低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸中细胞色素c和caspase-3表达的变化

目的:研究低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸中细胞色素c(Cyt c)和caspase-3表达的变化,阐明二者对低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸细胞凋亡的作用.方法:实验小鼠分为不同剂量(0、0.050、0.075、0.100和0.200 Gy)组与不同时程(0、6、12和24 h)组.采用实时PCR和Western blotting分别检测不同剂量X射线照射后不同时间小鼠睾丸组织中细胞色素c(Cyt c)和caspase-3 mRNA和蛋白表达的变化.结果:实时PCR结果显示,不同剂量X射线照射后12 h,Cyt c和caspase-3 mRNA表达随剂量增加而增加,Cyt c mRNA在0.100 Gy照射时表达最多,而caspase-3则在0.075 Gy照射时表达最多;在0.075 Gy照射时二者蛋白表达最多.0.075 Gy照射后Cyt c和caspase-3 mRNA表达随着时间延长表达增多,24 h时达到最高;二者蛋白表达在12 h时最高.结论:低剂量电离辐射能够诱导小鼠睾丸生精细胞中Cyt c和caspase-3 mRNA和蛋白表达的增加,并且具有剂量和时程规律性.     

Taurolidine联合X射线对小鼠恶性黑色素瘤细胞周期进程的影响

目的:观察taurolidine联合X射线照射对小鼠恶性黑色素瘤(B16-4A5和B16-F10)细胞周期进程的影响,探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的发生机制.方法:选择B16-4A5和B16-F10细胞系按给药浓度随机分为4组,taurolidine剂量分别为0、25、50和100 μmol·L-1,同时进行1、2和4 Gy X射线照射,采用流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,Western blotting分析cyclin B、cdc2和caspase-3的表达.结果:与25 μmol·L-1 taurolidine组比较,50和100 μmol·L-1 taurolidine组诱导B16-4A5和B16-F10细胞发生G0/G1期阻滞,细胞数分别升高54.9%、73.7%和36.8%、55.5%(P＜0.05); 50 μmol·L-1 taurolidine联合2和4 Gy X射线照射组,细胞G2/M期阻滞消除,细胞数分别降低52.1%、44.2%和59.3%、52.7%(P＜0.05).与对照组、单纯taurolidine组及单纯照射组比较,联合4 Gy X射线照射组cyclin B和cdc2的表达降低,caspase-3的表达升高(P＜0.05).结论:taurolidine联合X射线照射可去除G2/M期阻滞,可选择地抑制肿瘤细胞cyclin B和cdc2的表达、增强caspase-3的表达,共同诱导细胞凋亡.     

表皮生长因子受体单克隆抗体对辐射诱导肺腺癌细胞SPC-A-1的增敏作用

目的:探讨表皮生长因子受体单克隆抗体(C225)作为靶向治疗药物联合放射治疗对肺腺癌细胞系(SPC-A-1)的增敏作用,为临床综合治疗非小细胞肺癌提供理论依据.方法:SPC-A-1细胞体外传代培养6代以上,取对数生长期细胞进行实验.SPC-A-1细胞分为对照组(PBS)、照射组(4 Gy)、C225组(100 nmol·L-1)和照射+ C225组(4Gy+100 nmol·L-1),Hoechst 33258染色后采用荧光显微镜观察细胞凋亡情况.SPC-A-1细胞分别给予0、2、4和8 Gy 6-MV X射线照射后继续培养72 h,收集细胞,分为照射组和实验组(照射+C225组),用流式细胞仪检测细胞凋亡率.SPC-A-1细胞分为对照组(PBS)、C225组(100 nmol·L-1)、照射组(8 Gy)和照射+ C225组(8 Gy+100 nmol·L-1),作用48 h后,采用流式细胞仪检测细胞周期.结果:Hoechst 33258染色后,照射+ C225组凋亡细胞数明显高于照射组和C225组;细胞凋亡实验,实验组细胞凋亡率明显高于相应剂量照射组(P<0.05).细胞周期检测,与对照组比较,C225组G0+G1期细胞增加(P<0.05),照射组G2+M期细胞增加(P<0.05),而照射+C225组G0+G1和G2+M期细胞均增加(P<0.05);与对照组比较,C225组、照射组及照射+C225组S期细胞均下降(P<0.05).结论:C225对SPC-A-1细胞系有放射增敏作用,其机制可能与诱导细胞凋亡和细胞周期G0+G1期阻滞有关.     

