嗜酸乳杆菌喷雾干燥技术的研究

研究利用喷雾干燥法对嗜酸乳杆菌进行微胶囊化处理，以微胶囊产品细菌存活率作为主要考察目标，设计了四因素三水平的正交试验。通过正交试验分析，得出微胶囊细菌存活率优化工艺条件为：进风温度140℃；进料速度14．58ml／min；主要壁材阿拉伯胶与麦芽糊精的配比为1：10；壁材浓度为20％。微胶囊内细菌的存活率可达63％，活菌数达到108cfu／ml数量级。并对微胶囊进行了表征。     

椰壳甘露低聚糖促嗜酸乳杆菌CGMCC 1.1854生长特性的研究

研究了椰壳甘露低聚糖促嗜酸乳杆菌生长特性,发现椰壳低聚糖具有较强的促进嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus CGMCC1.1854 )生长作用,而椰壳低聚糖与蔗糖混合(DMC SUC)则可进一步提高其增殖能力,37℃下培养36 h,最高活菌数可达9.38×109cfu·mL-1.     

PC12细胞体外培养法测定蛇毒神经生长因子活性

目的建立PC12细胞检测蛇毒NGF活性的方法。方法在有血清条件下,观察NGF诱导PC12细胞分化情况。在无血清条件下,以SRB染色定量NGF维持PC12细胞存活数量,计算NGF效价,并与鸡胚背根神经节法比较。结果在有血清条件下,NGF能诱导PC12细胞分化,出现神经突触样生长。在无血清条件下,NGF浓度对数值与PC12细胞数呈直线相关,标准品与样品的生物效应平行性良好,以量反应平行线法可计算样品的NGF平均效价为1108·3U/ml,与鸡胚背根神经节法检测结果相符。结论该法简便易行,定量准确,重复性好,实验周期短。     

牛毛水解物对PC12细胞氧化损伤的抑制

通过考察H₂O₂浓度和作用时间对细胞活力的影响,确定PC12细胞氧化损伤模型的建立条件;通过细胞活力及形态分析,测定牛毛水解物对H₂O₂致PC12细胞氧化损伤的抑制作用。结果表明,H₂O₂浓度0.15 mmol/L、作用时间2 h为建立PC12细胞氧化损伤模型的理想条件;不同质量浓度的牛毛水解物 (10、20、40、60、80 mg/L)可有效抑制H₂O₂对PC12细胞的氧化损伤,使细胞活力达到58.79%、67.53%、76.89%、85.96%、87.58%,也能在一定程度上修复氧化损伤的细胞,使其活力恢复至53.69%、57.18%、62.56%、65.68%、67.23%,还能有效地维持细胞原有的形态特征。     

氧糖剥夺条件下PC12细胞RAGE的表达及对其损伤的影响

目的探讨大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞在氧糖剥夺(OGD)的条件下,晚期糖基化终产物受体(RAGE)的表达及其对PC12细胞损伤的影响。方法PC12细胞随机分为3组:OGD培养组(PC12细胞在无血清无糖的DMEM培养液中厌氧培养);封闭RAGE的OGD培养组(PC12细胞在加5μg/mlRAGE抗体的无血清无糖DMEM培养液中厌氧培养);对照组(PC12细胞在无血清无糖DMEM培养液中培养)。免疫组化法检测RAGE表达。收集细胞上清液,检测乳酸脱氢酶(LDH)活性和一氧化氮(NO)含量,并对细胞死亡率进行检测。结果在OGD条件下PC12细胞培养8、11、20h均有RAGE表达,与对照组相比表达均明显增加,OGD培养组与封闭RAGEOGD培养组相比,LDH活性差异显著。随着厌氧时间的延长,PC12细胞死亡率明显增高,封闭RAGEOGD培养组与OGD培养组相比,PC12细胞死亡率明显降低。NO含量差异无显著意义,但与对照组相比差异显著。结论在OGD条件下,PC12细胞RAGE表达增高。RAGE的表达对细胞的损伤起促进作用。     

