灵芝孢子内脂质护肝作用的实验研究

目的 :探讨灵芝孢子内脂质对小鼠肝癌的抑制作用及其对肝脏的保护作用。方法 :动物试验观察灵芝孢子内脂质对移植性小鼠肝癌的抑制作用及其对 D-氨基半乳糖所致肝脏损害的保护作用。抑瘤试验设二处理 :A-对照组 (肝癌移植 生理盐水 ) ,B-灵芝孢子内脂质给药组 (肝癌移植 灵芝孢子内脂质 2 .5g· kg-1· d-1 ) ,受试小鼠每日分别给予受试物共 1 0天 ,比较 AB组瘤重 ,计算抑瘤率。护肝试验设三处理 :C-生理盐水对照组 ,D- D-氨基半乳糖 生理盐水 ,E- D-氨基半乳糖 灵芝孢子内脂质 (2 .5g· kg-1· d-1 ) ,1 0 d后测小鼠肝功能 (ALT)并取肝组织行病理组织学检查。结果 :AB两组小鼠间瘤重存在着极显著性差异 (P<0 .0 1 ) ,灵芝孢子内脂质组抑瘤率为 89.8% ;D、E组小鼠 ALT及病理组织学指标均有极显著性差异 (P<0 .0 1 ) ,灵芝孢子内脂质对 D-氨基半乳糖所致肝损害具拮抗作用。结论 :灵芝孢子内脂质对小鼠肝癌有抑制作用 ,对肝脏具保护作用。     

破壁灵芝孢子抑制肿瘤实验研究

目的 :通过对移植性动物瘤株作为病理模型的体内抑瘤试验来验证灵芝孢子在未破壁及经破壁后对移植性动物肿瘤小鼠肝癌、小鼠肉瘤 - 1 80及小鼠网细胞肉瘤 (L- II)的抑瘤作用。方法 :小鼠抑瘤实验设 6个处理。结果 :破壁灵芝孢子实验组在 2 g/kg· d～ 8g/kg· d剂量范围内对小鼠 S- 1 80的抑瘤率为 42 .3%～ 82 .0 %之间。对小鼠肝癌的抑瘤率为 52 .2 %～ 86.1 %。对 L-II的抑瘤率为 54.0 %～ 79.6%之间。实验显示 ,此抑制作用有明显的量效关系。     

破壁灵芝孢子对小鼠脾细胞IL-2的分泌和脾细胞转化增殖的影响

目的 :探讨破壁灵芝孢子对小鼠脾细胞 IL- 2分泌和脾细胞转化增殖的影响。方法 :实验组小鼠随机分成实验组 (低剂量组 4g/kg· d;高剂量组 8g/kg· d)和对照组 (与实验组用同体积的生理盐水 ) ,连续用药 1 0 d。用3H- Td R掺入法进行检测。结果 :与对照组相比破壁灵芝孢子对小鼠脾细胞IL- 2分泌有明显促进作用并能明显提高小鼠脾淋巴细胞转化增殖 ,并有一定的量效关系。     

灵芝醋抗衰老及增强免疫力作用的研究

研究了灵芝醋的抗衰老及增强免疫力的作用,用0.5%、1.5%、5%3种不同浓度灵芝醋饲喂果蝇,3个剂量组的平均寿命分别延长了17.3%、29.6%和44.6%,半数死亡时间、最高寿命也都有所延长,且表现为抗衰老效果随灵芝醋剂量的增加而增强;用5g/kg·d、10g/kg·d、20g/kg·d的剂量灌胃小鼠,与对照组相比,巨噬细胞的吞噬率提高了2.22%、4.22%、16.67%,吞噬指数分别提高了3.56%、4.56%、30.78%。增强免疫力效果随着灵芝醋剂量的增加而增强。     

萌动期破壁灵芝孢子对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响

目的 :观察萌动期灵芝孢子对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响。方法 :体内、外试验及碳廓清试验观察小鼠巨噬细胞的吞噬作用。结果 :0 .1 2～ 1 .2 0 mg/ml的灵芝孢子明显促进了巨嗜细胞的体外吞噬作用 ;0 .1 2～ 1 .80 g/kg剂量范围内 ,灵芝孢子对受试小鼠巨嗜细胞的体内吞噬功能有明显促进作用 ;每日口服 0 .2 4～ 1 .80 g/kg的灵芝孢子可使受试小鼠的碳廓清指数明显增加 ,并存在量效依赖关系。结论 :萌动期破壁灵芝孢子对小鼠巨噬细胞吞噬功能具显著促进作用。     