早熟染色体凝聚最长染色体长宽比和最长与最短染色体长度比作为估算辐射剂量指标的研究

目的:用花萼海绵体诱癌素A(calyculin A,CA)诱导早熟染色体凝聚(premature chromosome condensation,PCC),探索将G<,2>/M-PCC细胞中最长染色体长宽比(L/B)和最长与最短染色体长度比(L/L)用于分析电离辐射损伤和作为估算辐射剂量指标的可行性.方法:分别用0、4、8、12、16和20 Gy(剂量率为1 Gy/min)的<'60>Coγ射线照射外周血,培养48 h后用50 nmol/L CA诱导PCC.分析各射线照射剂量组G<,2>/M-PCC指数,并进一步分析G<,2>-PCC、M-PCC中L/B和L/L值的变化,建立L/B和L/L值与射线照射剂量之间的剂量-效应曲线.结果:用CA可成功诱导人外周血淋巴细胞产生PCC,G<,2>/M-PCC指数随着照射剂量水平的增高而降低(P<0.05).G<,2>-PCC、M-PCC分裂相中的L/B和L/L值在8～20 Gy范围内显著增大(P<0.05或P<0.01),在同样照射剂量水平上L/L值较L/B值增加更快(P<0.05或P<0.01).结论:CA诱导淋巴细胞G<,2>/M-PCC中的L/B和L/L值可用于电离辐射损伤程度的测定和作为估算辐射剂量的指标.     

核桃楸树皮乙酸乙酯提取物对原位移植荷胃癌小鼠的抑瘤作用

目的:研究核桃楸树皮乙酸乙酯提取物(HYT)对原位移植荷胃癌小鼠的抑瘤作用及其对免疫功能的影响,阐明HYT抗胃癌作用机理,为研发低毒高效的抗胃癌中草药提供理论依据.方法:建立HYT灌胃的原位移植荷胃癌小鼠研究模型,分为HYF高剂量组(60 mg·kg-1)、HYF低剂量组(40 mg·kg-1)、假手术组、阳性对照组(5-FU)及阴性对照组,观察每组小鼠抑瘤率及胸腺、脾脏指数,采用ELISA法及流式细胞术等检测荷胃癌小鼠IL-4 、IL-12、TNF-α水平及T淋巴细胞亚群情况.结果:HYT高剂量组抑瘤率与阳性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);与阴性对照组比较,HYT高剂量组小鼠胸腺指数及脾脏指数明显增加(P<0.05),IL-12水平升高(P<0.05),IL-4水平降低(P<0.05),TNF-α水平升高(P<0.05),T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比值升高(P<0.05).结论:HYT可以增强机体免疫功能,具有明确的抑瘤作用,可以作为抗胃癌低毒高效的中草药.     

海藻色素糖蛋白对小鼠H22肝癌细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究麒麟菜海藻色素糖蛋白(seaweed pigment glycoprotein,SPG)对小鼠H22肝癌细胞增殖与凋亡的影响.方法:将不同浓度SPG与小鼠H22肝癌细胞共同培养,用MTT法测定癌细胞增殖活性.建立H22移植瘤小鼠肝癌模型,随机分为SPG高、中、低剂量组,对照组及环磷酰胺组.实验组小鼠每天分别给予不同剂量(100、50、10 mg/kg)的SPG灌胃,连续10 d,对照组同法给予等量生理盐水,环磷酰胺组小鼠腹腔注射20 mg/kg环磷酰胺,隔日一次.各组小鼠均于末次给受试物后24 h处死,取肿瘤组织用免疫组化法检测各组Bcl-2和Bax蛋白表达.结果:SPG高剂量组瘤细胞增殖活性(0.545±0.002)明显高于对照组(0.404±0.008)(P<0.05);SPG高剂量组Bcl-2和Bax蛋白阳性表达率分别为16.78%和38.1%,对照组分别为65.16%和4.68%,两组间的差异具有统计学意义(P<0.05).结论:SPG具有抑制小鼠H22肝癌细胞增殖、促进其凋亡的作用.     