川牛膝多糖对H2O2诱导PC12细胞氧化损伤保护作用的研究

目的:探讨川牛膝多糖组分对H_2O_2诱导PC12细胞产生的氧化和凋亡作用,并对其机制进行深入研究。方法:通过H_2O_2诱导PC12细胞,建立神经氧化损伤模型,通过MTT法测定PC12细胞存活率,丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)和超氧化物歧化酶(SOD)检测氧化作用,Hoechst 33342法染色观察川牛膝多糖组分对PC12细胞遭受H_2O_2损伤凋亡状态特征。结果:浓度为100μmol·L~(-1) H_2O_2时,PC12细胞产生明显损伤,为最佳造模浓度;川牛膝多糖组分能够减少H_2O_2诱导PC12的损伤程度,减少MDA含量、降低ROS的活性、提高SOD的活性,并减轻细胞凋亡作用。结论:川牛膝多糖能够减少H_2O_2对PC12细胞的氧化作用,增强细胞保护作用。     

神经干细胞对去血清诱导PC12细胞凋亡的作用

肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12 cells)去血清后,其凋亡与多巴胺能神经元的凋亡有许多共同之处,今通过研究神经干细胞(NSCs)对去血清诱导的PC12细胞凋亡的作用,进一步为NSCs移植治疗神经系统疾病提供相应的实验和理论依据.将正常培养的PC12细胞与NSCs以不同的方式进行去血清共培养,观察PC12细胞的形态,检测PC12细胞的活性,计算PC12细胞的存活率,同时检测培养基中胶质细胞源神经营养因子(GDNF)的浓度,分析不同培养方式下NSCs对去血清诱导凋亡的PC12细胞的作用以及NSCs与去血清诱导凋亡的PC12细胞共培养后,其分泌GDNF的能力.结果表明:①去血清诱导PC12细胞凋亡呈时间依赖性,去血清72 h后,PC12细胞存活的比率为44.25%;②NSCs培养基对去血清诱导凋亡的PC12细胞没有明显的保护作用;③NSCs培养上清及NSCs对去血清诱导凋亡的PC12细胞具有保护作用;④NSCs与去血清诱导凋亡的PC12细胞共培养后,分泌GDNF的能力增强.     

专性嗜碱芽孢杆菌Bacillus pseudofirmus 的基因导入方法

引言 极端微生物可以为改善传统生物催化剂的"脆性"提供新的方法, 从而提高酶在高温、高压、高酸碱性等条件下的催化活性[1].嗜碱菌是一类最适生长pH＞10的极端微生物,可以生产碱性淀粉酶、碱性蛋白酶、碱性纤维素酶等碱性酶,具有重要的工业应用价值[2].     

浮选药剂对嗜酸氧化亚铁硫杆菌活性的影响

引言 传统的矿山资源开发模式,要求采出高品位、易选矿,从而造成资源利用率低、能源消耗大、产生大量废矿和尾矿、环境污染严重,难以适用于品位较低的矿物资源.     

镉、锰、镍、铅对嗜酸氧化亚铁硫杆菌活性的影响

以从粤北大宝山尾矿酸性矿山废水(AMD)分离的氧化亚铁硫杆菌(A.f菌)为研究对象,采用重铬酸钾滴定法测定Fe2+氧化率以及对A.f菌培养体系pH和氧化还原电位(ORP)的测定,研究镉、锰、镍、铅四种重金属对A.f菌活性的影响.结果表明,Ni对A.f菌生长和氧化活性具有明显的抑制作用,不同重金属处理组A.f菌培养体系p...     

干扰硫氧还蛋白-1对H_2O_2诱导PC12细胞超氧化损伤的保护作用

目的探讨硫氧还蛋白-1(sulfiredoxin-1,Srxn-1)对H2O2诱导的PC12细胞超氧化损伤的保护作用及其可能机制。方法在Lipofectamine 2000的介导下,分别将pLVT574、pLVT575和pLVT576干扰质粒转染PC12细胞,同时设空白对照组(正常培养细胞)及阴性对照组(转染pLVT4质粒),普通显微镜和倒置荧光显微镜下观察转染效率,并采用RT-PCR和Western blot法分别检测转染细胞中Srxn-1基因mRNA转录和蛋白表达的水平。采用不同终浓度(50、100、150、200、250、300μmol/L)的H2O2诱导PC12细胞,建立超氧化细胞损伤模型,MTT法检测Srxn-1对细胞存活率的影响,并采用超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)试剂盒检测细胞SOD活性及MDA含量。结果镜下观察可见,转染后细胞死亡数较多,胞体缩小;有绿色荧光,转染效率达50%。si-Srxn-1-575组细胞中Srxn-1基因mRNA转录及蛋白表达水平较空白对照组明显下降(P0.05)。终浓度为200μmol/L的H2O2处理12 h后,PC12细胞的存活率为66%;H2O2+si-Srxn-1-575组的细胞存活率(49.3%)明显低于空白对照组(65.2%)(P0.05)。H2O2+si-Srxn-1-575组细胞中SOD活性[(10.319±1.362)U/mg pro]明显低于H2O2+空白对照组[(15.7±1.138)U/mg pro],MDA含量[(5.507±0.297)nmol/mg pro]明显高于H2O2+空白对照组[(3.41±0.281)nmol/mg pro](P均0.05)。结论 Srxn-1对H2O2损伤的PC12细胞具有保护作用,其机制可能与其发挥内源性抗氧化作用有关。     

