快速检测畜产品中青霉素残留的研究

将青霉素与牛血清白蛋白连接成复合物作为抗原 ,建立畜产品中青霉素残留间接竞争酶联免疫反应吸附法(ELISA)分析方法。测定残留青霉素的浓度范围为 6.0～1 50 ng/ ml检测限是 6.0 ng/ ml,样品回收率 87%～ 1 1 0 %。     

SM_2单克隆抗体的初步应用研究

以磺胺二甲嘧啶(SM2)-人血清白蛋白(HSA)为免疫抗原和SM2-卵清白蛋白(OVA)为包被抗原。制备SM2单克隆抗体;利用杂交瘤技术和有限稀释法经亚克隆,得到三株特异性稳定分泌SM2抗体的杂交瘤细胞,与其他四种磺胺药和两种载体蛋白HSA、OVA均无交叉反应。利用本试验制备的单克隆抗体初步建立了动物组织中检测SM2的间接竞争ELISA方法。最低检出限为9.95 ng/mL,灵敏度为47.12 ng/mL。     

氢化物发生-原子荧光光谱法同时测定食品中的镉和锡

为提高食品中镉和锡的检测水平,建立了氢化物发生-原子荧光光谱法同时测定食品中的镉和锡的方法.在最佳实验条件下的检出限:镉0.002 9 ng/ml、锡0.19 ng/ml;线性范围:镉0～2ng/ml,相关系数0.999 8,锡0～100 ng/ml,相关系数0.999 9;在0.5 ng/ml时,镉测定的相对标准偏差为1.5%(RSD),2.5 ng/ml时锡的相对标准偏差为3.1%(RSD);试样加标回收率:镉93.0%～100.5%,锡91.3%～99.2%.该方法具有操作简便、快速、检出限低、灵敏度高、结果准确等优点,适合于各种食品镉、锡的联合测定.     

LC-MS/MS测定牛奶中六种青霉素类抗生素残留

目的建立一种用LC-MS/MS快速测定牛奶中6种青霉素类抗生素残留的方法。方法选择青霉素G-D7为内标,样品经乙腈沉淀蛋白,SPE柱净化、浓缩,有效地去除杂质。经高效液相色谱C18柱分离,选用含0·1%甲酸的水和乙腈作流动相,在26min内,在线梯度洗脱将6种青霉素类抗生素得以分离。结果方法检出限为青霉素G0·02ng/ml、青霉素V0·06ng/ml、苯唑西林0·04ng/ml、氯唑西林0·11ng/ml、奈夫西林0·02ng/ml、双氯唑西林0·19ng/ml,在0·2~2·0ng/ml线性范围内,相关系数r为0·991,回收率大于90%,方法精密度为4·87%。结论该方法准确可靠,重复性好,灵敏度高。可适用于牛奶中多组分β-内酰胺类抗生素的确认和准确定量检测,能满足各国对上述β-内酰胺类抗生素的最低检出要求。     

SM_2人工抗原合成研究

采用重氮化法合成磺胺二甲嘧啶(SM2)-人血清白蛋白(HAS)免疫抗原和SM2-卵清白蛋白(OVA)包被抗原。经紫外光谱扫描法确认SM2与载体蛋白偶联成功;经计算得SM2与HSA、OVA的结合比分别为9:1和15:1。     

辣椒制品中苏丹红Ⅰ～Ⅳ号检测方法比较研究

实验选用高效液相色谱法(HPLC)和液相色谱-质谱联用法(LC-MS)两种方法对辣椒制品中苏丹红Ⅰ～Ⅳ号进行了分离和检测.HPLC法选用229 nm作为苏丹红Ⅰ～Ⅳ号的检测波长,其工作曲线的线性范围较宽,分别为0.625 ng～2000 ng(R2=1)、2.5 ng～2000 ng(R2=1)、5 ng～2000ng(R2=0.998 9)和5 ng～2000 ng(R2=0.999 0),苏丹红Ⅰ～Ⅳ号的检测限分别为1.88μg/kg、2.5μg/kg、6.25μg/kg和10μg/kg,适合含量较高的样品检测.LC-MS法在质核比(M/Z)为249.05、277.10、353.10和381.15的条件下分别对苏丹红Ⅰ～Ⅳ号进行MS检测,其工作曲线线性范围较窄,苏丹红Ⅰ～Ⅲ为0.10 ng～5 ng(R2≥0.999 7),苏丹红Ⅳ号为0.25 ng～5 ng(R2=0.999 8),苏丹红Ⅰ～Ⅳ号的检测限均为1μg/kg,更适合微量样品的检测.两种方法均具有简单、快速的特点.     