骨髓间充质干细胞对放射性胸腺损伤的修复作用

目的 观察骨髓间充质干细胞(MSCs)对放射性胸腺损伤的修复作用.方法 C57BL/6小鼠行1.75Gy X 线全身照射,每周1次,连续4周.实验设正常对照组、照射组及照射+MSCs组,于末次照射后30、60、90 d称量各组小鼠体质量.取胸腺组织,计算胸腺质量指数,并通过组织学观察MSCs对胸腺组织损伤的修复作用.结果 辐射组和MSCs组在照射期间体质量下降,在观察期间内,小鼠体质量随时间逐渐增加,并且MSCs组小鼠体质量略高于辐射组.对照组小鼠胸腺指数随周龄增大而逐渐减小,辐射组和MSCs组小鼠随照射后时间的延长胸腺指数逐渐增加,MSCs组90d时胸腺指数与对照组小鼠接近.通过观察病理结果可知,正常对照组小鼠胸腺组织皮、髓质结构清楚.辐射组小鼠30d时胸腺组织淋巴细胞可见变性、坏死,细胞数量减少;60d时辐射组可见胸腺淋巴细胞出现修复性再生与增生;90 d时辐射组可见胸腺瘤癌前病变.MSCs移植30 d时胸腺组织皮质高度增生,髓质缩小,皮髓质内可见新生的淋巴组织;60d时胸腺结构趋于正常.结论 MSCs可促进损伤胸腺再生与修复.     

Bcl-2参与SCID小鼠体内齐墩果酸诱导HL-60细胞凋亡的调控作用

目的:观察齐墩果酸(OA)对白细胞移植模型小鼠脾脏浸润白血病细胞凋亡数量和Bcl-2蛋白表达的影响,探讨OA对白血病模型鼠的治疗作用机制.方法:取浓度为2×107mL-1体外培养的人早幼粒系白血病HL-60细胞0.5 mL,腹腔注射重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠,构建SCID小鼠的HL-60细胞移植瘤模型;模型成功后小鼠分为用药组、白血病模型对照组,并设正常对照组.用药组以200 mg·kg-1OA皮下注射,用药2周后观察各组小鼠的一般状态、外周血象及骨髓象白细胞分类情况,病理学检查脾白血病细胞浸润程度,TUNEL方法测定脾浸润白血病细胞凋亡率,免疫组织化学检测HL-60细胞凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达率.结果:成功建立SCID小鼠的HL-60细胞移植瘤模型;用药组小鼠体质量[(15.0±0.8) g]明显高于模型组小鼠[(13.9±0.9) g](P<0.01),小鼠生存期[(50.3±5.5) d]明显高于模型组小鼠[(37.1±4.4) d](P<0.01);与模型组比较,用药组外周血白血病细胞有向正常白细胞分化趋势,可见分叶的白血病细胞,骨髓象中幼稚细胞减少,脾浸润情况改善;用药组小鼠脾浸润白血病细胞凋亡率高于模型组(P<0.01),Bcl-2蛋白表达阳性细胞百分率低于模型组(P<0.01).结论:成功建立白血病移植瘤鼠模型;OA可改变白血病移植瘤模型鼠的一般状态,延长生存期;OA通过降低Bcl-2表达可诱导白血病细胞凋亡.     