细胞膜分离费氏丙酸杆菌离位转化合成维生素B12

采用膜分离技术将费氏丙酸杆菌菌体细胞分离,离位合成转化维生素B12,考察了不同类型及孔径的膜对发酵液的处理能力及对菌体细胞活性的损伤情况,分析了不同浓缩条件下维生素B12的转化效果. 结果表明,卷式膜比陶瓷膜更适用于发酵液中菌体细胞的分离,用0.22 mm卷式膜处理时,细胞的生物活性几乎不受损伤,存活率达99.5%,将发酵液浓缩4倍,中间体Abo-cbi转化率达78.8%,维生素B12产量为53.9 mg/L.     

镍离子对氧化亚铁微螺菌和喜温嗜酸硫杆菌活性的影响

氧化亚铁微螺菌和喜温嗜酸硫杆菌是浸矿细菌的一种两种常见的浸矿细菌,为了测定重金属镍离子对它们活性的影响,设置了不同浓度镍离子的摇瓶实验,在温度为45℃,转速为150 r/min的条件下开展实验.结果表明:镍离子浓度在小于2g/L时,氧化亚铁微螺菌和喜温嗜酸硫杆菌的活性不受影响;镍离子浓度在4 g/L时,细菌的活性受到影响,活性降低,但通过自身的调节作用,还可以继续生长;镍离子浓度大于8g/L时,细菌几乎不生长.     

蛋白酶体抑制剂诱导的PC12细胞帕金森病模型中血红素加氧酶-1的差异表达

目的探讨蛋白酶体抑制剂(Proteasome inhibitor,PSI)诱导的PC12细胞帕金森病(Parkinson disease,PD)模型中血红素加氧酶-1(Hemeoxygenase-1,HO-1)的差异表达,为深入研究PD的发病机制提供理论依据。方法取培养的PC12细胞,加入终浓度为10μmol/L的PSI,建立PSI诱导的PC12细胞模型,以加入终浓度为10μmol/L的二甲基亚砜(DMSO)为对照组。经HE、AO&EB及α-SYN染色进行鉴定;PSI作用48h后提取蛋白,应用荧光差异凝胶电泳(DIGE)系统获得差异蛋白点,运用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOFProMS)鉴定差异蛋白。结果模型组与对照组比较,PSI作用48h可见细胞内嗜酸性类Lewy小体形成及细胞凋亡,凋亡率达(24.74±4.55)%。模型组与对照组比较,HO-1表达量显著增加。结论在泛素-蛋白酶体系统(Ubiquitin-proteasome system,UPS)功能障碍诱发PD过程中,氧化应激反应发挥着一定的作用。     

固定化德氏乳杆菌发酵乳酸及其微环境对细胞的影响

本文研究了以海藻酸载体的固定化德氏乳酸杆菌发酵乳酸的一些最佳条件及其微环境对于细胞增殖、细胞形态、α—氨基氮和无机磷的利用、热稳定性、严酸及操作稳定性等方面的影响。结果表明,在最佳条件下发酵液中乳酸含量达7.83％,转化率为81.1％,产率为1.63g/l.h,载体生产能力为8.16g乳酸/l载体.h。由于载体微环境的影响,固定化细胞的生长与形态和自由细胞有较大的不同,对α—氨基氮及无机磷的利用率降低,热稳定性及产酸量大幅度提高,并具有良好的操作稳定性。为适应工业生产的需要,研究了以麸皮水解渡与麸皮浸出液作营养源,以玉米淀粉水解液作底物的乳酸发酵。发现以麸皮水解液作营养源具有良好效果。     

