紫杉醇耐药对食管癌细胞增殖、迁移及血管形成的影响

目的 研究紫杉醇(paclitaxel,PTX)耐药对食管癌细胞增殖、迁移及血管形成的影响.方法 采用体外间歇诱导加逐步递增PTX浓度的方法建立PTX耐药细胞系KYSE150/PTX.倒置显微镜下观察PTX耐药细胞形态变化,MTT法检测PTX耐药对食管癌细胞细胞增殖能力的影响,克隆形成试验观察PTX耐药对食管癌细胞克隆...     

谷氨酰胺转移酶处理对大豆分离蛋白、酪蛋白酸钠和明胶可食膜特性的影响

研究了谷氨酰胺转移酶(TGase)对大豆分离蛋白(SPI1和SPI2)、酪蛋白酸钠(NaCN1和NaCN2)及明胶(G1和G2)3类蛋白质成膜特性的影响。研究表明在成膜溶液中加入TGase(8U/g蛋白),可以使SPI、NaCN和明胶等3类蛋白质膜的抗拉强度和表面疏水性有不同程度的改善,其中抗拉强度增加的辐度为13.1%(P≤0.05),而表面疏水性增加的辐度为2%～216%(P≤0.05);明显降低了膜的水分含量、总可溶性物量及透光率。对于断裂伸长率,TGase的处理使G1膜、NaCN2膜、G2膜、NaCN1膜和SPI2膜分别增加16.3%、16.8%、43.0%、72.6%和440.5%,而使SPI1膜降低7.5%。SDS-PAGE电泳分析表明TGase使这3类蛋白质均产生了共价交联。     

谷氨酰胺限制对杂交瘤细胞生长、代谢和单抗生产的影响

利用批培养和流加培养方式以及不同的流加培养成分,考察了谷氨酰胺限制对杂交瘤细胞生长、代谢和单抗生成的影响.谷氨酰胺限制降低了最大细胞密度和单抗比生产速率,说明谷氨酰胺限制阻碍了细胞生长和单抗生产.谷氨酰胺限制流加培养的YLac/Gluc和YLac/Cells高于批培养和谷氨酰胺非限制流加培养的,说明谷氨酰胺限制促进了葡萄糖向乳酸的生成,增强了葡萄糖的溢流代谢.与批培养和谷氨酰胺非限制流加培养相比,谷氨酰胺限制流加培养的氨和丙氨酸浓度及其比生成速率较低,而且YAmm/Gln高,YAla/Gln和YAla/Cells低,说明谷氨酰胺限制使得较多的谷氨酰胺参与脱氢反应,提高了谷氨酰胺的利用率,降低了细胞对氨和丙氨酸的生成,从而削弱了氨对细胞生长和单抗生产的毒害.在流加培养中应严格控制谷氨酰胺的流加浓度及与葡萄糖的配比,要避免谷氨酰胺过分限制导致的葡萄糖溢流代谢和对细胞生长和单抗产率的不利效应.     

单-ADP-核糖基转移酶3过表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、凋亡及侵袭的影响

目的探讨单-ADP-核糖基转移酶3(mono-ADP-ribosyltransferase 3,ART3)过表达对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。方法在Lipofectamine 2000的介导下,将ART3基因重组真核表达质粒pCMV-ART3-myc-tag转染人乳腺癌细胞MDA-MB-231,用G418进行稳定转染细胞株的筛选,同时设未转染组对照。Western blot法检测稳定转染细胞中ART3-myc-tag蛋白的表达,MTT法、流式细胞术和Transwell试验分别检测ART3对MDA-MB-231细胞增殖活力、凋亡及侵袭能力的影响。结果 ART3可在MDA-MB-231细胞中稳定过表达;ART3转染组细胞的增殖活力和侵袭能力均明显高于未转染组(P0.05);ART3转染组细胞的凋亡率明显低于未转染组(P0.05)。结论过表达ART3能促进乳腺癌细胞增殖、侵袭,并抑制其凋亡,本实验为进一步研究ART3基因在乳腺癌发生发展中的作用及其机制奠定了基础。     

S期激酶相关蛋白2对食管鳞癌细胞增殖、迁移的影响及其作用机制

目的 明确S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase associated protein 2,Skp2)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞中的功能.方法 利用RT-qPCR和Western blot法检测Skp2基因在ESCC细胞系中的表达;用慢病毒...     