胡桃楸水提物的遗传毒性及抗诱变作用研究

目的:探讨胡桃楸水提物(juglans mandshurica maxim extract,JMME)的抗诱变作用,及评价胡桃楸是否具有遗传毒性.方法:取80只昆明小鼠,随机分成不同JMME剂量的诱变组(6.55、13.09、26.18 g/kg,分别为1/8、1/4、1/2 LD50),不同剂量的JMME与环磷酰胺(cyclophosphamide,CP)(0.04 g/kg)联合应用的抗诱变组,阴性对照组(Ns)和阳性对照组(CP,0.04 g/kg),共8组,每组10只.采用小鼠骨髓细胞微核试验(MNT)检测JMME是否具有遗传毒性及抗诱变作用.结果:阳性对照组微核发生率(28.82‰)明显高于阴性对照组(2.65‰),其差异具有统计学意义(P<0.01),而JMME各剂量组与阴性对照组间的差异无统计学意义(P>0.05).抗诱变各组的微核发生率与阳性对照组比较,除JMME低剂量组(6.55 g/kg)无统计学意义外(P>0.05),JMME中剂量组(13.09 g/kg)和高剂量组(26.18 g/kg)均显著低于阳性对照组(P<0.05),其中高剂量组明显低于中剂量组(P<0.05).结论:在本实验条件下,JMME无遗传毒性,JMME对CP诱发的微核率,具有一定抵抗作用,且呈量-效关系.     

硒和维生素E对克山病病区粮喂饲大鼠心肌纤维化的影响

目的:观察适时适量补充硒(Se)和维生素E(VE)对心肌纤维化和心肌重构的影响,探讨克山病病区的低Se和低VE膳食是否在心肌损伤后的修复过程中持续发挥作用.方法:30只Wistar 大鼠随机分为:正常对照组(Control,混合饲料喂养)、病区粮饲料组(EG,病区粮喂养)、病区粮饲料加Se组(EG+Se)、病区粮饲料加VE组(EG+VE)和病区粮饲料加Se加VE组(EG+Se+VE).喂养21 d后,取大鼠心脏,比色法测定大鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力;硫代巴比妥法测定血清丙二醛(MDA)含量;马松三色染色测定大鼠细胞外基质沉积情况;免疫组织化学法和Western blotting法测大鼠心肌组织中转化生长因子β(TGF- β)和结缔组织生长因子(CTGF)表达.结果:与正常对照组比较,EG组心肌纤维化大鼠血清中GSH-Px活力下降(P<0.01),MDA含量升高(P<0.05),心肌组织胶原蛋白大量沉积,并伴有TGF-β和CTGF表达上调(P<0.01).与EG组比较,EG+Se组和EG+Se+VE组病区粮心肌纤维化大鼠血清中GSH-Px活力均提高(P<0.01 和P<0.05),MDA含量降低(P<0.05);大鼠心肌细胞外基质沉积缓解;克山病大鼠心肌TGF- β和CTGF表达下调(P<0.01).结论:低Se和低VE在心肌损伤后的修复过程中持续发挥作用,适时适量补充Se和VE有利于减轻和逆转过度的心肌纤维化和心肌重构.     

单宁酸对糖尿病大鼠肾组织炎症因子表达的抑制作用

目的:观察单宁酸(TA)对链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病(DM)大鼠肾脏组织炎症因子表达的抑制作用,探讨其作用机制.方法:70只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、DM组、氨基胍(AG)组、TA低剂量组和TA高剂量组.处理10周后检测各组大鼠肾脏功能指标[血清肌酐(Cre)、尿素氮(BUN)及24 h尿蛋白排泄量],PAS染色观察肾脏病理改变,免疫组织化学染色观察肾组织细胞间黏附分子1(ICAM-1)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达,RT-PCR方法检测肾组织ICAM-1 mRNA的表达.结果:与模型组比较,TA组大鼠血清Cre、BUN及24 h尿蛋白排泄量降低(P<0.05或P<0.01),大鼠肾小球系膜区PAS阳性物质减少,肾组织ICAM-1及TNF-α蛋白表达水平降低,肾组织ICAM-1 mRNA表达水平降低(P<0.05).结论:TA能降低糖尿病大鼠肾组织ICAM-1及TNF-α的表达,对糖尿病大鼠肾脏有保护作用.     

