两株嗜酸乳杆菌体外降低胆固醇的研究

考察两株嗜酸乳杆菌体外降低胆固醇的降低曲线和降低方式,以及不同条件下嗜酸乳杆菌对培养基中胆固醇的降低情况.结果表明,这两株茵对胆固醇有明显的去除作用,其对胆固醇的降低作用是同化吸收和共沉淀的结果,以同化方式为主;随着接种量的增加,降低率也随之增加;不同胆盐对其降低胆固醇效果不同,当胆盐添加量为0.2％(m/V)时,胆固醇降低量最大;当吐温80添加量为0.1％时,胆固醇降低效果最佳.     

嗜酸乳杆菌优良菌株筛选及其生物学性状的研究

对嗜酸乳杆菌6个菌株的产酸力、胆盐抗性、生物量及同化胆固醇性状进行了测定、比较,从中筛选出LA－1、LA－3两株。其产酸力可达209．5°T,胆盐抗性为0．50%的胆盐浓度,能够同化60%－80%的胆固醇,可较好地用于制备微生态活菌制剂。     

乳杆菌体外降解胆固醇特性研究

以实验室自主分离纯化的鼠李糖乳杆菌zxr01、嗜酸乳杆菌zrx02、植物乳杆菌zrx03, 3株乳杆菌体外降解胆固醇的特性以及不同金属阳离子对其影响进行了研究。嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌体外胆固醇降解率分别为28.87%、25.61%、20.39%；当pH为3时，3株乳杆菌耐酸性分别为：52.77%、52.57%、59.82%;牛胆盐浓度为0.3%时胆盐耐受性为28.65%、27.40%、26.04%；嗜酸乳杆菌在氯仿中的疏水性最好，达到了19.88%，静置24 h后，嗜酸乳杆菌和植物乳杆菌的自凝聚力都达到了80%以上且3株乳杆菌产生白色沉淀说明能产生胆盐水解酶，在Ca2+浓度为0.02 N时，嗜酸乳杆菌的胆固醇降解率为35.4%和降解效果65.43μg/u。结果显示3株乳杆菌均能在体外降解胆固醇，嗜酸乳杆菌的降解胆固醇的能力要优于其它两株乳杆菌，添加浓度为0.02 N的Ca2+可以促进嗜酸乳杆菌胆固醇降解率和降解效力。本研究结果可为进一步研究胆固醇降解提供了试验依据，为开发降胆固醇食品提供材料。     

嗜酸乳杆菌同化吸附降胆固醇作用机理研究

嗜酸乳杆菌具有降低血清及培养介质中胆固醇水平能力,其机理主要体现在其对胆固醇的吸附作用和同化吸收作用。实验采用MATH法测定了胆固醇介导嗜酸乳杆菌La-XH1和La-XH2表面疏水性、对超声波的抗性及胞内脂肪酸组成变化。结果表明,La-XH1和La-XH2对正十六烷和二甲苯具有较强表面疏水性,并通过电镜扫描结果显示,La-XH1和La-XH2可以将胆固醇吸附到自身表面,并随菌体一起在离心条件下沉淀下来,而且生长在含有胆固醇培养基内的菌株对超声波的抗性要明显高于生长在普通MRS培养基内的菌株。胞内脂肪酸含量GC-MC分析得出,添加胆固醇后,嗜酸乳杆菌La-XH1和La-XH2胞内饱和脂肪酸相对含量分别由16.99%与18.31%下降为13.55%与17.87%,不饱和脂肪酸相对含量分别由33.69%与32.22%增加至53.73%与53.91%,改变了菌体自身脂肪酸组成,胆固醇被菌体吸收同化到菌体内。     

蒺藜和嗜酸乳杆菌相互作用的研究

研究了不同浓度蒺藜药液及离心与否对嗜酸乳杆菌生长的影响以及嗜酸乳杆菌对蒺藜甾体皂苷的利用情况。结果表明：蒺藜药液培养嗜酸乳杆菌的最佳浓度为0．111g／mL，药液离心对嗜酸乳杆菌的生长和药液的pH几乎没有影响。嗜酸乳杆菌能利用蒺藜药液的甾体皂苷，培养5d后，其吸光度由1．6378T降到0．4617。     

