reaction monitoring, MRM）模式检测,基质匹配外标法进行定量。结果 对于乳及乳制品基质, 2-己基吡啶在0.5～20.0 ng/mL的质量浓度与其相对应的峰面积之间线性关系良好,相关系数（r²）均大于0.998,在0.005、0.010和0.050 mg/kg 3种不同浓度添加水平下, 2-己基吡啶的平均回收率为94.45%～109.63%,相对标准偏差为3.93%～9.53%。结论 本方法可满足乳及乳制品中2-己基吡啶检测的正确度、精密度和灵敏度的要求。     

Technical note: Measurement of total estrone content in foods. Application to dairy products

Estrone is a powerful growth-inducing hormone that is present in milk, mainly in the form of fatty acid esters, at concentrations that promote growth in experimental animals. We present here a method useful for the measurement of this natural hormone in foods and applied it to several common dairy products. Samples were frozen, finely powdered, and lyophilized then extracted with trichloromethane/methanol; the dry extract was saponified with potassium hydroxide. The free estrone evolved was extracted with ethyl acetate and was used for the estimation of total estrone content through radioimmunoassay. Application of the method to dairy products showed high relative levels of total estrone (essentially acyl-estrone) in milk, in the range of 1 microM, which were halved in skimmed milk. Free estrone levels were much lower, in the nanomolar range. A large proportion of estrone esters was present in all other dairy products, fairly correlated with their fat content. The amount of estrone carried by milk is well within the range, where its intake may exert a physiological response in the sucklings for which it is provided. These growth-inducing and energy expenditure-lowering effects may affect humans ingesting significant amounts of dairy products.     

母乳低聚糖对婴儿肠道菌群及认知功能的影响

母乳低聚糖(HMOs)是母乳中具有独特结构的复杂糖类物质,其多样性远高于其它哺乳动物乳。HMOs的功能作用可从婴儿肠道菌群的初步建立一直持续到成年阶段,包括支持有益细菌生长和抗病原菌黏附等,其也具有在认知方面产生有益效果的潜力。关于HMOs是否能够通过调节肠道菌群并借助肠-脑轴来促进婴儿大脑的健康发育,值得进一步研究。本文综述HMOs的组成、结构,重点阐述HMOs在塑造婴儿肠道菌群中的作用,并探讨两者及其产生的代谢物通过肠-脑轴对婴儿认知的促进作用,旨在为推进HMOs在婴儿配方食品中的应用提供理论参考。