过量维生素E摄入对大鼠脂代谢的影响

目的:探讨摄入大剂量维生素E(VE)对大鼠脂代谢的影响,为VE摄入限量值的确定提供实验依据.方法:28只成年健康雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组、低剂量VE组(400 mg·kg-1)、中剂量VE组(800 mg·kg-1)和高剂量VE组(1600 mg·kg-1),每天定时采用灌胃方法给予VE,定期根据体质量调整剂量,给药16 d后,经眼球采血,检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白(HDL-C)等生化指标;处死大鼠取肝、肾、脾,计算上述脏器的脏体比.结果:与正常对照组比较,低、中和高剂量VE组大鼠饮水、进食量减少,状态及活动欠佳;与正常对照组和低剂量VE组比较,中、高剂量VE组大鼠体质量降低(P<0.05);与正常对照组比较,VE各剂量组大鼠肝/体比、肾/体比和脾/体比差异无统计学意义(P>0.05).与正常对照组比较,中、高剂量VE组大鼠血清中TC、TG和HDL-C水平均显著降低(P<0.05);与低剂量VE组比较,中、高剂量VE组TC、TG和HDL-C水平均显著降低(P<0.05);中、高剂量VE组之间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:大剂量VE抑制大鼠的生长,过量口服会降低体内HDL-C、TC和TG的合成,不利于脂代谢,提示不建议大量补充VE.     

熔融制样-X射线荧光光谱法测定轻稀土精矿中稀土总量

作为稀土工业的原料,稀土精矿中稀土总量的测定方法步骤多、流程长。实验采用熔融制样-X射线荧光光谱法测定轻稀土精矿中稀土总量,研究了制样和测量条件。准确称取6.000 0g无水四硼酸锂和偏硼酸锂混合熔剂(质量比2∶1)于铂黄坩埚中,以0.500 0g硝酸锂为氧化剂消除试样中还原物质对铂黄坩埚的侵蚀,称取0.600 0g稀土精矿试样,再于试样表面均匀覆盖0.500 0g氧化硼防止试样喷溅,滴加0.5mL 20mg/mL的溴化铵溶液作为脱模剂。将坩埚放进预加热到1 050℃的熔样机内熔融19min制备样片,可消除矿物效应、粒度效应及表面效应。通过各稀土元素X射线荧光谱线的选择减少谱线干扰,以经验系数法校正谱线干扰和基体效应,用稀土精矿标样建立各稀土元素校准曲线。各组分校准曲线的相关系数在0.991~0.999之间,试样重复测量的相对标准偏差(RSD)小于0.5%,稀土总量测定结果与重量法一致。方法的精密度和正确度能够满足生产要求。     

转录因子Ets1和Ets2在小鼠睾丸组织中的表达及其意义

目的:检测Ets家族转录因子Ets1和Ets2在小鼠睾丸组织中的表达,探讨其对小鼠睾丸发育的调控及其对精原干细胞(SSCs)增殖、分化的可能影响.方法:取生后第1、5、10、15、20、25、30、35、40、50和70天的小鼠睾丸组织,对成年小鼠进行白消安10 mg·kg-1腹腔注射,分别在注射后第0、3、5、8、10和18天取睾丸组织,用半定量RT-PCR方法对比内参β-actin在对应组织内的表达水平,分析Ets1、Ets2 mRNA在睾丸组织中的相对表达量.结果:Ets1的表达量在生后第1～30天显著高于出生后第35天(P<0.05或P<0.01),之后明显降低并保持稳定;Ets2在生后第1～25天表达量显著高于第35天(P<0.05或P<0.01),之后明显下降并保持稳定.白消安处理后,Ets1的表达量于第5天降至最低,随后逐渐恢复,第9天后基本达到处理前水平并保持相对稳定,其中第5、8天表达量均显著低于处理后第0天(P<0.05或P<0.01);Ets2的表达量在白消安处理后前期变化不明显,第10天时明显降低,与第0和18天比较差异有统计学意义(P<0.05),之后缓慢回升,第18天左右恢复至处理前水平.结论:转录因子Ets1和Ets2可能对睾丸早期发育、成年精子发生的维持及精原细胞的增殖、分化具有调节作用.     