灵芝孢子粉破壁工艺优化及其抗肿瘤作用

以灵芝孢子粉为原料,采用高压均质法破壁灵芝孢子,研究灵芝孢子粉破壁优化工艺及破壁孢子粉抗肿瘤作用。选取水为破壁溶剂,以均质压力、均质次数、料液比为试验因素,以灵芝孢子破壁率为试验指标,通过单因素试验及正交试验对灵芝孢子破壁工艺进行优化。通过建立S180荷瘤小鼠模型,对破壁灵芝孢子粉的抗肿瘤作用进行研究。结果表明,最佳破壁工艺条件为均质压力150 MPa、均质次数3、料液比1∶100（g/mL）,破壁率为94.35%。抗肿瘤实验表明,破壁灵芝孢子对小鼠S180肉瘤的抑制率为43.37%～57.59%,且肝体比和肺体比变化稳定,并可显著提高小鼠的胸腺指数和脾指数。因此,破壁灵芝孢子粉具有良好的抗肿瘤作用。     

萌动激活灵芝孢子抗癌活性研究

进行了休眠期灵芝孢子、破壁灵芝孢子、萌动激活灵芝孢子及萌动激活全破壁灵芝孢子对小鼠肝癌和网状细胞肉瘤L—Ⅱ细胞生长的抑制作用研究,结果表明,休眠期灵芝孢子经萌动激活可显著提升灵芝孢子的药理活性,萌动激活全破壁灵芝孢子具有显著的抗癌活性,并呈明显的量效关系。     

啤酒酵母胞壁多糖抑制肿瘤作用的实验研究

目的:通过动物实验探讨啤酒酵母胞壁多糖对肿瘤的抑制作用。方法:采用现代分离提取技术从啤酒废酵母中分离纯化出酵母胞壁多糖;通过小鼠移植性肿瘤试验探讨酵母胞壁多糖在体内的抑瘤作用,并对其进行半致死量测定。结果:酵母胞壁多糖能显著抑制HCa-F25/A16肝癌和Lewis肺癌的瘤重(在剂量为0～200mg/kg·d范围内抑制率随剂量增加而增加,当剂量超过200mg/kg·d时,抑制率反而下降);该多糖小鼠口服时的半致死量LD_(50)为3077.86(mg/kg)。结论:使用本工艺获得的样品,其酵母胞壁多糖的含量为86.5％;酵母胞壁多糖对Hca-F25/A16肝癌和Lewis肺癌具有显著的抑制作用;急性毒理实验说明酵母胞壁多糖是一种安全低毒、值得开发的保健食品的原料资源。     

玛咖多糖的抗疲劳作用研究

为了观察玛咖多糖对小鼠的抗疲劳作用,本研究采用水提醇沉法提取玛咖粗多糖,通过Sevag法去蛋白,纯化多糖。将60只雄性昆明小鼠随机分为正常对照组,高、中、低剂量给药组。高、中、低剂量给药组分别按2.25g/kg·d、1.5g/kg·d、0.75g/kg·d灌胃玛咖多糖,正常对照组以等体积生理盐水灌胃,连续灌胃10d后对小鼠进行负重游泳实验及血清指标测定。结果表明:三个剂量组玛咖多糖均能延长小鼠游泳时间,增强小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活力,减少小鼠血清中丙二醛(MDA)的生成,提高小鼠抗疲劳能力,并呈剂量-功效依赖关系。因此,玛咖多糖的抗疲劳、提高运动能力与其抗氧化作用相关。     

灵芝子实体不同提取物对小鼠睡眠改善作用的比较

目的:观察灵芝子实体水提物、醇提物和多糖对睡眠的改善作用并初步探讨作用机制。方法:将ICR小鼠随机分为正常对照组、阳性对照组（罗通定片,15 mg/kg）、灵芝子实体水提物高剂量组（GLW-H,154.2 mg/kg）和低剂量组（GLW-L,77.1 mg/kg）、灵芝子实体醇提物高剂量组（GLE-H,125.4 mg/kg）和低剂量组（GLE-L,62.7 mg/kg）及灵芝子实体多糖高剂量组（GLP-H,31.8 mg/kg）和低剂量组（GLP-L,15.9 mg/kg）,连续灌胃30 d。末次灌胃后分别进行直接睡眠实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验和巴比妥钠睡眠潜伏期实验,并测定小鼠脑内γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）、5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）和多巴胺（Dopamine,DA）水平。结果:灵芝子实体水提物、醇提物和多糖对小鼠体重、脏器指数均无影响,各实验组小鼠给药60 min内均无出现直接睡眠现象。与正常对照组比较,GLW-H、GLE-H、GLE-L、GLP-H组均能显著延长戊巴比妥钠睡眠时间（P<0.05）,以及缩短巴比妥钠睡眠潜伏期（P<0.05）,小鼠脑内GABA、5-HT含量上升（P<0.05）,DA含量变化不显著（P>0.05）。GLE-H组较正常对照组组能显著增加戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验小鼠睡眠率（P<0.05）。结论:灵芝子实体水提物、醇提物、多糖对小鼠均具有改善睡眠作用,在相同生药剂量下总体趋势为:灵芝子实体醇提物>灵芝子实体水提物>灵芝子实体多糖,其改善睡眠作用可能与上调小鼠脑内GABA、5-HT含量有关。     