EZH2甲基转移酶抑制剂的设计、合成及甲基化抑制活性

对2-(3-甲基-6-甲氧基喹唑啉-2-氨基)-6-(1-苯基-1H-四唑-5-硫甲基)-4-嘧啶酮（DCE-254）进行了分子对接，设计、合成了14种DCE-254类似物。以4-氯乙酰乙酸乙酯和1-苯基-5-巯基四氮唑，盐酸胍，取代苯甲酰氯、取代异硫氰酸酯等为原料，合成了这些类似物Va~Ⅵh。采用MS，1HNMR和13CNMR对这些类似物的结构进行了表征。H3K27me放射性甲基化抑制测试得到了5种具有较强甲基化抑制作用的DCE-254类似物，活性最好的是N-[4-羟基-6-(1-苯基-1H-四氮唑-5-硫甲基)-2-嘧啶]-N''-2-甲氧基-5-甲基苯基硫脲（Ⅵf），其甲基化抑制率达到77% 结果优于DCE-254。     

谷氨酰胺转氨酶对馒头品质的影响

为了开发新兴的生物来源性馒头专用面粉品质改良剂,文章研究了谷氨酰胺转氨酶(TG)对馒头制成品感观指标的影响。将高、低筋小麦粉配成五种比例(w/w),再添加0.25%的TG分别制成馒头,并使用行业标准进行了相应的感官质量评价。结果显示,TG的添加能有效改善成品馒头的比容,内外部结构,使其各项感官指标提高。对于不同配比的小麦粉,成品馒头的总体评分提高了0.04%。高、低筋小麦粉配比系列中,5∶5和4∶6的配比显示出了最佳的成品馒头质量,3∶7和2∶8的效果较好,1∶9的效果相对较差。而且在4∶6,3∶7中添加了0.25%的TG的改善效果甚至比5∶5原粉的效果要好,2∶8也可以达到5∶5原粉的效果。试验证明馒头用面粉中添加TG能够改善品质,降低配粉成本。     

3-苯甲酰基苯乙腈单甲基化的研究

以3-苯甲酰基苯乙腈为原料,采用碳酸二甲酯进行α-甲基化反应制备2-(3苯甲酰基苯基)丙腈,使反应控制在单甲基化阶段,HPLC测定产物含量99.7%。同时探讨了催化剂的选择、反应温度、反应时间对反应的影响。     

甲基化试剂对螺旋霉素发酵的影响

研究了在发酵过程中添加氯化胆碱对发酵产螺旋霉素及组分的影响.采用单因子实验设计法,以效价和杂质组分为指标,优化氯化胆碱的添加条件.结果表明,氯化胆碱的最优添加时间为120 h、最优添加浓度为0.66 g·L-1,在此条件下发酵效价提高约15%,各主要杂质组分的含量均降低,其中杂质UNK4的含量变化最显著,而有效组分的含...     

发酵液的组成对纳滤分离谷氨酰胺的影响

研究了谷氨酰胺发酵液中盐离子对纳滤分离提取谷氨酰铵的作用，系统地考察了操作温度和发酵液组成对纳滤分离透过特性的影响，确定了纳滤分离时发酵液最佳稀释倍数和操作温度. 结果表明，二价阳离子通过改变膜面电荷密度对谷氨酸的透过特性产生很大影响，使其截留率降低了8%. 发酵液中较高浓度的(NH4)2SO4使谷氨酸和谷氨酰胺的截留率和透过通量明显降低，但较高浓度的NH4Cl影响较小，这体现了纳滤膜对不同离子排斥力的差异. 当发酵液稀释至谷氨酰胺浓度为1%，pH调至7时，发酵液中的其它盐离子和残糖因浓度较低而对纳滤分离影响不显著.     

S-腺苷酰-L-甲硫氨酸对肝癌细胞HepG2增殖、迁移及癌基因C-myc表达的影响

目的探讨S-腺苷酰-L-甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine,SAMe)对肝癌细胞HepG2增殖、迁移及癌基因C-myc表达的影响,为深入研究SAMe在肝癌治疗中的作用奠定基础。方法体外培养HepG2细胞,MTT法检测不同浓度SAMe作用不同时间对HepG2细胞增殖的影响;细胞划痕法检测最适浓度SAMe对HepG2细胞迁移能力的影响;RT-PCR、免疫细胞化学法及Westernblot法检测SAMe对HepG2细胞癌基因C-myc转录、蛋白定位及表达的影响。结果终浓度为15.0μmol/L的SAMe处理细胞5d,细胞抑制率达54.6%,且抑制作用呈时间与剂量依赖性;经15.0μmol/LSAMe处理的细胞迁移能力明显下降,愈合速率为对照组的76.78%;细胞中癌基因C-myc的转录和蛋白表达均明显下降,蛋白定位无明显变化。结论 SAMe可通过降低C-myc的表达,抑制HepG2细胞的增殖和迁移,为肝癌治疗性药物的研究提供了一个新的方向。     

