食品酶的生产及应用

<正>酶的生产与分离纯化酶的生产指通过人工操作而获得所需的酶技术过程,酶的生产方法可分为3种方法,分别为:提取分离法、生物合成法、化学合成法。提取分离法提取分离法是采用各种提取、分离、纯化技术从动植物器官、组织、细胞或微生物细胞中提取酶出来,再进行分离纯化的过程。在酶提取时应     

栉孔扇贝内脏、裙边油中脂肪酸组成分析

采用索氏提取法对栉孔扇贝内脏和裙边中的油脂进行提取,用气相色谱对其油的脂肪酸组成进行分析测定.结果表明:扇贝内脏油脂含量远远高于扇贝裙边,扇贝内脏油脂含量占70℃烘干样品的14％以上;扇贝内脏和裙边油中不饱和脂肪酸分别为68.10％和55.29％,尤其是(EPA+DHA)含量高,内脏油为44.12％,裙边油为39.77％;扇贝内脏油中(EPA+DHA)含量高于目前报道的各种鱼油的( EPA+ DHA)含量(12％～42％).从扇贝内脏中提取油脂将有较大的市场潜力.     

芦根多糖的分离纯化和体外抗肿瘤研究

从芦根中提取和纯化了芦根多糖,并研究其体外抗肿瘤活性。采用热水浸提法从芦根中提取芦根多糖,经Sevag法脱蛋白,冷冻干燥后,葡聚糖凝胶柱层析分离纯化,得到纯化的芦根多糖,苯酚-硫酸法测定多糖样品中总糖含量,凝胶层析测定多糖分子量,细胞毒性实验研究其体外抗肿瘤作用。结果测得芦根多糖样品中总糖含量为0.872%,分离纯化得到三种芦根多糖组分R-PolyⅠ、R-PolyⅡ、R-PolyⅢ,三者的分子量分别为79781、29073、10605u,细胞毒性实验表明三种芦根多糖组分对Hela细胞和B16细胞均具有良好的抑制作用。这为芦根多糖在食品工业及医药保健等领域的应用奠定了基础。     

藻胆蛋白的提取纯化研究进展

本文从提取原料、细胞破碎方法、粗提和纯化方法等几方面对近期有关藻胆蛋白的提取纯化研究做一介绍。常用的提取原料有螺旋藻、多管藻、条斑紫菜等;细胞破碎方法有反复冻融法、化学试剂处理法等五种;粗提方法主要有盐析法等四种;而常用的纯化方法有羟基磷灰石柱层析法、DEAE-纤维素离子交换柱法和葡聚糖凝胶柱层析法等三种。实际应用中为获得较好的提取纯化效果,经常混合使用多种细胞破碎方法和多种纯化方法。     

银杏叶总黄酮提取纯化工艺的研究

介绍了从银杏叶中提取黄酮类化合物,用树脂吸附法进行纯化的生产工艺。     

中长链脂肪酸对3T3-L1脂肪细胞凋亡和脂肪生成的作用

为了探究不同种类、不同浓度脂肪酸对3T3-L1脂肪细胞凋亡和脂肪生成的影响,以3T3-L1脂肪细胞为研究对象,用不同种类、不同浓度的中长链脂肪酸处理细胞,观察细胞凋亡和脂肪生成情况。结果发现:中长链脂肪酸可以抑制3T3-L1脂肪细胞增殖,并且存在剂量依赖性,C16∶0、C18∶0、C18∶3c6,9,12、EPA处理组与对照组相比,具有显著性差异,而DHA处理组与对照组相比具有极显著性差异;C18∶3c6,9,12和EPA处理后,剪切形式PARP增加,说明C18∶3c6,9,12和EPA能诱导细胞凋亡;油红O染色结果表明两种浓度(150μmol/L和180μmol/L)的EPA和DHA均能显著促进脂肪细胞的脂肪生成。综上可知,不同脂肪酸对细胞生长、增殖和凋亡有不同作用,特别是EPA能诱导细胞凋亡,EPA和DHA可显著促进细胞的脂肪生成。     

裙带菜（Undaria pinnatifida）类囊体膜分离及光谱性质研究

利用CaCl2溶液浸泡和超声波粉碎细胞技术相结合,从裙带菜细胞中提取类囊体膜.采用蔗糖密度梯度超速离心的方法(蔗糖密度梯度为60%、50%、40%、30%、20%、15%和10%)纯化类囊体膜.结果表明纯化的类囊体膜位于50%的蔗糖密度梯度.并进行光谱性质分析,从吸收光谱中可以看出最高峰位于670nm,荧光发射光谱最高峰位于680nm,缺少高等植物具有的730nm特征峰.     