植物甾醇乙酸酯和植物留醇油酸酯抗肿瘤作用初探

该研究目的:研究植物甾醇乙酸酯(PSA)和植物甾醇油酸酯(PSO)抗肿瘤作用。方法:以S180荷瘤小鼠为模型,腹腔注射10 mg／kg·d、50 mg／kg·d剂量的PSA和PSO,9 d后分别计算胸腺指数、脾指数、抑瘤率,测定小鼠红细胞过氧化氢酶活力(CAT)。结果:PSA和PSO组能明显抑制移植性S180肿瘤生长,使荷瘤小鼠CAT活性提高至正常水平;与环磷酰胺药物组比较,PSA和PSO组增加荷瘤小鼠免疫器官重量,没有阻碍动物生长现象发生。结论:PSA和PSO对S180荷瘤小鼠肿瘤生长具有一定抑制作用。     

增强免疫力的破壁灵芝孢子粉保健胶囊的试验评价

以破壁灵芝孢子为主要原料,辅以维生素C研制出破壁灵芝孢子胶囊。产品经安全性毒理学评价,大鼠和小鼠的急性经MTD值均大于10 g/(kg·bw),按急性毒性分级属无毒级;经功能评价表明灵芝孢子胶囊具有增强免疫力的功能;经功效成分稳定性评价表明其具功效成分稳定。     

灵芝多糖辅助DNA疫苗对小鼠肿瘤免疫治疗的影响

DNA疫苗给肿瘤免疫治疗带来了新的希望,合适的助剂有利于进一步提高DNA疫苗的免疫效果。本研究提取分离灵芝菌托、菌柄、菌盖多糖,考察不同部位多糖对小鼠免疫功能的促进作用。在此基础上,筛选免疫促进作用显著的灵芝菌盖多糖,考察其辅助HER2/neu质粒DNA疫苗的肿瘤免疫治疗效果。采用4T1荷瘤小鼠为实验动物模型,分为空白对照组、DNA疫苗对照组以及灵芝多糖组进行研究。灵芝多糖组在进行DNA疫苗皮下注射免疫2次之前,采用30 mg/kg的灵芝多糖连续喂食3 d和21 d后测定小鼠瘤体大小和体质量,发现相比于DNA疫苗组和对照组,瘤体生长显著抑制,体质量增长稳定。T细胞表型及其亚型分析结果表明,灵芝多糖能够显著促进小鼠对HER2/neu质粒DNA疫苗的细胞免疫应答,本研究结果为DNA疫苗助剂的开发提供参考。     

绿蒜正己烷萃取物对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用

为了探讨绿蒜75%乙醇提取物的正己烷萃取物(简称绿蒜正己烷萃取物:GGHE)对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及对其免疫功能的影响,建立H22荷瘤小鼠模型。将60只小鼠平均分为6组:空白对照组、模型组、阳性对照组(环磷酰胺CTX,20 mg/kg)、GGHE低中高剂量组(L-GGHE:75 mg/kg;M-GGHE:150 mg/kg;H-GGHE:300 mg/kg),连续给药14 d。测定小鼠体重、水食量、肝脏中SOD、GSH-Px、CAT、ALT、AST的活性和MDA的含量;测定小鼠血清中细胞因子TNF-α、IL-2和VEGF的含量;计算水食效率、瘤体积、抑瘤率、脏器指数;分析肿瘤组织的病理特征。实验结果表明:M-GGHE的抑瘤率达71.48%。与模型组相比,GGHE能显著提高小鼠水食效率、胸腺及脾脏指数以及IL-2,TNF-α的水平,降低VEGF的表达。不同程度的提高肝脏组织中抗氧化酶SOD、GSH-Px和CAT的活力、降低MDA的含量以及转氨酶ALT和AST的活力。结论:GGHE对H22荷瘤小鼠的肿瘤生长有一定的抑制作用,改善了荷瘤小鼠的生存质量,提高了荷瘤小鼠的抗氧化水平和免疫功能。本实验提示可将绿蒜75%乙醇提取物的正己烷萃取物开发成治疗肝癌的候选药物。     

