海洋鱼蛋白低聚肽结构和抗氧化活性的体外消化稳定性

本研究通过体外模拟胃肠道消化海洋鱼蛋白低聚肽,运用高效凝胶过滤色谱、紫外全波长扫描、圆二色光谱表征其消化前后结构变化,测定其消化前后DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除能力、铁离子还原能力(FRAP)及氧自由基吸收能力(ORAC)的变化,以探究模拟胃肠道消化对海洋鱼蛋白低聚肽结构及抗氧化活性的影响.分子量分布数据揭...     

海洋骨胶原低聚肽钙配合物的稳定性

以三文鱼骨为原料制备海洋骨胶原低聚肽钙配合物,以分子量分布和钙含量为指标,研究了热处理、pH和体外胃肠道模拟消化对海洋骨胶原低聚肽钙配合物稳定性的影响。结果表明:海洋骨胶原低聚肽钙配合物具有较好的热稳定性,各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的钙含量无显著性差异;海洋骨胶原低聚肽钙配合物在酸性和碱性条件下,分子量小于1000u的总含量略有升高,但升高不到8%,钙含量有所降低,但在广泛的pH范围内仍然有65%以上的钙含量;海洋骨胶原低聚肽钙配合物经过蛋白酶消化后,分子量小于1000u的总含量略有升高,但升高不到6%,经过胃蛋白酶消化和胰蛋白酶共同消化后,仍然有40.5%的钙含量。这说明海洋骨胶原低聚肽钙配合物具有一定的热稳定性、pH稳定性以及消化稳定性,是一种具有潜力的肽钙补充剂产品。     

加工条件及体外消化对大米低聚肽结构和抗氧化活性的影响

通过酶解大米蛋白粉制备大米低聚肽,以分子质量分布、二级结构和氧自由基吸收能力(ORAC)为指标,研究不同温度、pH值和体外消化方式对大米低聚肽结构和抗氧化活性的影响。结果表明:热处理显著降低大米低聚肽在2 000~3 000 u、3 000~5 000 u和＞5 000 u范围内的分子质量(P<0.05),显著提高<150 u的分子质量(P<0.05),然而对重均分子质量、二级结构无显著影响(P＞0.05)。40 ℃下大米低聚肽的ORAC值显著高于其它温度(P<0.05)。pH值对大米低聚肽的重均分子质量、α-螺旋和平行式β-折叠无显著影响(P＞0.05)。在pH 6下大米低聚肽的ORAC值显著高于对照组(P<0.05),而pH 2和pH 4的ORAC值显著下降(P<0.05)。体外模拟消化显著降低大米低聚肽在1 000~2 000 u,2 000~3 000 u,3 000~5 000 u,＞5 000 u范围内的分子质量及重均分子质量(P<0.05),而＜150 u所占比例显著升高(P<0.05),而二级结构无显著变化(P＞0.05)。先胃蛋白酶后胰蛋白酶消化,可显著提高大米低聚肽的ORAC值(P<0.05)。研究结果表明,大米低聚肽具有一定的结构稳定性和抗氧化活性,为研发抗氧化功能性饮料奠定理论依据。     

海洋胶原低聚肽的制备及其稳定性研究

利用两步酶解法制备出海洋胶原低聚肽,在对其基础理化成分进行分析的基础上,以分子量分布为指标,利用HPLC分子排阻的方法,研究了pH,温度和蛋白酶消化对海洋胶原低聚肽稳定性的影响。结果显示:(1)pH分别为2,4,6,8,10和37℃水浴2h后,海洋胶原低聚肽各个分子量区间的比例变化不超过3%;(2)分别于20℃,40℃,60℃,80℃和100℃下水浴2 h后,海洋胶原低聚肽各个分子量区间的比例变化不超过2%;(3)分别经过胃蛋白酶单独消化,胰蛋白酶单独消化,先胃蛋白酶消化再胰蛋白酶消化,海洋胶原低聚肽各个分子量区间的比例变化不超过6%。表明pH,温度和蛋白酶消化对海洋胶原低聚肽组分的影响很小,海洋胶原低聚肽具有良好的pH稳定性,热稳定性以及消化稳定性。     