青蒿素对乳腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制

目的探究青蒿素(artemisinin,ART)对乳腺癌细胞(MDA-MB-231和MCF-7)增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法实验分为对照组(加入1μL/mL DMSO)和ART处理组(加入终浓度为300μmol/L的ART)。ART作用48 h后,采用平板克隆试验检测乳腺癌细胞与乳腺上皮细胞(MCF-10A)的克隆形成能力,免疫荧光染色法检测细胞增殖标记Ki-67蛋白的表达,流式细胞术分析3种细胞的凋亡变化,RT-qPCR检测乳腺癌细胞中DNMTs家族与抑癌基因FHIT、CDH1、PTEN等的表达变化,Western blot分析BAX、BCL-2、DNMT1和DNMT3A蛋白的表达水平,亚硫酸氢盐测序法分析FHIT和CDH1基因的甲基化水平。结果 ART显著抑制乳腺癌细胞的增殖,并诱导乳腺癌细胞的凋亡(P 0. 01),同时对正常人上皮细胞有明显的诱导凋亡作用(P 0. 01);ART抑制DNMT1的表达,促进DNMT3A的表达(P 0. 05);ART处理乳腺癌细胞后,抑癌基因FHIT和CDH1的甲基化水平降低,表达水平增加。结论 ART通过改变DNMT1和DNMT3A的表达,降低某些抑癌基因如FHIT、CDH1的甲基化水平,促进这些抑癌基因的表达,从而发挥抑制乳腺癌细胞增殖与诱导凋亡的作用。此外,ART用于乳腺癌治疗的安全性需进一步评估。     

氧对Klebsiella pneumoniae产1,3-丙二醇代谢的影响

考察了氧对Klebsiella pneumoniae发酵产1,3-丙二醇(PDO)代谢的影响. 研究结果表明,在厌氧或供氧条件下,K. pneumoniae都能利用甘油产PDO. 起始甘油浓度20 g/L,发酵时间4 h,在充分供氧条件下,PDO产量仅为1.1 mmol/L;但在微量供氧条件下,PDO产量为16 mmol/L,是厌氧发酵时的1.28倍. 在微量供氧条件下,调控PDO合成的关键酶甘油脱氢酶、甘油脱水酶及1,3-丙二醇氧化还原酶的活性分别为7.28, 1.14, 0.52 U/mg,高于厌氧或充分供氧条件下的相应酶活性. 氧对细胞内NADH的合成也有影响,厌氧及微量供氧条件下菌体内NADH含量分别为3.78及3.72 μmol/g (DCW),高于充分供氧发酵时的0.85 μmol/g (DCW).     

β-羟丁酸对体外培养牛肝细胞肉碱脂酰基转移酶-Ⅰ转录和翻译水平的影响

目的检测不同浓度β-羟丁酸(β-hydroxy butyrate,BHBA)对体外培养牛肝细胞肉碱脂酰基转移酶Ⅰ(Carnitine palmityl transferase-Ⅰ,CPT-Ⅰ)转录及翻译水平的影响。方法分别采用荧光定量PCR法和ELISA法,检测不同浓度BHBA(0、0.3、0.6、1.2、2.4、4.8mmol/L)对体外培养牛肝细胞CPT-I基因和蛋白表达的影响。结果随着BHBA浓度的增加,肝细胞CPT-Ⅰ的转录和翻译水平均下降。当BHBA浓度大于1.2mmol/L时,肝细胞CPT-I的转录和翻译水平下降更显著。结论高浓度的BHBA可显著抑制体外培养牛肝细胞CPT-I的表达,可能减少肝细胞脂肪酸氧化代谢。     

DNA甲基化对调控胰岛分化基因表达的影响

目的探讨DNA甲基化对调控胰岛分化基因表达的影响,为调控干细胞分化为胰岛细胞提供理论依据。方法采用甲基化DNA免疫共沉淀-实时定量PCR法(MeDIP-qPCR)检测129/J小鼠胚胎干细胞、NIT1细胞及NIH3T3细胞中Pdx-1、MafA、Nkx6.1和Oct4四种调控胰岛分化基因的DNA甲基化程度;同时采用实时定量RT-PCR检测上述3种细胞中4种基因mRNA表达水平,分析这些基因DNA甲基化水平差异与基因表达之间的关系。结果 Pdx-1、MafA和Nkx6.1基因在129/J小鼠胚胎干细胞和NIT1细胞中呈低甲基化,在NIH3T3细胞中则呈高甲基化,前两种细胞的甲基化程度明显低于后者(P<0.05);Oct4基因在129/J小鼠胚胎干细胞中未甲基化,在NIT1和NIH3T3细胞中呈低甲基化,NIT1细胞的甲基化程度明显低于NIH3T3细胞(P<0.05)。低甲基化的Pdx-1、MafA和Nkx6.1基因在NIT1细胞中可高效表达,而在NIH3T3和129/J小鼠胚胎干细胞中则未见表达(P<0.05);Oct4基因在129/J小鼠胚胎干细胞中可高效表达,在NIT1和NIH3T3细胞中则未见表达。结论转录起始区DNA甲基化程度可影响Pdx-1、MafA、Nkx6.1和Oct4基因的表达,参与β细胞的分化过程。     