人参三七提取物抗疲劳作用的研究

[目的]研究人参三七提取物缓解体力疲劳的作用,为进一步开发利用人参三七提供试验依据.[方法]将小鼠分为4批,每批48只,随机分为4组,分别为对照组和50、100、300 mg/kg 3个给药组,各组小鼠经口灌胃给药30 d后,分别测定其负重游泳时间及血清尿素氮、血乳酸、肝糖原含量.[结果]100和300 mg/kg 剂量组人参三七提取物小鼠负重游泳时间显著长于对照组(P<0.01),血清中尿素氮含量显著低于对照组(P<0.01;P<0.05),小鼠肝糖原水平明显高于对照组(P<0.01;P<0.05);小鼠游泳后血乳酸含量显著低于对照组(P<0.01;P<0.05).[结论]人参三七提取物具有缓解体力疲劳的作用.     

N-乙酰氨基葡萄糖对乙醇致肝组织损伤的保护作用及其机制

目的:探讨N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)减轻乙醇对肝组织损伤的作用,并阐明其作用机制.方法:小鼠灌胃市售白酒建立酒精性肝病模型,同时在市售白酒中加入低、中、高剂量的GlcNAc作为干预组,记录模型组和干预组小鼠开始醉酒时间及醉酒持续时间,HE染色观察模型组和干预组小鼠肠道组织和肝组织的病理损伤程度.结果:与模型组比较,GlcNAc低、中、高剂量组小鼠的开始醉酒时间逐渐延长(P<0.05或P<0.01),醉酒持续时间逐渐缩短(P<0.05或P<0.01).组织切片观察,模型组小鼠肠道组织结构受损,腺体萎缩,管腔内可见脱落的肠黏膜细胞,肝组织多数细胞胞膜破裂,少许细胞核破碎、溶解消失,肝小叶中央静脉及其周围肝窦明显扩张,肝细胞索间充满淡红色嗜酸性均质状物,周围组织结构疏松;GlcNAc干预组小鼠肠道及肝组织损伤均有不同程度的减轻,且随着GlcNAc剂量的增加,肠道组织和肝组织损伤逐步减轻.结论:GlcNAc可不同程度减轻乙醇对肠道组织和肝组织的损伤,GlcNAc对肝脏的保护作用可能与GlcNAc稳定肠黏膜屏障作用有关.     

MUM1/IRF4在滤泡性淋巴瘤中的表达及其临床病理意义

目的 探讨MUM1/IRF4在滤泡性淋巴瘤(FL)中的表达情况及临床病理意义.方法 对96例FL患者标本进行MUM1、CD10、bcl-2、bcl-6、Ki-67免疫组织化学染色,并与患者的临床资料和病理学特征比较.结果 MUM1在96例FL中总的阳性率为59.2%(58/96),其中1～2级组阳性率为36.2%(19/51),3级组阳性率为86.4%(39/45)(x2=24.406,P<0.001).68.9%伴有弥漫成分的FL患者MUM1阳性(x2=8.161,P=0.004).MUM1和CD10的表达呈负相关,83.3%的CD10阴性病例表达MUM1(x1=12.649,P<0.001).MUM1阳性者核分裂和Ki-67标记指数高于MUM1阴性者(t=-3.852、t=-4.610,P<0.001).结论 MUM1可作为FL分型的标志物.MUM1阳性的FL可能为类似非生发中心B细胞分化特征的高度恶性淋巴瘤.     