黄药类捕收剂对嗜酸氧化亚铁硫杆菌的毒害机理研究

以分离于湖北某铜矿的嗜酸氧化亚铁硫杆菌LD-1菌株(At.f LD-1)为研究对象,首先得出了乙基黄药、异丙基黄药、丁基黄药、异戊基黄药4种黄药类捕收剂对At.f LD-1菌株活性的抑制规律,进而研究了这些浮选药剂对At.f LD-1菌株的毒害作用机理。结果表明,不同碳链黄药在酸性介质中与硫酸发生分解反应生成的醇和CS2均会引起At.f LD-1菌株氧化活性降低。醇类随着分子量增加,在菌体表面的吸附和渗透性能越强, 由醇类抑菌作用所造成的At.f LD-1菌株氧化活性的降低越来越明显;相同黄药药剂用量下,随着不同烃基黄药碳链的增长,与酸反应所生成CS2量的逐渐减小,对At.f LD-1菌株的抑制作用逐渐减弱。故在这两种物质共同影响下,造成了不同碳链黄药对菌种活性影响差异较大。     

固定化嗜酸氧化硫硫杆菌浸出低品位磷矿粉中磷的研究

以卡拉胶、聚乙烯醇、海藻酸钠作为包埋剂,氯化钾、硼酸和氯化钙作为固定剂,将嗜酸氧化硫硫杆菌(Acdithiobacillus thiooixidans,A.t)包埋制备成固定化小球。研究了不同固定化方法制备的A.t小球在硫磺粉存在下对低品位磷矿粉中磷的浸出效果,结果表明,固定化A.t能明显提高磷的浸出率,促进培养液pH降低。3种固定方法中,以海藻酸钠固定化浸出效果最好,培养第10d海藻酸钠固定A.t小球对磷矿粉中磷的浸出率是游离A.t浸出率的1.21倍。海藻酸钠固定化A.t浸出磷矿粉中磷的最佳工艺条件是:海藻酸钠质量分数3%(w/v),氯化钙质量分数2%(w/v),固定时间4h,包埋粒径1mm。     

嗜酸氧化亚铁硫杆菌对典型川煤全硫脱除的实验研究

利用嗜酸氧化亚铁硫杆菌对典型川煤进行脱硫实验研究,考察了FeSO4质量、Tf菌接种量、处理时间、煤浆质量分数、煤粉粒度等因素对脱硫效果的影响,并对煤系嗜酸氧化亚铁硫杆菌(煤系Tf菌)和非煤系氧化亚铁硫杆菌(非煤系Tf菌)的煤炭脱硫效果进行了比较。结果表明:煤系Tf菌最优条件为:FeSO4质量为0,接种量为9 mL,处理时间为28 d,煤浆质量分数为10%,煤粉粒度为0.150～0.075 mm,其脱硫率分别为43.35%、48.50%、49.36%、42.06%和57.71%;非煤系Tf菌最优条件为:FeSO4质量为1.12 g,接种量为9 mL,处理时间为28 d,煤浆质量分数为10%,煤粉粒度为0.150～0.075 mm,其脱硫率分别为20.60%、42.06%、50.64%、39.06%和53.30%。     

初始pH对表面活性剂/嗜酸性硫杆菌处理电镀污泥脱水及去除铜的影响

以电镀污泥脱水及去除Cu为目标,通过摇瓶试验,对初始pH为3～9的电镀污泥进行为期7 d的表面活性剂/嗜酸性硫杆菌处理.结果表明,烷基糖苷(APG-10)的处理效果要优于十二烷基二甲基甜菜碱(BS-12)和鼠李糖脂.对于APG-10组,随着初始pH的上升,污泥中Cu的去除率先增大后减小,在初始pH为5时Cu的去除率达到最高的93.06％;残渣态Cu含量先上升后下降,氧化态Cu含量先下降后上升,可交换态、还原态Cu含量则几乎一直下降;当初始pH为5时,Cu的生物有效性最低、污泥的稳定性最强,残渣态Cu含量增加41.81％,可交换态、还原态及氧化态Cu含量分别减少15.95％、5.44％和24.13％,污泥比阻由pH为7时的1.56×1012 m/kg降至3.11×1011 m/kg,污泥由中等难度脱水状态转化为易脱水状态.