食源性低聚肽的体外消化稳定性研究

利用生物酶解法制备大豆肽、卵白肽、玉米肽、乳清肽、海洋骨原肽、海洋胶原肽、海洋蛋白肽7种食源性低聚肽,对其基础理化成分和氨基酸组成进行分析。然后在模拟胃肠道消化生理条件下,对7种低聚肽经胃蛋白酶和胰蛋白酶消化处理,对消化产物进行分子质量分布的分析和基于疏水性进行分离的反相色谱的分析,评价各种低聚肽的消化稳定性。结果显示,7种低聚肽95%以上未被胃蛋白酶消化,90%以上未被胰蛋白酶消化,绝大部分将以肽的形式被直接吸收,由此确定了通过高效液相色谱评价食源性低聚肽体外消化稳定性的体系方法,证实了食源性低聚肽具有良好的体外消化稳定性。     

人工胃液作用牛蒡低聚果糖分子质量的变化体外研究初探

探究牛蒡低聚果糖在体外模拟人工胃液中动态变化过程。以牛蒡根为原料,热水浸提、Sevage法脱蛋白、过Sephadex G-50凝胶层析柱最终得到水溶性多糖BFO-2。在体外模拟人工胃液的环境中,经0.5、1、1.5、2、4、6 h胃液作用后,检测牛蒡低聚果糖分子质量的变化。实验结果表明,牛蒡低聚果糖在模拟人工胃液环境中,随胃酸与胃酶作用时间的延长,其分子质量并没有发生显著地改变。从研究中可以看出牛蒡低聚果糖在消化过程中具有较好的稳定性,研究结果为进一步研究牛蒡低聚果糖在生物体内的代谢规律提供参考。     

模拟消化对乳清肽结构和抗氧化活性的影响

为开发乳清肽在抗氧化食品方面的应用,该研究通过酶解乳清蛋白获得乳清肽,以分子质量分布、紫外全波长扫描及圆二色光谱表征乳清肽在经模拟胃肠液消化后结构方面的变化;对比模拟胃肠液消化前后乳清肽的DPPH自由基清除率、ABTS＋自由基清除率、铁离子还原能力（ferric ion reducing antioxidant power,FRAP）及氧自由基吸收能力（oxygen radical absorbance capacity,ORAC）。结果表明,乳清肽主要由分子质量为150 Da～1 000 Da的小肽组成,所占比例均高于80%;紫外全波长扫描显示模拟胃肠液消化以后乳清肽的氨基酸芳香杂环电子跃迁发生变化;圆二色光谱结果表明乳清肽对胃蛋白酶和胰蛋白酶的消化均具有一定的稳定性。此外4个抗氧化指标中除了DPPH自由基清除率外,其余3个指标在模拟胃肠液消化后抗氧化活性均有所提高,ORAC值在经模拟胰液消化后提升最明显（p＜0.05）。     

体外消化对三文鱼皮胶原低聚肽抗氧化活性的影响

本研究以三文鱼皮为原料通过酶解法制备三文鱼皮胶原低聚肽,并进行体外模拟消化实验,通过分子量分布分析、DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力、总抗氧化能力（ABTS法）以及活性氧ROS实验,探究三文鱼皮胶原低聚肽经模拟胃、肠道消化后抗氧化活性的变化。结果表明:经模拟消化实验后,三文鱼皮胶原低聚肽的重均分子量轻微减少,变化不超过4%;胃蛋白酶消化前后,DPPH自由基清除能力IC₅₀值分别为11.1、12.3 mg/mL,胰蛋白酶消化前后,IC₅₀值分别为12.5、14.6 mg/mL;胃蛋白酶消化前后,羟自由基清除能力IC₅₀值分别为12.2、13.2 mg/mL,胰蛋白酶消化前后,IC₅₀值分别为10.7、11.5 mg/mL;胃蛋白酶消化后,总抗氧化能力下降不超过13%,胰蛋白酶消化后,总抗氧化能力下降不超过19%;胃蛋白酶消化后,ROS清除能力提高不超过3%,胰蛋白酶消化后,ROS清除能力提高不超过5%。这表明三文鱼皮胶原低聚肽具有良好的消化稳定性和抗氧化活性,为其在抗氧化功能性食品的开发提供了理论基础。     