银杏叶提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及其降血糖作用机制

目的:通过体外药效学实验研究银杏叶提取物(GBE)对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,探讨其降血糖的作用机制,为开发利用银杏叶资源提供实验依据.方法:提取大鼠小肠中的α-葡萄糖苷酶液,利用葡萄糖试剂盒测定酶活力;体外抑制实验分为正常对照组、阳性对照组及GBE高、中、低剂量组(10.0、5.0、2.5 g·L-1),对反应体系中的葡萄糖浓度进行测定,计算药物对蔗糖酶的抑制率;离体器官实验分为正常对照组、阴性对照组、阳性对照组和GBE高、中、低剂量组(10.0、5.0、2.5 g·L-1),对反应体系中的淀粉光密度值进行测定,计算药物对淀粉酶的抑制率;半数抑制率(IC50)实验将GBE分为7个剂量组,分别计算药物对α-糖苷酶的抑制率及IC50;抑制曲线实验分为正常对照组、阳性对照组及GBE组,计算反应速率,以底物浓度的倒数作为横坐标,以反应速率的倒数作为纵坐标,绘制抑制曲线.结果:大鼠小肠酶活力值为67.2活力单位.与正常对照组比较,GBE高、中、低剂量组蔗糖酶抑制率明显增加(P<0.001,P<0.001,P<0.01);与正常对照组比较,GBE高剂量组大鼠小肠中淀粉酶抑制率明显增加(P<0.01);GBE对蔗糖酶的IC50值为0.758 6 g·L-1,对淀粉酶的IC50值为0.910 1 g·L-1;GBE组趋势线与正常对照组斜率相近,且截距大于正常对照组趋势线.结论:GBE对α-糖苷酶具有良好的抑制作用,其作用机制为反竞争性抑制.     

北五味子对小鼠学习记忆及脑SOD和MDA的影响

[目的]了解北五味子醇提取物对小鼠学习记忆能力及脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量的影响.[方法]将健康昆明小鼠随机分为对照组和北五味子醇提取物低、中、高剂量组,连续灌胃28 d,通过Morris水迷宫试验检测小鼠学习记忆能力的变化;并测定小鼠脑组织SOD、MDA含量.[结果]北五味子提取物灌胃后经Morris水迷宫定位航行试验检测发现,第7、14、21天各组小鼠逃避潜伏期无显著差异(P>0.05),第28天高剂量组小鼠逃避潜伏期较对照组显著延长(P<0.05).各组小鼠脑组织SOD活力较对照组出现不同程度降低(P<0.05),MDA含量无显著差异(P>0.05).[结论]北五味子提取物对小鼠学习记忆能力可能没有明显影响,但可能影响脑组织中SOD含量.     

p38MAPK蛋白在体外培养神经元中的表达及W-7的干预作用

目的:探讨p38MAPK蛋白在体外培养神经元中的激活及钙调蛋白抑制剂W-7的干预作用.方法:神经元原代培养并采用NSE免疫细胞化学技术鉴定神经元.取原代培养7 d的大鼠皮质神经元随机分为5组:正常对照组,仅用DMEM/F12完全培养基;NMDA组,去除正常神经元培养液,加入NMDA 50 μmol·L-1,处理时间10 min;W-7干预组,W-7浓度分别为25、50和100 μmol·L-1,继续培养24 h,加入NMDA 50 μmol·L-1.免疫细胞化学染色法及免疫印记法检测皮质神经元内p38MAPK蛋白的表达水平.结果:培养6～12 h后大部分神经元贴壁,随时间延长形态多变,突起逐渐增多,神经元突起间互相接触形成网络.NSE鉴定神经元纯度为90.86%;免疫细胞化学染色法检测,NMDA组p38MAPK蛋白表达水平高于对照组(P<0.05),W-7组低于NMDA组(P<0.05或P<0.01),呈剂量依赖性;Western blotting法检测,NMDA组p38MAPK蛋白表达水平高于对照组(P<0.05),W-7干预组p38 MAPK表达水平低于NMDA组(P<0.01),呈剂量依赖性.结论:NMDA导致皮质神经元p38MAPK蛋白表达增高,W-7可降低p38MAPK的蛋白表达.