不破壁松花粉对小鼠免疫功能的调节作用

目的 研究不破壁松花粉对小鼠的免疫调节作用。方法 以不破壁松花粉为受试物, 每天以0.33、0.67、2.00 g/(kg·bw) 3个剂量经口给予小鼠30 d。对小鼠淋巴细胞增殖能力、吞噬细胞的吞噬功能、单核-巨噬细胞功能等方面进行测定。结果 0.67 g/(kg·bw)/d组小鼠淋巴细胞增殖能力、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率以及自然杀伤(natural killer, NK)细胞活性显著高于对照组(P<0.05), 2.00 g/(kg·bw)/d组小鼠血清半数溶血值(half hemolytic unit of complement, HC50)以及NK细胞活性显著高于对照组(P<0.05)。结论 本实验条件下, 不破壁松花粉在0.67 g/(kg·bw)/d和2.00 g/(kg·bw)/d剂量下有一定程度的增强小鼠免疫力功能的作用, 其机制有待进一步研究。     

鸡肉酶解物对HepG2细胞抗氧化活性及小鼠血清抗氧化酶活性的影响

为了研究鸡肉酶解物SSPH(Salt Soluble Protein Hydrolysate,SSPH)及MFH(Muscle Fibrin Hydrolysate,MFH)的抗氧化作用,实验测定了鸡肉酶解物的HepG2细胞内活性氧的清除能力,以及小鼠胃饲28 d实验后的体内抗氧化酶活性。SSPH和MFH是特定工艺条件下提取鸡胸肉的盐溶蛋白及肌纤蛋白,经酶解制备的、95%以上分子量小于1000 u的酶解物。研究结果显示,在HepG2细胞培养中,鸡肉酶解物SSPH和MFH的添加浓度为500 μg/mL时,HepG2细胞的成活率为84.50%和89.87%,鸡肉酶解物对HepG2细胞均不存在毒性。细胞抗氧化实验中,实验组的HepG2细胞内荧光强度均显著降低于(P<0.05)空白对照组,并随鸡肉酶解物浓度增加而荧光强度降低;当SSPH及MFH的浓度为150 μg/mL时,细胞活性氧清除率,即抗氧化活性(Cellular Antioxidant Activity,CAA)值分别达到43.17%和46.64%,表明二者均具有良好的HepG2细胞活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)清除能力,且呈良好的剂量-效应关系。小鼠实验以生理盐水及鸡肉匀浆为对照组,经28 d胃饲,30 min游泳后取血清分析血清SOD、CAT及GSH-Px抗氧化酶活性,结果显示,除胃饲鸡肉酶解物SSPH剂量为40 mg/kg·bw·d组的CAT酶活性与实验对照组间差异不显著外,胃饲SSPH及MFH剂量为40 mg/kg·bw·d 和200 mg/kg·bw·d的实验组小鼠,血清SOD、CAT及GSH-Px等抗氧化酶活性均极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)高于实验对照组,表明鸡肉酶解物SSPH及MFH能够有效提高实验小鼠体内抗氧化酶活性。     