嗜酸乳杆菌NCFM表层蛋白的提取及其与菌体酸和胆盐耐受及粘附性能的关系

对嗜酸乳杆菌NCFM表层蛋白(SLP)的氯化锂(LiCl)提取方法进行了优化,通过SDS-PAGE验证,确定了效率最高的提取条件,即用5mol/L LiCl在35℃处理菌体20min,且提取SLP后,菌体不会失活,8h后重新生成的SLP达到峰值。利用SLP能够再生的性质,分析了SLP与菌体耐酸耐胆盐性能,以及菌体对肠上皮细胞HT-29粘附能力的关系。实验结果显示:随着SLP的再生,去除SLP的菌体酸存活率由0h的52.5%上升到8h后的85.9%,胆盐存活率由0h的43.4%上升到8h后的81.8%,菌体对HT-29细胞的粘附指数从0h的0.33上升到8h后的18.54。SLP再生过程中菌体对酸和胆盐的耐受力和对HT-29细胞的粘附力均有恢复,因此说明SLP的完整对嗜酸乳杆菌NCFM在消化中存活力有重要影响。     

嗜酸乳杆菌高密度培养及发酵剂的研究

研究了嗜酸乳杆菌的高密度培养条件,并使用喷雾干燥法对嗜酸乳杆菌粉末发酵剂进行了制备。实验表明,嗜酸乳杆菌6012的最佳增菌培养基为：乳清培养基＋0．6％（w／v）低聚异麦芽糖＋0．6％（w／v）黄豆粉＋10％（v／v）胡萝卜汁＋0．5％（w／v）CaCO3,在培养过程中伤脑筋20％柠檬酸钠调节培养基pH值为6．2,37℃静置培养18h,活菌数可达1．0×10^9 cfu/mL。以0．5％甘油＋0．5％葡萄精＋3％大豆分离蛋白＋2％海藻酸钠作为抗热保护剂,菌体经过喷雾干燥,其发酵剂活菌数为8．0×10^9 cfu／g。     

银耳多糖对嗜酸乳杆菌L101发酵生长影响的研究

研究嗜酸乳杆菌在发酵过程中银耳多糖对其菌体细胞增殖作用的影响。研究以银耳（Tremella fuciformis）为原料,采用热水抽提和DEAE—sepharoseFF色谱分离技术获得银耳多糖以及银耳多糖两组分-酸性多糖和中性多糖;将分离的多糖按不同比例添加于MRS培养基中,以评价菌体各组分对嗜酸乳杆菌细胞增殖的作用。结果表明：银耳多糖添加量为3g／L～7g／L可有效促进嗜酸乳杆菌L101增殖,其最佳添加量为5g／L,在此添加量下,菌体发酵16h后,活菌数可达8．13×10^8cfu／mL;而≥9s／L添加量会抑制菌体的增殖。研究同时证实,酸性多糖是银耳多糖中促进嗜酸乳杆菌L101生长的主要有效成分,5虮的酸性多糖添加量,发酵16h后,活菌数可达1．01×10^9cfu／mL,较5g/L精制银耳多糖组,生物量提高了24．2％。     

蒺藜对L.acidophilus和L.bulgaricus生长的影响

研究了不同浓度的蒺藜药液及药液离心与否对嗜酸乳杆菌和保加利亚乳杆菌生长的影响。结果表明,蒺藜药液培养嗜酸乳杆菌和保加利亚乳杆菌的最佳浓度均为0．111g／mL;药液离心对嗜酸乳杆菌的生长和药液的pH几乎没有影响;药液离心对保加利亚乳杆菌的生长和药液的pH均有较大影响,与对照相比,其菌体减少,pH升高。     

分离自Kefir的植物乳杆菌体外降胆固醇作用的研究

对分离Kefir中的植物乳杆菌体外降胆固醇作用进行了研究。结果表明，植物乳杆菌在含胆盐的培养基中具有良好的降胆固醇能力，24h后培养基中的胆固醇可降低60％(0．18g／L)；该菌体外降胆固醇作用的机理主要是其产生的胆盐水解酶水解胆盐变为游离态的胆酸，与胆固醇形成复合物，在酸性pH值条件下发生共沉淀。同时，也发现该菌产生的胆盐水解酶对反应底物(各种胆盐)的特异性不同，以脱氧牛磺胆酸最佳。     

嗜酸乳杆菌生物学特性及其发酵乳的研究

研究了嗜酸乳杆菌的生物学特性,并确定其发酵乳的合适的加工工艺。结果表明,在质量分数为11％脱脂乳培养基中加入质量分数为7％的啤酒能显著提高嗜酸乳杆菌的产酸速率及活菌总数。该菌株耐盐和耐胆酸盐能力分别达到6 0％和1.5％,同化胆固醇达80％,证明是一株性能优良的益生菌株。在此基础上确定嗜酸乳杆菌发酵乳的加工工艺:①采用乳糖部分水解的牛乳（水解率40％）为原料,接种质量分数为3％的嗜酸乳杆菌;②采用混合菌种（嗜酸乳杆菌+唾液链球菌嗜热亚种+德氏乳杆菌保加利亚亚种=3％+0.5％+0.5％）为发酵剂,按常规酸乳工艺生产。产品中嗜酸乳杆菌的活菌数达到109mL-1以上,5d后其活菌数仍有6×108mL-1,且产品口风味良好。     