毛细管电泳法测定食品中的低聚糖异麦芽糖含量

应用高效毛细管区带电泳柱前衍生法测定食品中的功能性低聚糖 (低聚异麦芽糖和低聚麦芽糖 )。样品经稀释 ,去除蛋白 ,在甲醇溶液中与对氨基苯甲酸乙酯 (ABEE)衍生后 ,于熔融石英毛细管中 ,以 80 mmol/ L 硼砂缓溶液(PH8.0 )为缓冲体系 ,恒定柱温 2 5℃ ,在 30 KV电压下 30 min内得以完全分离。在紫外 30 0 nm下检测 ,外标法定量。各组分在 31 .2 5～ 1 0 0 0 μg/ ml的浓度范围内线性相关系数均达0 .998以上 ,检出限可达 0 .0 2 7～ 0 .0 59ng,相对标准偏差为2 .9%～ 5.0 % ,回收率为 1 0 0 .4%～ 1 0 1 .2 %。     

高效液相色谱法分析黑米皮花青素及其体内代谢产物

建立分析黑米皮中花青素含量及人体内代谢产物的高效液相色谱方法。并研究了黑米皮中花青素种类、含量及在人体内的代谢情况。样品经预处理后,以HypersilBDSC18柱,4%磷酸水溶液、乙腈(V/V)等度洗脱分离,520nm波长下检测、外标法定量。结果表明,黑米皮中花青素总含量约为2.31%,其中矢车菊素-3-葡萄糖苷(Cy-3-g)占1.87%,芍药素-3-葡萄糖苷(Pn-3-g)占0.44%。Cy-3-g在血浆中的最高浓度为21.47±4.48ng/ml,出现在口服黑米皮后1.5h,血浆中未检测到Pn-3-g。Cy-3-g在0～2h的尿液样品中的含量最高(390.78±69.28ng/ml),Pn-3-g在2～4h收集的尿液中含量最高(105.90±26.26ng/ml)。     

蛋白质芯片检测牛乳中乳铁蛋白条件的优化研究

目的优选并确定蛋白质芯片检测牛乳中乳铁蛋白(lactoferrin,Lf)的检测条件。方法利用蛋白质芯片技术,采用双抗夹心的方式,通过点样探针选择试验、点样一致性试验、棋盘滴定试验、浓度倍比试验、生物检测限试验及检测下限试验最终优化出针对目标蛋白的最佳检测条件。结果最终确定以Lf鼠单抗75#为点样探针,预点样46点,46点至90点为点样一致性区段;点样探针浓度为0.5 mg/ml,检测抗体效价为1∶2 000,在0.6~612ng/ml之间剂量-反应关系呈现S型曲线,其线性范围在9.56~306 ng/ml之间;检测下限为1.68 ng/ml,生物检测限为3.59 ng/ml;建立了对Lf具有最佳回归系数(r=0.998)的回归方程与标准曲线。结论此研究优化了利用蛋白质芯片技术检测Lf的试验条件,为建立定量检测Lf的蛋白质芯片平台奠定了基础。     

小麦中T—2毒素酶联免疫吸附测定法(ELISA)

本文建立了测定小麦中 T—2毒素的简便、灵敏、快速的酶联免疫吸附测定法。样品经三氯甲烷—无水乙醇(4:1)提取,用中性氧化铝/活性碳柱净化,制备成样液,供 ELISA 检测之用。表方法的最低检出量为0.1ng/检测孔(1ng/ml),检测的线性范围为1—1000ng/ml。小麦中 T—2毒素含量在1、10、50、100、200、和500ppb六个水平时,回收率为80.4—110.7%,变异系数为4.7—19.2%。共检测10份赤霉病污染的小麦样品,均为阳性,T—2含量为78—126ng/_ 。     