大豆低聚肽分子质量分布的测定及体外消化实验

为验证国产化大豆低聚肽产品分子质量分布和产品在体内经消化道后的稳定性,对该产品进行了分子质量分布测定及体外消化实验,目的是为以大豆低聚肽为原料开发功能性保健系列产品提供产品稳定性的理论依据。研究结果显示,国产大豆低聚肽分子质量均低于1 000 Da;经胃蛋白酶处理后,该大豆低聚肽95%以上未被消化,经胰蛋白酶处理后,约90%未被消化,说明该产品具有良好的稳定性,在体内大部分将以多肽的形式被直接吸收。同时应用该大豆低聚肽产品开发功能性食品时,其本身所具有的各项生理功能将不会发生改变。     

模拟胃肠消化对牡蛎低聚肽抗氧化活性的影响

以去壳牡蛎肉为原料通过酶解法制备牡蛎低聚肽,并通过体外模拟消化试验,对比消化前后牡蛎低聚肽分子量分布、DPPH自由基清除能力、羟自由基(·OH)清除能力、ABTS自由基清除能力、氧自由基吸收能力(ORAC)变化,探究牡蛎低聚肽经模拟胃、肠道消化后抗氧化活性的变化。试验结果显示,牡蛎低聚肽的相对分子量主要在1 000 Da以下,胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后重均分子量下降不超过8.2%;胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后,DPPH自由基清除率降低分别不超过7.9%,8.7%;胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后,·OH清除率降低分别不超过9.3%,3.8%;胃蛋白酶消化后,ABTS自由基清除率降低9.2%,胰蛋白酶消化后,ABTS自由基清除率提高3.6%;胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后,ORAC值分别提高11.5%,1.3%。胃肠消化对牡蛎低聚肽的抗氧化活性评价各指标均无显著性影响(P＞0.05)。说明牡蛎低聚肽具有较好的综合抗氧化活性和稳定性。     

乳清蛋白-低聚异麦芽糖模拟胃液消化过程中抗原性的变化

目的 研究乳清蛋白-低聚异麦芽糖和乳清蛋白在模拟胃液消化过程中抗原性及游离氨基酸的变化。方法 乳清蛋白(WPI)-低聚异麦芽糖制备后, 对WPI-低聚异麦芽糖及WPI模拟胃液消化过程中的抗原性变化和游离氨基酸含量进行分析。结果 糖基化后乳清蛋白中精氨酸、酪氨酸、胱氨酸和赖氨酸的含量显著降低。经过模拟胃液消化, 乳清蛋白和乳清蛋白-低聚异麦芽糖中α-乳白蛋白的抗原性降低到1 μg/mL以下, 乳清蛋白中β-乳球蛋白抗原性降低到42.83 μg/mL, 乳清蛋白-低聚异麦芽糖中β-乳球蛋白抗原性降低到15.66 μg/mL。结论 经过模拟胃消化, 乳清蛋白-低聚异麦芽糖中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的抗原性比乳清蛋白中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的抗原性低; 在模拟胃液消化过程中, 乳清蛋白-低聚异麦芽糖比乳清蛋白更容易受到胃蛋白酶酶解。     

模拟胃肠道消化对玉米低聚肽抗氧化作用的影响

以胃蛋白酶和胰蛋白酶在体外模拟胃肠环境,测定模拟消化前后玉米低聚肽的相对分子质量分布、DPPH自由基清除能力、·OH清除能力、ABTS自由基清除能力、ORAC值和ROS清除能力,旨在探索模拟胃肠道消化对玉米低聚肽抗氧化活性的影响。结果表明：玉米低聚肽中大部分肽段相对分子质量低于1 000。分别模拟胃、肠环境消化后,重均相对分子质量有所下降,下降率分别为1.47%、0.05%,ABTS自由基清除能力有一定程度的升高,分别为25.47%、1.39%。模拟胃环境消化前后,DPPH自由基清除能力IC50值分别约为1.41、1.50 mg/mL,·OH清除能力IC50值分别约为10.3、12.3 mg/mL;模拟肠环境消化前后,DPPH自由基清除能力IC₅₀值分别约为1.39、1.48 mg/mL,·OH清除能力IC₅₀值分别约为8.1、9.5 mg/mL。模拟胃环境消化后,ORAC值有所降低,降幅为10.4%,100、400 μg/mL玉米低聚肽对ROS清除能力分别提高了1.42%、16.78%;模拟肠环境消化后,ORAC值提高了1.4%,100 μg/mL玉米低聚肽对ROS清除能力降低1.71%,而400 μg/mL玉米低聚肽对ROS清除能力提高2.61%。     