具有高抗胃肠道胁迫嗜酸乳杆菌的筛选及对肠炎小鼠的治疗作用

目的:从三株嗜酸乳杆菌中筛选出具有高抗胃肠道胁迫特性的嗜酸乳杆菌并研究其对溃疡性结肠炎小鼠的治疗效果。方法:人工模拟人体消化道胃液、肠液和胆盐环境,设置不同浓度梯度,研究三株嗜酸乳杆菌进入人体后对在消化道胃液、肠液和胆盐环境中的存活率,从而反映嗜酸乳杆菌对人体消化道胃液、肠液和胆盐环境的抵抗力。然后以筛选出的具有高抗胃肠道胁迫能力的嗜酸乳杆菌为研究对象,让处理组小鼠自由饮用3%葡聚糖硫酸钠盐(DSS)溶液7 d,以人工诱发的溃疡性结肠炎(UC)小鼠为动物模型,观察此株高性能的嗜酸乳杆菌CGMCC10436的抗溃疡性结肠炎潜力。结果表明,嗜酸乳杆菌CGMCC10436在模拟胃酸pH2.5~4.5时,其活菌数大于10~7CFU/mL,并且在3 h时没有下降的趋势;在模拟肠液中2h时,嗜酸乳杆菌CGMCC10436活菌数有所上升;并且嗜酸乳杆菌CGMCC10436在胆盐浓度为4g/kg时,3 h时其活菌数大于1×107CFU/mL。嗜酸乳杆菌CGMCC10436发挥较好的抗溃疡性结肠炎功效的剂量为3×108CFU,能够改善溃疡性结肠炎小鼠表观状况,修复溃疡性结肠炎小鼠肠粘膜损伤,增强溃疡性结肠炎小鼠的免疫调节。     

凝固型降胆固醇全蛋发酵饮料加工工艺研究

目的：以鲜鸡蛋为主要原料，通过乳酸菌发酵作用加工凝固型降胆固醇发酵全蛋饮料；方法：对嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、两岐双岐杆菌及其复合菌种的降胆固醇能力进行测定，选择嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌作为复合发酵菌种，对发酵基质配方和发酵条件进行优化；结果：确定全蛋液用量32％、葡萄糖用量1．25％、CMC—Na用量0．3％、卡拉胶用量0．2％、培养时间24h为优选条件，在优选条件下胆固醇降解率可达36．03％，且感官质量较好。     

嗜酸乳杆菌发酵乳增酵因子的研究

以质量浓度100g／L脱脂乳为基础培养基，研究了添加不同比例和种类的维生素、氨基酸、蛋白质及糖类等营养素对嗜酸乳杆菌产酸能力及凝乳时间的影响。结果表明：乳糖0．5％、泛酸0．08％、半胱氨酸1％、大豆蛋白胨0．25％可使发酵乳凝乳时间从18-24h缩短到4h，pH值达4．30～5．25，因此该四种营养素可作为嗜酸乳杆菌发酵乳的增酵因子。     

嗜酸乳杆菌生物抗性的研究

选择一株嗜酸乳杆菌优良菌株为研究对象,用平板菌落计数法测定嗜酸乳杆菌在各因素的作用下的存活率来研究其耐酸、耐渗透压、耐胆盐能力以及模拟人体肠胃环境研究胃酸、食盐、胆盐对嗜酸乳杆菌的综合影响;从实验结果得出嗜酸乳杆菌具有一定的抗性能力。     

高效降胆固醇乳酸菌的筛选

研究了25株嗜酸乳杆菌在MRS-CHOL培养基中对胆固醇的降解量,降胆固醇的能力,以及对酸、胆盐的耐受性。实验表明:所有实验菌株均有降解培养物中胆固醇的能力,其中有6株实验菌对培养物中胆固醇的降解率大于40%,这6株菌对胆固醇的脱除效力也较高,同时对这6株菌的耐酸、耐胆盐,以及对胆固醇的脱除能力进行了比较,筛选出降胆固醇能力较强同时对酸和胆盐耐受性较强的嗜酸乳杆菌1株。     