QuEChERS-高效液相色谱-串联质谱法测定火锅调料中罂粟壳

目的 建立了用QuEChERS/高效液相色谱-串联质谱法测定火锅调料中的吗啡、可待因、罂粟碱、蒂巴因、那可丁五种生物碱含量的方法。方法 样品通过QuEChERS法处理后,样品液采用C18色谱分离柱,以10 mmol/L甲酸铵溶液(含0.1%甲酸)-乙腈(含0.1%甲酸)作为流动相进行梯度洗脱,电喷雾正离子模式下多反应监测(MRM)模式检测。结果 样品平均回收率为84.5%～100.5%,RSD为0.8%～3.1%。吗啡、可待因的线性范围为5.0 ng/ml～250.0 ng/ml,相关系数为0.9990～0.9994,最低检出限为2.0 ng/ml,罂粟碱、那可丁、蒂巴因的线性范围为1.0 ng/ml～50.0 ng/ml,相关系数为0.9998～0.9999,最低检出限为0.1 ng/ml。结论 该方法快速、简单、安全、有效、灵敏、准确,适用于火锅调料中罂粟壳的检测。     

双酚A残留的检测方法研究

建立了用液相色谱.串联质谱技术测定双酚A残留的方法.质谱采用电喷雾电离源(ESI).负离子采集模式,选择反应监测技术(SRM),定量离子对为m/z 227>132、114;甲醇.水(3:7)为流动相,流速500μl/min.方法的检出限为1.8ng/ml,线性范围20.0～2000.0ng/ml,回收率91%.并实验比较了液相色谱紫外检测器与串联质谱检测的灵敏度和选择性,结果表明LC-MS2方法灵敏、准确、快速.     

HPLC法测定红曲霉发酵样品中麦角固醇的含量

采用HPLC法对红曲霉发酵样品中的麦角固醇 (Ergosterol)进行测定。色谱柱为Shim_packVP -ODSC18(4.6× 15 0mm ;5 μm)柱 ,以甲醇—水 (97:3)作为流动相 ,流速1.8ml/min ,紫外检测波长 2 82nm。红曲霉发酵样品经碱性乙醇皂化、乙醚萃取后 ,用外标法进行定量检测。结果表明 :Ergosterol标准曲线在 0 .0 2mg/ml～ 1.6mg/ml范围内呈线性关系 ,r =0 .994 9,该法的回收率为 98.86 % ,相对标准误差为 0 .15 %。本测定方法操作简便、准确、可靠。     

重金属镉特异性抗体的制备及icELISA检测方法的建立

为检测食品中的重金属镉残留问题,本研究建立了基于重金属镉抗体的酶联免疫分析方法。利用异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(Isothiocyanobenzyl-EDTA,ITCBE)螯合Cd~(2+)并偶联牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA),合成了针对Cd~(2+)的免疫原Cd-ITCBE-BSA和包被原Cd-ITCBE-OVA,通过紫外扫描鉴定说明偶联成功;以Cd-ITCBE-BSA免疫Balb/c小鼠,制备出Cd~(2+)抗血清并对其免疫学特性进行鉴定,进一步说明了抗原合成成功,在此基础上进行了条件优化并建立了针对镉的icELISA检测方法。方法的检测限(IC10)为0.18 ng/mL,IC50为1.15 ng/mL,线性检测范围(IC20～IC80)为0.24～5.54 ng/mL。除了与Hg~(2+)有2.16%的交叉反应率,该方法对Pb~(2+)、Fe~(3+)、Cu~(2+)和Cr3+交叉反应率均小于0.3%,板内变异系数和板间变异系数都低于10%。此抗体特异性强灵敏度高,建立的icELISA方法可应用于食品中重金属镉的快速检测。     

微量酸微波消解-原子荧光光谱法同时测定食品中砷、汞

为建立同时测定食品中砷、汞微量酸微波消解-原子荧光光谱法,采用1ml硝酸 0.5ml过氧化氢 6ml水的微波消解体系,用0.5g抗坏血酸 1g硫脲为As5 预还原剂,消解液无需赶酸,直接用原子荧光光谱仪同时测定。砷在0～200ng/ml、汞在0～40ng/ml范围内线性关系良好,相关系数均大于0.9995。方法的检出限砷0.12ng/ml、汞0.04ng/ml。检测国家标准物质GBW08508米粉、GBW08513茶树叶,相对标准偏差砷3.94%,汞3.22%,平均回收率砷96.1%;汞93.6%。该方法试剂用量少,污染小,简便、快速、准确,能满足各类食品中砷、汞检测。     