不同碱金属氢氧化物对纤维素羧甲基化的影响

以不同碱金属氢氧化物(NaOH,KOH)为碱化剂,利用淤浆法合成CMC,对纤维素的碱化及羧甲基化进行了研究。结果表明,NaOH质量分数为25%,纤维素达到最大的润胀,KOH质量分数在20%~35%,纤维素的润胀率出现平台区;同一质量分数下,纤维素在NaOH溶液中的润胀率和吸附碱量都比在KOH中高;CMC的取代度随NaOH用量的增加急剧增加,而随KOH量的增加较为缓慢;取代度相近时,羧甲基纤维素钾的耐酸性和耐盐性比羧甲基纤维素钠差。     

miR-153-5p靶向基质金属蛋白酶-16对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的 探讨miR-153-5p对胃癌细胞SGC-7901增殖、迁移和侵袭的影响。方法 RT-qPCR法检测胃癌和癌旁组织(河北北方学院附属第一医院2016年1月—2018年12月经病理确诊的胃癌患者手术切除样本)以及正常胃细胞GES-1和胃癌细胞系(GES-1、MHCC97H、MKN-1、SGC-7901、MKN45、MGC803)中miR-153-5p的表达;将SGC-7901细胞分别或联合转染各质粒后分为miR-NC、miR-153-5p mimic、miR-153-5p inhibitor、pc-NC、pc-MMP-16、miR-153-5p mimic+pc-NC和miR-153-5p mimic+pc-MMP-16组,以未处理的SGC-7901细胞为对照组。克隆形成试验检测细胞增殖能力,Transwell试验检测细胞侵袭能力,划痕试验检测细胞迁移能力,Western blot法检测基质金属蛋白酶-16(matrix metalloproteinase-16,MMP-16)表达水平,Targetscan网站和双荧光素酶报告试验分别预测和验证miR-153-5p与MMP-16的靶...     

羟甲基化改性对木质素磺酸钠络合性能的影响

研究了不同条件下羟甲基化改性对木质素磺酸钠(简称木钠)与Mg2+、Zn2+、Cu2+络合性能的影响。实验结果表明较适宜的改性条件为:甲醛含量为0.22 g/g木钠,反应温度为60~70℃,反应p H为9.0。在优选方案下羟甲基木钠对Zn2+、Mg2+、Cu2+的络合性能分别提高了23.3%、18.9%和34.9%。且反应产物总羟基含量增加,特性粘度少许增大。研究表明,木钠总羟基含量增大是导致络合能力提高的主要原因。     

维生素D_3对成骨细胞增殖和分化行为的影响

生理环境下的维生素D_3在骨质疏松的发病机制中发挥重要作用。目前,业界广泛研究的对象是维生素D_3对成骨细胞行为的影响作用。着重研究了维生素D_3对成骨细胞增殖和分化行为的影响。采用不同浓度的维生素D_3(0, 1, 10,100 nmmol/L)对成骨细胞进行刺激,观察维生素D_3对成骨细胞增殖和分化行为的影响。     

谷氨酰胺对骨肽药物促UMR106细胞增殖试验的影响

目的 考察谷氨酰胺对骨肽生物活性测定方法——UMR106细胞增殖试验的影响。方法 使用液质联用测定骨肽原液中谷氨酰胺含量,采用CCK-8法检测谷氨酰胺对UMR106细胞增殖影响的浓度范围,以及骨肽原液对UMR106细胞的增殖作用。同时对骨肽原液浓度与相应谷氨酰胺浓度,以及谷氨酰胺试验应用浓度（骨肽原液浓度1 mg/mL）与相应细胞增殖率进行相关性分析。结果 骨肽原液中谷氨酰胺含量差异较大,且UMR106细胞对谷氨酰胺较为敏感。骨肽原液浓度与其相应谷氨酰胺含量、谷氨酰胺试验应用浓度与相应细胞增殖率均无显著相关性（r分别为0.146 3和0.547 1,P均> 0.05）。结论 骨肽原液中谷氨酰胺不会对骨肽生物活性测定方法——UMR106细胞增殖试验产生影响。