微生物发酵法生产EPA及DHA的研究进展

EPA和DHA是两种人体必需多不饱和脂肪酸,对人体健康有重要意义,微生物发酵法生产EPA和DHA具有稳定性好、易于分离纯化和工业化等优点,是近年来研究的热点。从微生物利用葡萄糖合成多不饱和脂肪酸的代谢途径和影响微生物合成多不饱和脂肪酸的因素出发,论述了微生物发酵法生产EPA和DHA的研究现状和最新进展。     

酶法富集DHA、EPA的研究进展及产业化展望

DHA、EPA是具有多种生理活性的功能因子,对人体的健康具有重要作用。酶法富集DHA、EPA具有反应条件温和,绿色环保,安全性高的优点,成为近年来的研究热点。本文概述了近年来利用脂肪酶选择性催化DHA、EPA富集的相关研究进展,介绍了DHA专一性脂肪酶、EPA专一性脂肪酶、DHA和EPA专一性酶以及固定化酶技术在分离纯化上的应用,进而对酶法制备DHA、EPA的规模化生产做出展望。     

水产品中EPA和DHA的研究进展

EPA和DHA是人体中重要的不饱和脂肪酸,具有许多重要的生理功能,对人类和动物的生长发育和健康起着重要的作用,本文简要介绍了EPA和DHA的生理功能,分离提取方法及水产来源的EPA和DHA研究现状,并对其发展前景进行了展望.     

盐度及其调节方式对眼点拟微球藻的生长和EPA积累的影响

本文研究了盐度对海产眼点拟微球藻的生长和EPA积累的影响,同时比较了天然海水、粗海盐和NaCl三种物质在调节培养基盐度、影响藻细胞生长和EPA积累方面的作用,结果表明:盐度处于14.5 ‰(33.5 ‰之间对EPA的含量没有显著影响,但对细胞比生长速率的影响更为显著.藻细胞生长和EPA积累的最适盐度范围在27.0 ‰(29.0 ‰.用NaCl实现海水中的盐度不能有效促进细胞的生长和EPA积累,而用粗海盐实现海水中的盐度能发挥与海水基本相同的作用.     

酵母菌葡萄糖耐量因子的纯化

以高铬酵母菌粉为研究对象,采用温和的纯化方法,通过氨水提取高铬酵母菌粉中的酵母菌葡萄糖耐量因子（glucose tolerance factor,GTF）,联用SuperdexTM75和Sephadex G25凝胶过滤层析对提取物进行粗分离,然后用反相高效液相色谱对提取物进行再分离,从而对GTF进行高效纯化研究。将GTF纯化品作用于胰岛素抵抗型3T3-L1脂肪细胞,通过检测细胞葡萄糖消耗量,分析GTF纯化品对细胞葡萄糖代谢调节活性。研究表明,GTF纯化品可以有效提高胰岛素抵抗型3T3-L1脂肪细胞葡萄糖的消耗。可见,经过多步柱层析纯化后,可以得到具有葡萄糖代谢调节活性的GTF纯化品 。     

藻蓝蛋白的性质和提取技术研究进展

藻蓝蛋白是一种从微藻细胞(蓝藻、红藻、聚球藻和隐藻等)中分离纯化后获得的色素蛋白复合体。藻蓝蛋白位于微藻细胞内部,在不同领域的用途存在差异,需灵活选择分离纯化方法。文章综述了其分子结构和生物学功能,提取与分离纯化工艺(包括细胞破碎、色素蛋白提取、分离纯化)及其进展,以期为藻蓝蛋白在食品、保健品和制药工业等领域应用提供参考。     

利用纳豆菌提取抗菌物质的研究

对纳豆菌产抗菌物质的摇瓶发酵条件进行初步研究,确定纳豆菌发酵的动态变化;用酸沉醇提法从纳豆菌发酵液中提取抗菌物质;采用凝胶过滤层析对抗菌物质粗提物进行纯化,并对提取、纯化效果进行分析,表明纳豆菌能够产生多个组分的抗菌物质。     