毛革两用鞋面革生产工艺(绒面)

1　原料皮澳大利亚盐湿羊羔皮。2　预浸水1张皮 =2 0升水 ,在划槽中进行。温度 2 8℃ACTIVOL OLN杀菌浸水剂 1 . 0 ml/ lSUPRAL AN80脱脂剂1 . 0 ml/ l划动 1 80分钟排液 ,水洗。3　主浸水温度 2 8℃食盐 1 0 . 0 g/ lACTIVOL OLN 1 . 0 ml/ lSUPRAL AN 80 1 . 0 ml/ l划动 30分钟 ,过夜4　去肉5　离心机脱水6　脱脂温度 38℃SUPRAL AN 80 2 . 0 ml/ l纯碱 0 . 5 g/ l划动 6 0～ 90分钟要求 :( 1 )如果毛根松动 ,在浸水和脱脂液中用 1～ 2 ml NO-VALTAN PF (脂肪醛鞣剂 )。( 2 )如果需要 ,可在第 2次去肉后再次脱脂。…     

高效液相色谱-串联质谱法测定进出口食品中十三吗啉残留

建立一种快速、灵敏的测定进出口食品中十三吗啉残留量的高效液相色谱- 串联质谱(LC-MS-MS)方法,并已在选定的多种基质的检测中证明是有效的。采用乙酸乙酯对样品中十三吗啉残留进行提取。提取液经ENVI-Carb/LC-NH2 柱固相萃取(花生采用GPC 净化)净化后,用液相色谱- 串联质谱联用仪检测,外标法定量。实验结果表明,该方法的线性范围为2.5～100ng/ml,线性相关系数为0.9995,检测限为2.5ng/ml,在添加浓度10～100ng/g 范围内,十三吗啉的平均回收率在80.2%～101.8% 之间,相对标准偏差在5.71%～10.50% 之间(n=6)。实验证明该方法具有操作简便、快速、结果准确、检测限低等特点,能够满足日本肯定列表及欧盟等发达国家的限量检测要求。     

催化光度法测定食品中的痕量铜

研究了测定痕量铜的新催化光度法。方法在pH为11.4的条件下,铜(Ⅱ)催化双氧水氧化百里酚兰的反应。测定铜的线性范围为0～180ng/25ml,检出限为0.31ng/ml。用于食品的测定,结果令人满意。     

RP-HPLC法测定鸡胚蛋及鸡蛋中性激素的残留量

目的:建立了RP-HPLC法测定鸡胚蛋及鸡蛋中己烯雌酚、丙酸睾酮激素残留.方法:采用Waters XTerra C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇:乙腈:水(2:2:1,V/V/V),流速为1ml/min,柱温为40℃,检测波长为240hm.用外标法定量,测定激素残留量.结果与结论:该方法线性范围为0.05～3.500μg/ml,标准曲线线性关系良好,其回归方程和相关系数分别为:己烯雌酚Y=21734x 963.18,R2=0.999l;丙酸睾酮Y=28967x-475.62,R2=0.9995.最低检测限为己烯雌酚0.25ng,丙酸睾酮0.33ng.回收率在78.7%～98.4%之间.相对标准偏差小于2.1%.     

呋喃西林代谢物多克隆抗体制备及酶联免疫吸附分析方法

为了建立检测呋喃西林代谢物(SEM)的酶联免疫吸附分析方法(ELISA),将所设计合成的系列半抗原与牛血清白蛋白(BSA)偶联制备免疫原并免疫新西兰大白兔,筛选获得源于新颖半抗原H3的具有高亲和力、高特异性抗SEM多克隆抗体。同时,基于设计合成的系列同/异源包被抗原,考察了不同结构包被原对ELISA灵敏度的影响,发现H4-OVA作为异源包被原建立SEM的ELISA检测方法可获得最佳的检测效果,结果显示:ELISA方法的半抑制浓度(IC50)为12.37ng/mL;定量检测线性范围(IC20～IC80)为0.439～110.78ng/mL;检测限(IC10)达0.07ng/mL,达到了国内外相关检测限量要求,可应用于实际食品样品检测。