柴达木大肥菇胞内多糖改善氧化应激作用

为研究柴达木大肥菇胞内多糖对氧化损伤小鼠抗氧化应激作用,将小鼠随机分为5组,分别为胞内多糖低剂量组[25 mg/（kg·d）]、中剂量组[50 mg/（kg·d）]、高剂量组[100 mg/（kg·d）]、空白对照组[蒸馏水100 mg/（kg·d）]和阳性对照组[红景天胶囊200 mg/（kg·d）],连续灌胃35 d,测定小鼠氧化损伤条件下相关生理生化指标,探究柴达木大肥菇胞内多糖对小鼠氧化应激的保护作用。结果表明：与空白对照组相比,胞内多糖低、中、高剂量组小鼠力竭游泳时间延长极显著（P<0.01）,缺氧存活时间延长显著（P<0.05）;低、中、高剂量组肝脏中丙二醛含量降低极显著（P<0.01）,抗氧化酶系中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性升高极显著（P<0.01）,低、中剂量组谷胱甘肽过氧化物酶活性升高显著（P<0.05）,高剂量组升高极显著（P<0.01）;低、中、高剂量组血清中尿素氮含量、血乳酸浓度、乳酸脱氢酶活性和小鼠脑组织中NO含量均显著降低（P<0.05）。与阳性对照组相比,中剂量组力竭游泳时间延长显著（P<0.05）,高剂量组延长极显著（P<0.01）;中、高剂量组缺氧存活时间延长显著（P<0.05）;中剂量组丙二醛含量降低显著（P<0.05）,高剂量组降低极显著（P<0.01）,低、中、高剂量组超氧化物歧化酶活性无明显差异,中、高剂量组过氧化氢酶活性升高显著（P<0.05）,中剂量组谷胱甘肽过氧化物酶活性升高显著（P<0.05）,高剂量组升高极显著（P<0.01）;中剂量组尿素氮含量降低显著（P<0.05）,高剂量组降低极显著（P<0.01）,高剂量组血乳酸浓度降低极显著（P<0.01）,中、高剂量组乳酸脱氢酶活性和小鼠脑组织中NO含量降低极显著（P<0.01）。胞内多糖高剂量组的抗氧化效果优于低、中剂量组,呈剂量依赖性。综上,柴达木大肥菇胞内多糖可以通过增强抗氧化防御机制减轻氧化应激损伤,提高氧化胁迫条件下机体的代偿代谢水平,增强机体抗氧化应激的能力。     

灵芝多糖抗肿瘤试验

通过以相当于人体推荐摄入量11．7mg／kg．bw／d的5倍、10倍和20倍3种剂量的灵芝全粉和灵芝精粉对70只雄性ICR小鼠的试验，表明灵芝全粉和灵芝精粉各剂量组小鼠体重与模型对照比较，差异无显著性（P〉0．05），瘤体重量进行方差分析，各剂量组具有抑制小鼠S-180肉瘤生长的作用。     

梅花鹿茸血冻干粉的安全性评价

通过小鼠急性毒性试验,大鼠30 d喂养试验,三项遗传毒性试验,小鼠尾部铅皮负重游泳,小鼠血清中尿素水平检测,小鼠肝脏中糖原储备量测定以及小鼠运动前后血清中乳酸水平的测定对梅花鹿茸血冻干粉的食品安全性及对小鼠的缓解体力疲劳作用进行探讨。结果表明：小鼠急性经口毒性>15 g/kg·BW,属无毒级;鹿茸血冻干粉0.6,1.3,2.0 g/(kg·BW·d)剂量在30 d喂养试验中未对大鼠的体重、摄食量、血液常规和血液生化指标产生影响,且三项遗传毒性试验结果均为阴性。0.6 g/(kg·BW·d) 组小鼠负重游泳时间长于阴性对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;0.1,0.2,0.6 g/(kg·BW·d) 组肝糖原储备量高于阴性对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;0.6 g/(kg·BW·d)组小鼠游泳前后血乳酸变化的曲线下面积值低于阴性对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。梅花鹿茸血冻干粉食用安全,且具有缓解小鼠体力疲劳功能。     

黑灵芝多糖缓解运动性疲劳的效果

研究黑灵芝多糖对小鼠运动抗疲劳的功效。将小鼠随机分为5个实验组(共50只,每组10只),分别为黑灵芝多糖低剂量组[25 mg/(kg·d)]、中剂量组[50 mg/(kg·d)]、高剂量组[100 mg/(kg·d)]、空白组(蒸馏水)和阳性对照组[红景天西洋参胶囊200 mg/(kg·d)],连续灌胃30 d,黑灵芝多糖低、中、高剂量组分别与空白组和阳性对照组比较,评价小鼠运动抗疲劳能力相关指标。结果表明:与空白组比较,黑灵芝多糖低、中、高剂量组小鼠负重游泳力竭时间显著升高(P<0.05),血糖、肝糖原和肌糖原含量显著升高(P<0.05),血清中乳酸含量、尿素氮含量、肌酸激酶活力和乳酸脱氢酶活力均显著降低(P<0.05),血清和肝组织中丙二醛含量显著降低(P<0.05),超氧化物歧化酶活力、过氧化氢酶活力和谷胱甘肽过氧化物酶活力均显著升高(P<0.05),肝组织中Na+K+-腺嘌呤核苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)酶及Ca2+Mg2+-ATP酶活性显著升高(P<0.05);与阳性对照组比较,黑灵芝多糖中、高剂量组没有显著差异。黑灵芝多糖具有缓解运动性疲劳的作用。