嗜酸乳杆菌在乳酸饮料中的发酵特性

对从健康婴儿粪便中筛选出的具有良好产酸、耐酸特性的嗜酸乳杆菌G2菌株在乳酸饮料中的发酵特性进行了研究。嗜酸乳杆菌G2菌株在单独发酵时 ,以 2 .5 %的接种量 ,酸凝时间为 1 2h ,酸乳中的菌体量可达 1 .3× 1 0 9mL-1。酸凝后的贮藏试验表明 ,D4℃ 值为 9d ,D2 5℃ 值为 4d ,将嗜酸乳杆菌G2和嗜热链球菌F0 1混合发酵 ,两菌株间存在一定的互生关系 ,酸牛乳中G2的菌体量为 8.3× 1 0 8mL-1,大大缩短了混合发酵后的酸凝时间 (只为 7.5h)。嗜热链球菌的存在对G2菌株的存活率没有显著影响。     

嗜酸乳杆菌对杂色曲霉素吸附作用的研究

嗜酸乳杆菌是肠道内的一种益生菌,也是奶制品中含有的重要的活性微生物。本文探讨了嗜酸乳杆菌及其菌体总蛋白对杂色曲霉素的去除能力,实验结果显示:嗜酸乳杆菌菌体总蛋白对杂色曲霉素的相对吸附率达75.8%,而面包酵母菌体总蛋白为48.9%、小牛血清白蛋白只有32.5%, 嗜酸乳杆菌菌体总蛋白的吸附作用呈一定的量效关系;胰蛋白酶或胃蛋白酶消化使嗜酸乳杆菌菌体总蛋白对杂色曲霉素的相对吸附率由52.2%下降至34.3%和36.1%,但吸附作用没有消失;菌体总蛋白与杂色曲霉素混合温育1、2、3、4、5h检测,结果嗜酸乳杆菌菌体总蛋白在整个实验的时段中的相对吸附率在57.2%～75.7%的较高水平内波动,而面包酵母菌体总蛋白由开始的70.6%相对吸附率在实验5h结束时的19.8%,另外的BSA的吸附率一直维持在14.6%～34.3%之间;酸和热处理菌体使嗜酸乳杆菌对ST的相对吸附率由60.5%分别增加至71.2%和69.5%。本研究的结果为杂色曲霉素的去毒以及食品加工提供了有用的参考数据。     

酵母浸出物对嗜酸乳杆菌菌体形态及冻干存活率的影响

为分析酵母浸出物中对嗜酸乳杆菌形态及冻干存活率产生重要影响的关键营养组分，采用不同酵母浸出物的营养组分与应用关联分析和单因素试验验证了酵母浸出物中不同营养组分对嗜酸乳杆菌形态的影响。研究结果表明，同等培养条件下，酵母浸出物中的蛋白类物质对嗜酸乳杆菌菌体形态无显著影响，其所含有的核酸类物质对嗜酸乳杆菌的菌体形态有着重要影响，酵母浸出物含有的肌苷酸、尿嘧啶核苷酸、胞嘧啶核苷酸、腺嘌呤核苷酸及相关RNA水解物有助于嗜酸乳杆菌的菌体分裂和菌体长度缩短，进而提升嗜酸乳酸菌冻干存活率。研究结果的应用有助于嗜酸乳杆菌工业化生产的精准调控和生产效率提升。     

表层蛋白对嗜酸乳杆菌NCFM生长代谢的影响

为评估表层蛋白对嗜酸乳杆菌自聚集、生长及代谢的影响,通过测定菌体自聚集率、菌体生长、GC-MS分析表层蛋白去除前后嗜酸乳杆菌胞内小分子代谢物的变化。结果表明,表层蛋白去除前后,嗜酸乳杆菌的胞内氨基酸类如组氨酸、酪氨酸、鸟氨酸,有机酸类如乳酸、苹果酸等代谢物具有显著差异,这些代谢物直接影响了表层蛋白相关的主要生化反应和关键代谢通路。经过代谢通路富集分析,主要影响了精氨酸和脯氨酸代谢、赖氨酸生物合成、精氨酸生物合成、氨基糖和核苷酸糖代谢、丙氨酸,天冬氨酸和谷氨酸代谢这5条代谢通路。总之,表层蛋白的剥离影响了氨基酸合成的代谢通路,氨基酸合成会竞争生长所需的能量,进而影响嗜酸乳杆菌的生长,该研究为进一步认识表层蛋白对嗜酸乳杆菌胞内小分子化合物代谢的影响提供了依据。