布鲁氏菌S-2与S-19株提取的脂多糖在人布鲁氏菌病诊断抗原中的应用

目的使用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)提取试剂盒提取布鲁氏菌S-19与S-2菌株中的脂多糖,检测这2种脂多糖的抗原性与诊断价值。方法用工业化生产的布鲁氏菌S-19与S-2菌株菌液用LPS纯化试剂盒通过裂解、纯化、洗涤的方法提取LPS,用提取的LPS进行斑点酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)与布鲁氏菌病阳性、正常阴性、疱疹病、血吸虫病患者血清反应,观察反应结果并判断诊断价值。结果斑点ELISA实验结果显示从S-19与S-2株中提取的LPS与布鲁氏菌病阳性血清能作出反应,反应颜色明显,诊断价值高。结论S-19与S-2菌株中提取的LPS能与布鲁氏菌病阳性血清反应,有较好的诊断价值。     

蛋黄卵磷脂的纯化及含量的测定

采用柱层析的方法对提取的卵磷脂进行纯化,用消化定磷法测定卵磷脂的含量。结果表明,从蛋黄提取的卵磷脂粗品经柱层析纯化,精制卵磷脂的纯度达99.6%。用消化定磷法可以准确测定卵磷脂的含量,有较高的准确度。     

硝酸银硅胶柱分离纯化蛇鲻鱼油中的EPA和DHA

采用NaOH-乙醇皂化再硫酸酸化的方法制备蛇鲻鱼油混合脂肪酸,然后用硝酸银硅胶柱色谱分离纯化EPA和DHA.结果表明:15 g硅胶与1g硝酸银充分混合后装柱,置于5℃的恒温层析柜中,待色谱柱平衡后,上样0.75 g混合脂肪酸,然后依次用100 mL石油醚,2％,4％,8％,10％无水乙醚-石油醚溶液各100 mL进行洗脱,洗脱液流速为0.5～1.0 mL/min,收集200 mL以后的洗脱液,进行旋转蒸发,EPA和DHA的质量分数分别从4.43％和13.94％提高至21.47％及70.13％,总质量分数可达90％以上.     

鱼油中EPA和DHA的酶法富集工艺研究

利用Sn-1,3特异性脂肪酶对食品级鱼油中的二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)进行富集,而后利用偏甘油酯脂肪酶除去上述步骤产生的甘油二酯、甘油一酯,后处理得到具有天然属性的精制鱼油。采用单因素实验考察特异性脂肪酶富集EPA和DHA过程中脂肪酶用量、纯化水加入量、水解时间及水解温度对富集EPA和DHA的影响。运用气相色谱分析精制鱼油的脂肪酸组成。结果表明:特异性脂肪酶富集过程的最优工艺条件为在pH 6条件下固定化Sn-1,3特异性脂肪酶用量1%～15%、纯化水加入量1%～10%、水解时间2～6 h、水解温度30～70℃,富集后EPA和DHA总量为40%～60%,产品收率在48%～75%;精制鱼油含有21种主要脂肪酸,其中EPA和DHA含量最多。     

天浆壳生物碱的提取分离纯化及对舌癌Tca8113细胞的增殖抑制作用

目的:从天浆壳中提取分离纯化得到生物碱,并研究其对人舌癌Tca8113细胞的增殖抑制作用。方法:采用醇提法提取天浆壳中总生物碱,硅胶柱色谱分离纯化得到单一生物碱化合物,通过核磁共振光谱和质谱对其化学结构进行分析。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定生物碱对Tca8113细胞增殖的抑制率,Hoechst 33342染色法观察细胞形态变化。结果:从天浆壳中分离出secu'amamine D、securinine、securitinine三种生物碱;MTT结果表明,三种生物碱均能明显抑制Tca8113细胞的增殖;Hoechst 33342染色结果显示,三种生物碱均能使Tca8113细胞发生凋亡形态学改变,且与浓度正相关。结论:首次从天浆壳中分离出secu'amamine D、securinine、securitinine三种生物碱,三种生物碱均能抑制Tca8113细胞增殖并促使其凋亡。     

利用生物柴油副产物粗甘油发酵生产EPA

实验利用生物柴油副产物甘油为碳源,培养畸雌腐霉(Pythiumirregulare)发酵生产EPA。实验中所用废甘油为利用碱法催化大豆油与甲醇进行酯交换反应生成,粗甘油经过纯化精制作为碳源。EPA产量采用气相色谱分析,分析之前采用浓硫酸-甲醇酯化法进行脂肪酸甲酯化。由实验得出,最佳发酵条件为:温度为25℃,pH为6,转速为170r/min,粗甘油加入量为70g/L,此条件下获得的EPA产量为:105mg/L。