乌鸡低聚肽铁配合物的稳定性研究

以乌鸡为原料制备乌鸡低聚肽铁配合物,以分子量分布和铁含量为指标,对乌鸡低聚肽铁配合物的热稳定性、酸碱稳定性和消化稳定性进行了考察。结果表明:在温度为20⁸0℃时,乌鸡低聚肽铁配合物各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的铁含量无显著性差异;在pH为380℃时,乌鸡低聚肽铁配合物各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的铁含量无显著性差异;在pH为3⁹时,分子质量小于1 000 u的总含量略有升高,但升高不到6%,铁含量有所降低,但在广泛的pH范围内仍然有58.4%以上的铁含量;乌鸡低聚肽铁配合物经过蛋白酶消化后,分子质量小于1 000 u的总含量略有升高,但升高不到8%,经过胃蛋白酶消化和胰蛋白酶共同消化后,仍然有37.6%的铁含量。这说明乌鸡低聚肽铁配合物具有一定的热稳定性、pH稳定性以及消化稳定性。     

葛仙米藻胆蛋白的体外消化特性

研究葛仙米藻胆蛋白在体外模拟胃液和肠液的消化产物性质,重点测定不同消化时间产物的可溶性蛋白质、游离氨基含量变化及其抗氧化作用,并利用HPLC法测定消化产物分子质量变化情况。结果表明：在胃液和肠液消化作用下蛋白质含量均呈现下降趋势,而游离氨基含量呈现上升趋势,消化产物较初始产物对ABTS+·和脂质过氧化具有更强的抑制作用,但对·OH的清除能力却有所下降;偏相关分析结果表明,与葛仙米藻胆蛋白消化产物的抗氧化作用紧密相关的是消化产物中的分子质量为6ku和0.2ku的肽类。     

乌鸡低聚肽的制备及其稳定性研究

以乌鸡为原料,利用两步酶解法制备乌鸡低聚肽,以分子量分布为指标,研究了热处理、pH和体外胃肠道模拟消化对乌鸡低聚肽稳定性的影响。结果表明,乌鸡低聚肽分别于20、40、60、80、100℃下水浴2 h后,各个分子量区间的比例变化不超过2%;pH值分别为2、4、6、8、10,37℃水浴2 h后,各个分子量区间的比例变化不超过2%;分别经过胃蛋白酶单独消化、胰蛋白酶单独消化、先胃蛋白酶消化再胰蛋白酶消化,各个分子量区间的比例变化不超过4%。这表明乌鸡低聚肽具有较好的热稳定性、pH稳定性以及消化稳定性,为其在食品工业中的应用提供了一定的理论依据。     

豌豆低聚肽硒螯合物的稳定性研究

以豌豆低聚肽和亚硒酸钠为原料制备豌豆低聚肽硒螯合物,对其水分、酸溶蛋白、总氮、分子质量分布的基础理化性质进行研究,然后以分子质量分布和硒含量为指标对螯合物的热稳定性、酸碱稳定性、消化稳定性进行考察。结果表明,豌豆低聚肽硒螯合物水分含量为(14. 17±1. 12)%(质量分数),酸溶蛋白含量为(23. 22±0. 12)%(质量分数),总氮含量为(23. 87±0. 30)%,分子质量分布在1 000 Da以下的占比超过76%。在温度25～100℃时,分子质量分布在1 000 Da以下的部分比例变化均小于2%,硒含量变化不显著。在pH=3～11,分子质量分布在1 000 Da以下的部分比例变化均小于3%,硒含量虽有一定变化,但含量仍在78%以上。经过胃蛋白酶、胰蛋白酶和2种酶共同消化后,分子质量在1 000 Da以下的部分比例均都在90%以上,而硒含量变化不显著。这说明豌豆低聚肽硒螯合物具有一定的热稳定性、酸碱稳定性和消化稳定性。     

