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人骨髓间充质干细胞的分离培养及其形态学特点 总被引:6,自引:0,他引:6
利用Percoll梯度分离、贴壁筛选法及单克隆培养法分离、培养人骨髓间充质干细胞(mesenehymal stem cells,MSCs);采用流式细胞术检测MSCs免疫学表型;采用细胞组织化学和免疫荧光技术观察MSCs的一般形态学特点;利用透射电镜和扫描电镜观察MSCs的超微结构。结果表明,分离、培养出高度同源性的MSCs具有独特的细胞免疫学表型,即CD73、CD105、CD44、CD166、CD90阳性,CD34、CD31、CD45阴性;细胞组织化学MSCs PAS-过碘酸雪夫氏染色阳性,苏丹黑-B(SB)及碱性磷酸酶(AKP)染色阴性;免疫荧光见细胞CD73、CD105阳性;透射电镜下MSCs表面有微绒毛,相邻细胞间有缝隙连接,细胞器丰富;扫描电镜下MSCs呈长梭形、鱼群状排列,表面有许多微绒毛。实验结果为MSCs的诱导分化及应用提供了形态学基础。 相似文献
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人骨髓间充质干细胞(human Mesenchymal stem cells,hMSCs)在特定的培养条件下能定向诱导分化为成骨细胞、软骨细胞、肌腱细胞以及成纤维细胞等,在组织工程学中具有广阔的应用前景。应用扫描电镜观察hMSCs在Cytodex-3微载体上的生长情况为实验提供依据。采用悬浮细胞常规制样技术得到的样品,镜下显示Cytodex-3微载体和Cytodex-3微载体上负载的hMSCs的数量均极少,且负载在Cytodex-3微载体上的hMSCs的体积和表面形态结构变化较大。为了避免这类问题对实验结果的影响,我们对样品制备技术进行了改进,取得了显著的效果。 相似文献
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分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,传代纯化后接种至共聚焦培养皿,置于自主研发搭建的平场定量相位显微镜下,利用荧光及相位双通道证实线粒体特征后,进行长时间无标记观察,分析平场定量相位显微镜观察到的线粒体分裂、融合过程,以及细胞凋亡过程中的线粒体变化。平场定量相位显微镜无标记观察到的线粒体可与荧光标记的线粒体完全重叠,表明平场定量相位显微镜可以清晰观察线粒体并进行无标记高分辨率成像。同时,平场定量相位显微镜可以对培养条件下的骨髓间充质干细胞进行长时间无标记观察,并高分辨率记录线粒体分裂、融合过程。此外,还利用平场定量相位显微镜首次完整记录了CCCP作用下线粒体的变化,该变化直观地呈现了线粒体途径的细胞凋亡过程。平场定量相位显微镜可以对培养的细胞进行长时间无标记高分辨率观察,为线粒体动力学的研究提供了一种新的观察手段。 相似文献
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In this paper, we report the discrimination of the viability of human umbilical cord mesenchymal stem cells (hUC-MSCs) with photo-induced delayed luminescence (DL). We measure the DL decay kinetics of hUC-MSCs using an ultraweak luminescence detection system, and find the significant difference in the weight distributions of the decay rate for hUC-MSCs with high and low viabilities. Spectral discrimination of hUC-MSCs with high and low viabilities is thus carried out by comparing the DL kinetics parameters, including the initial intensity, the peak decay rate and the peak weight value. Our results show that the novel optical method for the viability diagnosis of hUC-MSCs has a promising prospect. 相似文献
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间充质干细胞修复损伤肌腱的超微结构观察 总被引:3,自引:0,他引:3
肌腱损伤、缺损是外科常见问题之一 ,常用肌腱移植术进行修补治疗 ,但自体肌腱来源有限 ,且会造成供区功能缺失 ,异体肌腱又存在不同程度的排异问题 ,无法满足临床需要。随着组织工程学的发展 ,构建组织工程化人工腱可以为临床损伤肌腱的修复开辟一条新的治疗途径。腱细胞是肌腱的基本功能单位 ,分化程度很高 ,但体外增殖能力有限 ,不能满足肌腱组织工程对其数量上的要求。间充质干细胞(mesenchymalstemcells ,MSCs)是一种分化程度低、具有多向分化潜能的细胞 ,它可以向骨、软骨、肌腱、脂肪等组织分化[1] ,同时具… 相似文献
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目的研究急性粒细胞白血病异基因造血干细胞-人脐带源间充质干细胞(hUG—MSC)联合移植效果。方法急性髓性白血病-M2,供者为其胞兄,HLA单倍型相合,移植物为经粒细胞集落刺激因子(Granulocyte Clony—Stimulating Factor,G—CSF)动员的骨髓以及外周血造血干细胞,加入分离、扩增的hUC—MSC。移植物抗宿主病(Graft—Versus—Host Disease,GVHD)预防采用环孢菌素A+ATG^+霉酚酸酯+短程甲氨喋呤和CD25单抗。结果输注供者的MSC总数和CD34细胞数分别为7.92×10^8/L和3.78×10^6/L。中性粒细胞大于0.5×10^9/L和血小板大于20×10^9/L的时间分别为14d和15d。24d嵌合体100%,40d左右出现Ⅰ度aGVHD,治疗后好转,未出现其他严重并发症。结论异基因造血干细胞-人脐带源间充质干细胞(hUC—MSC)联合移植安全简便,可加速造血功能恢复。 相似文献