低值海洋鱼低聚肽抗氧化和抗疲劳活性

目的：研究低值海洋鱼（以鳀鱼为主的海产小杂鱼）低聚肽体外抗氧化活性和抗疲劳作用。方法：通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼等4 种体外化学模型、DNA氧化损伤模型及小鼠生理生化指标综合评价低值海洋鱼低聚肽的抗氧化与抗疲劳能力。结果表明：低聚肽清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基半抑制浓度（half maximal inhibitory concentration,IC50）分别为（4.76±0.57）、（5.09±0.27）、（5.91±0.23）mg/mL,还原力IC50为（1.31±0.12）mg/mL;与空白组相比,不同剂量的低值海洋鱼低聚肽均延长了小鼠力竭游泳时间,降低了小鼠疲劳后乳酸和尿素氮含量,提高了肝糖原含量和超氧化物歧化酶、过氧化氢酶及谷胱甘肽过氧化物酶活力。结论：低值海洋鱼低聚肽具有一定的抗氧化活性,并且能够提高运动耐力,缓解疲劳。     

模拟胃肠道消化对大豆低聚肽结构及抗氧化作用的影响

大豆低聚肽是一种有益健康的功能性配料,所呈现的健康益处高度依赖于肽结构。采用紫外全波长扫描法及圆二色光谱法分析其结构是如何受胃蛋白酶、胰蛋白酶以及先胃蛋白酶后胰蛋白酶处理的影响。为探讨消化处理前、后大豆低聚肽抗氧化能力的变化规律,分别计算消化前、后大豆低聚肽的ABTS自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、氧自由基吸收能力(ORAC)和铁离子还原能力(FRAP)。结果显示:大豆低聚肽主要为分子质量<1000 u的组分,经胃蛋白酶、胰蛋白酶及先胃蛋白酶后胰蛋白酶处理后<1000 u的组分比例最大可达88.46%。在波长275 nm处均有最大吸收峰。二级结构中,4组大豆低聚肽中无规则卷曲所占比例均为30%左右,约占总二级结构组成的1/3,表明了大豆低聚肽无序性较高且结构疏松开放。大豆低聚肽的ABTS自由基清除能力和铁还原能力稳定性均较好。经胰蛋白酶消化后,DPPH自由基清除率有所降低,氧自由基吸收能力极显著提高(P<0.01)。     

海洋蛋白低聚肽的抗氧化与降血压作用

以三文鱼肉为原料,通过复合酶解的方法获得海洋蛋白低聚肽,对其理化性质、氨基酸组成、分子质量分布等方面进行分析;从羟基自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基清除活性及还原能力4个方面对其抗氧化活性进行分析;从对血管紧张素转化酶（ACE）的抑制作用方面,探究其降血压活性。结果显示：海洋蛋白低聚肽分子质量大多在1 000 u以下（占86.56%）,主要是140～500 u之间的短肽含量最高（占51.91%）。海洋蛋白低聚肽具有较强的体外抗氧化能力,清除羟基自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基的半抑制浓度（IC50值）分别约为2.75,4.7 mg/mL和18.2 mg/mL。海洋蛋白低聚肽质量浓度为20 mg/mL时的还原能力与0.04 mg/mL的抗坏血酸VC相当。海洋蛋白低聚肽显示出较高的ACE抑制能力,IC50值约为0.75 mg/mL。本试验结果表明：海洋蛋白低聚肽具有良好的抗氧化和降血压活性,为其营养健康食品的开发提供了一定的试验依据。     

载鲣鱼鱼籽肽微球模拟消化过程中黄嘌呤氧化酶抑制活性变化

在体外模拟鲣鱼鱼籽肽不同消化阶段对黄嘌呤氧化酶（xanthine oxidase,XOD）的抑制活性,分析不同消化阶段鱼籽肽的分子量分布、氨基酸组成;并利用海藻酸钙对鱼籽肽进行包埋,分析鱼籽肽微球在模拟胃/肠液中的累计释放率及XOD 抑制活性变化。结果表明,经胃消化后鱼籽肽XOD 抑制活性最高,为（76.09±0.12）%;肠消化后,鱼籽肽XOD 抑制活性下降到（53.02±0.48）%;分子量小于3 000 Da 的多肽以及疏水性氨基酸在鱼籽肽XOD 抑制活性中起重要作用;载鱼籽肽海藻酸钙微球在肠液中的累计释放率为（88.79±0.65）%,肠液中XOD 抑制活性为（81.82±0.28）%,利用海藻酸钙包埋鱼籽肽明显提高了其对XOD 的抑制活性。